激素處理對(duì)杜鵑花自交與雜交種子萌發(fā)的影響

曹 莎，劉 冰，周 泓，夏宜平

(浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058)

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激素處理對(duì)杜鵑花自交與雜交種子萌發(fā)的影響

曹 莎，劉 冰，周 泓，夏宜平*

(浙江大學(xué) 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310058)

杜鵑花種子細(xì)小且發(fā)芽率低，為探索有效促進(jìn)種子萌發(fā)的方法，選用杜鵑花主栽品種春鵑紫蝴蝶自交種子為材料，通過蒸餾水浸種、GA3浸種和無菌播種添加NAA、KT、ZT及GA3的處理方式，比較不同處理對(duì)杜鵑花自交種子萌發(fā)時(shí)間、發(fā)芽率等指標(biāo)的影響。結(jié)果表明，蒸餾水浸種處理以24 h浸種的效果最佳，發(fā)芽率達(dá)43%；無菌播種結(jié)合2.0 mg·L-1GA3+0.05 mg·L-1NAA處理的效果最佳，發(fā)芽率達(dá)75%；GA3浸種以1 600 mg·L-1GA3處理24 h的效果最佳，發(fā)芽率可達(dá)82%，是對(duì)照組的1.82倍。以GA3浸種法處理杜鵑花2個(gè)雜交組合的雜交種子，發(fā)現(xiàn)其各項(xiàng)發(fā)芽指標(biāo)均優(yōu)于對(duì)照，其中29號(hào)雜交種子的最適GA3處理為1 200 mg·L-1浸種24 h，發(fā)芽率達(dá)96%；59號(hào)雜交種子最適GA3處理為1 600 mg·L-1浸種24 h，發(fā)芽率可達(dá)95%，二者發(fā)芽率分別比對(duì)照提高20%和71%，萌發(fā)時(shí)間分別提早2和8 d。因此，適宜濃度尤其是高濃度GA3浸種處理能有效促進(jìn)杜鵑花自交和雜交種子的萌發(fā)。

杜鵑；自交種子；雜交種子；激素處理；種子萌發(fā)

杜鵑花屬杜鵑花科(Ericaceae)杜鵑花屬(Rhododendron)植物，是中國(guó)十大名花之一[1]。雖然中國(guó)的杜鵑花種質(zhì)資源十分豐富[2]，但是迄今自育品種很少，實(shí)際園林應(yīng)用品種更少，與中國(guó)擁有的豐富資源極不相稱[3]。目前，杜鵑花育種方法包括實(shí)生選種、芽變選種、誘變育種等，但傳統(tǒng)雜交育種仍然是最主要的途徑之一[4]。

杜鵑花屬植物在自然界雜交現(xiàn)象普遍，栽培條件下也易于雜交變異[4-5]。但是由于杜鵑花種子極為細(xì)小，一般千粒重僅0.008～0.431 g[6]，播種成苗困難。因此，研究雜交育種的優(yōu)良性狀、篩選杜鵑花新品種，首先要建立科學(xué)的播種方法和促進(jìn)種子萌發(fā)的技術(shù)體系。由于品種資源珍貴，播種繁殖困難，出苗率低，種苗階段易引種馴化等原因[7]，應(yīng)用激素處理是提高種子萌發(fā)率的主要手段之一。前人研究表明，播種前浸種、有效的激素處理，如萘乙酸(NAA)、激動(dòng)素(KT)、玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)可促進(jìn)杜鵑花生長(zhǎng)和種子的萌發(fā)[8-12]，目前與杜鵑花種子萌發(fā)相關(guān)的研究集中在高山杜鵑類杜鵑花，主要為杜鵑亞屬、常綠杜鵑亞屬的種。

