激素處理對杜鵑花自交與雜交種子萌發(fā)的影響

曹 莎，劉 冰，周 泓，夏宜平

(浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058)

?

激素處理對杜鵑花自交與雜交種子萌發(fā)的影響

曹 莎，劉 冰，周 泓，夏宜平*

(浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058)

杜鵑花種子細(xì)小且發(fā)芽率低，為探索有效促進(jìn)種子萌發(fā)的方法，選用杜鵑花主栽品種春鵑紫蝴蝶自交種子為材料，通過蒸餾水浸種、GA3浸種和無菌播種添加NAA、KT、ZT及GA3的處理方式，比較不同處理對杜鵑花自交種子萌發(fā)時間、發(fā)芽率等指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，蒸餾水浸種處理以24 h浸種的效果最佳，發(fā)芽率達(dá)43%；無菌播種結(jié)合2.0 mg·L-1GA3+0.05 mg·L-1NAA處理的效果最佳，發(fā)芽率達(dá)75%；GA3浸種以1 600 mg·L-1GA3處理24 h的效果最佳，發(fā)芽率可達(dá)82%，是對照組的1.82倍。以GA3浸種法處理杜鵑花2個雜交組合的雜交種子，發(fā)現(xiàn)其各項發(fā)芽指標(biāo)均優(yōu)于對照，其中29號雜交種子的最適GA3處理為1 200 mg·L-1浸種24 h，發(fā)芽率達(dá)96%；59號雜交種子最適GA3處理為1 600 mg·L-1浸種24 h，發(fā)芽率可達(dá)95%，二者發(fā)芽率分別比對照提高20%和71%，萌發(fā)時間分別提早2和8 d。因此，適宜濃度尤其是高濃度GA3浸種處理能有效促進(jìn)杜鵑花自交和雜交種子的萌發(fā)。

杜鵑；自交種子；雜交種子；激素處理；種子萌發(fā)

杜鵑花屬杜鵑花科(Ericaceae)杜鵑花屬(Rhododendron)植物，是中國十大名花之一[1]。雖然中國的杜鵑花種質(zhì)資源十分豐富[2]，但是迄今自育品種很少，實際園林應(yīng)用品種更少，與中國擁有的豐富資源極不相稱[3]。目前，杜鵑花育種方法包括實生選種、芽變選種、誘變育種等，但傳統(tǒng)雜交育種仍然是最主要的途徑之一[4]。

杜鵑花屬植物在自然界雜交現(xiàn)象普遍，栽培條件下也易于雜交變異[4-5]。但是由于杜鵑花種子極為細(xì)小，一般千粒重僅0.008～0.431 g[6]，播種成苗困難。因此，研究雜交育種的優(yōu)良性狀、篩選杜鵑花新品種，首先要建立科學(xué)的播種方法和促進(jìn)種子萌發(fā)的技術(shù)體系。由于品種資源珍貴，播種繁殖困難，出苗率低，種苗階段易引種馴化等原因[7]，應(yīng)用激素處理是提高種子萌發(fā)率的主要手段之一。前人研究表明，播種前浸種、有效的激素處理，如萘乙酸(NAA)、激動素(KT)、玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)可促進(jìn)杜鵑花生長和種子的萌發(fā)[8-12]，目前與杜鵑花種子萌發(fā)相關(guān)的研究集中在高山杜鵑類杜鵑花，主要為杜鵑亞屬、常綠杜鵑亞屬的種。

江南地區(qū)應(yīng)用的杜鵑花大多為映山紅亞屬的種及雜交種，即春鵑、夏鵑類，相關(guān)種子萌發(fā)的研究鮮有報道。春鵑紫蝴蝶(Rhododendron×pulchrum)是我國杜鵑花園林應(yīng)用最為廣泛的品種，也是雜交育種的優(yōu)良親本。本研究首先用不同方式處理春鵑紫蝴蝶自交種子，探索促進(jìn)杜鵑花種子萌發(fā)的適宜方法。然后將此方法應(yīng)用于以春鵑紫蝴蝶為父本的雜交種子(29號)和夏鵑雜交種子(59號)，以驗證該方法促進(jìn)不同杜鵑花雜交種子萌發(fā)的可行性?？紤]到杜鵑花種子的自然萌發(fā)率不高，田間播種萌發(fā)和幼苗生長緩慢，且難以統(tǒng)計描述種子質(zhì)量的指標(biāo)[13]，本實驗利用蒸餾水浸種、GA3浸種和無菌播種方法，浸種處理結(jié)合人工氣候箱培養(yǎng)催芽，以量化的種子萌發(fā)指標(biāo)探尋適宜的處理方法，以期為摸索提高杜鵑花雜交種子萌發(fā)率的有效方法提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

