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    苜草素對產(chǎn)蛋后期蛋雞脂肪肝出血綜合征的預(yù)防作用

    2016-11-15 10:37:50高媛媛楊長進(jìn)董曉芳佟建明高玉鵬
    動物營養(yǎng)學(xué)報 2016年10期
    關(guān)鍵詞:高能產(chǎn)蛋苜蓿

    高媛媛 楊長進(jìn) 董曉芳* 佟建明 高玉鵬

    (1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所,北京100193;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院,楊凌712100)

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    苜草素對產(chǎn)蛋后期蛋雞脂肪肝出血綜合征的預(yù)防作用

    高媛媛1楊長進(jìn)2董曉芳1*佟建明1高玉鵬2

    (1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所,北京100193;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院,楊凌712100)

    本試驗(yàn)旨在研究苜草素對產(chǎn)蛋后期蛋雞脂肪肝出血綜合征(FLHS)的預(yù)防作用。選用500日齡京紅1號產(chǎn)蛋雞1 008只,隨機(jī)等分為7組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)24只雞。Ⅰ組為對照組,飼喂常規(guī)飼糧(代謝能11.10 MJ/kg,粗蛋白質(zhì)17.68%);Ⅱ~Ⅶ組為試驗(yàn)組,飼喂高能低蛋白質(zhì)飼糧(代謝能12.87 MJ/kg,粗蛋白質(zhì)13.84%),并分別在飼糧中添加0、200、400、600、800、1 000 mg/kg苜草素。試驗(yàn)期60 d。結(jié)果表明:1)與對照組相比,高能低蛋白質(zhì)飼糧組(Ⅱ組)蛋雞第30天時即可表現(xiàn)出明顯的FLHS病理特征,第1~30天平均日采食量、產(chǎn)蛋率、蛋重、產(chǎn)蛋量顯著降低(P<0.05),料蛋比顯著升高(P<0.05),第1~60天趨勢更加顯著(P<0.05);第42天蛋白高度和哈氏單位顯著降低(P<0.05)。2)在高能低蛋白質(zhì)飼糧中添加不同梯度的苜草素均能降低FLHS發(fā)生率,提高第1~60天的平均日采食量、產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋量,降低料蛋比;提高第42天的蛋白高度、哈氏單位。由此可見,高能低蛋白質(zhì)飼糧能夠誘導(dǎo)蛋雞FLHS,補(bǔ)充苜草素具有預(yù)防作用。

    苜草素;蛋雞;脂肪肝出血綜合征

    與哺乳動物不同,雞脂肪酸合成的主要場所是肝臟[1],僅有很少部分在脂肪組織進(jìn)行。在產(chǎn)蛋期,蛋雞肝臟大量合成脂肪,與載脂蛋白等結(jié)合形成極低密度脂蛋白,轉(zhuǎn)運(yùn)到肝外組織以滿足蛋黃脂質(zhì)沉積的需要。此時,肝臟代謝負(fù)擔(dān)沉重,極易發(fā)生脂肪肝出血綜合征(fatty liver hemorrhagic syndrome,F(xiàn)LHS)。FLHS可使整個雞群產(chǎn)蛋率下降,造成經(jīng)濟(jì)損失[2]。目前,F(xiàn)LHS的誘發(fā)機(jī)制還不清楚,有研究報道,F(xiàn)LHS發(fā)生的主要原因?yàn)楦闻K脂肪合成多于輸出[3-4]。此外,蛋雞肝臟內(nèi)游離的脂肪酸較多,易被氧化產(chǎn)生自由基,破壞細(xì)胞生物膜結(jié)構(gòu),導(dǎo)致肝損傷[5]。

    苜草素是紫花苜蓿經(jīng)水提后噴霧干燥形成的植物飼料添加劑,主要成分為苜蓿多糖、苜蓿黃酮和苜蓿皂苷。飼糧中添加苜草素可以改善體內(nèi)脂質(zhì)代謝[6-7],其中,苜蓿多糖具有抗氧化作用[8],可保護(hù)肝臟防止自由基損傷[5];苜蓿黃酮具有增強(qiáng)免疫和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的功能[9];苜蓿皂苷具有調(diào)控膽固醇代謝的作用[10-14]。目前,尚未見直接使用苜草素預(yù)防蛋雞FLHS的報道。因此,本試驗(yàn)通過飼喂高能低蛋白質(zhì)飼糧人工誘發(fā)FLHS,研究苜草素的預(yù)防作用,旨在為控制FLHS提供解決方案。

