HBsAg陽性血標(biāo)本無害化處理方法的研究

武紅玉，陳永偉，李躍松，馬智鴻，潘棟輝，徐希杰，王靜，陸丹

1.江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所附屬江原醫(yī)院（檢驗(yàn)科），江蘇無錫214063；2.江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所（研究部），江蘇無錫214063

HBsAg陽性血標(biāo)本無害化處理方法的研究

武紅玉1，陳永偉1，李躍松1，馬智鴻1，潘棟輝2，徐希杰2，王靜1，陸丹1

1.江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所附屬江原醫(yī)院（檢驗(yàn)科），江蘇無錫214063；2.江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所（研究部），江蘇無錫214063

目的探索并建立乙肝病毒表面抗原陽性血標(biāo)本無害化處理的可行方案。方法通過給不同陽性強(qiáng)度的乙肝病毒表面抗原陽性血標(biāo)本加入不同量的84消毒液，于不同的時(shí)間周期檢測(cè)乙肝病毒表面抗原濃度，尋找乙肝病毒表面抗原被滅活的84消毒液有效劑量和滅活所需時(shí)間。結(jié)果當(dāng)84消毒液劑量達(dá)不到有效滅活水平時(shí)，作用時(shí)間1周也無滅活效果；而使用84消毒液有效滅活劑量即體積比達(dá)1：1時(shí)，作用1 h以上強(qiáng)陽性的血標(biāo)本也完全達(dá)到滅活效果。結(jié)論使用84消毒液等體積處理乙肝病毒表面抗原陽性血標(biāo)本可以完全滅活乙肝病毒，達(dá)到無害化效果，是簡(jiǎn)便、快捷、價(jià)廉、安全的防范風(fēng)險(xiǎn)醫(yī)療廢棄物處理手段，值得推廣應(yīng)用。

乙肝病毒表面抗原；陽性血標(biāo)本；84消毒液；醫(yī)療廢棄物；無害化；處理

我國(guó)乙肝病毒感染率一直比較高［1］，甚至在某個(gè)時(shí)段有超過1億的乙肝病毒攜帶者［2］。有資料顯示，農(nóng)村的陽性率較城市高，有些農(nóng)村高達(dá)55%，這樣的高感染率基本上是由失控的感染源所致。有些地區(qū)孕婦HBV總感染率達(dá)到21.26%［3］，高感染率嚴(yán)重影響了人們的身心健康，干擾了正常的生活。有相關(guān)研究證明乙肝病毒陽性的患者與肝硬化和肝癌有一定的相關(guān)性。目前乙肝疫苗的預(yù)防接種是控制乙肝最經(jīng)濟(jì)有效的措施之一［4］，盡管經(jīng)過多年努力，陽性率有所下降，但目前青少年乙肝表面抗原陽性率仍＞4.0%［5-6］。乙肝陽性血標(biāo)本的滅活處理，從源頭上阻斷接觸感染，應(yīng)該是一種很有效的控制手段。如果對(duì)各類醫(yī)療單位的乙肝病毒污染的血液或其他污染物進(jìn)行無害化處理，杜絕未經(jīng)消毒滅活處理就排放進(jìn)下水管道或送到醫(yī)療垃圾中轉(zhuǎn)站，以免造成意外乙肝病毒的傳染。檢驗(yàn)標(biāo)本應(yīng)放在帶蓋的試管中，在作為醫(yī)療廢棄物前做好規(guī)范的無害化滅活處理，符合從傳染源上防止和控制傳染病的原則。

1　材料與方法

1.1儀器、材料與試劑

微量移液器，上海求精玻璃儀器廠；HH-W21-600S數(shù)顯電熱恒溫水溫箱，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司；iMa r K酶標(biāo)儀，美國(guó)BI0-RAD公司；1575洗板機(jī)，美國(guó)BI0-RAD公司；KJ-201C微量振蕩器，江蘇康健醫(yī)療用品有限公司；血液標(biāo)本，收集本科室乙型肝炎表面抗原陽性病人血清；84消毒液，江蘇愛特福84股份有限公司；乙型肝炎表面抗原診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫法），上?？迫A生物工程股份有限公司。

