HBV-DNA定量與HBsAg滴度和肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平的相關(guān)性研究

李峰　荀健

HBV-DNA定量與HBsAg滴度和肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平的相關(guān)性研究

李峰荀健

目的 探討乙肝患者血清HBV-DNA載量與血清乙肝表面抗原（HBsAg）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）之間的關(guān)系。方法 選取300例乙肝患者，其中血清低、中、高病毒載量者各100例，同時(shí)進(jìn)行血清HBsAg、ALT和AST檢測(cè)。結(jié)果 血清HBV-DNA病毒載量與血清HBs Ag水平相關(guān)（χ2=6．205，P=0．45），而與血清ALT（χ2=4．705，P=0．95）和AST（χ2=4．762，P=0．092）水平無顯著性相關(guān)。結(jié)論 血清HBsAg與血清HBV-DNA定量應(yīng)該聯(lián)合用于乙肝病毒載量和復(fù)制的評(píng)價(jià)；而血清ALT和AST主要反映肝細(xì)胞的損傷，與乙肝病毒載量缺乏相關(guān)性。

乙型病毒性肝炎；HBV-DNA；HBsAg；ALT；AST

血清HBV-DNA檢測(cè)以其能直接準(zhǔn)確地反映HBV復(fù)制狀況，成為當(dāng)今乙肝診斷及療效評(píng)價(jià)的主要手段。血清乙肝表面抗原（HBsAg）是乙肝病毒感染檢測(cè)的里程碑，并且仍舊是慢性乙型肝病病毒檢測(cè)的重要手段。而病毒的持續(xù)復(fù)制又導(dǎo)致肝臟細(xì)胞破壞和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）釋放。因此，乙肝患者血清HBV-DNA載量與乙肝表面抗原和血清肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平之間的關(guān)系一直是臨床關(guān)注的熱點(diǎn)[1-3]。本研究以乙肝患者為研究對(duì)象，通過檢測(cè)其血清HBsAg、ALT和AST水平，探討血清HBV-DNA載量與乙肝表面抗原滴度和肝臟轉(zhuǎn)氨酶水平的關(guān)系。

1　材料與方法

1.1研究對(duì)象

選擇2015年1～ 6月在太原市第三人民醫(yī)院就診的乙型肝炎患者300例（男性186例，年齡15～69歲）。所有患者進(jìn)行了血清HBV-DNA，HBsAg、ALT和AST檢測(cè)。HBV-DNA載量小于1×103IU/ml者、1×103IU/ml～1×106IU/ml者、大于1×106IU/ ml者各100例。乙肝患者的診斷符合2008年原衛(wèi)生部發(fā)布的《乙型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》（WS299-2008）[3]。HBV-DNA及HBsAg、ALT 和AST檢測(cè)均為采集患者空腹靜脈血，及時(shí)分離血清后進(jìn)行。

1.2方法

（1）HBV-DNA檢測(cè)：熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)患者血清HBV-DNA含量，使用美國(guó)ABI7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑購(gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。

（2）ALT和AST檢測(cè)：采用連續(xù)檢測(cè)比色法檢測(cè)血清ALT 和AST，儀器為日本奧林巴斯AU5400全自動(dòng)生化分析儀，試劑購(gòu)自煙臺(tái)澳斯邦生物工程有限公司。

（3）HBsAg檢測(cè)：采用羅氏Cobas601檢測(cè)，電化學(xué)發(fā)光原理，配套試劑。

1.3實(shí)驗(yàn)分組

將實(shí)驗(yàn)分為三組：血清HBV-DNA載量小于1×103IU/ml者為低病毒載量組，1×103～1×106IU/ml者為中等病毒載量組，大于1×106IU/ml者為高病毒載量組，每組100例患者。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

計(jì)數(shù)資料比較用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料符合正態(tài)分布時(shí)，以（±s）表示，兩組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)量資料不符合正態(tài)分布時(shí)，采用中位數(shù)和四分位間距表達(dá)，兩組間比較采用非參數(shù)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1血清病毒載量與血清乙肝表面標(biāo)志物和肝臟轉(zhuǎn)氨酶的關(guān)系

三組患者HBsAg、ALT和AST均值見表1，血清HBV-DNA病毒載量與血清HBs Ag水平相關(guān)（χ2=6.205，P=0.45），而與血清ALT（χ2=4.705，P=0.95）和AST（χ2=4.762，P=0.092）水平對(duì)比，P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1　三組患者血清HBsAg、ALT和AST水平比較