2013年10月下旬于浙江大學(xué)園林研究所種質(zhì)資源圃采集春鵑紫蝴蝶的成熟蒴果。2014年10月于該資源圃采集杜鵑花雜交組合第29號、第59號的成熟蒴果，其中，雜交種子29號的父本為春鵑紫蝴蝶，母本為毛鵑(雙套粉紅色，民間收集資源，未命名)；59號的父本是石巖杜鵑，母本夏鵑。采回的蒴果放于培養(yǎng)皿中，置于室溫下，等自然開裂后將種子取出。

1.2 方法

1.2.1 種子處理方法

A：自交種子蒸餾水浸種。春鵑紫蝴蝶自交種子用蒸餾水于室溫下分別浸種6、12、24、36、48 h后消毒，置于墊有濕潤濾紙的帶蓋培養(yǎng)皿中，于人工氣候箱中培養(yǎng)，每個重復(fù)100粒種子，共5個重復(fù)。B：自交種子無菌播種。在1/4MS培養(yǎng)基中分別添加NAA、KT、ZT、GA3激素的組合(表1)，將春鵑紫蝴蝶自交種子消毒后無菌播種培養(yǎng)，每個重復(fù)30粒種子，共5個重復(fù)。C：自交種子GA3浸種。分別用0、100、200、400、800、1 200、1 600、2 000 mg·L-1的GA3，室溫下將春鵑紫蝴蝶自交種子浸種24 h，消毒后置于墊有濕潤濾紙的帶蓋培養(yǎng)皿中，于人工氣候箱中培養(yǎng)，每個重復(fù)50粒種子，共3個重復(fù)(表1)。

D：雜交種子GA3浸種。將杜鵑花雜交種子29號與59號用1 200、1 600、2000 mg·L-1的GA3室溫下浸種24 h，消毒后播種于1/4 MS培養(yǎng)基中無菌培養(yǎng)，每個重復(fù)50粒種子，共5個重復(fù)。

A、B、C試驗于2013年11月至2014年12月完成，D試驗于2014年12月至2015年1月在相同地點完成。

表1 春鵑紫蝴蝶自交種子無菌播種激素處理組合

Table 1 Different hormone treatments for self-pollinated seeds of azalea Zihudie in aseptic seeding

mg·L-1

1.2.2 種子消毒方法

自交和雜交種子浸種后，將種子表面水分用濾紙吸干后，用70%的酒精浸泡30 s，無菌水沖洗3遍。再用0.1%升汞浸泡15 min，無菌水沖洗5遍，充分搖晃。用濾紙吸干種子表面水分。

1.2.3 培養(yǎng)條件

A、C組于25 ℃、光照2 500 lx、光照時間12 h·d-1的人工氣候箱中培養(yǎng)，每天澆水1次，保持濾紙濕潤；B、D組在組培室中相同光溫條件無菌

培養(yǎng)。

1.3 觀察與統(tǒng)計方法

參照《國際種子檢驗規(guī)程》的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行發(fā)芽測定[14]。發(fā)芽測定的指標(biāo)包括發(fā)芽率、萌發(fā)高峰期、發(fā)芽勢、萌發(fā)時滯、發(fā)芽持續(xù)時間、子葉長出時間和發(fā)芽指數(shù)。發(fā)芽率/%=發(fā)芽種子總數(shù)/試驗種子總數(shù)× 100。萌發(fā)高峰期即萌發(fā)量最大的時間距離試驗開始的天數(shù)。發(fā)芽勢/%=萌發(fā)高峰期時發(fā)芽種子數(shù)/試驗種子總數(shù)× 100。萌發(fā)時滯即第1粒種子開始萌發(fā)距離試驗開始的天數(shù)。發(fā)芽持續(xù)時間即為第1粒種子開始萌發(fā)到最后1粒種子萌發(fā)所經(jīng)過的總天數(shù)。子葉長出時間為種子開始萌發(fā)后到長出第1片子葉的天數(shù)。發(fā)芽指數(shù)=Σ(Gi/Di)，其中Gi為i日內(nèi)的發(fā)芽數(shù)，Di為相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)。試驗結(jié)果采用Excel 2007和IBM SPSS Statistics 20軟件進(jìn)行方差分析和因素多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

2.1.1 蒸餾水浸種對杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

用蒸餾水浸種不同時間后，紫蝴蝶自交種子的萌發(fā)情況如表2所示。浸種24 h，種子發(fā)芽率最高，但各組均無顯著差異。從發(fā)芽指數(shù)上來看，各組的發(fā)芽指數(shù)均大于對照，但僅36 h浸種處理與對照組差異顯著(P<0.05)。浸種處理24與48 h能夠促使自交種子提前1 d萌發(fā)，其他處理與對照無差異。綜合分析，蒸餾水浸種不能顯著促進(jìn)紫蝴蝶自交種子的萌發(fā)。

表2 蒸餾水浸種時間對春鵑紫蝴蝶自交種子萌發(fā)的影響

Table 2 Effect of water soaking time on germination of self-pollinated seeds of azalea Zihudie

浸泡時間Soakingtime/h發(fā)芽率Germinationrate/%發(fā)芽勢Germinationenergy/%萌發(fā)時滯Germinationtimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時間Germinationtime/d子葉長出時間Timeofcotyledoneruption/d發(fā)芽指數(shù)Germinationin-dex035±10a24±8a821171024.74±8.43b638±3a19±4a91716834.00±8.01ab1233±6a3±1b81518535.3±10.09ab2443±3a19±1a71419841.23±3.72ab3638±3a12±1ab91116553.63±4.57a4841±4a23±1a71519740.28±3.67ab

同列數(shù)據(jù)后無相同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著。下同。

Values (mean±SD) without the same lower letters within a column are significantly different at the 5% level. The same as below.