    1 材料與方法

    1.1試驗(yàn)材料

    苜草素是以天然植物藥物提取原理,采用破壁萃取技術(shù)從干燥的紫花苜蓿中提取的一種植物飼料添加劑,其主要有效成分為多糖(≥15%)、黃酮(≥5%)、皂苷(≥5%),由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所提供。

    1.2試驗(yàn)設(shè)計和試驗(yàn)飼糧

    選取健康的500日齡京紅產(chǎn)蛋雞1 008只(購自北京正大畜牧有限公司),隨機(jī)分為7組,每組6個重復(fù),每個重復(fù)24只雞。密閉雞舍階梯式籠養(yǎng),自由采食、飲水,光照時間為16 h/d,自動控制舍內(nèi)溫濕度,溫度為(22±3) ℃,相對濕度為45%~65%,按正常免疫程序免疫接種。預(yù)試期7 d,試驗(yàn)期60 d。

    7組試驗(yàn)蛋雞中,Ⅰ組為對照組,飼喂常規(guī)飼糧(代謝能11.10 MJ/kg,粗蛋白質(zhì)17.68%);Ⅱ~Ⅶ組為試驗(yàn)組,飼喂高能低蛋白質(zhì)飼糧(代謝能12.87 MJ/kg,粗蛋白質(zhì)13.84%),并分別添加0、200、400、600、800、1 000 mg/kg的苜草素。所有飼糧均為玉米-豆粕型,試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

    1.3檢測指標(biāo)和方法

    1.3.1產(chǎn)蛋性能指標(biāo)的測定

    試驗(yàn)期每天觀察雞只健康狀況,以重復(fù)為單位,記錄每天產(chǎn)蛋情況并稱重,每周結(jié)料1次。計算平均日采食量、產(chǎn)蛋量、產(chǎn)蛋率、蛋重和料蛋比。

    1.3.2蛋品質(zhì)指標(biāo)測定

    試驗(yàn)期每2周末,取當(dāng)天每個重復(fù)所有雞蛋測定蛋品質(zhì)。

    蛋殼強(qiáng)度測定采用蛋殼強(qiáng)度測試儀(Model-Ⅲ,Robotmation Co. Ltd.,Tokyo,Japan);蛋殼厚度測定采用蛋殼厚度檢測器(Model P-1,Ozaki MFG.Co.Ltd.,Tokyo,Japan);蛋白高度、哈氏單位及蛋黃顏色測定采用蛋品質(zhì)分析儀(EMT-5200,Robotmation Co. Ltd.,Tokyo,Japan)。

    1.3.3蛋雞肝臟病變指標(biāo)的測定

    試驗(yàn)第30天和第60天,每個重復(fù)取4只蛋雞,每組24只蛋雞,禁食12 h后空腹稱雞體重,并翅下靜脈采血,3 000 r/min離心10 min,制備血漿,-20 ℃凍存;采血后麻醉處死,小心取出整個肝臟,用預(yù)冷的生理鹽水沖洗上面血漬,然后用濾紙擦干并稱重記錄,取5 g肝組織,錫箔紙包裝,液氮速凍,-20 ℃凍存。

    肝臟指數(shù)(%)=(肝臟濕重/活體重)×100。

    肝臟出血指數(shù)和FLHS發(fā)生率觀測:參照董曉芳等[15]試驗(yàn)的劃分標(biāo)準(zhǔn),將本試驗(yàn)肝臟出血程度劃分為4級:0=沒有出血,1=有少數(shù)出血點(diǎn)或斑,2=有明顯的出血區(qū)或血腫;3=有廣泛的局灶性出血區(qū)或大出血。2、3級判為FLHS雞,1級為亞臨床FLHS雞。肝臟出血分級見圖1。

    表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

    1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provides the following per kg of diets:VA 7 500 IU,VD32 500 IU,VE 15 IU,VK 2 mg,VB64 mg,VB120.01 mg,煙酸 niacin 20 mg,核黃素 riboflavin 4 mg,硫胺素 thiamine 2 mg,泛酸鈣 calcium pantothenate 5 mg,生物素 biotin 0.1 mg,葉酸 folic acid 1 mg,Se 0.2 mg,Mn 63.6 mg,F(xiàn)e 45 mg,Cu 6 mg,I 0.4 mg,Zn 34 mg。

    2)營養(yǎng)水平均為計算值。Nutrient levels are calculated values.

