• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不可逆蛋白激酶抑制劑研究進(jìn)展

    2016-11-17 03:43:29鄭培根鄭程隆
    農(nóng)產(chǎn)品加工 2016年1期

    鄭培根,鄭程隆

    (青島科技大學(xué),山東青島 266042)

    不可逆蛋白激酶抑制劑研究進(jìn)展

    鄭培根,鄭程隆

    (青島科技大學(xué),山東青島 266042)

    蛋白激酶是一個(gè)由多種高度保守酶組成的酶系,主要負(fù)責(zé)將ATP的Y-磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移給酪氨酸、絲氨酸、蘇氨酸等多種氨基酸,這些氨基酸在細(xì)胞中起到信號(hào)傳導(dǎo)的作用。迄今為止,多數(shù)上市的激酶抑制劑是ATP競(jìng)爭(zhēng)的非共價(jià)抑制劑,但是近來(lái)不可逆蛋白抑制因其可以和半胱氨酸或其他親核殘基在ATP口袋處結(jié)合形成共價(jià)鍵而備受科研人員的青睞。通過(guò)講述不可逆蛋白激酶抑制劑的研究進(jìn)展,探討新型共價(jià)抑制劑的高效發(fā)展戰(zhàn)略。

    蛋白激酶;共價(jià)鍵抑制劑;不可逆性

    激酶是一個(gè)大的基因家族,功能是催化ATP上的Y-磷酸鹽轉(zhuǎn)移到特定的靶標(biāo)分子。蛋白質(zhì)磷酸化可以誘導(dǎo)產(chǎn)生多種影響,包括酶的活性、構(gòu)象、穩(wěn)定性等[1]。在所有激酶中,蛋白激酶家族是一個(gè)很有吸引力的藥物靶點(diǎn)。目前,在所有藥理學(xué)靶點(diǎn)中,有超過(guò)25%是蛋白激酶,而在抗腫瘤領(lǐng)域更是有超過(guò)75%的靶點(diǎn)是蛋白激酶[2-3]。目前,上市的大多數(shù)蛋白激酶抑制劑均為可逆性的ATP競(jìng)爭(zhēng)抑制劑,其通過(guò)識(shí)別特定的ATP結(jié)合口袋,從而具有靶向性、選擇性等特點(diǎn)[4]。這類(lèi)抑制劑能夠和ATP結(jié)合口袋處的腺嘌呤結(jié)合,并可延伸到周?chē)R种苿┑慕Y(jié)合經(jīng)常會(huì)引起顯著性的結(jié)構(gòu)重排,進(jìn)而影響生物的新陳代新[5]。

    不可逆激酶抑制劑的發(fā)現(xiàn)相對(duì)較晚,但是其應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)大。以下2個(gè)方面的發(fā)展,對(duì)不可逆激酶抑制劑的開(kāi)發(fā)有重要影響。首先,在過(guò)去的十幾年里,小分子抑制劑在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域取得飛速發(fā)展。這些激酶抑制劑獲得美國(guó)藥物食品監(jiān)督管理局

    (FDA)批準(zhǔn),并且用于腫瘤治療。但是這些蛋白激酶抑制劑都是使用傳統(tǒng)方法識(shí)別、開(kāi)發(fā)的,即這些可逆激酶抑制劑占據(jù)了ATP結(jié)合口袋中激酶的催化結(jié)構(gòu)域。第二個(gè)重要的發(fā)展是共價(jià)結(jié)合[6-7],這主要源于共價(jià)鍵藥物選擇性和安全性方面的全新認(rèn)識(shí)。歷史經(jīng)驗(yàn)告訴藥物研發(fā)者,要避免使用親電的小分子化合物。因?yàn)樾》肿佑H電基團(tuán)的選擇性會(huì)非?;靵y,或者即使選擇性很好,在后期的臨床試驗(yàn)中也會(huì)表現(xiàn)出很高的毒性。其結(jié)果是不可逆抑制劑或者共價(jià)鍵抑制劑成為毒性試劑,并且開(kāi)發(fā)的也越來(lái)越少。但是隨著臨床上不可逆抑制劑有更好的療效和安全性例子的增多,對(duì)不可逆抑制劑的質(zhì)疑才不斷減少。概括來(lái)說(shuō),不可逆抑制劑能否成功取決于共價(jià)鍵是否只局限于靶向的蛋白激酶,即包括療效和毒性2個(gè)方面的內(nèi)容。

    1 常見(jiàn)不可逆激酶抑制劑的種類(lèi)

