海南地區(qū)豆大薊馬田間種群的抗藥性監(jiān)測

唐良德，趙海燕，付步禮，韓 云，閆凱莉，邱海燕，

(1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護研究所，?？?571101; 2. 海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所，?？?571100；3. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，廣州 510642; 4. 海南省植保植檢站，?？?570203)

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海南地區(qū)豆大薊馬田間種群的抗藥性監(jiān)測

唐良德1，趙海燕2，付步禮1，韓 云3，閆凱莉3，邱海燕1，

劉 奎1*，吳建輝3*，李 鵬4

(1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護研究所，海口 571101; 2. 海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所，海口 571100；3. 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，廣州 510642; 4. 海南省植保植檢站，?？?570203)

采用葉管藥膜法(TIBS)室內(nèi)測定了2014-2015年海南主要豇豆種植區(qū)三亞、澄邁和?？诙勾笏E馬田間種群對6種常用殺蟲劑敏感性的年度變化。結(jié)果表明，2014年，三亞種群對甲維鹽、高效氯氰菊酯和吡蟲啉產(chǎn)生了低水平抗性，抗性倍數(shù)分別為5.39、8.07和5.44倍，澄邁種群對甲維鹽也產(chǎn)生了5.93倍的低水平抗性，?？诜N群對藥劑仍處于敏感階段；2015年，三亞種群對甲維鹽、乙基多殺菌素、吡蟲啉和啶蟲脒產(chǎn)生了低水平抗性，抗性倍數(shù)分別為7.97、5.43、7.51和5.44倍，對高效氯氰菊酯產(chǎn)生了中等水平抗性，抗性倍數(shù)為12.99倍；澄邁種群和?？诜N群對除甲維鹽外的其它藥劑仍處于敏感狀態(tài)，但年度間相比，均表現(xiàn)出藥劑敏感性下降，有進一步產(chǎn)生低水平抗性的趨勢。海南各監(jiān)測地區(qū)均未發(fā)現(xiàn)豆大薊馬對阿維菌素產(chǎn)生抗性，可以考慮其它藥劑與阿維菌素輪換使用。

豆大薊馬；海南；抗藥性；監(jiān)測

豆大薊馬Megalurothripsusitatus(Bagnall)，又名普通大薊馬和豆花薊馬，屬纓翅目Thysanoptera薊馬科Thripidae，主要為害豆科植物，是豆科作物的重要害蟲(Chang, 1987，1988a, 1988b)。

海南是我國的“冬季菜籃子”，在保障冬季瓜菜的有效供給中發(fā)揮著舉足輕重的作用。豇豆是人們喜食的大宗蔬菜，且對光溫有較高的要求。海南獨特的區(qū)位優(yōu)勢成為冬季豇豆種植的天然溫室，每年種植面積近2萬hm2，是海南冬季瓜菜最大的品種之一。近年來，豆大薊馬在我國華南豇豆種植區(qū)暴發(fā)性為害，嚴重影響了豇豆的生長和品質(zhì)(范詠梅等，2013；肖春雷等，2014；周遠平和貝近靈，2014)，給海南冬種豇豆產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展帶來了巨大的影響(孔祥義等，2012)。針對豆大薊馬嚴重為害的現(xiàn)狀，目前仍主要依賴于化學(xué)防治。由于豆大薊馬主要集中在花內(nèi)為害，藥劑很難到達靶標，防效不理想，造成增加藥量及施藥頻次，加之豆大薊馬世代短、繁殖快且能營孤雌生殖等特點(邱海燕等，2014；Tangetal., 2015)，易對藥劑形成抗性。為了明確目前海南地區(qū)豆大薊馬田間種群對常用殺蟲劑的抗性水平，連續(xù)兩年對海南主要豇豆種植區(qū)豆大薊馬的抗藥性進行了監(jiān)測，旨在為豆大薊馬防治藥劑的合理選擇和科學(xué)施用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試昆蟲