2.1.2 激素對杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

春鵑種子能在無菌播種條件下發(fā)芽，不同激素組合對無菌種子萌發(fā)的誘導(dǎo)效果各異(表3)。其中，G5組的種子萌發(fā)效果最好，相對CK1和CK2分別提前4和6 d萌發(fā)，萌發(fā)率為75%。添加NAA的3種激素處理的組合比激素單獨處理的效果均要好，尤其是GA3+NAA的組合。不添加NAA的激素處理中，KT組的總體效果最好。另外，有些激素組合的誘導(dǎo)效果甚至不如對照組，這與激素種類和污染情況有關(guān)。在萌發(fā)時間方面，除K6、Z4和Z5，各處理組能使種子的萌發(fā)時間提前0～4 d；除K3外，各組處理基本能使種子子葉長出時間提前0～5 d。各激素處理組的發(fā)芽勢基本小于對照組，說明添加激素并不能使種子的發(fā)芽整齊度提高。

2.1.3 GA3浸種對杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

由表4可知，除100 mg·L-1GA3處理的杜鵑花發(fā)芽率低于對照組外，其他處理均能促進(jìn)種子萌發(fā)。其中，1 200、1 600、2 000 mg·L-1GA3處理的發(fā)芽率均顯著高于對照組，1 600 mg·L-1GA3處理組的發(fā)芽率達(dá)到對照組的1.82倍；發(fā)芽指數(shù)方面，除100、1 200 mg·L-1GA3組外，其他處理均顯著大于對照組。從發(fā)芽時間來看，所有處理均能使自交種子萌發(fā)時間提前1 d，1 600 mg·L-1GA3處理組的萌發(fā)高峰期和子葉長出時間最早。綜合分析，1 600 mg·L-1GA3浸種24 h是最佳處理組。

綜合分析以上3種春鵑紫蝴蝶自交種子的處理方式發(fā)現(xiàn)，蒸餾水浸泡不能顯著促進(jìn)種子萌發(fā)；用添加激素的培養(yǎng)基進(jìn)行無菌播種，污染率小，能夠保存所有種子，其中，GA3+NAA組合處理的整體效果較佳；用高濃度GA3浸種24 h能夠顯著促進(jìn)種子的萌發(fā)，其中，1 600 mg·L-1處理組在各方面均表現(xiàn)較佳(圖1)。對比3種處理方式中表現(xiàn)最好的2組——1 600 mg·L-1GA3浸種24 h與培養(yǎng)基中添加2.0 mg·L-1GA3+0.05 mg·L-1NAA，結(jié)果見圖1，前者的發(fā)芽率更高、子葉長出時間更短，二者萌發(fā)遲滯時間差別不大，考慮到在人工氣候箱播種培養(yǎng)，種子易受真菌感染，致發(fā)霉，在后續(xù)的試驗中選擇1 600 mg·L-1GA3浸種24 h 處理杜鵑花雜交種子，再無菌播種于普通無添加激素的1/4 MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

表3 不同激素處理對春鵑紫蝴蝶自交種子無菌播種的影響

Table 3 Effect of aseptic sowing with different hormone treatments for self-pollinated seeds of azalea Zihudie

處理Treatments發(fā)芽率Germinationrate/%發(fā)芽勢Germinationenergy/%萌發(fā)時滯Germinationtimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時間Germinationtime/d子葉長出時間Timeofcotyle-doneruption/d發(fā)芽指數(shù)GerminationindexCK148±11bcdef43±8a111535921.08±1.80bcdCK229±5fghij11±4def13173588.95±3.21fghK170±4a41±7ab111526825.00±3.40abcK236±4defghi20±7cdef91527811.42±1.06efghK329±4fjhij20±2cdef81528128.94±0.62fghK445±2bcdefg28±1abcd81527714.82±1.08defgK550±15bcd43±13a122027517.22±6.75cdefK631±10ef-ghij20±7cdef141427712.62±3.99defghZ130±9fghij9±6ef11143188.71±3.89fghZ249±3bcde26±7bcde111529614.97±1.55defgZ344±3cdefgh16±5def101430612.69±3.18defghZ429±7fghij17±2def14182349.52±2.04efghZ515±4j9±1ef12142557.97±2.12fghZ616±1j11±4def11183255.17±1.80hG143±0cdefgh23±3cdef91327617.05±1.02cdefG248±2bcdef20±3cdef91229618.47±2.78cdeG356±3abc37±2abc101529529.78±2.28aG427±0ghij10±3ef81229610.98±2.57efghG575±6a37±6abc71329727.23±2.17abG616±7j7±2f10173589.71±2.54efghG722±3ij11±1def92035910.34±1.89efghG819±4ij12±3def9203587.45±2.42ghG923±3ij11±2def91640812.90±1.76defghG1026±0hij18±2def91935711.79±1.21efgh