    1.1 Bruton's酪氨酸激酶(BTK)抑制劑

    Bruton's酪氨酸激酶是非受體酪氨酸激酶中Tec家族的一員,也是一種在B淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化中起著重要作用的酪氨酸激酶,因此它是B細(xì)胞淋巴瘤的關(guān)鍵靶標(biāo)酶。由于在免疫應(yīng)答中涉及到B細(xì)胞,因而B(niǎo)TK抑制劑也可以應(yīng)用于自身免疫性病癥。BTK在鉸鏈結(jié)合區(qū)擁有1個(gè)非催化性的Cys481,即非常接近于ATP結(jié)合位點(diǎn)的抑制劑。BTK抑制劑表現(xiàn)出良好的臨床療效和安全性,該抑制劑的成功開(kāi)發(fā)對(duì)Pharmacyclics'公司的Imbruvica(拉鐵尼伯)用于治療外套細(xì)胞淋巴瘤(MCL) 的批準(zhǔn)有很大推進(jìn)作用,該藥物的口服生物利用度較高[8]。Pharmacyclics'公司目前正在與Jansen醫(yī)藥公司合作,研究Imbruvica(拉鐵尼伯)在治療慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL)、多發(fā)性骨髓瘤和彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤上的作用。

    常見(jiàn)Bruton's酪氨酸激酶(BTK)抑制劑見(jiàn)圖1。

    圖1 常見(jiàn)Bruton's酪氨酸激酶(BTK)抑制劑

    1.2 表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)抑制劑

    EGFR激酶是一種細(xì)胞表面的酪氨酸激酶,它們?cè)诩せ罴?xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程起到重要的作用。EGFR含量的上升是許多癌癥的病因,包括肺癌、結(jié)腸癌和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。許多制藥公司研究不可逆EGFR激酶抑制劑已超過(guò)15年,正是由于他們的堅(jiān)持,才使很多第1代不可逆抑制劑提前進(jìn)入臨床試驗(yàn)。轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是由于野生型EGFR的過(guò)度表達(dá),外顯子19的缺失或外顯子21 L858R的突變引起。為了制止該疾病的蔓延,2013年美國(guó)批準(zhǔn)上市了Gilotrif(Afatinib) 并作為一線治療藥物[9]。另外2種與EGFR輪廓類(lèi)似的抑制劑Neratinib和Dacomitinib[10],正處于III期臨床試驗(yàn)階段。所有這些抑制劑均含有丙烯酰胺基結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)與EGFR亞型中Cys797在鉸鏈結(jié)合區(qū)有不可逆地相互作用。最近研發(fā)的新型EGFR抑制劑焦點(diǎn)都集中在抑制EGFR的雙突變T790M/L858R,因?yàn)樗鼈兛赡苁谴蠖鄶?shù)癌癥患者用EGFR抑制劑治療的耐藥機(jī)制[11]。常見(jiàn)表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)抑制劑見(jiàn)圖2。

    圖2 常見(jiàn)表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)抑制劑

    1.3 Janus激酶3(JAK3)抑制劑

    在胞漿中的JAK3是Janus家族中酪氨酸受體激酶(JAK1,JAK2和TYK2)之一,它們參與細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程。具有選擇性的JAK3抑制劑能夠較好地治療許多自身免疫適應(yīng)癥,如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病和器官移植排斥反應(yīng)等。此外,JAK3抑制劑還是一個(gè)有價(jià)值的、選擇性更強(qiáng)的藥物,最近推出的JAK3抑制劑Xeljanz(Tofacitinib),已獲用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[12]的批準(zhǔn)。JAK3在其鉸鏈結(jié)合區(qū)具有獨(dú)特的、不存在于JAK1,JAK2和TYK2的半胱氨酸殘基(Cys909),最近的專(zhuān)利文獻(xiàn)也經(jīng)常開(kāi)始引用不可逆JAK3抑制劑的例子,因?yàn)镴AK3抑制劑可以與JAK3 Cys909結(jié)合,進(jìn)而產(chǎn)生選擇性。

    常見(jiàn)的JAK3抑制劑見(jiàn)圖3。

    圖3 常見(jiàn)的JAK3抑制劑

    1.4 磷脂酰肌醇-3-激酶抑制劑

    磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3Ks)是受體酪氨酸激酶下游的主要穩(wěn)壓器,能夠調(diào)節(jié)許多主要的細(xì)胞功能,如細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、運(yùn)輸和凋亡。這些激酶的失調(diào),往往暗示著許多轉(zhuǎn)移性癌癥[13]的發(fā)生。非催化半胱氨酸(PI3KαCys862)位于PI3Ks的鉸鏈結(jié)合區(qū)后,不可逆抑制劑正是以此為靶點(diǎn)實(shí)現(xiàn)與酶的結(jié)合。在該領(lǐng)域,Celgene Avilomics公司一直通過(guò)合成含有雙環(huán)雜環(huán)的化合物進(jìn)行專(zhuān)利申請(qǐng),如化合物9結(jié)構(gòu)中的噻吩并嘧啶丙烯酰胺。