豆大薊馬田間種群分別采自?？谑袞|山鎮(zhèn)溪南村(海口種群)、澄邁縣大拉鎮(zhèn)金安農(nóng)場(澄邁種群)和三亞市崖城鎮(zhèn)南賓農(nóng)場(三亞種群)的豇豆，室內(nèi)用四季豆豆莢飼養(yǎng)1代后用于生測；相對敏感品系采自海南尖峰嶺四季豆(無用藥記錄)，室內(nèi)在不接觸任何藥劑的情況下用四季豆豆莢連續(xù)繼代飼養(yǎng)15代以上。選用健康、日齡基本一致的雌成蟲進行試驗。

1.2 供試藥劑

66%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽(emamectin benzoate，河北天順生物工程有限公司)；92%阿維菌素(abamectin，南通農(nóng)藥劑型開發(fā)中心)；97%高效氯氰菊酯(betacy permethrin，江蘇揚農(nóng)化工集團有限公司)；96%吡蟲啉(imidacloprid，四川國光農(nóng)化股份有限公司)；96%啶蟲脒(acetamiprid，石家莊伊宏化工有限公司)，上述藥劑均為原藥；乙基多殺菌素(spinetoram，艾綠士60克/升懸浮劑，美國陶氏益農(nóng)公司)。

1.3 生物測定方法

生物測定方法參照唐良德等(2015)報道的葉管藥膜法進行測定。浸管：事先用00#號昆蟲針針尖在酒精燈上加熱后，在離心管管蓋和管底分別打數(shù)個小孔，大小以豆大薊馬成若蟲不能鉆出為宜。然后將供試藥劑用丙酮稀釋成6-8個濃度(含0.1% v/v Triton X-100)，用移液槍吸取1 mL藥液注入4 mL的離心管中，上下顛倒搖晃數(shù)次后將藥液倒掉，置于實驗臺自然晾干，待用。每管為1個重復(fù)，每個濃度4個重復(fù)。以丙酮浸管為對照。浸果：用小刀將鮮嫩的豇豆豆莢切成長度為2 cm 左右的片段(豆莢兩端平整，不留豆?？?，便于結(jié)果調(diào)查)，分別在每個濃度藥液中浸漬15 s，以丙酮浸果為對照。處理后的果莢置于吸水紙上自然晾干，用小鑷子夾入相應(yīng)藥液濃度的離心管中，每管1節(jié)。吸蟲：采用自制吸蟲器將蟲吸入，然后將試蟲彈入藥管中，每管20頭。吸蟲器的基本構(gòu)造為：在1 mL移液槍槍頭大開口的一端用240目的昆蟲網(wǎng)橡皮筋纏緊封口，然后截掉尖頭部分(約1/2)套在一個新的槍頭上，將組合后的槍頭再套在一個硅膠管上，最后將硅膠管連接到抽氣泵(100W)上或用人工吸氣。試蟲吸入槍頭后，從兩個槍頭的接合部斷開，將試蟲彈入藥管中?？剐员稊?shù)值為田間種群的LC50與敏感種群LC50的比值?？剐运降膭澐植捎媚壳暗囊话銟藴?張帥等，2010)，即抗性比低于3倍的為敏感狀態(tài)，3-5倍為敏感性下降狀態(tài)，5-10倍為低水平抗性，10-40倍為中水平抗性，40-160倍為高水平抗性，>160倍為極高水平抗性。

2 結(jié)果與分析

2014年和2015年連續(xù)2年對海南主要豇豆種植區(qū)豆大薊馬的抗藥性進行了監(jiān)測，測定結(jié)果如表1(2014年)和表2(2015年)所示。從表1 可以看出，2014年海南地區(qū)除三亞種群對甲維鹽、高效氯氰菊酯和吡蟲啉及澄邁種群對甲維鹽產(chǎn)生了低水平抗性外，其他種群對所測定的6種藥劑仍處于敏感階段或敏感下降狀態(tài)(抗性倍數(shù)<5)，其中三亞種群對乙基多殺菌素和啶蟲脒的敏感性下降較多，抗性倍數(shù)分別為4.74和3.88倍。