    A:正常肝 normal liver;B:1級肝出血 first-degree hepatorrhagia;C:2級肝出血 second-degree hepatorrhagia;D:3級肝出血 third-degree hepatorrhagia。

    圖1肝臟出血分級

    Fig.1Classification of liver hemorrhage

    1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

    試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差或平均值表示。采用SAS 9.2統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析,Duncan氏法進(jìn)行多重比較,以P<0.05為差異顯著水平。

    2 結(jié) 果

    2.1苜草素對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

    由表2可知,試驗(yàn)第1~60天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組(Ⅱ組)平均日采食量顯著低于對照組(P<0.05),添加600 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組平均日采食量顯著高于高能低蛋白質(zhì)飼糧組(P<0.05);高能低蛋白質(zhì)飼糧組產(chǎn)蛋率顯著低于對照組(P<0.05),添加400、600、800、1 000 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組產(chǎn)蛋率顯著高于高能低蛋白質(zhì)飼糧組(P<0.05);高能低蛋白質(zhì)飼糧組蛋重顯著低于對照組(P<0.05);高能低蛋白質(zhì)飼糧組料蛋比顯著高于對照組(P<0.05),添加400、600、800、1 000 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組料蛋比顯著低于高能低蛋白質(zhì)飼糧組(P<0.05);高能低蛋白質(zhì)飼糧組產(chǎn)蛋量顯著低于對照組(P<0.05),添加200、400、600、800、1 000 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組產(chǎn)蛋量顯著高于高能低蛋白質(zhì)飼糧組(P<0.05)。

    表2 苜草素對蛋雞生產(chǎn)性能的影響

    續(xù)表2項(xiàng)目Items時間Time/d對照組Controlgroup苜草素添加水平Polysavonesupplementallevel/(mg/kg)02004006008001000產(chǎn)蛋量Eggmass/(g/d)1~3030.4±1.5a22.1±1.5c23.5±1.6bc25.7±3.3b24.6±2.1bc25.0±1.5b25.3±2.1b31~6032.1±3.5a19.7±1.9c23.2±3.9b23.7±1.5b23.8±2.1b22.9±1.5b22.2±2.5bc1~6031.1±1.9a21.0±1.1c23.4±2.0b24.8±2.3b24.2±2.0b24.1±1.3b23.9±2.2b

    同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

    In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

    2.2苜草素對蛋雞蛋品質(zhì)的影響

    由表3可知,第42天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組蛋白高度顯著低于對照組(P<0.05),添加200、400、600、800、1 000 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組蛋白高度顯著高于高能低蛋白質(zhì)飼糧組 (P<0.05);第42天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組哈氏單位顯著低于對照組(P<0.05),添加200、400、600、800 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組哈氏單位顯著高于高能低蛋白質(zhì)飼糧組(P<0.05)。第28天和第42天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組及添加200、400、600、800、1 000 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組蛋黃顏色顯著高于對照組(P<0.05);第14天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組及添加400、600、800、1 000 mg/kg苜草素的高能低蛋白質(zhì)飼糧組蛋殼強(qiáng)度顯著低于對照組(P<0.05)。

    表3 苜草素對蛋品質(zhì)的影響

    2.3苜草素對蛋雞肝臟病變的影響

    由表4可知,第30天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組肝臟指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)。第60天,高能低蛋白質(zhì)飼糧組肝臟指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05);高能低蛋白質(zhì)飼糧組肝臟出血指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)。本研究中,第30天,各組的FLHS發(fā)生率分別為10%、60%、26%、25%、21%、31%、40%,第60天,各組的FLHS發(fā)生率分別為0、47%、39%、27%、24%、22%、30%。