    常見(jiàn)PI3Ks抑制劑見(jiàn)圖4。

    1.5 其他不可逆的激酶抑制劑

    除了前面所討論的主要激酶靶點(diǎn)外,還有專(zhuān)利記載以其他激酶為靶點(diǎn)的不可逆抑制劑。Avila公司

    R提出了一種識(shí)別激酶的方法申請(qǐng),即在與可逆抑制劑的結(jié)合位點(diǎn)周?chē)幇珻ys殘基的激酶。由已知的可逆性抑制劑與酶的結(jié)合得出,只要不可逆抑制劑包含親電基團(tuán)便可以與該半胱氨酸形成共價(jià)鍵[14]?;衔?4是FAK不可逆抑制劑的一個(gè)例子,該抑制劑能靶向與FAKP環(huán)Cys427結(jié)合。Taiho公司已經(jīng)公開(kāi)了一系列含有吡唑并嘧啶的FGFR抑制劑,這些抑制劑的結(jié)構(gòu)與以前討論過(guò)[15]的吡唑并嘧啶BTK抑制劑相似?;衔?5是由Barcelona大學(xué)研制出來(lái)的GSK 3β不可逆性抑制劑[16],關(guān)于化合物15的可逆性類(lèi)似物如何通過(guò)改造(與DFG模段附近的Cys199相互作用) 而成為不可逆性抑制劑的描述都在文獻(xiàn)[17]中有描述。此類(lèi)例子還有很多,不再逐一列舉。

    圖4 常見(jiàn)PI3Ks抑制劑

    其他不可逆的激酶抑制劑見(jiàn)圖5。

    圖5 其他不可逆的激酶抑制劑

    2 優(yōu)勢(shì)與劣勢(shì)

    抑制劑的選擇性和安全性一直是發(fā)展共價(jià)抑制劑治療腫瘤進(jìn)程中的重要問(wèn)題。令人擔(dān)憂(yōu)的是,一個(gè)不可逆抑制劑會(huì)雜亂地在體內(nèi)標(biāo)記多個(gè)目標(biāo),導(dǎo)致細(xì)胞毒性或免疫毒性。在本次審查中所列的專(zhuān)利文獻(xiàn)表明,許多公認(rèn)的BTK和EGFR抑制劑對(duì)其他酶的抑制能力比對(duì)原始酶的抑制能力還強(qiáng),尤其是那些靶向與激酶中保守的非催化Cys鉸鏈結(jié)合區(qū)結(jié)合的化合物。盡管不可逆激酶抑制劑存在選擇性的問(wèn)題,但是已批準(zhǔn)的不可逆激酶抑制劑Afatinib和Ibrutinib顯示出良好的安全性[18]。FDA已批準(zhǔn)這些藥物用于腫瘤適應(yīng)癥,說(shuō)明具有較溫和的不良反應(yīng),因此可用于未滿(mǎn)足的醫(yī)療需求領(lǐng)域。

    由于許多不可逆激酶抑制劑對(duì)很多的靶點(diǎn)突變體都會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的作用效力(尤其是EGFR抑制劑),所以不可逆抑制劑一般只作為二線抗腫瘤藥物[19]。但是最近新公開(kāi)的不可逆抑制劑也可作為一線藥物治療患者,前提是患者的腫瘤基因分型顯示其突變體的表達(dá)對(duì)已知的標(biāo)準(zhǔn)療法產(chǎn)生耐藥性[20]。因此,不可逆激酶抑制劑可以為這些患者提供更大的初始效力和潛在完善的安全性。

    總之,不可逆蛋白激酶抑制劑最顯著的優(yōu)點(diǎn)是對(duì)靶標(biāo)的活性強(qiáng),一旦藥物分子經(jīng)過(guò)代謝到達(dá)靶標(biāo)組織與靶蛋白結(jié)合后,抑制活性將不再依賴(lài)于血藥溶度(AUC)、半衰期(t1/2)等藥動(dòng)數(shù)據(jù)[9]。因?yàn)椴豢赡嫘》肿拥慕Y(jié)合,將使被結(jié)合的靶蛋白永久失去生物功能,而機(jī)體只能通過(guò)自身新陳代謝重新生成靶蛋白來(lái)恢復(fù)本身的功能。這樣又會(huì)帶來(lái)另一個(gè)問(wèn)題,即毒性問(wèn)題。因?yàn)橐坏┧幬锓肿渝e(cuò)誤地結(jié)合了非靶標(biāo)蛋白,將會(huì)影響正常的生理功能。