表4 GA3對春鵑紫蝴蝶自交種子萌發(fā)的影響

Table 4 Effect of GA3on germination of self-pollinated seeds of azalea Zihudie

GA3濃度ConcentrationofGA3/(mg·L-1)發(fā)芽率Germinationrate/%發(fā)芽勢Germinationenergy/%萌發(fā)時滯Germinationtimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時間Germinationtime/d子葉長出時間Timeofcotyle-doneruption/d發(fā)芽指數(shù)Germinationin-dex045±2de23±5b91516923.17±2.81e10039±6e19±1b812171028.52±2.60de20057±3cd19±2b81116938.00±2.17abc40059±4bcd27±5b81217938.78±3.80bc80062±7bcd45±7a81417844.30±5.80ab120078±11ab28±2b81413930.60±0.47cde160082±3a16±6b81018549.35±1.51a200067±10abc45±6a81218647.04±3.04ab

A，蒸餾水浸種24 h；B，添加2.0 mg·L-1 GA3+0.05 mg·L-1 NAA無菌播種處理；C，1 600 mg·L-1 GA3浸種24 hA， water soaking for 24 h; B， tissue culture pretreatment added 2.0 mg·L-1 GA3+0.05 mg·L-1NAA; C， 1 600 mg·L-1 GA3 soaking for 24 h圖1 播種20 d后3個處理的春鵑紫蝴蝶自交種子的萌發(fā)情況Fig.1 Germination of self-pollinated seeds of azalea Zihudie after 20 day’s growth with three different treatments

2.2 GA3浸種處理對杜鵑花雜交種子萌發(fā)的影響

如表5所示，29號種子在1 200 mg·L-1GA3處理時發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)均為最高，顯著高于對照組；各處理組均能促進(jìn)種子提前萌發(fā)，2 000 mg·L-1GA3處理能使種子提前3 d萌發(fā)；萌發(fā)高峰期隨著處理濃度的增加而提前，子葉長出時間則各不相同。59號種子各處理組的發(fā)芽率和發(fā)芽勢均顯著高于對照組，分別達(dá)到對照組的6.3～6.6倍與5.8～6.1倍，各處理間差異不顯著；處理組的發(fā)芽指數(shù)均顯著大于對照組，其中2 000 mg·L-1GA3處理種子發(fā)芽指數(shù)最高，相較于對照組能提升337%；所有處理組均能比對照組提前7～8 d萌發(fā)，整體發(fā)芽進(jìn)程均比對照組快。圖2是1 200 mg·mL-1GA3處理29號種子、1 600 mg·mL-1GA3處理59號種子18和70 d的發(fā)芽情況。

表5 GA3浸種處理對2個杜鵑花雜交種子萌發(fā)的影響

Table 5 Effects of GA3on germination of azalea hybrid seeds NO.29 and NO.59

品種CultivarGA3濃度ConcentrationofGA3/(mg·L-1)發(fā)芽率Germina-tionrate/%發(fā)芽勢Germina-tionenergy/%萌發(fā)時滯Germina-tiontimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時間Germinationtime/d子葉長出時間Timeofcotyledoneruption/d發(fā)芽指數(shù)Germinationindex29號070±2b48±3ab1118181021.22±1.80c120096±1a62±5a1014191146.46±3.28a160080±4ab40±8b913201234.24±3.20b200080±4ab42±7ab812221028.5±3.90bc59號014±2b11±2b15———18.13+3.53d120089±2a69±4a85191042.27±3.53c160095±1a64±1a7419952.95±2.24b200093±1a68±2a7419979.16±2.75a

“—”表示數(shù)據(jù)缺失。由于59號的對照組萌發(fā)過于緩慢，在30 d后測定其發(fā)芽率等指標(biāo)，發(fā)芽時間相關(guān)指標(biāo)未記載完全。

“—” means lack of data. Because the germination of control group of azalea hybrid seeds NO.59 was very slow， and germination rate and other indicators were determined after 30 days， which led to the lack of germination time correlation indexes.