    表4 苜草素對肝臟病變的影響

    3 討 論

    3.1產(chǎn)蛋后期蛋雞FLHS病理模型的建立

    利用高能低蛋白質(zhì)飼糧飼喂蛋雞能夠誘發(fā)蛋雞FLHS。董曉芳等[15]采用代謝能13.46 MJ/kg、粗蛋白質(zhì)13.0%的飼糧,飼喂36周齡海蘭灰商品蛋雞24 d即可誘發(fā)。本試驗(yàn)采用代謝能12.87 MJ/kg、粗蛋白質(zhì)13.84%的飼糧飼喂產(chǎn)蛋后期蛋雞30 d,蛋雞表現(xiàn)出明顯的FLHS病理特征。蛋雞FLHS的發(fā)生與諸多因素有關(guān),飼糧能量過高或蛋白質(zhì)不足是其中之一。高能低蛋白質(zhì)飼糧引起FLHS,可能有3條途徑:1)在產(chǎn)蛋期,肝臟從頭大量合成脂肪,與載脂蛋白等結(jié)合形成極低密度脂蛋白,轉(zhuǎn)運(yùn)到肝外組織以滿足蛋黃對脂質(zhì)的需要;當(dāng)肝臟中脂肪合成速度大于向外轉(zhuǎn)運(yùn)速度時,過量的脂肪就會沉積在肝臟中;當(dāng)?shù)半u采食高能低蛋白質(zhì)飼糧后,合成的脂肪過多,由于低蛋白質(zhì)飼糧的供給,從而使載脂蛋白合成減少,阻礙了肝脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn),造成肝臟脂肪的沉積,從而誘發(fā)病征[16]。2)蛋雞采食高能低蛋白質(zhì)飼糧,會使體內(nèi)能量物質(zhì)過高,從而使脂肪酸β氧化作用增強(qiáng),產(chǎn)生大量的自由基,超過了機(jī)體的生理補(bǔ)償能力,肝細(xì)胞受損,肝功能降低,發(fā)生脂肪肝[5]。3)蛋雞采食高能低蛋白質(zhì)飼糧,造成脂類物質(zhì)的堆積,肝細(xì)胞線粒體功能下降,阻礙了呼吸鏈電子的傳遞,生成有毒有害物質(zhì),導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷,形成脂肪肝[17]。

    3.2苜草素對產(chǎn)蛋后期蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響

    本研究中,與對照組比較,高能低蛋白質(zhì)飼糧飼喂產(chǎn)蛋后期蛋雞第1~30天時,其平均日采食量、產(chǎn)蛋率、平均蛋重、產(chǎn)蛋量顯著降低,料蛋比顯著升高,與前人研究結(jié)果[18]一致,飼喂第1~60天時,趨勢更加顯著。與高能低蛋白質(zhì)飼糧組相比,第1~60天高能低蛋白質(zhì)飼糧中添加600 mg/kg苜草素能夠使蛋雞平均日采食量增加,第1~60天添加400、600、800、1 000 mg/kg苜草素能夠改善其引起的產(chǎn)蛋率降低、飼料利用率降低、產(chǎn)蛋量降低的情況。前人研究表明,飼糧中添加苜草素可促進(jìn)動物生長發(fā)育,提高飼料轉(zhuǎn)化率[6]。還有研究顯示,隨著苜蓿皂苷添加量的增多,蛋雞采食量在一定程度上表現(xiàn)出上升的趨勢[19]。另有研究報道,苜草素可顯著降低58~65周齡蛋雞的料蛋比[20]。此外,本研究中,高能低蛋白質(zhì)飼糧組與對照組比較,高能低蛋白質(zhì)飼糧飼喂產(chǎn)蛋后期蛋雞第42天時,雞蛋蛋白高度、哈氏單位顯著降低,與前人研究結(jié)果[21]一致。與高能低蛋白質(zhì)飼糧組相比,高能低蛋白質(zhì)飼糧中添加200、400、600、800 mg/kg苜草素后,能夠升高蛋白高度和哈氏單位。

    本研究表明,添加苜草素能夠改善高能低蛋白質(zhì)飼糧引起的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)下降,這可能與苜草素的活性成分有關(guān)。苜草素的主要活性成分有多糖、黃酮、皂苷。蛋雞長期進(jìn)食高脂飼糧可能會降低血液雌激素水平進(jìn)而引發(fā)產(chǎn)蛋率降低,而黃酮具有弱雌激素和抗雌激素活性雙向調(diào)節(jié)作用,當(dāng)雌激素水平低時,黃酮與雌激素受體結(jié)合表現(xiàn)出雌激素作用,從而改善高能低蛋白質(zhì)飼糧引起的產(chǎn)蛋率下降的情況[22]。作為苜草素的另一重要成分,潘俊良[19]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),苜蓿皂苷對提高蛋雞采食量具有促進(jìn)作用,這與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致。另外,有研究表明,苜蓿草粉可以提高雞蛋哈氏單位[23],這也與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致。