江南地區(qū)應(yīng)用的杜鵑花大多為映山紅亞屬的種及雜交種，即春鵑、夏鵑類，相關(guān)種子萌發(fā)的研究鮮有報(bào)道。春鵑紫蝴蝶(Rhododendron×pulchrum)是我國(guó)杜鵑花園林應(yīng)用最為廣泛的品種，也是雜交育種的優(yōu)良親本。本研究首先用不同方式處理春鵑紫蝴蝶自交種子，探索促進(jìn)杜鵑花種子萌發(fā)的適宜方法。然后將此方法應(yīng)用于以春鵑紫蝴蝶為父本的雜交種子(29號(hào))和夏鵑雜交種子(59號(hào))，以驗(yàn)證該方法促進(jìn)不同杜鵑花雜交種子萌發(fā)的可行性?？紤]到杜鵑花種子的自然萌發(fā)率不高，田間播種萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)緩慢，且難以統(tǒng)計(jì)描述種子質(zhì)量的指標(biāo)[13]，本實(shí)驗(yàn)利用蒸餾水浸種、GA3浸種和無菌播種方法，浸種處理結(jié)合人工氣候箱培養(yǎng)催芽，以量化的種子萌發(fā)指標(biāo)探尋適宜的處理方法，以期為摸索提高杜鵑花雜交種子萌發(fā)率的有效方法提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

2013年10月下旬于浙江大學(xué)園林研究所種質(zhì)資源圃采集春鵑紫蝴蝶的成熟蒴果。2014年10月于該資源圃采集杜鵑花雜交組合第29號(hào)、第59號(hào)的成熟蒴果，其中，雜交種子29號(hào)的父本為春鵑紫蝴蝶，母本為毛鵑(雙套粉紅色，民間收集資源，未命名)；59號(hào)的父本是石巖杜鵑，母本夏鵑。采回的蒴果放于培養(yǎng)皿中，置于室溫下，等自然開裂后將種子取出。

1.2 方法

1.2.1 種子處理方法

A：自交種子蒸餾水浸種。春鵑紫蝴蝶自交種子用蒸餾水于室溫下分別浸種6、12、24、36、48 h后消毒，置于墊有濕潤(rùn)濾紙的帶蓋培養(yǎng)皿中，于人工氣候箱中培養(yǎng)，每個(gè)重復(fù)100粒種子，共5個(gè)重復(fù)。B：自交種子無菌播種。在1/4MS培養(yǎng)基中分別添加NAA、KT、ZT、GA3激素的組合(表1)，將春鵑紫蝴蝶自交種子消毒后無菌播種培養(yǎng)，每個(gè)重復(fù)30粒種子，共5個(gè)重復(fù)。C：自交種子GA3浸種。分別用0、100、200、400、800、1 200、1 600、2 000 mg·L-1的GA3，室溫下將春鵑紫蝴蝶自交種子浸種24 h，消毒后置于墊有濕潤(rùn)濾紙的帶蓋培養(yǎng)皿中，于人工氣候箱中培養(yǎng)，每個(gè)重復(fù)50粒種子，共3個(gè)重復(fù)(表1)。

D：雜交種子GA3浸種。將杜鵑花雜交種子29號(hào)與59號(hào)用1 200、1 600、2000 mg·L-1的GA3室溫下浸種24 h，消毒后播種于1/4 MS培養(yǎng)基中無菌培養(yǎng)，每個(gè)重復(fù)50粒種子，共5個(gè)重復(fù)。

A、B、C試驗(yàn)于2013年11月至2014年12月完成，D試驗(yàn)于2014年12月至2015年1月在相同地點(diǎn)完成。

表1 春鵑紫蝴蝶自交種子無菌播種激素處理組合

Table 1 Different hormone treatments for self-pollinated seeds of azalea Zihudie in aseptic seeding

mg·L-1

1.2.2 種子消毒方法

自交和雜交種子浸種后，將種子表面水分用濾紙吸干后，用70%的酒精浸泡30 s，無菌水沖洗3遍。再用0.1%升汞浸泡15 min，無菌水沖洗5遍，充分搖晃。用濾紙吸干種子表面水分。

1.2.3 培養(yǎng)條件

A、C組于25 ℃、光照2 500 lx、光照時(shí)間12 h·d-1的人工氣候箱中培養(yǎng)，每天澆水1次，保持濾紙濕潤(rùn)；B、D組在組培室中相同光溫條件無菌