    3 發(fā)展策略

    早期報(bào)道的“人類(lèi)靈感”共價(jià)抑制劑的構(gòu)建是通過(guò)修改已知的非共價(jià)抑制劑,即在適當(dāng)?shù)奈恢蒙嫌H電試劑接近半胱氨酸殘基,進(jìn)而兩者發(fā)生反應(yīng)。隨著科研人員不斷對(duì)新激酶配體的發(fā)現(xiàn),可用的復(fù)雜結(jié)構(gòu)配體數(shù)目也隨之增加,這一現(xiàn)象就為這種方法提供了起始點(diǎn)。但是,該方法的瓶頸是尋找模板,使之能在微摩爾濃度范圍內(nèi)與非共價(jià)鍵結(jié)合,并能在等量、位置確定的半胱氨酸激酶中展現(xiàn)出選擇性。如果共價(jià)鍵的形成是成功的,那么相對(duì)于沒(méi)有適當(dāng)位置的半胱氨酸殘基所有激酶來(lái)說(shuō),該共價(jià)鍵是有選擇性的。另一項(xiàng)挑戰(zhàn)是獲得腳手架,它可以呈現(xiàn)一個(gè)合適的“平臺(tái)”,該平臺(tái)安裝了帶電基團(tuán)相對(duì)親核半胱氨酸的正確軌跡。ATP位點(diǎn)的識(shí)別元素和親電子之間的活性越少,說(shuō)明單個(gè)半胱氨酸殘基作為目標(biāo)的可能性就越高。在這種情況下,理想的化合物是最初與激酶的結(jié)合模式,所處的幾何空間能夠快速成鍵形成親電子的化合物[21]。

    盡管有關(guān)報(bào)道稱(chēng)共價(jià)抑制劑是合成的,但是也有許多天然產(chǎn)物通過(guò)共價(jià)修飾激酶ATP結(jié)合位點(diǎn)處的半胱氨酸殘基形成共價(jià)抑制劑。其中,有一類(lèi)共價(jià)激酶抑制劑最明顯的表征是結(jié)構(gòu)中包含二羥基苯甲酸酯類(lèi)化合物(RALs),Hypothemycin是含有該結(jié)構(gòu)的著名藥物之一。Hypothemycin最初是根據(jù)其抗真菌活性被應(yīng)用于臨床,而隨后的調(diào)查證明它是一個(gè)共價(jià)蛋白激酶抑制劑。共價(jià)鍵是通過(guò)結(jié)構(gòu)中順式烯酮與半胱氨酸殘基反應(yīng)而形成的[22]。

    4 展望

    許多激酶對(duì)多種惡性腫瘤的發(fā)作有關(guān),并會(huì)起到關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用,從而使該蛋白家族成為一個(gè)有吸引力的藥物靶標(biāo)。目前,研究以激酶為靶點(diǎn)的藥物難點(diǎn)在于發(fā)現(xiàn)和確定更多的潛在激酶抑制劑,并合成出選擇性更強(qiáng)、效果更佳、安全范圍更廣的藥物。與可逆性激酶抑制劑相比,現(xiàn)階段酶領(lǐng)域的發(fā)展更適合具有明確潛在優(yōu)勢(shì)的不可逆性激酶的發(fā)展。首先,細(xì)胞內(nèi)ATP含量很高,非ATP競(jìng)爭(zhēng)是一個(gè)主要的上漲空間。第二,人類(lèi)激酶組在ATP結(jié)合口袋內(nèi)或附近有一個(gè)特定半胱氨酸,這不僅增強(qiáng)不可逆激酶抑制劑的效力也實(shí)現(xiàn)了選擇性。第三,許多激酶能夠有效地與不可逆抑制劑結(jié)合形成共價(jià)鍵,使得該類(lèi)酶的更新率降低,進(jìn)而導(dǎo)致作用于此蛋白家族的藥物不必頻繁給藥。這些發(fā)展變化,使研究人員對(duì)不可逆激酶抑制劑作為有效和安全的治療方法越來(lái)越有信心。見(jiàn)證已經(jīng)用于治療危及生命的癌癥藥物Afatinib和Ibrutinib,能否可以擴(kuò)展到治療慢性疾?。?lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)是非常有趣的。在不久的將來(lái),科研人員一定會(huì)進(jìn)一步完善不可逆激酶抑制劑的多種功效,將其毒副作用降低到最小,期待這類(lèi)藥物的早日問(wèn)世。views Drug Discovery,2011,10(4):307-317.

    [1]Cohen P.The origins of protein phosphorylation[J].Nat. Cell Biol.,2002,4(5):127-130.

    [2]Manning G.Evolution of protein kinase signaling from yeast to man[J].Trends Biochem.Sci.,2002,27(10):514-520.

    [3]Manning G.The protein kinase complement of the human genome[J].Science(Washington,DC,U.S).,2002,298:1 912-1 916,1 933-1 934.

    [4]Davis M I.Comprehensive analysis of kinase inhibitor selectivity[J].Nature Biotechnology,2011,29(11):1 046-1 051.

    [5]Uetrecht J P.New concepts in immunology relevant to idiosyncratic drug reactions:the“danger hypothesis”and innate immune system[J].Chemical Research in Toxicology,1999,12(5):387-395.

