血清TNF-α、IL-6、IL-8檢測在重癥支原體肺炎患兒中的價值

顧浩翔，陸 敏，車大鈿，李 嬪

（1.上海交通大學附屬兒童醫(yī)院呼吸內科，上海200040；2.上海市兒童醫(yī)院兒童內分泌科，上海200333）

血清TNF-α、IL-6、IL-8檢測在重癥支原體肺炎患兒中的價值

顧浩翔1，陸 敏1，車大鈿1，李 嬪2

（1.上海交通大學附屬兒童醫(yī)院呼吸內科，上海200040；2.上海市兒童醫(yī)院兒童內分泌科，上海200333）

目的 探討血清TNF-α、IL-6、IL-8檢測在重癥支原體肺炎患兒中的應用價值。方法 選取我院于2012年4月至2015年2月入院治療的支原體肺炎兒童患者90例，觀察組45例為重癥支原體肺炎，對照組45例為一般支原體肺炎，采用流式熒光法，測定患兒發(fā)病極期、恢復期血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平。結果 觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在極期時的值分別為1.13±0.21、230.5±36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04 pg/mL，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；在恢復期，觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8的值分別為0.81±0.34、135.32±30.8、0.162 ±0.07 pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140±0.02 pg/mL，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩組患者，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治療后均顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉歸中起重要作用，可作為監(jiān)測支原體肺炎嚴重程度的指標。

腫瘤壞死因子； 白細胞介素6； 白細胞介素8； 重癥支原體肺炎； 兒童； 應用價值

支原體肺炎現(xiàn)已成為兒童下呼吸道感染，特別是小兒社區(qū)獲得性肺炎的常見病癥之一［1］。支原體肺炎以發(fā)熱、咳嗽、無痰或白色黏液痰等為主要臨床特征，患兒在使用抗生素后，還可能存在治療較為困難或者長時間癥狀無明顯改善，逐漸發(fā)展成為重癥支原體肺炎的現(xiàn)象［2］。TNF-α（腫瘤壞死因子-α）、IL-6（白細胞介素6）、IL-8（白細胞介素8）等細胞因子及炎癥介質對于重癥支原體肺炎的發(fā)病機制和病情程度等有正相關聯(lián)系［3-5］，本次研究對90例不同程度支原體肺炎兒童極期和恢復期的TNF-α、IL-6及IL-8進行測試，在于探尋NF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉歸中具體作用。

材料和方法

1 研究對象

選取2012年4月至2015年2月在我院進行治療的支原體肺炎患兒90例，均符合支原體肺炎診斷標準（兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識（2015年版），經(jīng)實驗室檢查和影像學檢查得到確診。按病情輕重分為兩組。將重癥支原體肺炎的患兒定為觀察組，共45例；將一般支原體肺炎的患兒定為對照組。觀察組患兒符合如下基本情況：①血清支原體抗體IgM陽性率在1：160以上；②符合重癥肺炎診斷標準；③有缺氧表現(xiàn)并且有不同程度的肺外損害。排除標準：①無肺結核、支氣管哮喘等其他呼吸系統(tǒng)疾病②檢測未發(fā)現(xiàn)除類胸膜肺炎微生物（PPLO）外其他病毒感染。其中男23例，女22例；年齡5～13歲，平均9.1±3.3歲，病史2～14 d；合并癥：心包積液6例，胸腔積液15例，中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變7例，肝脾大5例，皮疹13例。對照組男20例，女25例；年齡5～16歲，平均9.1±4.6歲，病史3～9 d；對照組為一般支原體肺炎，無明顯呼吸困難、缺氧及肺外合并癥等。兩組患者的基本資料對比，年齡、性別等一般資料上比較差異不顯著（P＞0.05），具有可比性，適合臨床研究。研究前所有患兒家長都詳細聽取試驗流程的介紹，并簽署了自愿參加本次研究的知情同意書。

2 研究方法

采用流式熒光法（FIA）檢測血清特異性MP-IgM抗體，分別于發(fā)病初期（或入院初期），治療前后，發(fā)病極期（3～7 d）及恢復期（8～10 d），空腹抽取每例患者4 mL全血，血樣分別置于美國BD公司分離膠試管中，-20℃下保存待檢。檢驗儀器使用Luminex200流式熒光檢測儀（美國Luminex公司），先將配對三種檢測物的微球混合，加入待測血清。該混濁液中，抗體與抗原特異性相互配對，熒光標記在此階段添加。進而，微球被微量液體傳輸系統(tǒng)排成單列通過檢測器。通過檢測器內熒光確認微球的編號，其他熒光判斷該編號微球上的熒光強度，最后經(jīng)由計算機處理后得出TNF-α、IL-6及IL-8等細胞因子及炎癥介質的含量。