A和C分別為1 200 mg·L-1 GA3處理29號種子18和70 d的情況；B和D分別為1 600 mg·L-1 GA3處理59號種子18和70 d的情況A and C show status of No.29 which soaked with 1 200 mg·L-1 GA3 after 18 and 70 days， respectively; B and D show status of No.59 which soaked with 1 600 mg·L-1 GA3 after 18 and 70 days， respectively圖2 播種18和70 d后2種杜鵑花雜交種子的生長情況Fig.2 Growth of hybrid seeds of azalea after 18 and 70 days

綜合分析，1 200～2 000 mg·L-1GA3處理均能促進(jìn)2組杜鵑花雜交種子的萌發(fā)，對于29號而言，1 200 mg·L-1GA3處理促進(jìn)萌發(fā)效果最好；對于59號而言，3組處理效果均較好且無顯著差異，就發(fā)芽率而言，1 600 mg·L-1GA3處理效果較佳。

3 結(jié)論與討論

發(fā)芽勢指的是種子發(fā)芽速度和發(fā)芽整齊度，表示種子生活力的強弱程度。從杜鵑花種子發(fā)芽勢來看，春鵑紫蝴蝶種子的發(fā)芽整齊度普遍不高，僅7%～45%，發(fā)芽率最高的1 600 mg·L-1GA3浸種處理組也只有16%。2組雜交種子的發(fā)芽勢經(jīng)過GA3浸種處理后明顯提高，達(dá)40%～69%，但發(fā)芽仍然不整齊。前人研究的高山杜鵑如雷山杜鵑[15]、秀雅杜鵑[16]、短果杜鵑[17]、毛氈杜鵑[14]、馬纓杜鵑[18]的種子，包括雜交種的種子，均有發(fā)芽不整齊的現(xiàn)象[19-20]。從其他植物研究可知，種子萌發(fā)整齊度可能與種子中所含的水溶性內(nèi)源萌發(fā)抑制物質(zhì)[21]、種子活力[22]、親本遺傳差異[23]等有關(guān)。春鵑紫蝴蝶自交種子、春鵑紫蝴蝶與毛鵑雜交組合種子(29號)以及夏鵑間雜交組合種子(59號)的發(fā)芽勢均符合杜鵑花種子零星萌發(fā)的特點，具體原因尚待進(jìn)一步研究。

29號雜交種子的對照組比自交種子蒸餾水浸種、無菌播種以及GA3浸種處理的萌發(fā)效果都好，說明在雜交親本選擇合理的前提下，雜交種子可能存在自發(fā)性好的現(xiàn)象。而59號的對照組需要15 d才開始發(fā)芽，并且30 d后的發(fā)芽效果依舊遠(yuǎn)低于處理組，說明雜交種子的自發(fā)性不一致。29號父本為春鵑紫蝴蝶，母本為毛鵑，與自交種子相比，父本不同，在發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及發(fā)芽時間上均比自交種子表現(xiàn)好；而59號雜交種子的父本是石巖杜鵑，母本夏鵑，均不是春鵑類。前人對水稻種子[24]、半枝蓮[25]、玉米[26]等植物的研究表明，種子發(fā)芽差異在很大程度上是由基因型決定的，杜鵑花雜交種子的自發(fā)性可能也與本身特性有關(guān)，但需進(jìn)一步研究探討。

前人研究表明，NAA、KT、ZT、GA3在杜鵑組培中，對細(xì)胞分裂、芽再生、種子打破休眠等有一定的促進(jìn)作用[27-28]，將NAA、KT、ZT應(yīng)用于杜鵑種子萌發(fā)的研究是一次新的嘗試。從本研究的結(jié)果看來，NAA與GA3組合處理組對杜鵑種子萌發(fā)促進(jìn)效果較顯著，而且與1 200～1 600 mg·L-1GA3浸種處理效果對比，促進(jìn)種子萌發(fā)效果好且更經(jīng)濟，這可能與激素的作用不同有關(guān)，NAA、KT、ZT主要是促進(jìn)細(xì)胞分裂和組織增殖，而GA3可誘導(dǎo)種子淀粉酶等水解酶的合成，打破種子休眠[29]。浸種后由于種皮透水、透氣性的提高，種子內(nèi)生理生化過程與呼吸作用得以增強，進(jìn)而促進(jìn)種胚的發(fā)育與種子萌發(fā)，這與杜鵑花科植物種子休眠是由種皮障礙所引起相吻合[30]。

與其他2種方式處理相比，GA3浸種處理對杜鵑花自交種子和雜交種子的萌發(fā)均有促進(jìn)作用，增幅最大可達(dá)579%，說明GA3浸種處理對杜鵑花種子萌發(fā)的促進(jìn)作用可能有廣譜性。但前人對高山杜鵑的研究表明，低濃度GA3浸種24 h效果更好，例如對九龍山杜鵑與桃葉杜鵑的GA3浸種處理，最適濃度均為200 mg·L-1[31]，大白杜鵑為500 mg·L-1[32]，太白杜鵑為800 mg·L-1[33]。本試驗中，春鵑自交種子和雜交種子均在高濃度1 200、1 600 mg·L-1浸種處理時表現(xiàn)較佳，說明促進(jìn)不同類型杜鵑花種子萌發(fā)的最適GA3浸種濃度有明顯差異。

[1] 馮國楣. 花中西施杜鵑花[J]. 園林， 2008 (12): 124-125.