培養(yǎng)。

1.3 觀察與統(tǒng)計(jì)方法

參照《國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程》的鑒定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行發(fā)芽測(cè)定[14]。發(fā)芽測(cè)定的指標(biāo)包括發(fā)芽率、萌發(fā)高峰期、發(fā)芽勢(shì)、萌發(fā)時(shí)滯、發(fā)芽持續(xù)時(shí)間、子葉長(zhǎng)出時(shí)間和發(fā)芽指數(shù)。發(fā)芽率/%=發(fā)芽種子總數(shù)/試驗(yàn)種子總數(shù)× 100。萌發(fā)高峰期即萌發(fā)量最大的時(shí)間距離試驗(yàn)開始的天數(shù)。發(fā)芽勢(shì)/%=萌發(fā)高峰期時(shí)發(fā)芽種子數(shù)/試驗(yàn)種子總數(shù)× 100。萌發(fā)時(shí)滯即第1粒種子開始萌發(fā)距離試驗(yàn)開始的天數(shù)。發(fā)芽持續(xù)時(shí)間即為第1粒種子開始萌發(fā)到最后1粒種子萌發(fā)所經(jīng)過的總天數(shù)。子葉長(zhǎng)出時(shí)間為種子開始萌發(fā)后到長(zhǎng)出第1片子葉的天數(shù)。發(fā)芽指數(shù)=Σ(Gi/Di)，其中Gi為i日內(nèi)的發(fā)芽數(shù)，Di為相應(yīng)的發(fā)芽天數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果采用Excel 2007和IBM SPSS Statistics 20軟件進(jìn)行方差分析和因素多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

2.1.1 蒸餾水浸種對(duì)杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

用蒸餾水浸種不同時(shí)間后，紫蝴蝶自交種子的萌發(fā)情況如表2所示。浸種24 h，種子發(fā)芽率最高，但各組均無顯著差異。從發(fā)芽指數(shù)上來看，各組的發(fā)芽指數(shù)均大于對(duì)照，但僅36 h浸種處理與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)。浸種處理24與48 h能夠促使自交種子提前1 d萌發(fā)，其他處理與對(duì)照無差異。綜合分析，蒸餾水浸種不能顯著促進(jìn)紫蝴蝶自交種子的萌發(fā)。

表2 蒸餾水浸種時(shí)間對(duì)春鵑紫蝴蝶自交種子萌發(fā)的影響

Table 2 Effect of water soaking time on germination of self-pollinated seeds of azalea Zihudie

浸泡時(shí)間Soakingtime/h發(fā)芽率Germinationrate/%發(fā)芽勢(shì)Germinationenergy/%萌發(fā)時(shí)滯Germinationtimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時(shí)間Germinationtime/d子葉長(zhǎng)出時(shí)間Timeofcotyledoneruption/d發(fā)芽指數(shù)Germinationin-dex035±10a24±8a821171024.74±8.43b638±3a19±4a91716834.00±8.01ab1233±6a3±1b81518535.3±10.09ab2443±3a19±1a71419841.23±3.72ab3638±3a12±1ab91116553.63±4.57a4841±4a23±1a71519740.28±3.67ab

同列數(shù)據(jù)后無相同小寫字母表示在0.05水平上差異顯著。下同。

Values (mean±SD) without the same lower letters within a column are significantly different at the 5% level. The same as below.

2.1.2 激素對(duì)杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

春鵑種子能在無菌播種條件下發(fā)芽，不同激素組合對(duì)無菌種子萌發(fā)的誘導(dǎo)效果各異(表3)。其中，G5組的種子萌發(fā)效果最好，相對(duì)CK1和CK2分別提前4和6 d萌發(fā)，萌發(fā)率為75%。添加NAA的3種激素處理的組合比激素單獨(dú)處理的效果均要好，尤其是GA3+NAA的組合。不添加NAA的激素處理中，KT組的總體效果最好。另外，有些激素組合的誘導(dǎo)效果甚至不如對(duì)照組，這與激素種類和污染情況有關(guān)。在萌發(fā)時(shí)間方面，除K6、Z4和Z5，各處理組能使種子的萌發(fā)時(shí)間提前0～4 d；除K3外，各組處理基本能使種子子葉長(zhǎng)出時(shí)間提前0～5 d。各激素處理組的發(fā)芽勢(shì)基本小于對(duì)照組，說明添加激素并不能使種子的發(fā)芽整齊度提高。