1.2方法

配制工作濃度洗滌液，選擇一定量的板條，分別加入75 uL待測(cè)標(biāo)本和陰性、陽性對(duì)照。預(yù)留空白對(duì)照孔。用封片紙覆蓋反應(yīng)板后，置37℃水浴箱孵育60 uL。取出反應(yīng)板，撕去封片，在已加入待測(cè)樣本和陰性、陽性對(duì)照的孔中加入50 uL酶結(jié)合物，在微孔振蕩器上震蕩10 s，用封片紙覆蓋反應(yīng)板后，置37℃水浴箱孵育30 min。取出反應(yīng)板，撕去封片紙，在洗板機(jī)上洗滌反應(yīng)板5次。洗完后在干凈的吸水紙上拍干。洗滌結(jié)束后立即在所有孔內(nèi)加入顯色劑A、顯色劑B各50 uL，混勻，在微孔震蕩器上震蕩10 s，用封片紙覆蓋反應(yīng)板后，將反應(yīng)板置37℃孵育30 min。在所有孔內(nèi)加入50 uL終止液，振蕩反應(yīng)板5 s，使之充分混勻。用酶標(biāo)儀讀數(shù)，雙波長(zhǎng)：波長(zhǎng)450 nm，參考波長(zhǎng)630 nm，空白校零，然后讀取各孔0D值S。根據(jù)公式：CO=NC+0.100。C0為閾值；NC為陰性對(duì)照0D值。當(dāng)S/C0≥1.0，說明該檢測(cè)標(biāo)本HBsAg結(jié)果為陽性；當(dāng)S/C0＜1.0，說明該檢測(cè)樣本HBsAg結(jié)果為陰性。

實(shí)驗(yàn)所用84消毒液是以次氯酸鈉為主要成分的液體消毒液，有效氯含量為34.0～46.0 g/L?？蓺缒c道致病菌、化膿性球菌、致病性酵母菌，并能滅活病毒。將84消毒液和血清按不同比例分別混合，各放入試管中，蓋緊，放置1 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d，分別測(cè)定HBsAg的S/CO值。

2　結(jié)果

S/CO=10±的HBsAg陽性血清標(biāo)本的滅活效果，見表1；S/CO=15±的HBsAg陽性血清標(biāo)本的滅活效果，見表2；S/CO=20±的HBsAg陽性血清標(biāo)本的滅活效果，見表3；乙肝大三陽HBsAg強(qiáng)陽性血清標(biāo)本的滅活效果，見表4。

由表1～4可見，HBsAg陽性血標(biāo)本是否滅活完全取決于HBsAg陽性的強(qiáng)弱和84消毒液的使用比例，達(dá)不到滅活的劑量，作用時(shí)間延長(zhǎng)也無效果。當(dāng)兩者體積等比時(shí)，1 h可完全滅活HBsAg陽性血清標(biāo)本活性。

表1　S/CO=10±的HBsAg陽性血清標(biāo)本的滅活效果（5例）

表2　S/CO=15±的HBsAg陽性血清標(biāo)本的滅活效果（5例）

表3　S/CO=20±的HBsAg陽性血清標(biāo)本的滅活效果（5例）

表4　乙肝大三陽HBsAg強(qiáng)陽性血清標(biāo)本的滅活效果（5例）**

3　討論

乙肝病毒于25℃下可以在血制品或干血塊中保持活性7 d以上［7］，因而無論是醫(yī)務(wù)人員還是從事醫(yī)療廢棄物處理的相關(guān)人員在收集運(yùn)輸?shù)倪^程中都存在接觸乙肝陽性標(biāo)本感染的高風(fēng)險(xiǎn)［8-11］，所以乙肝陽性血標(biāo)本的無害化處理極其重要，須從源頭上杜絕被感染的可能性。該研究提供了HBsAg陽性血標(biāo)本無害化處理的簡(jiǎn)單價(jià)廉可行的解決方案。

