TP-ELISA、RPR與TPPA檢測診斷梅毒的臨床意義

陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科(咸陽 712000)

李 瑛 李 軍

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TP-ELISA、RPR與TPPA檢測診斷梅毒的臨床意義

陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科(咸陽 712000)

李 瑛 李 軍

目的：探討梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA)、梅毒螺旋體抗體快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)和梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)3種不同梅毒檢測方法對梅毒診斷的臨床價值。方法：2681例梅毒患者，分別對其血清標(biāo)本用TP-ELISA、RPR和TPPA方法進(jìn)行檢測，檢測方案分為單項(xiàng)目、雙項(xiàng)目和3項(xiàng)目共18種，用四格表卡方檢驗(yàn)比較3種檢測方法的結(jié)果。結(jié)果：在各單項(xiàng)檢測方案中TPPA方法的靈敏度(98.13%)和特異度(96.21%)最高(P<0.05)。在聯(lián)合檢測中,TP-ELISA+RPR+TPPA的靈敏度(88.87%)和特異度(99.98%)最高(P<0.01)；(TP-ELISA+TPPA)/(TP-ELISA+RPR)/ (RPR+TPPA)的靈敏度(87.76%)和特異度(99.17%)也較高(P<0.01)。結(jié)論：TPPA檢測方法在輔助梅毒診斷中具有重要價值，聯(lián)合檢測方案TP-ELISA+RPR+TPPA對梅毒診斷最有價值。

梅毒(Syphilis)是由梅毒螺旋體(Treponema Pallidum, TP)引起的一種系統(tǒng)性、慢性傳播疾病,其病程長、危害大, 且臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，時隱時現(xiàn)，已成為我國重點(diǎn)防治的性傳播疾病之一，近年來發(fā)病率有上升趨勢[1-2]。梅毒螺旋體感染后機(jī)體產(chǎn)生兩種抗體: 非特異性抗類脂質(zhì)抗體和特異性抗螺旋體抗體[3]。梅毒血清學(xué)試驗(yàn)對梅毒診斷具有重要意義，現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室最常用的為螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(TP-ELISA)、梅毒螺旋體抗體快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)(RPR)和梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)等檢測方法,本研究對3種方法在梅毒檢測中的應(yīng)用結(jié)果進(jìn)行分析比較,以便為臨床提供更準(zhǔn)確、更合理的診斷依據(jù)。

對象與方法

1 研究對象 隨機(jī)選取2014年1～11月期間在我院門診及住院的2681例梅毒患者,其中男145例,平均年齡25±0.13歲,女136例,平均年齡26±0.11歲。該研究獲得本院倫理委員會的批準(zhǔn)且所有患者均知情同意及自愿。

2 試劑與儀器 TP-ELISA試驗(yàn)試劑盒(北京吉比愛生物技術(shù)有限公司)，RPR試驗(yàn)試劑盒(上?？迫A生物工程股份有限公司),TPPA試驗(yàn)試劑盒(日本富士瑞必歐株式會社),MM-1型振蕩器(江蘇省泰縣醫(yī)療器械廠)，MK3型酶標(biāo)儀(芬蘭)，HH-W21-600型電熱恒溫水浴箱(上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠)。

3 檢測方法 分別用TP-ELISA、RPR和TPPA進(jìn)行檢測，操作和結(jié)果判定嚴(yán)格按照各試劑盒說明進(jìn)行，所有試劑盒都在有效期內(nèi)。根據(jù)檢測項(xiàng)目數(shù)目可分單項(xiàng)目(3種)、雙項(xiàng)目(平行試驗(yàn)與系列試驗(yàn)共6種)和三項(xiàng)目檢測(包括系列試驗(yàn)TP-ELISA+RPR+TPPA、平行試驗(yàn)TP-ELISA/RPR/TPPA和7種系列與平行混合試驗(yàn)共9種)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料組間比較采用四格表χ2檢驗(yàn)，以α=0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

結(jié) 果

1 各方案陽性與陰性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) 用平行試驗(yàn)指標(biāo)進(jìn)行診斷時，若干選取指標(biāo)中只要有一者為陽性，結(jié)果即判定為陽性。而用系列試驗(yàn)指標(biāo)進(jìn)行診斷時，必須幾個指標(biāo)均為陽性才可判定為陽性結(jié)果。