2.1.3 GA3浸種對(duì)杜鵑花自交種子萌發(fā)的影響

由表4可知，除100 mg·L-1GA3處理的杜鵑花發(fā)芽率低于對(duì)照組外，其他處理均能促進(jìn)種子萌發(fā)。其中，1 200、1 600、2 000 mg·L-1GA3處理的發(fā)芽率均顯著高于對(duì)照組，1 600 mg·L-1GA3處理組的發(fā)芽率達(dá)到對(duì)照組的1.82倍；發(fā)芽指數(shù)方面，除100、1 200 mg·L-1GA3組外，其他處理均顯著大于對(duì)照組。從發(fā)芽時(shí)間來看，所有處理均能使自交種子萌發(fā)時(shí)間提前1 d，1 600 mg·L-1GA3處理組的萌發(fā)高峰期和子葉長(zhǎng)出時(shí)間最早。綜合分析，1 600 mg·L-1GA3浸種24 h是最佳處理組。

綜合分析以上3種春鵑紫蝴蝶自交種子的處理方式發(fā)現(xiàn)，蒸餾水浸泡不能顯著促進(jìn)種子萌發(fā)；用添加激素的培養(yǎng)基進(jìn)行無菌播種，污染率小，能夠保存所有種子，其中，GA3+NAA組合處理的整體效果較佳；用高濃度GA3浸種24 h能夠顯著促進(jìn)種子的萌發(fā)，其中，1 600 mg·L-1處理組在各方面均表現(xiàn)較佳(圖1)。對(duì)比3種處理方式中表現(xiàn)最好的2組——1 600 mg·L-1GA3浸種24 h與培養(yǎng)基中添加2.0 mg·L-1GA3+0.05 mg·L-1NAA，結(jié)果見圖1，前者的發(fā)芽率更高、子葉長(zhǎng)出時(shí)間更短，二者萌發(fā)遲滯時(shí)間差別不大，考慮到在人工氣候箱播種培養(yǎng)，種子易受真菌感染，致發(fā)霉，在后續(xù)的試驗(yàn)中選擇1 600 mg·L-1GA3浸種24 h 處理杜鵑花雜交種子，再無菌播種于普通無添加激素的1/4 MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

表3 不同激素處理對(duì)春鵑紫蝴蝶自交種子無菌播種的影響

Table 3 Effect of aseptic sowing with different hormone treatments for self-pollinated seeds of azalea Zihudie

處理Treatments發(fā)芽率Germinationrate/%發(fā)芽勢(shì)Germinationenergy/%萌發(fā)時(shí)滯Germinationtimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時(shí)間Germinationtime/d子葉長(zhǎng)出時(shí)間Timeofcotyle-doneruption/d發(fā)芽指數(shù)GerminationindexCK148±11bcdef43±8a111535921.08±1.80bcdCK229±5fghij11±4def13173588.95±3.21fghK170±4a41±7ab111526825.00±3.40abcK236±4defghi20±7cdef91527811.42±1.06efghK329±4fjhij20±2cdef81528128.94±0.62fghK445±2bcdefg28±1abcd81527714.82±1.08defgK550±15bcd43±13a122027517.22±6.75cdefK631±10ef-ghij20±7cdef141427712.62±3.99defghZ130±9fghij9±6ef11143188.71±3.89fghZ249±3bcde26±7bcde111529614.97±1.55defgZ344±3cdefgh16±5def101430612.69±3.18defghZ429±7fghij17±2def14182349.52±2.04efghZ515±4j9±1ef12142557.97±2.12fghZ616±1j11±4def11183255.17±1.80hG143±0cdefgh23±3cdef91327617.05±1.02cdefG248±2bcdef20±3cdef91229618.47±2.78cdeG356±3abc37±2abc101529529.78±2.28aG427±0ghij10±3ef81229610.98±2.57efghG575±6a37±6abc71329727.23±2.17abG616±7j7±2f10173589.71±2.54efghG722±3ij11±1def92035910.34±1.89efghG819±4ij12±3def9203587.45±2.42ghG923±3ij11±2def91640812.90±1.76defghG1026±0hij18±2def91935711.79±1.21efgh

