Vitros5600測(cè)定血漿肌鈣蛋白I ES穩(wěn)定性及假陽(yáng)性的分析

左　軍　宋曉冬　徐建華

（吉林省長(zhǎng)春市一汽總醫(yī)院（吉林大學(xué)第四醫(yī)院），吉林 長(zhǎng)春 130011）

Vitros5600測(cè)定血漿肌鈣蛋白I ES穩(wěn)定性及假陽(yáng)性的分析

左軍宋曉冬徐建華

（吉林省長(zhǎng)春市一汽總醫(yī)院（吉林大學(xué)第四醫(yī)院），吉林 長(zhǎng)春 130011）

目的 探討Vitros5600測(cè)定肌鈣蛋白I（CTNI）中存在的假陽(yáng)性及不穩(wěn)定因素。由于心肌肌鈣蛋白特異地分布于心肌組織，作為心肌損傷的高敏感和特異性標(biāo)志物，心肌肌鈣蛋白對(duì)于檢測(cè)急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者心肌缺血及危險(xiǎn)分級(jí)具有重要意義。目前測(cè)定肌鈣蛋白的方法很多如電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法（ECLIA）、酶聯(lián)熒光分析法等。方法 Vitros5600測(cè)定血漿肌鈣蛋白I定量檢測(cè)已被廣泛應(yīng)用，它采用的是intelliccheck技術(shù)（化學(xué)發(fā)光法）應(yīng)用特異性免疫測(cè)定單克隆抗體（-CTnI）。結(jié)果 其敏感度很高，其線性范圍在0.003～66.7 μg/L其測(cè)定結(jié)果的穩(wěn)定性顯得尤為重要。結(jié)論 本文主要探討關(guān)于使用Vitros5600測(cè)定血漿肌鈣蛋白IES時(shí)，測(cè)定中發(fā)現(xiàn)的不穩(wěn)定及其假陽(yáng)性的一些問題，以示在報(bào)告結(jié)果時(shí)應(yīng)該加以注意，防止誤報(bào)。

CTnI；不穩(wěn)定性；假陽(yáng)性

1　材料與方法

1.1檢測(cè)儀器：Vitros5600生化免疫分析儀。

1.2試劑：vitros提供測(cè)定試劑及定標(biāo)液，質(zhì)控品。

1.3測(cè)定方法：在經(jīng)過儀器調(diào)試定標(biāo)完成之后，進(jìn)行質(zhì)控測(cè)定并且通過后進(jìn)行樣本檢測(cè)［1-2］。采集患者新鮮無溶血、乳糜、黃疸的全血4 mL，離心。用血清進(jìn)行直接測(cè)定。

2　結(jié)　果

在我院使用5600這兩年期間檢測(cè)患者CTnI我們選取今年5月份不斷出現(xiàn)重復(fù)性差，假陽(yáng)性的一共20例樣本進(jìn)行比較分析，研究發(fā)現(xiàn)有些樣本首次檢測(cè)結(jié)果偏高，有的甚至達(dá)到危急值，而當(dāng)再次復(fù)檢后結(jié)果正常了或者略高，與第一次檢測(cè)結(jié)果相差甚遠(yuǎn)，結(jié)果見表1。

3　討　論

3.1從表1中可以看出在使用5600一段時(shí)間后檢測(cè)患者血清CTnI某一階段頻繁出現(xiàn)重復(fù)性差，穩(wěn)定性差以及假陽(yáng)性，而質(zhì)控和批量檢測(cè)對(duì)比竟然沒有明顯變化。其中，在今年5～6月份檢測(cè)的1200分樣本中假性增高總數(shù)為50例占4.12%最為明顯。而真正有心肌梗死問題的和其他心臟疾病方面引起的增高占35%。其余為正常結(jié)果，經(jīng)過二次復(fù)檢得以證實(shí)。為什么會(huì)出現(xiàn)首次檢測(cè)結(jié)果與再次復(fù)檢存在較大差異呢。對(duì)此我們考慮是不是由于試劑批號(hào)不同所引起的差異，試劑對(duì)血清樣本與質(zhì)控品之間存在差異，然而，我們對(duì)此也用正?；颊哐暹M(jìn)行了比對(duì)，也沒有發(fā)現(xiàn)很大的差異。連續(xù)進(jìn)行樣本的重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果顯示穩(wěn)定。還是記過用不同批號(hào)的試劑進(jìn)行比對(duì)也沒有發(fā)現(xiàn)明顯差異，之后我們考慮是不是由于儀器設(shè)備本身的因素比如光源，檢測(cè)模塊，吸樣針，吸樣量等多方面因素的查找，更換也沒有發(fā)現(xiàn)具體引起這種現(xiàn)象的主要因素。

3.2從標(biāo)本采集開始我們仔細(xì)研究是不是由于采血量不夠和離心力及離心時(shí)間不夠或者由于纖維蛋白凝塊或者有極微小的凝塊所致，我們對(duì)每一分樣本離心后采用手工方式徹底分離血清以達(dá)到減少微凝方面的最低程度，此外同樣選取無溶血，無乳糜，無黃疸的樣本進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)也考慮到藥物方面的影響，以及臨床護(hù)士采集標(biāo)本時(shí)的一些影響因素，經(jīng)過分離血清用測(cè)試小杯將血清分離進(jìn)行測(cè)試，但還是或多或少，不定期的出現(xiàn)兩次測(cè)定結(jié)果不符及假陽(yáng)性的現(xiàn)象。

3.3之后我們覺得過多的分離步驟也許會(huì)有影響結(jié)果的重復(fù)性及穩(wěn)定性，我們采用增加標(biāo)本采集量每份標(biāo)本采血量不少于4 mL，離心時(shí)間不少于8 min離心速度不低于4000轉(zhuǎn)/分，待血清完全離好后直接上機(jī)測(cè)定經(jīng)過這些嘗試后雖然出現(xiàn)假陽(yáng)性頻率略低但還是有。

3.4經(jīng)過和廠家技術(shù)人員共同分析以及從他們那兒得到的經(jīng)驗(yàn)我們考慮到室內(nèi)環(huán)境的塵埃是不是也會(huì)影響到結(jié)果的穩(wěn)定性，對(duì)此我們經(jīng)常清潔空調(diào)，并且在機(jī)房?jī)?nèi)加裝空氣凈化器以減少對(duì)檢測(cè)時(shí)的影響。

綜合上訴各種原因，我們認(rèn)為造成這種重復(fù)性差，假陽(yáng)性以及不穩(wěn)定的結(jié)果是多方面的因素所致。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可信度必須嚴(yán)格從標(biāo)本采集到實(shí)驗(yàn)室測(cè)定操作規(guī)程對(duì)于這種敏感度高的檢測(cè)項(xiàng)目必須提高注意結(jié)果的監(jiān)測(cè)，一方面在平時(shí)要做好儀器設(shè)備的保養(yǎng)維護(hù)，對(duì)于試劑的不同批號(hào)應(yīng)做對(duì)比，堅(jiān)持做好室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)評(píng)。我們認(rèn)為一個(gè)可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，不僅僅是一個(gè)方面，而是多方面多種維護(hù)措施的共同協(xié)調(diào)。

［1］ 鄭佐婭，曹丹如，陳悅，等.檢測(cè)肌紅蛋白的半定量金免疫層析法的研究［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2007，22（6）:645-647.

［2］ Vitros試劑使用說明書［S］.

表1　20例重復(fù)3次測(cè)定樣本及同時(shí)定值質(zhì)控品反測(cè)結(jié)果

R446.1；R541

B

1671-8194（2016）29-0023-02