    [6]Potashman M H,Duggan M E.Covalent modifiers:An orthogonal approach to drug[J]Design.J.Med.Chem.,2009,52(5):1 231-1 246.

    [7]Singh J.The resurgence of covalent drugs[J].Nature Re-

    [8]Honigberg L E Verner,Z Pan.Inhibitors of bruton's tyrosine kinase[J].Design.J.Med.Chem.,2010,59(3):1 231-1 246.

    [9]Kumar S,R Agrawal.Next generation tyrosine kinase inhibitor(TKI):Afatinib.Recent patents on anti-cancer drug discovery[J].Nature Reviews Drug Discovery,2014,9(3):382-393.

    [10]Hanke J H,Joseph P Gardner,Robert L Dow,et al. Discovery of a novel,potent,and src family-selective tyrosine kinase inhibitor Study of Lck-and FynT-dependent T cell activation[J].Journal of Biological Chemistry,1996,271(2):695-701.

    [11]Lee Y,Shim H S,Rark M S,et al.High EGFR gene copy number and skin rash as predictive markers for EGFR tyrosine kinase inhibitors in patients with advanced squamous cell lung carcinoma[J].Clinical Cancer Research,2012,18(6):1 760-1 768.

    [12]Clark J D,M E Flanagan,J B.Telliez.Discovery and development of janus kinase(JAK) inhibitors for inflammatory diseases:miniperspective[J].Journal of Medicinal Chemistry,2014,57(12):5 023-5 038.

    [13]Luo J,B D Manning,L C Cantley.Targeting the PI3KAkt pathway in human cancer:rationale and promise[J]. Cancer cell,2003,4(4):257-262.

    [14]Yuan W,R M Krug.Influenza B virus NS1 protein inhibits conjugation of the interferon(IFN) induced ubiquitin like ISG15 protein[J].The EMBO Journal,2001,20(3):362-371.

    [15]Sagara T.3,5-disubstituted alkynylebenzene compound and salt thereof.US 2014034035[P],2014.

    [16]Martinez A.Preclinical efficacy on GSK 3 inhibitors:Towards a future generation of powerful drugs[J].Medicinal Research Reviews,2008,28(5):773-796.

    [17]Perez D I,Valle P,Concepcion P,et al.Switching reversibility to irreversibility in glycogen synthase kinase 3 inhibitors:clues for specific design of new compounds[J]. Journal of Medicinal Chemistry,2011,54(12):4 042-4 056.

    [18]Farooqui M,Wiestner Z A.Ibrutinib for the treatment of chronic lymphocytic leukemia[J].Journal of Medicinal Chemistry,2013,65(12):4 089-4 095.

    [19]Haber D A,N S Gray,J Baselga.The evolving war on cancer[J].Cell,2011,145(1):19-24.

    [20]Barluenga S.In vivo efficacy of natural product inspired irreversible kinase inhibitors[J].Chem Bio Chem,2010,11(12):1 692-1 699.

    [21]Dungo R T,G M Keating.Afatinib:first global approval[J]. Drugs,2013,73(13):1 503-1 515.

    [22]Carmi C.Clinical perspectives for irreversible tyrosine kinase inhibitors in cancer[J].Biochemical Pharmacology,2012,84(11):1 388-1 399.◇

    Advances in Irreversible Protein Kinase Inhibitors

    ZHENG Peigen,ZHENG Chenglong
    (Qingdao University of Science and Technology,Qingdao,Shandong 266042,China)

    Protein kinases are a highly conserved enzyme systerm by a variety of enzymes,which are primarily responsible for the transfer of ATP Y-phosphate groups to tyrosine,serine,threonine and other amino acids.These amino acids play a role in signal transduction in cells.To date,the majority of listed kinase inhibitors are non-covalent ATP competitive inhibitors. But recently,the development of an irreversible inhibitors is favored by researchers,because of they can combine with cysteine or other nucleophilic amino acids residues to form covalent bonds in the ATP binding pocket.This article is mainly about the research progress in irreversible protein kinase inhibitors,and discussed the efficient development strategies of new covalent inhibitors.