3　討論

在HBV感染的患者中理解HBsAg、ALT和AST與HBV-DNA濃度的關(guān)系非常重要。

HBsAg是預(yù)測(cè)乙肝臨床結(jié)局的穩(wěn)定標(biāo)志物。HBsAg通常在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成[3-4]，其合成在HBV病毒生命周期中是一個(gè)復(fù)雜的過程。病毒一旦進(jìn)入肝細(xì)胞，脫去蛋白殼，其基因組就被運(yùn)送至細(xì)胞核，在細(xì)胞核以穩(wěn)定完全的雙鏈共價(jià)閉合環(huán)狀HBV-DNA（Covalently Closed Circular HBV DNA，ccc DNA）寄生，作為病毒基因復(fù)制的模板[5]。HBsAg水平反應(yīng)cccDNA的轉(zhuǎn)錄活性，而不是絕對(duì)的cccDNA拷貝數(shù)。

雖然，HBV-DNA在體內(nèi)的持續(xù)復(fù)制是導(dǎo)致乙肝慢性化的主要原因。而乙肝病毒DNA定量檢測(cè)只能查出游離在乙肝患者血液中的病毒含量。而此病患者血液中乙肝病毒的含量并不能代表其病情的輕重程度，只能說明其體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制的活躍程度[6-8]。而病毒在復(fù)制過程中會(huì)激發(fā)機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)病毒的清除，同時(shí)也引發(fā)了機(jī)體的免疫病理反應(yīng)，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷、破壞，肝功能異常及肝纖維化改變[9]。作為肝功能評(píng)價(jià)，ALT和AST是現(xiàn)階段臨床應(yīng)用最廣的指標(biāo)。

本研究結(jié)果提示，血清病毒載量與血清HBs Ag水平相關(guān)（χ2=6.205，P=0.45）。因此，在臨床實(shí)踐中，血清HBsAg水平應(yīng)該被聯(lián)合使用，而不是取代HBV-DNA。在HBsAg陽性和anti-HBc反應(yīng)的獻(xiàn)血者中，HBV-DNA 水平可能極低。大約6%的供者用現(xiàn)有的HBV-DNA測(cè)定的方法可能為陰性，所以要警惕任何考慮拋棄HBsAg篩查的想法[10]。

但本研究結(jié)果同時(shí)提示血清病毒載量與血清ALT（χ2=4.705，P=0.95）和AST（χ2=4.762，P=0.092）水平無顯著性相關(guān)。說明患者體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制再活躍，只要其免疫系統(tǒng)的功能沒有發(fā)生紊亂，病情就不會(huì)加重。如乙肝病毒攜帶者（尤其是年紀(jì)幼小的乙肝病毒攜帶者）其體內(nèi)乙肝病毒的復(fù)制非?；钴S，但其免疫系統(tǒng)一直對(duì)乙肝病毒保持著“麻痹”的狀態(tài)，故其肝臟受損的程度往往很輕。因此，此類患者的病情可長(zhǎng)期保持相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，甚至終生不會(huì)發(fā)病。相反，很多乙肝后肝硬化患者和乙肝后肝癌患者在進(jìn)行乙肝病毒DNA定量檢測(cè)時(shí)結(jié)果均為陰性，但其病情卻十分嚴(yán)重[11-13]。

綜上所述，血清HBsAg與血清HBV-DNA定量應(yīng)該聯(lián)合用于乙肝病毒載量和復(fù)制的評(píng)價(jià)；而血清ALT和AST主要反映肝細(xì)胞的損傷，與乙肝病毒載量缺乏相關(guān)性。

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The Im pact of HBV-DNA Concentrations on Serum HBsAg and Liver Function

LI Feng XUN Jian Department of Liver Diseases, The Third People's Hospital of Taiyuan, Taiyuan Shanxi 030012, China

Ob jective We aimed to investigate the relationship among serum HBV DNA concentration, hepatitis B surface antigen (HBsAg) titer, alanine am inotransferase (ALT) and aspartate am ino transferase (AST) level. Methods A total of 300 patients with hepatitis B were recruited. Serum HBVDNA, HBsAg, ALT and AST level were tested. Resu lts The viral load of HBV is related to the serum HBsAg level (χ2=6.205, P=0.45), however, it is not related to the serum ALT and AST (χ2=4.705, P=0.95, χ2=4.762, P=0.092).Conclusion Serum HBsAg level should be used together with, but not as a substitute for, HBV DNA, serum ALT and AST indicate the extent of liver injures and are poorlyrelated to HBV DNA.

Hepatitis B, HBV-DNA, HBsAg, ALT, AST

R 512．6+2

A

1674-9308（2016）31-0032-02

10．3969/j．issn．1674-9308．2016．31．018

太原市第三人民醫(yī)院肝病科，山西 太原030012