FENG G M. The beauty of flowers-Rhododendron[J].Garden， 2008 (12): 124-125. (in Chinese)

[2] 李章汀， 林方喜， 魏云華， 等. 杜鵑育種進(jìn)展及品種開發(fā)建議[J]. 臺灣農(nóng)業(yè)探索， 2007 (4): 97-99.

LI Z T， LIN F X， WEI Y H， et al. Advances in the breeding of cuckoo and suggestions for its development [J].TaiwanAgriculturalResearch， 2007 (4): 97-99. (in Chinese)

[3] 劉曉青， 蘇家樂， 李暢， 等. 杜鵑花雜交、自交及開放授粉結(jié)實性研究[J]. 上海農(nóng)業(yè)學(xué)報， 2010， 26(4): 145-148.

LIU X Q， SU J L， LI C， et al. Study the fruitfulness of hybridization， selfing open pollination ofRhododendron[J].ActaAgriculturaeShanghai， 2010， 26(4): 145-148. (in Chinese with English abstract)

[4] 方瑞征，閔天祿. 杜鵑屬植物區(qū)系的研究[J]. 云南植物研究， 1995， 17(4): 359-379.

FANG R Z， MIN T L. The floristic study on the genusRhododendron[J].ActaBotanicaYunnanica， 1995， 17(4): 359-379. (in Chinese with English abstract)

[5] 張長芹. 杜鵑花[M]. 北京: 中國建筑工業(yè)出版社， 2003.

[6] 丁炳揚， 繆晶， 盛束軍， 等. 浙江12種杜鵑花屬植物的果實形態(tài)、種子數(shù)及其相關(guān)性研究[J]. 林業(yè)科學(xué)， 2000， 36(4): 102-105.

DING B Y， LIAO J， SHENG S J， et al. Studies on the correltivity of fruit morphology and seed number for 12 species ofRhododendronL. from ZheJiang Province [J].ScientiaSilvaeSinicae， 2000， 36(4): 102-105. (in Chinese with English abstract)

[7] 段旭， 陳訓(xùn)， 趙洋毅. 馬纓杜鵑種子萌發(fā)研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007， 35(29): 9199-9200.

DUAN X， CHEN X， ZHAO Y Y. Study on germination test ofRhododendrondelavayiFranch [J].AnhuiAgriculturalSciences， 2007， 35(29): 9199-9200. (in Chinese with English abstract)

[8] 李波， 曾孔， 朱平， 等. 西洋杜鵑愈傷組織和芽誘導(dǎo)的研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011， 39(4): 51-53.

LI B， ZENG K， ZHU P， et al. Studies on callus and bud induction of western Azalea [J].JiangsuAgriculturalScience， 2011， 39(4): 51-53. (in Chinese)

[9] 朱春艷， 李志炎， 鮑淳松， 等. 云錦杜鵑組培快繁技術(shù)研究[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報， 2006， 22(5): 335-337.

ZHU C Y， LI Z Y， BAO C S， et al.Invitrorapid micropropagation ofRhododendronFortunei[J].ChineseAgriculturalScienceBulletin， 2006， 22(5): 335-337. (in Chinese with English abstract)

[10] 程雪梅. 馬纓杜鵑種子萌發(fā)與組織培養(yǎng)技術(shù)體系研究[D]. 昆明: 西南林學(xué)院， 2008.

CHENG X M. Study on germination test and technique of tissue culture inRhododendrondelavayiFranch [D]. Kunming: Southwest Forestry College， 2008. (in Chinese with English abstract)

[11] 管耀義， 袁惠貞， 杜鵑， 等. 高山杜鵑葉片再生植株的研究[J]. 河北林業(yè)科技， 2009 (SI): 19-21.

GUAN Y Y， YUAN H Z， DU J， et al. Studies on leaf regeneration plants of AlpineRhododendron[J].HebeiForestryScienceandTechnology， 2009 (SI): 19-21. (in Chinese)

[12] 劉冰， 曹莎， 周泓， 等. 不同激素配比對春鵑‘紫蝴蝶’無菌播種的影響[C]// 中國園藝學(xué)會. 中國觀賞園藝研究進(jìn)展(2014). 2014: 352-357.

[13] 劉林， 張良英， 牛歆雨， 等. GA3對2種杜鵑種子萌發(fā)特性的影響[J]. 種子， 2015， 34(7): 5-7.

LIU L， ZHANG L Y， NIU X Y， et al. Effect of GA3on seeds germination of two speciesRhododendron[J].Seed， 2015， 34(7): 5-7. (in Chinese with English abstract)

[14] 李暢， 蘇家樂， 陳璐， 等. 赤霉素浸種對毛氈杜鵑種子萌發(fā)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2011， 39(6): 278-279.

LI C， SU J L， CHEN L， et al. Effect of GA3on seeds germination ofRhododendronconfertissimum[J].JiangsuAgriculturalScience， 2011， 39(6): 278-279. (in Chinese)

[15] 陳雪梅， 歐靜， 陳訓(xùn)， 等. 雷山杜鵑種子特性及萌發(fā)試驗研究[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2014， 42(8): 184-186.