    protein kinase;covalent inhibitor;irreversibility

    Q813

    A

    10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2016.01.015

    2015-09-13

    鄭培根(1989— ),男,碩士,研究方向?yàn)樗幬锖铣伞?/p>

    天天躁日日操中文字幕| 免费观看a级毛片全部| 美女高潮的动态| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 涩涩av久久男人的天堂| 中国国产av一级| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲精品一二三| 大香蕉97超碰在线| 丰满乱子伦码专区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 天堂网av新在线| 久久久久久久亚洲中文字幕| 嘟嘟电影网在线观看| 欧美国产精品一级二级三级 | av免费观看日本| 熟妇人妻不卡中文字幕| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲在久久综合| 亚洲成人一二三区av| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 成人美女网站在线观看视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 男女下面进入的视频免费午夜| 国产一区有黄有色的免费视频| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲伊人久久精品综合| 午夜视频国产福利| 久久精品久久精品一区二区三区| 1000部很黄的大片| 搞女人的毛片| 亚洲综合精品二区| 成人毛片a级毛片在线播放| 内地一区二区视频在线| 国产老妇伦熟女老妇高清| 黄片wwwwww| 97超碰精品成人国产| 性色avwww在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 欧美激情在线99| 大话2 男鬼变身卡| 美女被艹到高潮喷水动态| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 哪个播放器可以免费观看大片| 成人欧美大片| 一级毛片我不卡| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产又色又爽无遮挡免| 午夜爱爱视频在线播放| 日韩欧美精品v在线| 一个人看的www免费观看视频| 一级av片app| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲经典国产精华液单| 夜夜爽夜夜爽视频| 成人无遮挡网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 尾随美女入室| 国产精品人妻久久久久久| 国产精品99久久99久久久不卡 | 人妻少妇偷人精品九色| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲性久久影院| 青春草视频在线免费观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 3wmmmm亚洲av在线观看| 免费看光身美女| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲成人久久爱视频| 久久精品综合一区二区三区| 国产午夜福利久久久久久| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成人无遮挡网站| 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品不卡视频一区二区| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲精品久久午夜乱码| 国产极品天堂在线| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久久久九九精品影院| 国产成人免费无遮挡视频| 久久99精品国语久久久| 观看免费一级毛片| 成人无遮挡网站| 一区二区三区免费毛片| 亚洲国产精品专区欧美| 黄色日韩在线| 日日啪夜夜爽| 免费观看的影片在线观看| 七月丁香在线播放| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | eeuss影院久久| 九草在线视频观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲,一卡二卡三卡| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 亚洲精品自拍成人| 国产精品国产av在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 久久国内精品自在自线图片| 我的女老师完整版在线观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 日本色播在线视频| 久久久久久久久久久免费av| 欧美日韩亚洲高清精品| 嘟嘟电影网在线观看| 国产美女午夜福利| 精品一区在线观看国产| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 看黄色毛片网站| 少妇的逼水好多| 国产一级毛片在线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 精品久久久久久电影网| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产爱豆传媒在线观看| kizo精华| 美女cb高潮喷水在线观看| 日韩大片免费观看网站| www.色视频.com| 一个人看视频在线观看www免费| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 夫妻午夜视频| 久久精品国产自在天天线| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲国产色片| 欧美国产精品一级二级三级 | 中文字幕av成人在线电影| 亚洲人成网站在线观看播放| 日韩一区二区三区影片| 最后的刺客免费高清国语| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产黄色免费在线视频| 99久久精品一区二区三区| 精品一区二区三区视频在线| 日韩亚洲欧美综合| 久久久精品94久久精品| 亚洲欧美日韩无卡精品| 中国美白少妇内射xxxbb| 中文在线观看免费www的网站| 简卡轻食公司| 精品少妇久久久久久888优播| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 国产爱豆传媒在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 久久久久久久久久久丰满| 国内精品宾馆在线| 91久久精品国产一区二区三区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲国产高清在线一区二区三| 成人鲁丝片一二三区免费| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲精品456在线播放app| 在线免费十八禁| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲精品,欧美精品| 亚洲国产高清在线一区二区三| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 久久国产乱子免费精品| 1000部很黄的大片| 夫妻性生交免费视频一级片| 看黄色毛片网站| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产久久久一区二区三区| 国产黄色视频一区二区在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 色哟哟·www| 少妇人妻 视频| 国产有黄有色有爽视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 免费人成在线观看视频色| 