3 觀察指標

記錄并統(tǒng)計TNF-α、IL-6及IL-8在極期和恢復期的數(shù)值。

4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 15.0軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料以頻數(shù)表示，比較采用χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，比較采用獨立樣本t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

結果

1 兩組患者極期測定情況

觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在極期時的值分別為1.13±0.21、230.5±36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04 pg/mL，差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05），表明TNF-α、IL-6及IL-8對于支原體肺炎的反應，水平越高，肺炎越嚴重。試驗具體數(shù)據(jù)見表1。

表1　兩組患者極期TNF-α、IL-6及IL-8檢測結果的比較表（pg/mL）

2 兩組患者恢復期測定情況

觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在恢復期時的值分別為0.81±0.34、135.32±30.8、0.162± 0.07 pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140± 0.02 pg/mL，差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。試驗具體數(shù)據(jù)見表2。

表2　兩組患者恢復期TNF-α、IL-6及IL-8檢測結果的比較表（pg/mL）

3 兩組患者治療前后TNF-α、IL-6及IL-8水平

重癥支原體患者不論是觀察組還是對照組，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平在治療后顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表3　兩組患者治療前后TNF-α、IL-6及IL-8含量比較（pg/mL）

討論

在兒童肺炎中，重癥支原體肺炎是難于治療、病因復雜、病程冗長、病情危重的一種［6］。從近時期治療的方式來看，我國抗生素濫用的現(xiàn)象日漸嚴重，并且隨著生態(tài)破壞、環(huán)境污染以及其他影響兒童生活環(huán)境因素的發(fā)展，重癥支原體肺炎的發(fā)病率在我國兒童中呈逐年遞增的態(tài)勢［7］。

觀察組TNF-α、IL-6及IL-8在極期與恢復期的值明顯高于治療組，差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；兩組患者，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治療后均顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。數(shù)據(jù)顯示了TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉歸中起重要作用。以往研究，多關注于TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子與支原體肺炎相關性，并未考慮TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子過度表達的原因。TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子過度表達的原因，可能在于參與了MP的發(fā)病機制。目前，MP的發(fā)病機制仍未有定論。兩種主流觀點：其一直接由病原體導致，其二間接由病原體激發(fā)了免疫炎癥反應。IL-6一方面可促進抗體的產(chǎn)生，另一方面會誘導T淋巴細胞分化，促進釋放炎癥因子。同樣的，TNF-α水平低時可保護抗體，增強自身免疫，而濃度偏高，便成為炎癥遞質，誘發(fā)炎癥逐漸嚴重。而 IL-8可激活中性粒細胞，促進其釋放溶酶體酶與超氧化物。病原體侵入體內，導致機體產(chǎn)生免疫反應，產(chǎn)生多種細胞因子，一方面產(chǎn)生IL-6、TNF-α、IL-8，利用其促炎作用，消除微生物，另一方面，生成IL-10，抑制炎癥發(fā)生。若某一方失衡，就會導致機體穩(wěn)態(tài)紊亂。

目前，研究人員多數(shù)認為，對于重癥肺炎的轉歸，炎性細胞因子介導的炎癥反應在其中起了重要作用，而且因為肺炎支原體與人體某些組織存在部分共同抗原［8］，在其進入人體后，會產(chǎn)生相應組織的自身抗體，使得多系統(tǒng)的免疫損害，肺炎支原體的發(fā)病機制與直接毒性作用及免疫損害有關。肺炎支原體在進入人體后，促使機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應答，這一過程中，多種細胞因子和其他體液因子同時產(chǎn)生，保護機體抵抗病原體侵襲，因為肺炎支原體的應答過于強烈，多余的炎性細胞因子累積產(chǎn)生毒害效果［9］。

本研究的結果顯示，觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在極期時的值分別為1.13±0.21、230.5± 36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04pg/mL，差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這說明TNF-α、IL-6及IL-8在重癥支原體肺炎中起重要作用；在恢復期，觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8的值分別為0.81±0.34、135.32±30.8、0.162±0.07pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140±0.02pg/mL，差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05），結果表明：隨著病情的好轉，兩組患者的TNF-α、IL-6及IL-8水平都有降低，結果揭示了TNF-α、IL-6及IL-8對于支原體肺炎的反應，水平越高，支原體肺炎越嚴重；不論是觀察組還是對照組，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治療后顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