表4 GA3對(duì)春鵑紫蝴蝶自交種子萌發(fā)的影響

Table 4 Effect of GA3on germination of self-pollinated seeds of azalea Zihudie

GA3濃度ConcentrationofGA3/(mg·L-1)發(fā)芽率Germinationrate/%發(fā)芽勢(shì)Germinationenergy/%萌發(fā)時(shí)滯Germinationtimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時(shí)間Germinationtime/d子葉長(zhǎng)出時(shí)間Timeofcotyle-doneruption/d發(fā)芽指數(shù)Germinationin-dex045±2de23±5b91516923.17±2.81e10039±6e19±1b812171028.52±2.60de20057±3cd19±2b81116938.00±2.17abc40059±4bcd27±5b81217938.78±3.80bc80062±7bcd45±7a81417844.30±5.80ab120078±11ab28±2b81413930.60±0.47cde160082±3a16±6b81018549.35±1.51a200067±10abc45±6a81218647.04±3.04ab

A，蒸餾水浸種24 h；B，添加2.0 mg·L-1 GA3+0.05 mg·L-1 NAA無菌播種處理；C，1 600 mg·L-1 GA3浸種24 hA， water soaking for 24 h; B， tissue culture pretreatment added 2.0 mg·L-1 GA3+0.05 mg·L-1NAA; C， 1 600 mg·L-1 GA3 soaking for 24 h圖1 播種20 d后3個(gè)處理的春鵑紫蝴蝶自交種子的萌發(fā)情況Fig.1 Germination of self-pollinated seeds of azalea Zihudie after 20 day’s growth with three different treatments

2.2 GA3浸種處理對(duì)杜鵑花雜交種子萌發(fā)的影響

如表5所示，29號(hào)種子在1 200 mg·L-1GA3處理時(shí)發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)均為最高，顯著高于對(duì)照組；各處理組均能促進(jìn)種子提前萌發(fā)，2 000 mg·L-1GA3處理能使種子提前3 d萌發(fā)；萌發(fā)高峰期隨著處理濃度的增加而提前，子葉長(zhǎng)出時(shí)間則各不相同。59號(hào)種子各處理組的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均顯著高于對(duì)照組，分別達(dá)到對(duì)照組的6.3～6.6倍與5.8～6.1倍，各處理間差異不顯著；處理組的發(fā)芽指數(shù)均顯著大于對(duì)照組，其中2 000 mg·L-1GA3處理種子發(fā)芽指數(shù)最高，相較于對(duì)照組能提升337%；所有處理組均能比對(duì)照組提前7～8 d萌發(fā)，整體發(fā)芽進(jìn)程均比對(duì)照組快。圖2是1 200 mg·mL-1GA3處理29號(hào)種子、1 600 mg·mL-1GA3處理59號(hào)種子18和70 d的發(fā)芽情況。

表5 GA3浸種處理對(duì)2個(gè)杜鵑花雜交種子萌發(fā)的影響

Table 5 Effects of GA3on germination of azalea hybrid seeds NO.29 and NO.59

品種CultivarGA3濃度ConcentrationofGA3/(mg·L-1)發(fā)芽率Germina-tionrate/%發(fā)芽勢(shì)Germina-tionenergy/%萌發(fā)時(shí)滯Germina-tiontimelag/d萌發(fā)高峰期Peakofgermination/d發(fā)芽持續(xù)時(shí)間Germinationtime/d子葉長(zhǎng)出時(shí)間Timeofcotyledoneruption/d發(fā)芽指數(shù)Germinationindex29號(hào)070±2b48±3ab1118181021.22±1.80c120096±1a62±5a1014191146.46±3.28a160080±4ab40±8b913201234.24±3.20b200080±4ab42±7ab812221028.5±3.90bc59號(hào)014±2b11±2b15———18.13+3.53d120089±2a69±4a85191042.27±3.53c160095±1a64±1a7419952.95±2.24b200093±1a68±2a7419979.16±2.75a

“—”表示數(shù)據(jù)缺失。由于59號(hào)的對(duì)照組萌發(fā)過于緩慢，在30 d后測(cè)定其發(fā)芽率等指標(biāo)，發(fā)芽時(shí)間相關(guān)指標(biāo)未記載完全。

“—” means lack of data. Because the germination of control group of azalea hybrid seeds NO.59 was very slow， and germination rate and other indicators were determined after 30 days， which led to the lack of germination time correlation indexes.