最近最新中文字幕大全电影3| 又爽又黄无遮挡网站| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产成人免费无遮挡视频| 深爱激情五月婷婷| 有码 亚洲区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 草草在线视频免费看| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲国产日韩一区二区| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 久久精品国产a三级三级三级| 秋霞在线观看毛片| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲色图综合在线观看| av一本久久久久| 毛片女人毛片| 精品久久久久久久末码| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 免费大片18禁| 国产黄片视频在线免费观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 97在线视频观看| 日韩中字成人| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产成人a区在线观看| 欧美高清性xxxxhd video| 一级黄片播放器| 亚洲国产色片| 免费观看的影片在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 国产综合精华液| 国产综合精华液| 舔av片在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 99久久精品热视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产乱人视频| av网站免费在线观看视频| 国内精品美女久久久久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久精品国产亚洲av涩爱| 熟女av电影| 国产伦理片在线播放av一区| 新久久久久国产一级毛片| 少妇 在线观看| 国产 精品1| 水蜜桃什么品种好| 久久久久网色| 日韩免费高清中文字幕av| 色播亚洲综合网| 性插视频无遮挡在线免费观看| 免费观看性生交大片5| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲内射少妇av| 777米奇影视久久| 国产精品一及| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 日韩制服骚丝袜av| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 免费大片18禁| 舔av片在线| 国模一区二区三区四区视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产精品99久久99久久久不卡 | 大片电影免费在线观看免费| 九色成人免费人妻av| 99热网站在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲人成网站在线播| 美女被艹到高潮喷水动态| 伦理电影大哥的女人| 久久久久久九九精品二区国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 成人黄色视频免费在线看| 久久久成人免费电影| 国产精品女同一区二区软件| 大香蕉97超碰在线| 色视频在线一区二区三区| 一级a做视频免费观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 26uuu在线亚洲综合色| 国产高潮美女av| 日韩av不卡免费在线播放| 日韩av不卡免费在线播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲欧洲日产国产| 一二三四中文在线观看免费高清| av在线播放精品| 男男h啪啪无遮挡| 高清av免费在线| 国产老妇女一区| 我的老师免费观看完整版| 最近中文字幕2019免费版| 日日啪夜夜爽| 久久精品国产亚洲网站| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日韩成人伦理影院| 精品国产露脸久久av麻豆| 蜜臀久久99精品久久宅男| 免费高清在线观看视频在线观看| 久久久午夜欧美精品| 国产乱人视频| 男女边摸边吃奶| 欧美xxⅹ黑人| 国产熟女欧美一区二区| 欧美区成人在线视频| 在现免费观看毛片| 精品一区二区免费观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 麻豆久久精品国产亚洲av| 伦理电影大哥的女人| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲最大成人手机在线| 女人被狂操c到高潮| 乱码一卡2卡4卡精品| 午夜免费男女啪啪视频观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产精品一区二区在线观看99| 国产一区二区三区综合在线观看 | 国产美女午夜福利| 成年人午夜在线观看视频| 深爱激情五月婷婷| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 久久久精品94久久精品| 99久久精品热视频| 国内精品美女久久久久久| 精品国产露脸久久av麻豆| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品成人在线| 国产老妇女一区| 精品熟女少妇av免费看| freevideosex欧美| 国产成年人精品一区二区| 日韩欧美精品v在线| 国产一区二区三区av在线| 寂寞人妻少妇视频99o| 插逼视频在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频 | 亚洲在线观看片| 黄色日韩在线| 日本色播在线视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产精品熟女久久久久浪| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲在久久综合| 午夜福利在线在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 97超碰精品成人国产| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 免费看日本二区| 日本一本二区三区精品| 久久久亚洲精品成人影院| 国产高清国产精品国产三级 | 80岁老熟妇乱子伦牲交| 中文字幕av成人在线电影| 国产有黄有色有爽视频| a级毛片免费高清观看在线播放| 午夜亚洲福利在线播放| 天天躁日日操中文字幕| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品三级大全| 美女高潮的动态| 寂寞人妻少妇视频99o| 听说在线观看完整版免费高清| 欧美成人午夜免费资源| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 久久6这里有精品| 亚洲天堂国产精品一区在线| 精华霜和精华液先用哪个| 好男人在线观看高清免费视频| 成年版毛片免费区| 26uuu在线亚洲综合色| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲av日韩在线播放| 久久精品综合一区二区三区| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 成年女人看的毛片在线观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 99re6热这里在线精品视频| 国产成人91sexporn| 三级国产精品片| 精品酒店卫生间| 夫妻午夜视频| av线在线观看网站| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 亚洲三级黄色毛片| 国产精品无大码| 99久久精品国产国产毛片| 搞女人的毛片| 国产成人精品婷婷| 久久99热6这里只有精品| 欧美日韩综合久久久久久| 国产精品精品国产色婷婷| 男女那种视频在线观看| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 