清瘟敗毒散的組分及添加化學(xué)藥物的顯微鑒別

陳建蓉　李 敏　吳春燕　武占銀　高建龍　史寧花

（寧夏獸藥飼料監(jiān)察所，寧夏銀川　750011）

清瘟敗毒散的組分及添加化學(xué)藥物的顯微鑒別

陳建蓉李 敏吳春燕武占銀高建龍史寧花

（寧夏獸藥飼料監(jiān)察所，寧夏銀川750011）

應(yīng)用顯微鏡鑒別技術(shù)對(duì)中獸藥清瘟敗毒散樣品中藥材組分進(jìn)行了檢測(cè)，鑒別出了具有一定顯微特征的方劑中藥材、方劑外藥材，以及非法添加的化學(xué)藥物。

中獸藥顯微鑒別非法添加

應(yīng)用顯微鏡鑒別技術(shù)，既可檢測(cè)出中藥粉末及成方制劑中的各中藥材組分，又能檢測(cè)出具有一定顯微特征的方劑外中藥材組分，甚至一些非法添加化學(xué)藥物。該方法具有快速、簡(jiǎn)便、實(shí)用的特點(diǎn)，在中獸藥散劑的質(zhì)量微觀檢測(cè)中應(yīng)用廣泛。目前，在中獸藥散劑中，以次充好、以低價(jià)藥材頂替貴重藥材，或添加化學(xué)藥物的違法行為屢見(jiàn)不鮮[1，2，3］，嚴(yán)重影響到動(dòng)物疾病的治療和動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量安全。利用顯微鏡檢技術(shù)對(duì)中獸藥產(chǎn)品質(zhì)量進(jìn)行快速簡(jiǎn)便有效分析，是推動(dòng)違法中獸藥檢打聯(lián)動(dòng)機(jī)制，凈化中獸藥市場(chǎng)的有效手段之一?，F(xiàn)就清瘟敗毒散方劑組分、非方劑組分、非法添加化學(xué)藥物的顯微鑒別檢驗(yàn)報(bào)告如下。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品 清瘟敗毒散，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供。

1.1.2試劑 水合氯醛試液、甘油乙醇試液。

1.1.3標(biāo)準(zhǔn)品 由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供，乙酰甲喹（批號(hào)H0111008）、喹乙醇（批號(hào)H0061407）、呋喃妥因（批號(hào)H0601406）、呋喃西林（批號(hào)H0591405）、呋喃唑酮（批號(hào)H0581406）、氯霉素（批號(hào)130555-201203）。

1.1.4儀器 OLYMPUS-CX41顯微鏡，UV-P顯微鏡成像系統(tǒng)。1.1.5 其他器械 載玻片、蓋玻片、酒精燈、鑷子。

1.2方法

1.2.1清瘟敗毒散中各味中藥材檢查 依據(jù)《中國(guó)獸藥典》二○一○年版二部鑒別（1）檢查[4］。取供試品少許，散布于載玻片上，滴加水合氯醛試液少許，加熱透化，滴加甘油乙醇試液封片后置10×10、10×20顯微鏡下檢查；同時(shí)，根據(jù)中藥各組分，制作單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)藥材的涂片對(duì)照檢查。

1.2.2清瘟敗毒散中非法添加的化學(xué)藥物檢查：依據(jù)農(nóng)業(yè)部關(guān)于發(fā)布獸藥國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)充檢查方法的通知（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2009〕17號(hào)）方法檢查[5］。取供試品少許，滴加甘油乙醇試液，封片，置10×10、10×20顯微鏡下檢查。同時(shí)，制作懷疑添加的化學(xué)藥品標(biāo)準(zhǔn)品的涂片對(duì)照檢查。