A和C分別為1 200 mg·L-1 GA3處理29號(hào)種子18和70 d的情況；B和D分別為1 600 mg·L-1 GA3處理59號(hào)種子18和70 d的情況A and C show status of No.29 which soaked with 1 200 mg·L-1 GA3 after 18 and 70 days， respectively; B and D show status of No.59 which soaked with 1 600 mg·L-1 GA3 after 18 and 70 days， respectively圖2 播種18和70 d后2種杜鵑花雜交種子的生長(zhǎng)情況Fig.2 Growth of hybrid seeds of azalea after 18 and 70 days

綜合分析，1 200～2 000 mg·L-1GA3處理均能促進(jìn)2組杜鵑花雜交種子的萌發(fā)，對(duì)于29號(hào)而言，1 200 mg·L-1GA3處理促進(jìn)萌發(fā)效果最好；對(duì)于59號(hào)而言，3組處理效果均較好且無顯著差異，就發(fā)芽率而言，1 600 mg·L-1GA3處理效果較佳。

3 結(jié)論與討論

發(fā)芽勢(shì)指的是種子發(fā)芽速度和發(fā)芽整齊度，表示種子生活力的強(qiáng)弱程度。從杜鵑花種子發(fā)芽勢(shì)來看，春鵑紫蝴蝶種子的發(fā)芽整齊度普遍不高，僅7%～45%，發(fā)芽率最高的1 600 mg·L-1GA3浸種處理組也只有16%。2組雜交種子的發(fā)芽勢(shì)經(jīng)過GA3浸種處理后明顯提高，達(dá)40%～69%，但發(fā)芽仍然不整齊。前人研究的高山杜鵑如雷山杜鵑[15]、秀雅杜鵑[16]、短果杜鵑[17]、毛氈杜鵑[14]、馬纓杜鵑[18]的種子，包括雜交種的種子，均有發(fā)芽不整齊的現(xiàn)象[19-20]。從其他植物研究可知，種子萌發(fā)整齊度可能與種子中所含的水溶性內(nèi)源萌發(fā)抑制物質(zhì)[21]、種子活力[22]、親本遺傳差異[23]等有關(guān)。春鵑紫蝴蝶自交種子、春鵑紫蝴蝶與毛鵑雜交組合種子(29號(hào))以及夏鵑間雜交組合種子(59號(hào))的發(fā)芽勢(shì)均符合杜鵑花種子零星萌發(fā)的特點(diǎn)，具體原因尚待進(jìn)一步研究。

29號(hào)雜交種子的對(duì)照組比自交種子蒸餾水浸種、無菌播種以及GA3浸種處理的萌發(fā)效果都好，說明在雜交親本選擇合理的前提下，雜交種子可能存在自發(fā)性好的現(xiàn)象。而59號(hào)的對(duì)照組需要15 d才開始發(fā)芽，并且30 d后的發(fā)芽效果依舊遠(yuǎn)低于處理組，說明雜交種子的自發(fā)性不一致。29號(hào)父本為春鵑紫蝴蝶，母本為毛鵑，與自交種子相比，父本不同，在發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽指數(shù)及發(fā)芽時(shí)間上均比自交種子表現(xiàn)好；而59號(hào)雜交種子的父本是石巖杜鵑，母本夏鵑，均不是春鵑類。前人對(duì)水稻種子[24]、半枝蓮[25]、玉米[26]等植物的研究表明，種子發(fā)芽差異在很大程度上是由基因型決定的，杜鵑花雜交種子的自發(fā)性可能也與本身特性有關(guān)，但需進(jìn)一步研究探討。