看黄色毛片网站| 亚洲av男天堂| 国产亚洲一区二区精品| 国产高潮美女av| 欧美成人a在线观看| 97超碰精品成人国产| 亚洲国产av新网站| 青春草国产在线视频| av在线蜜桃| 大片免费播放器 马上看| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲内射少妇av| 国产乱人偷精品视频| 国产精品国产三级专区第一集| 免费观看的影片在线观看| 国产精品一区二区在线观看99| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | freevideosex欧美| 国模一区二区三区四区视频| 国产伦在线观看视频一区| 国产成年人精品一区二区| 内地一区二区视频在线| 国产高潮美女av| av国产久精品久网站免费入址| 美女被艹到高潮喷水动态| 成人黄色视频免费在线看| 少妇 在线观看| 日本免费在线观看一区| 国国产精品蜜臀av免费| 美女高潮的动态| 亚洲成色77777| 国产亚洲91精品色在线| 韩国av在线不卡| 色网站视频免费| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 中文字幕久久专区| 亚洲美女视频黄频| 国产人妻一区二区三区在| 99久久九九国产精品国产免费| 欧美一区二区亚洲| 一级爰片在线观看| 免费看a级黄色片| 一区二区三区乱码不卡18| 国产精品不卡视频一区二区| 在线观看三级黄色| 婷婷色av中文字幕| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 六月丁香七月| 亚洲,欧美,日韩| 我的女老师完整版在线观看| 中文字幕制服av| 男人舔奶头视频| 毛片女人毛片| 三级经典国产精品| 青青草视频在线视频观看| 在线观看一区二区三区激情| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲国产色片| 人体艺术视频欧美日本| 国产亚洲最大av| 亚洲天堂国产精品一区在线| 中文字幕av成人在线电影| 色婷婷久久久亚洲欧美| 大香蕉久久网| 精品一区在线观看国产| 日韩视频在线欧美| eeuss影院久久| 久久久久性生活片| 全区人妻精品视频| 在线观看免费高清a一片| 搞女人的毛片| 性色avwww在线观看| 嫩草影院入口| 高清视频免费观看一区二区| 国产一区亚洲一区在线观看| 成年av动漫网址| 免费观看a级毛片全部| 欧美3d第一页| 亚洲美女视频黄频| 青春草视频在线免费观看| 精品一区在线观看国产| www.av在线官网国产| 日本一二三区视频观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 欧美成人精品欧美一级黄| 日日撸夜夜添| 看黄色毛片网站| av在线播放精品| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 精品国产乱码久久久久久小说| 高清在线视频一区二区三区| 国国产精品蜜臀av免费| www.av在线官网国产| 高清欧美精品videossex| 久久久亚洲精品成人影院| 晚上一个人看的免费电影| 久久久久久久久大av| 国产在线男女| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 又爽又黄a免费视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| kizo精华| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| av在线蜜桃| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲伊人久久精品综合| 国产精品国产av在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 99视频精品全部免费 在线| 一本一本综合久久| 久久99蜜桃精品久久| 日本三级黄在线观看| 亚洲精品色激情综合| 亚洲无线观看免费| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲av国产av综合av卡| 亚洲美女搞黄在线观看| 九色成人免费人妻av| 久久久久久久久久成人| 美女内射精品一级片tv| 午夜福利高清视频| 国产精品久久久久久精品古装| 成人国产av品久久久| 久久精品久久久久久噜噜老黄| av在线老鸭窝| 在线观看国产h片| 成人免费观看视频高清| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲天堂av无毛| 免费黄频网站在线观看国产| 少妇人妻 视频| 国产免费又黄又爽又色| 青青草视频在线视频观看| 国产有黄有色有爽视频| 国产69精品久久久久777片| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 丝袜美腿在线中文| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产久久久一区二区三区| 欧美另类一区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 少妇人妻一区二区三区视频| 精品久久久噜噜| 久久99热这里只频精品6学生| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日本黄色片子视频| 国产成年人精品一区二区| 搞女人的毛片| 久久久久网色| 久久久久精品久久久久真实原创| 日韩一区二区视频免费看| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久久久久久国产电影| 夫妻午夜视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 99热6这里只有精品| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产大屁股一区二区在线视频| 久久久精品欧美日韩精品| 熟女电影av网| 国产69精品久久久久777片| 黑人高潮一二区| 天天一区二区日本电影三级| 久久久久精品性色| 99热国产这里只有精品6| 国产成人精品一,二区| 日本av手机在线免费观看| 成人毛片60女人毛片免费| 国产v大片淫在线免费观看| 在线观看三级黄色| 黄色一级大片看看| 久久久久国产精品人妻一区二区| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 午夜视频国产福利| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲真实伦在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 视频中文字幕在线观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲美女搞黄在线观看| 中国国产av一级| 国产av码专区亚洲av| 国产精品伦人一区二区| 麻豆国产97在线/欧美| 波野结衣二区三区在线| 成年免费大片在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 少妇高潮的动态图| 免费在线观看成人毛片| 黑人高潮一二区| 精品酒店卫生间| 秋霞在线观看毛片| 亚洲精品色激情综合| 黄色配什么色好看| 熟女人妻精品中文字幕| 99久久精品热视频| 亚洲,欧美,日韩| 久久久久精品性色| 亚洲综合色惰| 不卡视频在线观看欧美| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲国产av新网站| 特级一级黄色大片| 麻豆成人午夜福利视频| 精品一区二区免费观看| 久久亚洲国产成人精品v| 日韩亚洲欧美综合| 又大又黄又爽视频免费| 中文资源天堂在线| av女优亚洲男人天堂| 国产精品久久久久久精品电影| 特级一级黄色大片| 亚洲欧美一区二区三区国产| 我的女老师完整版在线观看| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 亚洲精品第二区| 777米奇影视久久| 国产精品一区二区在线观看99| 免费看av在线观看网站| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲成人av在线免费| 晚上一个人看的免费电影|