分析表2中的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)海南地區(qū)豆大薊馬對所測定藥劑的抗性年度間變化明顯。相比于2014年度，三亞種群對高效氯氰菊酯產(chǎn)生了中等水平抗性(RR=12.99)，對啶蟲脒產(chǎn)生了低水平抗性(RR=5.44)。另外，?？诜N群對甲維鹽也產(chǎn)生了低水平抗性(RR=5.69)。值得注意的是，澄邁種群對高效氯氰菊酯的抗性水平達到了4.46倍，有產(chǎn)生低水平抗性的趨勢。?？诜N群對乙基多殺菌素和高效氯氰菊酯的敏感性也下降較快，值得關(guān)注。但海南各監(jiān)測地區(qū)均未發(fā)現(xiàn)豆大薊馬對阿維菌素產(chǎn)生抗性，可以考慮其它藥劑與阿維菌素輪換使用。

表1 海南地區(qū)豆大薊馬對6種殺蟲劑的抗藥性水平(2014)

表2 海南地區(qū)豆大薊馬對6種殺蟲劑的抗藥性水平(2015年)

3 討論與結(jié)論

豆大薊馬曾是臺灣地區(qū)豆科作物上的重要害蟲(Chang, 1987; 1988a; 1988b)，現(xiàn)已成為海南豇豆的頭號害蟲。目前，豆大薊馬普遍使用化學(xué)農(nóng)藥進行控害。本文連續(xù)2年測定了海南主要豇豆種植區(qū)豆大薊馬田間種群對6種常用殺蟲劑敏感性的年度變化。由于種植結(jié)構(gòu)和用藥水平的不同，其抗性水平也有一定的差異，總體上而言三亞地區(qū)豆大薊馬田間種群對藥劑最不敏感，抗性水平普遍高于海南北部澄邁和?？诘貐^(qū)，這可能與三亞豇豆價值高(春節(jié)前后上市)導(dǎo)致用藥頻次高(2-3 d/次)有關(guān)。通過2年的監(jiān)測結(jié)果分析，三亞種群已對測定藥劑中的5種(除阿維菌素外)產(chǎn)生了抗性，其中對高效氯氰菊酯還產(chǎn)生了中等水平的抗性(表2)。從年度間變化來看，相對于2014年，2015年豆大薊馬各地區(qū)田間種群對測定藥劑都表現(xiàn)出不同程度的敏感性下降。因而，建議在豆大薊馬的化學(xué)防治中要密切關(guān)注防效變化，注意藥劑的輪換使用，以延緩抗性的產(chǎn)生。例如，三亞種群已對高效氯氰菊酯產(chǎn)生了中等水平抗性(RR=12.99)，考慮到交互抗性應(yīng)暫停使用擬除蟲菊酯類殺蟲劑。乙基多殺菌素是當(dāng)前控制豆大薊馬最好的殺蟲劑之一，雖然年度間的敏感性變化不大，但也已產(chǎn)生了低水平抗性(RR=5.43)，并有進一步抗性發(fā)展的趨勢，因而應(yīng)注意避免單一藥劑的連續(xù)重復(fù)使用。同時，啶蟲脒與乙基多殺菌素的情形類似。殺蟲劑混配是延緩藥劑抗性形成的有效途徑，如將這2種不同作用機制的殺蟲劑進行混配，是否能有效提高殺蟲劑防效和延緩藥劑的抗性還有待于進一步的研究證實。

在西花薊馬和煙粉虱的抗性治理中，有學(xué)者提出了很好的抗性治理策略(Dennehy and Willians, 1997; Palumboetal., 2001;王澤華等，2011)，對豆大薊馬具有借鑒作用。例如，在每個階段(大約害蟲一個世代的時間)作用機制不同的殺蟲劑只允許使用一次；根據(jù)每年新殺蟲劑的引入和對殺蟲劑敏感性的變化重新調(diào)整和優(yōu)化抗性治理計劃以及合理使用殺蟲劑有效保護天敵。另外，根據(jù)西花薊馬的生物學(xué)和行為學(xué)特性合理用藥和施藥(Helyeretal., 1995; Robbetal., 1995; Bielza, 2008)。豆大薊馬和西花薊馬一樣，具有隱匿為害的習(xí)性，因而藥劑很難接觸靶標，需要精準施藥才能達到更好的效果，這對施藥器械有了更高的要求(<100 μm的霧滴)；在施藥時間上，應(yīng)盡量選擇在辰時豇豆花瓣張開時施藥，這時藥劑盡可能多的接觸到蟲體，提高防效。豆大薊馬還有入土化蛹的習(xí)性，土壤施藥也是減少薊馬化蛹數(shù)量的有效措施，考慮到土壤施藥對農(nóng)藥殘留風(fēng)險更低，可以選擇性使用一些無內(nèi)吸性相對高毒的藥劑，從而增加有效藥劑的選擇種類，延續(xù)抗性產(chǎn)生。