2 各方案檢測結(jié)果比較 見附表。在各單項(xiàng)檢測方案中TPPA檢測方法的靈敏度(98.13%)和特異度(96.21%)最高(χ2=4.38，P<0.05)。在聯(lián)合檢測中，TP-ELISA+RPR+TPPA的靈敏度(88.87%)和特異度(99.98%)最高(χ2=12.85,P<0.01)；(TP-ELISA+TPPA)/(TP-ELISA+RPR)/ (RPR+TPPA)的靈敏度(87.76%)和特異度(99.17%)也較高(χ2=11.23，P<0.01)。

附表 各方案的檢測結(jié)果比較

注：與各單項(xiàng)指標(biāo)比較,*P<0.05;與各聯(lián)合檢測指標(biāo)比較,△P<0.01

討 論

TP-ELISA是利用重組梅毒螺旋體TP17與TP47抗原包被微孔板和辣根過氧化物酶標(biāo)記的TP47、TP17抗原夾心法原理來檢測血清中的梅毒特異性抗體。此外TP-ELISA法可由機(jī)體因素、標(biāo)本因素、技術(shù)因素、儀器因素造成假陽性,需要TPPA試驗(yàn)確診[4]。RPR其檢測原理是采用心磷脂、卵磷脂和膽固醇的乙醇溶液作為抗原的非特異檢測。檢測操作簡單、時間短且成本低,適合大規(guī)模檢驗(yàn),并通過RPR滴度改變,可對疾病嚴(yán)重程度的判斷,療效觀察,是否復(fù)發(fā)或再感染的判斷有非常重要意義。其對一、三期,隱性梅毒和治療中梅毒的檢出率均低,可出現(xiàn)假陰性,造成漏檢[5]。TPPA法為用梅毒螺旋體Nichols株精制菌體成分制成抗原,包被于明膠顆粒上,以檢測血清中的梅毒特異性抗體,其靈敏度高、特異性好,是公認(rèn)的梅毒血清學(xué)確診試驗(yàn)。但該檢測時間長且試劑昂貴,需要將標(biāo)本作系列稀釋,以肉眼判斷結(jié)果,不利于大批量標(biāo)本檢測,且該方法檢測的抗體在梅毒患者恢復(fù)后可長期存在。檢測結(jié)果中出現(xiàn)TPPA陽性時,只能說明患者體內(nèi)存在梅毒特異性抗體[6-7]。

約登指數(shù)(YI)和卡帕值是各項(xiàng)指標(biāo)綜合統(tǒng)計(jì)參數(shù),YI越大表示其測定的真實(shí)性越好,卡帕值越大,說明該診斷實(shí)驗(yàn)的可靠性越好。在本研究中,TPPA檢測方法在各單項(xiàng)檢測方案中有高靈敏度和高特異度,在聯(lián)合檢測中,TP-ELISA+RPR+TPPA的靈敏度和特異度最高，(TP-ELISA+TPPA)/(TP-ELISA+RPR)/ (RPR+TPPA)的靈敏度和特異度與其他各聯(lián)合檢測也較高。這提示我們在實(shí)驗(yàn)條件和經(jīng)濟(jì)條件允許的情況下，最好選用3種方法聯(lián)合檢測，可降低誤診和漏診，有利于梅毒的早期診斷和治療。

[1] 高建華,唐 姬,黃若剛.北京市2004-2012年梅毒和淋病流行特征分析[J].中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志,2013,14(7): 530-532．

[2] Tucker JD，Chen XS, Peeling RW. Syphilis and social upheaval in China [J]. N Engl J Med,2010,362(18):1658-1661.

[3] Keynan Y.Predictors of serological cure after treatment of early syphilis[J].Clin Infect Dis,2012,54(7):1037-1038.

[4] 韓曉峰,劉 蔚.ELISA法篩查梅毒抗體陽性結(jié)果分析及應(yīng)對措施[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào),2013,8(34):1491.

[5] Dang Q,Feng J,Lu X,etal.Evaluation of specific antibodies for early diagnosis and management of syphilis [J]. Int J Dermatol,2006,45(10):1169-1171.

[6] 阮光強(qiáng),陳 衛(wèi).梅毒檢測方法的比較分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨檢,2011,8(20):2470.

[7] 林群英,謝芨莉.血清學(xué)檢測梅毒的三種方法比較與臨床應(yīng)用[J].醫(yī)學(xué)前沿,2012,2(15)：54-55.

(收稿：2016-02-18)

梅毒/診斷 梅毒血清診斷 酶聯(lián)免疫吸附測定

R759.1

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.056