本次研究的不足之處在于研究的對象只有90例，有些片面性，不能代表全部情況，而且設計的觀察指標有限，也有一定的局限性，這有待在今后的研究里改善，進一步進行探討研究。

綜上所述，TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉歸中起重要作用。利用流式熒光法檢測TNF-α、IL-6及IL-8水平變化對臨床診斷治療及預后有一定的臨床價值，檢測TNF-α、IL-6及IL-8的水平，可作為監(jiān)測支原體肺炎嚴重程度的指標。

［1］鐘曉，田寶琳，焦安夏，等.兒童難治性肺炎支原體肺炎44例臨床分析.中國實用兒科雜志，2015，30（8）：622-624.

［2］梁粵.肺炎支原體肺炎患兒外周血IL-10/IL-17表達與肺功能變化的相關性研究.臨床兒科雜志，2015，33（8）：686-689.

［3］魏紅玲，常艷美，魯珊.肺炎支原體肺炎合并肺栓塞一例.中華兒科雜志，2015，53（2）：143-144.

［4］陳莉莉，劉金榮，趙順英，等.常規(guī)劑量甲潑尼龍治療無效的兒童難治性肺炎支原體肺炎的臨床特征和治療探討.中華兒科雜志，2014，52（3）：172-176.

［5］張麗君，安淑華，李金英，等.肺炎支原體肺炎患兒氣道黏液栓形成的危險因素.臨床兒科雜志，2015，33（5）：432-436.

［6］陳蒙，楊軍，趙德育.兩歲以下兒童肺炎支原體肺炎臨床特點分析.臨床兒科雜志，2014，32（12）：1135-1137.

［7］李文，尹育華.難治性肺炎支原體肺炎32例臨床特點及早期診治.中華實用兒科臨床雜志，2015，30（4）：316-317.

［8］梅玉霞，蔣瑾瑾，蔡斌，等.兒童難治性支原體肺炎臨床危險因素分析.臨床兒科雜志，2014，32（12）：1138-1140.

［9］中華醫(yī)學會兒科學分會呼吸學組，《中華實用兒科臨床雜志》編輯委員會.兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識（2015年版）.中華實用兒科臨床雜志，2015，30（4）：1304-1308.

（潘子昂編輯）

Evaluation of Serum TNF-α，IL-6，IL-8 in Children with Severe Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia

GU Hao-xiang1，LU Min1，CHE Da-dian1，LI Bin2
（1.Department of Respiratory Medicine，Shanghai Children's Hospital，Shanghai Jiao Tong University，Shanghai 200040，China；2.Department of Pediatric Endocrine，Children's Hospital of Shanghai，Shanghai 200333）

Objective To investigate serum TNF-α（tumor necrosis factor-α），IL-6（interleukin-6），IL-8（interleukin-8）detection in children with severe mycoplasma pneumoniae pneumonia.Methods We collected 90 pediatric patients with refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia who were admitted in our hospital were selected from April 2012 to February 2015.In the observation group，there were 45 patients with severe mycoplasma pneumoniae pneumonia，in the control group，there were 45 patients with mycoplasma pneumoniae pneumonia.TNF-α，IL-6 and IL-8 levels were detected at different clinical stages.Results The levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 of observation group in the acute phase were 1.13±0.21，230.5±36.4 and 0.26±0.08，and treatment group were 0.82±0.17，185±31.1，0.18±0.04.The difference between two groups were statistically significant（P＜0.05）；In the recovery phase，the levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 of observation group were 0.81±0.34，135.32±30.8 and 0.162±0.07 and treatment group were 0.62±0.12，109.24±25.5 and 0.140±0.02 The difference between two groups were statistically significant（P＜0.05）. TNF-α，IL-6 and IL-8 levels significantly reduced after treatment in both groups The differences between before and after treatment were statistically significant（P＜0.05）. Conclusion TNF-α，IL-6 and IL-8 like other inflammatory cytokines play important roles in the development and prognosis of severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia.They can be used as indicators to monitor the severity of the disease.

TNF-α； IL-6； IL-8； Severe mycoplasma pneumoniae pneumonia； Children； Value

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.004

2016-05-30；

2016-06-22

李嬪（1963—），女，博士學位，主任醫(yī)師，教授，博士生導師。主要研究方向：兒童內分泌疾病，性早熟，矮小癥，糖尿病。Tel：18917128019；E-mail：Libin66655@126.com