另有文獻報道藍板對豆大薊馬有良好的誘殺效果(Chang, 1990; 云天海等，2012；唐良德等，2015)，土壤狀況對豆大薊馬化蛹有顯著的影響(Chang, 1989; 韓云等，2015)，因而可以將化學(xué)防治與物理防治(藍板誘殺)和農(nóng)業(yè)措施(土壤灌溉)結(jié)合起來，對薊馬的各個蟲態(tài)進行有效的控制，以減少殺蟲劑的施用量，降低殺蟲劑對豆大薊馬的選擇壓。另外，由于海南高溫高濕環(huán)境，豆大薊馬在海南一年可發(fā)生24-26代(邱海燕等，2014)，繁殖快和世代重疊嚴重。因而在防治豆大薊馬時，應(yīng)盡可能在豇豆開花前期用化學(xué)藥劑大力壓制豆大薊馬的蟲口基數(shù)，減輕豇豆盛花期的防治壓力。據(jù)報道內(nèi)吸性殺蟲劑苗期灌根對薊馬也有很好的防治效果(>90%)且持效期長，可有減少薊馬的蟲口基數(shù)(吳青君，2013)。

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Monitoring the insecticide resistance of the field populations ofMegalurothripsusitatusin Hainan area

TANG Liang-De1, ZHAO Hai-Yan2, FU Bu-Li1, HAN Yun3, YAN Kai-Li3, QIU Hai-Yan1, LIU Kui1*, WU Jian-Hui3*, LI Peng4

(1. Environment and Plant Protection Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China; 2. Institute of Plant Protection, Hainan Academy of Agricultural Sciences, Haikou 571100, China; 3. College of Agriculture, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China; 4. Plant Protection and Quarantine of Hainan Province, Haikou 570203, China)

Resistance to 6 common used insecticides in field populations ofMegalurothripsusitatusfrom Sanya, Chengmai and Haikou city of Hainan Province was monitored by a modified TIBS method in 2014 and 2015. The results showed thatM.usitatuspopulations in Sanya city exhibited low levels of resistance to emamectin benzoate, β-cypermethrin and imidacloprid (5.39, 8.07 and 5.44 folds, respectively), and the population of Chengmai city was also exhibited low levels of resistance to emamectin benzoate (5.93 folds), the other populations in Hainan area were still relatively sensitive to tested insecticides. By 2015, Sanya population had developed low levels of resistance to spinetoram and acetamiprid, besides emamectin benzoate, and imidacloprid in 2014, and also had developed moderate levels of resistance to β-cypermethrin (12.99 folds). The Chengmai and Haikou populations were still sensitive to other insecticides tested, except had developed low levels of resistance to emamectin benzoate (5.43 and 5.69 folds, respectively). But compared with the insecticide resistance in 2014, the populations of Sanya, Chengmai and Haikou all had decreased susceptibility to 6 tested insecticides. All field populations tested displayed no resistance to abamectin (<3 folds).

Megalurothripsusitatus(Bagnall)；Hainan；insecticide resistance；monitoring

海南省應(yīng)用技術(shù)研發(fā)與示范推廣專項 (ZDXM2015046)；中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費專項(2014hzs1J008) ；海南省自然科學(xué)基金 (314104)

唐良德，男，1985年生，博士，副研究員，主要從事害蟲綜合治理和昆蟲生態(tài)學(xué)，E-mail: tangldcatas@163.com

*通訊作者Author for correspondence：E-mail: lk0750@163.com; jhw@scau.edu.cn

Received：2015-09-26；接受日期Accepted：2016-01-30

Q965.9；S433

A

1674-0858(2016)05-1032-06