2　結(jié)果

檢出清瘟敗毒散方劑中正常組分7種（詳見(jiàn)附圖1）。其組織顯微特征為不規(guī)則片狀結(jié)晶無(wú)色，具平直紋理的，為石膏；纖維束鮮黃色，壁稍厚，紋孔明顯的，為黃連；不規(guī)則碎片多成柴片狀，稍有光澤，具有規(guī)則縱長(zhǎng)裂縫的，為水牛角；纖維淡黃色，梭形，壁厚，孔溝細(xì)的，為黃芩；內(nèi)果皮纖維上下層縱橫交錯(cuò)，纖維短梭形的，為連翹；纖維束周?chē)”诩?xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維的，為甘草；表皮細(xì)胞狹長(zhǎng)，垂周壁深，波狀歪曲，有氣孔，保衛(wèi)細(xì)胞啞鈴狀的，為淡竹葉。檢出清瘟敗毒散方劑外中藥組分2種（詳見(jiàn)附圖2），其組織顯微結(jié)構(gòu)特征為纖維束鮮黃色，周?chē)?xì)胞含草酸鈣形成晶纖維，含晶細(xì)胞的壁木化增厚的，為黃檗；草酸鈣簇晶大，直徑60～140μm的，為大黃。檢出該樣品中添加化學(xué)藥品1種（詳見(jiàn)附圖3），其顯微結(jié)構(gòu)特征為長(zhǎng)短不一的棒狀鮮黃色結(jié)晶，一端或兩端呈梭形，表面有暗綠色縱裂紋或裂縫，對(duì)照常見(jiàn)非法添加藥品標(biāo)準(zhǔn)品涂片，確定本樣品中非法添加的化藥成分為乙酰甲喹。

附圖1　中藥的正常組分

附圖2　清瘟敗毒散方劑外中藥組分

附圖3　樣品中添加的化學(xué)藥品

3　討論及小結(jié)

（1）通過(guò)顯微鏡鑒別技術(shù)，檢出清瘟敗毒散方劑中的石膏、黃連、水牛角、黃芩、連翹、甘草、淡竹葉7種中藥材的組織顯微特征，另檢出了非清瘟敗毒散方劑中的黃檗、大黃2種中藥材顯微特征；同時(shí)檢出了化學(xué)藥品添加物乙酰甲喹的顯微特征。

（2）顯微鏡鑒別技術(shù)能分辨出組織較細(xì)微的結(jié)構(gòu)特征。本方劑中的甘草與方劑外的黃檗從顯微結(jié)構(gòu)特征上來(lái)說(shuō)很相似，都為晶纖維，但黃檗的顯微結(jié)構(gòu)中含晶細(xì)胞的壁木化增厚，且顏色為鮮黃色，比甘草的顏色亮。方劑外的大黃簇晶與處方中的牡丹皮和赤芍的簇晶顯微結(jié)構(gòu)較相似，都為草酸鈣簇晶，但大黃的簇晶較大，且棱角鈍，直徑60～140μm。

（3）顯微鏡鑒別技術(shù)能檢出具有一定結(jié)構(gòu)特征的化學(xué)藥品。清瘟敗毒散主治熱毒發(fā)斑，高熱神昏。商家為了增加該藥的療效，常常添加化學(xué)藥品如乙酰甲喹（又稱(chēng)痢菌凈），治療細(xì)菌性腸炎和痢疾等病癥。乙酰甲喹具有一定的顯微特征，能夠通過(guò)顯微鑒別檢出。本次從清瘟敗毒散樣品中檢出了添加的乙酰甲喹。

（4）顯微鑒別技術(shù)觀察制片有一定的時(shí)間要求。檢查懷疑添加化學(xué)藥物時(shí)，制片后應(yīng)立刻觀察，否則化學(xué)藥物晶體溶解，會(huì)影響到檢驗(yàn)結(jié)果。

（5）顯微鏡鑒別技術(shù)要求檢驗(yàn)人員具有一定的檢驗(yàn)水平，能夠正確區(qū)分藥材組織的細(xì)微差別，才能做出準(zhǔn)確判斷。

[1]周媛，貢玉清，邵德佳.有關(guān)中獸藥中非法添加化學(xué)藥物的探討[J］.中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志，2010，（4）：28-30.

[2]李莉，高建龍，楊俊華，等.中獸藥散劑中非法添加喹乙醇、乙酰甲喹的檢測(cè)方法應(yīng)用[J］. 中國(guó)獸藥雜志，2012，46（1）：37-39.

[3]孔曉峰，紀(jì)銀福，李均.獸藥散劑中非法添加乙酰甲喹的檢查方法[J］.飼料工業(yè)，2010，31（16）：54.

陳建蓉（1966-），女，高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事中獸藥檢驗(yàn)。