CHEN X M， OU J， CHEN X， et al. Experimental study on seed characteristics and germination ofRhododendronHill [J].JiangsuAgriculturalScience， 2014， 42(8): 184-186. (in Chinese)

[16] 趙冰， 董進(jìn)英， 張冬林. 溫度、光照和赤霉素濃度對秀雅杜鵑種子萌發(fā)的影響[J]. 種子， 2014， 33(5): 26-30.

ZHAO B， DONG J Y， ZHANG D L. Effects of different temperature， light and GA3concentration on seed germination ofRhododendronconcinnum[J].Seed， 2014， 33(5): 26-30. (in Chinese)

[17] 李暢， 蘇家樂， 劉曉青， 等. 一種促進(jìn)短果杜鵑種子萌發(fā)的前處理方法——二次浸種法[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2014， 42(34): 12068-12070.

LI C， SU J L， LIU X Q， et al. A pretreatment method on seed germination ofRhododeudroubrachycarpum—Double soaking method [J].JournalofAnhuiAgriculturalScience， 2014， 42(34): 12068-12070. (in Chinese with English abstract)

[18] 程雪梅， 何承忠， 周敏， 等. 不同浸種方式對馬纓杜鵑種子發(fā)芽率的影響[J]. 北方園藝， 2008 (10): 106-109.

CHENG X M， HE C Z， ZHOU M， et al. Effects of different treatments onRhododendrondelavayiseeds [J].NorthHorticulture， 2008 (10): 106-109. (in Chinese with English abstract)

[19] 金培鋒， 邊才苗， 楊武杰， 等. 云錦杜鵑種子繁育及幼樹移栽試驗[J]. 浙江林業(yè)科技， 2007， 27(2): 34-36.

JIN P F， BIAN C M， YANG W J， et al. Seed breeding and sapling transplantation ofRhododendronfortuneiin Linhai[J].ZhejiangForestryScienceandTechnology， 2007， 27(2): 34-36. (in Chinese with English abstract)

[20] 趙紅霞. 杜鵑花播種繁殖和組織培養(yǎng)研究[D]. 泰安: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2012.

ZHAO H X. Study on seed propagation and tissue culture ofRhododendron[D]. Tai’an: Shandong Agriculture University ，2012. (in Chinese with English abstract)

[21] 王明焱， 徐連杰， 楊利民. 茗蔥種子萌發(fā)的生態(tài)學(xué)特性研究[J]. 北方園藝， 2011 (7): 35-37.

WANG M Y， XU L J， YANG L M. Study on the characteristics of seed germination and propagation techniques ofAlliumvictorialisL [J].NorthHorticulture， 2011 (7): 35-37. (in Chinese with English abstract)

[22] 錢紅格. 三種榆屬樹種種子萌發(fā)特性及活力變化的研究[D]. 楊凌: 西北農(nóng)林科技大學(xué)， 2009.

QIAN H L. Study on seed germination charictaristic and seed vigor changes of three elm species [D]. Yangling: North West Agriculture and Forestry University， 2009. (in Chinese with English abstract)

[23] 孫彩霞， 沈秀瑛. 不同基因型玉米種了萌發(fā)特性與芽、苗期抗旱性的關(guān)系[J]. 種子， 2001 (5): 32-35.

SUN C X， SHEN X Y. Relationship between different genotypes of maize germination and seedling drought resistance [J].Seed， 2001 (5): 32-35. (in Chinese with English abstract)

[24] 劉鵬. 雜交早稻組合種子發(fā)芽及成苗特性研究[D]. 長沙: 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2005.

LIU P. Study on seed burgeon and growing character of early hybrid rice combinations [D]. Changsha: Hunan Agricultural University， 2005. (in Chinese with English abstract)

[25] 俎煒華. 半支蓮自交系選育與雜交育種的初步研究[D]. 武漢: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2010.

ZU W H. A preliminary study on the breeding of inbred lines and hybrid breedingPortulacagrandifloraHook [D]. Wuhan: Huazhong Agricultural University， 2010. (in Chinese with English abstract)

[26] 吳海燕. 玉米雜交種種子生物學(xué)特性研究[D]. 保定: 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2005.

WU H Y. Study on biology characteristics of maize (ZeaMaysL.) hybrid seeds [D]. Baoding: Hebei Agricultural University， 2005. (in Chinese with English abstract)

[27] 郭穎， 羅樂， 程堂仁， 等. 大白杜鵑花苞組織培養(yǎng)研究[C]// 中國園藝學(xué)會. 中國觀賞園藝研究進(jìn)展(2014). 2014: 308-313.

[28] 楊麗娟， 顧地周， 王秋爽， 等. 鹿角杜鵑嫩葉離體培養(yǎng)和高效植株再生[J]. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2012， 40(12): 51-55.