前人研究表明，NAA、KT、ZT、GA3在杜鵑組培中，對(duì)細(xì)胞分裂、芽再生、種子打破休眠等有一定的促進(jìn)作用[27-28]，將NAA、KT、ZT應(yīng)用于杜鵑種子萌發(fā)的研究是一次新的嘗試。從本研究的結(jié)果看來，NAA與GA3組合處理組對(duì)杜鵑種子萌發(fā)促進(jìn)效果較顯著，而且與1 200～1 600 mg·L-1GA3浸種處理效果對(duì)比，促進(jìn)種子萌發(fā)效果好且更經(jīng)濟(jì)，這可能與激素的作用不同有關(guān)，NAA、KT、ZT主要是促進(jìn)細(xì)胞分裂和組織增殖，而GA3可誘導(dǎo)種子淀粉酶等水解酶的合成，打破種子休眠[29]。浸種后由于種皮透水、透氣性的提高，種子內(nèi)生理生化過程與呼吸作用得以增強(qiáng)，進(jìn)而促進(jìn)種胚的發(fā)育與種子萌發(fā)，這與杜鵑花科植物種子休眠是由種皮障礙所引起相吻合[30]。

與其他2種方式處理相比，GA3浸種處理對(duì)杜鵑花自交種子和雜交種子的萌發(fā)均有促進(jìn)作用，增幅最大可達(dá)579%，說明GA3浸種處理對(duì)杜鵑花種子萌發(fā)的促進(jìn)作用可能有廣譜性。但前人對(duì)高山杜鵑的研究表明，低濃度GA3浸種24 h效果更好，例如對(duì)九龍山杜鵑與桃葉杜鵑的GA3浸種處理，最適濃度均為200 mg·L-1[31]，大白杜鵑為500 mg·L-1[32]，太白杜鵑為800 mg·L-1[33]。本試驗(yàn)中，春鵑自交種子和雜交種子均在高濃度1 200、1 600 mg·L-1浸種處理時(shí)表現(xiàn)較佳，說明促進(jìn)不同類型杜鵑花種子萌發(fā)的最適GA3浸種濃度有明顯差異。

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(責(zé)任編輯 侯春曉)

Effects of hormone treatments on germination of self-pollinated seeds and hybrid seeds of azalea cultivars

CAO Sha， LIU Bing， ZHOU Hong， XIA Yi-ping*

(CollegeofAgricultureandBiotechnology，ZhejiangUniversity，Hangzhou310058，China)

s: To find an efficient way to promote seed germination of azaleas， whose seeds were very small and had low germination， self-pollinated seeds from azalea cultivar Zihudie were treated in three ways: 1) water soaking for 6 to 48 h; 2) 100 to 2 000 mg·L-1GA3soaking for 24 h; 3) cultured in 1/4 MS medium with different combinations of NAA， KT， ZT and GA3. Then seed germination status of these treatments， including germination time， germination rate and other indicators were compared. The results showed that germination rate of seeds reached 43% when water soaking 24 h and the germination rate increased to 75% when aseptic seeding with 2.0 mg·L-1GA3+0.05 mg·L-1NAA. Soaking seeds with 1 600 mg·L-1GA3for 24 h increased the germination rate to 82%， which was 1.82 times as that of the control. Then this GA3soaking treatment was set on seeds got from two cross breeding of azalea cultivars which named NO.29 and NO.59. The results showed that when treated with different concentrations of GA3for 24 h， germination rate and related index of these two hybrid seeds were superior to those of the controls. Additionally， when the seeds of NO.29 were soaked with 1 200 mg·L-1GA3for 24 h， the germination rate was 96%. As for NO.59， the germination rate was 95% when the seeds were soaked with 1 600 mg·L-1GA3for 24 h. The seeds germinated 2 and 7 d earlier than the controls， and their germination rates increased 20% and 71% than the controls， respectively. Thus， this treatment especially high concentration of GA3soaking was efficient in promoting germination for both self-pollinated seeds and hybrid seeds of azalea cultivars.

azalea; self-pollinated seeds; hybrid seeds; hormone treatments; germination

http://www.zjnyxb.cn

10.3969/j.issn.1004-1524.2016.10.10

2016-01-26

浙江省花卉新品種選育重大科技專項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目(2012C12909-7)

曹莎(1990—)，女，湖南郴州人，碩士研究生，主要從事杜鵑花資源評(píng)價(jià)與抗性育種研究。E-mail: sha1417@163.com

*通信作者，夏宜平，E-mail: ypxia@zju.edu.cn

S685.21

A

1004-1524(2016)10-1695-09

浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)ActaAgriculturaeZhejiangensis， 2016，28(10): 1695-1703

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