    3.3苜草素對產(chǎn)蛋后期蛋雞肝臟病變的影響

    蛋雞FLHS是由于脂肪代謝紊亂而造成肝臟脂肪堆積的營養(yǎng)性代謝疾病,目前對其發(fā)病機(jī)制還不清楚,但臨床最典型特征是肝出血。本研究中,高能低蛋白質(zhì)飼糧飼喂產(chǎn)蛋后期蛋雞30 d,顯著提高了肝臟指數(shù),F(xiàn)LHS發(fā)生率為60%;而添加不同比例苜草素后,F(xiàn)LHS發(fā)生率顯著降低,表明苜草素能夠調(diào)控肝臟脂肪代謝。蛋雞長期進(jìn)食高脂飼糧,會使體內(nèi)能量儲存增加,體內(nèi)胰島素含量升高,胰島素會激活乙酰輔酶A羧化酶α的表達(dá),促進(jìn)脂肪酸的合成,抑制脂肪的水解,這樣就會導(dǎo)致肝臟堆積過多的脂肪[24],過多的脂肪容易發(fā)生過氧化作用而產(chǎn)生過多的自由基,改變生物膜的功能和結(jié)構(gòu),導(dǎo)致肝臟損傷[25];筆者認(rèn)為這可能是高能低蛋白質(zhì)飼糧飼喂蛋雞導(dǎo)致FLHS發(fā)生的機(jī)制。有研究報道,苜草素能夠降低肉仔雞血液胰島素水平,升高血液甲狀腺激素水平,降低肝臟中脂肪酸合成酶mRNA的表達(dá)量,從而降低肝臟脂肪酸合成[26];作為苜草素的重要成分,苜蓿皂苷能夠降低動物對脂肪的消化吸收,降低肝臟脂肪酸重新合成的原料乙酰輔酶A含量,進(jìn)而導(dǎo)致肝臟脂肪酸合成減少[19];此外,苜蓿皂苷具有抗氧化作用[19],苜草素的另一重要成分苜蓿多糖也具有清除自由基的抗氧化作用[8];筆者認(rèn)為這可能是苜草素能夠降低蛋雞FLHS的機(jī)制。

    4 結(jié) 論

    高能低蛋白質(zhì)飼糧中添加200、400、600、800 和1 000 mg/kg苜草素在一定程度上可降低FLHS發(fā)生,綜合各個方面添加600 mg/kg苜草素預(yù)防FLHS效果最好。

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    [26]劉平.苜草素對肉仔雞脂肪代謝的影響及其作用機(jī)制研究[D].碩士學(xué)位論文.北京:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,2005.

    (責(zé)任編輯武海龍)

    Prophylactic Effects of Polysavone on Fatty Liver Hemorrhagic Syndrome of Laying Hens in Late-Phase

    GAO Yuanyuan1YANG Changjin2DONG Xiaofang1*TONG Jianming1GAO Yupeng2

    (1. Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China; 2. College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University, Yangling 712100, China)

    This experiment was conducted to investigate the prophylactic effects of polysavone (alfalfa extract) on fatty liver hemorrhagic syndrome (FLHS) of laying hens in late-phase. A total of 1 008JinghongNo. 1 laying hens aged 500 days were randomly divided into 7 groups, with 6 replicates per group and 24 hens per replicate. Hens in group Ⅰ (control group) were fed a common diet (metabolic energy 11.10 MJ/kg; crude protein 17.68%), while hens in groups Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ, Ⅴ, Ⅵ and Ⅶ (experimental groups) were fed high-energy and low-protein diets (metabolic energy 12.87 MJ/kg; crude protein 13.84%) supplemented with 0, 200, 400, 600, 800, 1 000 mg/kg ploysavone, respectively. The experiment lasted for 60 days. The results were as follows: 1) compared with the control group, feeding a high-energy and low-protein diet without polysavone for 30 days induced FLHS, at the 1 to 30 days, the average daily feed intake (ADFI), laying rate, egg weight and egg mass were significantly decreased (P<0.05), and the ratio of feed to egg was significantly increased (P<0.05), and at the 1 to 60 days, the trend was more obvious (P<0.05); at the 42 days, the albumen height and Haugh unit were significantly decreased (P<0.05). 2) Adding different gradients of ploysavone in high-energy low-protein diet could decrease the incidence rate of FLHS; increase the ADFI, laying rate, egg mass at the 1 to 60 days, decrease the ratio of feed to egg; increase albumen height and haugh unit at the 42 days. In conclusion, high-energy low-protein diet can induce FLHS in laying hens, while supplement of ploysavone can prevent the induction of FLHS.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(10):3153-3160]

    polysavone; laying hens; fatty liver hemorrhagic syndrome

    , associate professor, E-mail: xiaofangd1124@sina.com

    10.3969/j.issn.1006-267x.2016.10.017

    2016-04-11

    “十二五”國家科技支撐計劃課題(2013BAD10B04);國家蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)(CARS-41-K16);中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程(ASTIP-IAS08)

    高媛媛(1989—),女,山西柳林人,碩士研究生,研究方向?yàn)閯游餇I養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail: gaoyuanyuan312@126.com

    董曉芳,副研究員,碩士生導(dǎo)師,E-mail: xiaofangd1124@sina.com

    S831

    A

    1006-267X(2016)10-3153-08

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