從以上實(shí)驗(yàn)可以看出：同等體積的84消毒液對(duì)HBsAg陽性血標(biāo)本有完全滅活作用。84消毒液的用量與乙肝病毒陽性強(qiáng)度有關(guān)。陽性越強(qiáng)，84消毒液用量越多。如果消毒液達(dá)不到有效量，作用時(shí)間延長(zhǎng)也起不到滅活效果。

84消毒液是日常易得的商品化消毒殺菌制劑，用來處理HBsAg陽性血標(biāo)本，使其達(dá)到無害化效果，從一個(gè)源頭上解決感染和傳播的風(fēng)險(xiǎn)，無需太多成本也易于操作。從而更好地保護(hù)醫(yī)護(hù)人員，特別是保護(hù)從事醫(yī)療廢棄物處理的各個(gè)環(huán)節(jié)上的從業(yè)人員的健康安全具有重要意義。

建議各醫(yī)療部門將HBsAg陽性血標(biāo)本作為醫(yī)療廢棄物處理1 h前加入同等體積的84消毒液進(jìn)行滅活處理，以保護(hù)相關(guān)人員的健康安全。

［1］金美玉.血液檢驗(yàn)中HBV和HIV的危險(xiǎn)性及其防護(hù)措施［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2014，12（30）：395-396.

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［3］朱黎明，朱英杰，朱定菊，等.少數(shù)民族地區(qū)孕婦乙肝病毒感染的調(diào)查分析［J］.臨床肝膽病雜志，2005，21（2）：73-74.

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［11］劉偉蓮，張亮明，馮樹星.經(jīng)血傳播疾病對(duì)從事血液檢驗(yàn)人員的職業(yè)危害與防護(hù)［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2006，13（12）：2072-2074.

Research on Harmless Treatment Method of HBsAg Positive Blood Specimen

WU Hong-yu1，CHEN Yong-wei1，LI Yue-song1，MA Zhi-hong1，PAN Dong-hui2，XU Xi-jie2，WANG Jing1，LU Dan1
1.Department of Clinical Laboratory，Jiang Yuan Hospital Affiliated to the Institute of Atomic Medicine，Wuxi，Jiangsu Province，214063 China；2.Department of Research，Institute of Atomic Medicine，Wuxi，Jiangsu Province，214063 China

Objective To explore and establish the feasible program of HBsAg positive blood specimen.Methods The effective dose of 84 disinfectant and inactivation time needed were found out by putting different doses of 84 disinfectants into different positive intensities of HBsAg blood specimens and testing the HBsAg concentration in different time periods. Results There was no inactivation effect after 1-week action when the 84 disinfectant dose failed to reach the effective inactivation level，and the strong positive blood specimens could reach the inactivation effect after 1h action or above when the volume ratio of 84 disinfectant reached 1：1.Conclusion The use of isometric 84 disinfectants in handling the HBsAg positive blood specimens can totally inactivate the hepatitis B virus and reach the harmless effect，which is a simple，rapid，cheap and safe treatment means of medical wastes，and it is worth promotion and application.

HBsAg；Positive blood specimen；84 disinfectant；Medical waste；Harmless；Treatment

R19

A

1672-5654（2016）10（a）-0076-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.28.076

國(guó)家自然基金項(xiàng)目（81401450）。

武紅玉（1964-），女，江蘇無錫人，大專，主管檢驗(yàn)師，研究方向：臨床檢驗(yàn)。

徐希杰（1964-），男，江蘇南通人，大專，主管理化檢驗(yàn)師，主管技師，研究方向：分析測(cè)試、放射防護(hù)，E-mail：xuxijie@jsinm.org。

（2016-07-06）