YANG L J， GU D Z， WANG Q S， et al.Invitroculture and efficient plantlet regeneration from new leaves ofRhododendronlatoucheae[J].JournalofNortheastForestryUniverity， 2012， 40(12): 51-55. (in Chinese with English abstract)

[29] HENDERSON J T， LI H C， RIDER S D， et al. PICKLE acts throughout the plant to repress expression of embryonic traits and may play a role in gibberellin-dependent responses [J].PlantPhysiology， 2004， 134(3): 995-1005.

[30] 蘇家樂， 李暢， 陳璐， 等. 不同預(yù)處理方法對牛皮杜鵑和小葉杜鵑種子萌發(fā)的影響[J]. 植物資源與環(huán)境學(xué)報， 2011， 20(4): 64-69.

SU J L， LI C， CHEN L， et al. Effects of different pretreatment methods on seed germination ofRhododendronaureumandR.parvifolium[J].JournalofPlantResourcesandEnvironment， 2011， 20(4): 64-69. (in Chinese with English abstract)

[31] 高貴龍， 龍秀琴， 胡小京， 等. 赤霉素對兩種高山杜鵑種子發(fā)芽的影響[J]. 種子， 2010， 29(5): 23-25.

GAO G L， LONG X Q， HU X J， et al. Effect of GA on two species Alpine Rhododendron seeds germination [J].Seed， 2010， 29(5): 23-25. (in Chinese with English abstract)

[32] 黃承玲， 周洪英， 陳訓(xùn)， 等. GA3浸種對大白杜鵑種子萌發(fā)的影響[J]. 植物生理學(xué)通訊， 2010， 46(8): 793-796.

HUANG C L， ZHOU H Y， CHEN X， et al. Effects of GA3immersion on germination of seeds inRhododendrondecorumFranch [J].PhysiologyCommunications， 2010， 46(8): 793-796. (in Chinese with English abstract)

[33] 趙冰. 光照時間和赤霉素濃度對太白杜鵑種子萌發(fā)的影響[J]. 北方園藝， 2014 (2): 60-63.

ZHAO B. Effects of photoperiod and gibberellin concentration on germination ofRhododendronpurdomiiseeds [J].NorthHorticulture，2014 (2): 60-63. (in Chinese with English abstract)

(責(zé)任編輯 侯春曉)

Effects of hormone treatments on germination of self-pollinated seeds and hybrid seeds of azalea cultivars

CAO Sha， LIU Bing， ZHOU Hong， XIA Yi-ping*

(CollegeofAgricultureandBiotechnology，ZhejiangUniversity，Hangzhou310058，China)

s: To find an efficient way to promote seed germination of azaleas， whose seeds were very small and had low germination， self-pollinated seeds from azalea cultivar Zihudie were treated in three ways: 1) water soaking for 6 to 48 h; 2) 100 to 2 000 mg·L-1GA3soaking for 24 h; 3) cultured in 1/4 MS medium with different combinations of NAA， KT， ZT and GA3. Then seed germination status of these treatments， including germination time， germination rate and other indicators were compared. The results showed that germination rate of seeds reached 43% when water soaking 24 h and the germination rate increased to 75% when aseptic seeding with 2.0 mg·L-1GA3+0.05 mg·L-1NAA. Soaking seeds with 1 600 mg·L-1GA3for 24 h increased the germination rate to 82%， which was 1.82 times as that of the control. Then this GA3soaking treatment was set on seeds got from two cross breeding of azalea cultivars which named NO.29 and NO.59. The results showed that when treated with different concentrations of GA3for 24 h， germination rate and related index of these two hybrid seeds were superior to those of the controls. Additionally， when the seeds of NO.29 were soaked with 1 200 mg·L-1GA3for 24 h， the germination rate was 96%. As for NO.59， the germination rate was 95% when the seeds were soaked with 1 600 mg·L-1GA3for 24 h. The seeds germinated 2 and 7 d earlier than the controls， and their germination rates increased 20% and 71% than the controls， respectively. Thus， this treatment especially high concentration of GA3soaking was efficient in promoting germination for both self-pollinated seeds and hybrid seeds of azalea cultivars.

azalea; self-pollinated seeds; hybrid seeds; hormone treatments; germination

http://www.zjnyxb.cn

10.3969/j.issn.1004-1524.2016.10.10

2016-01-26

浙江省花卉新品種選育重大科技專項重點項目(2012C12909-7)

曹莎(1990—)，女，湖南郴州人，碩士研究生，主要從事杜鵑花資源評價與抗性育種研究。E-mail: sha1417@163.com

*通信作者，夏宜平，E-mail: ypxia@zju.edu.cn

S685.21

A

1004-1524(2016)10-1695-09

浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報ActaAgriculturaeZhejiangensis， 2016，28(10): 1695-1703

曹莎，劉冰，周泓， 等. 激素處理對杜鵑花自交與雜交種子萌發(fā)的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報， 2016， 28(10): 1695-1703.