外源銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花幼苗生物堿的影響

林 楓 高媚嬌 于博帆 陳華峰*

(1.遼寧省林業(yè)調(diào)查規(guī)劃院，沈陽 110122； 2.東北林業(yè)大學(xué)森林植物生態(tài)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱 150040)

外源銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花幼苗生物堿的影響

林 楓1高媚嬌2于博帆2陳華峰2*

(1.遼寧省林業(yè)調(diào)查規(guī)劃院，沈陽 110122；2.東北林業(yè)大學(xué)森林植物生態(tài)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，哈爾濱 150040)

以藥用植物長(zhǎng)春花為實(shí)驗(yàn)材料，采用珍珠巖為培養(yǎng)基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)方式培養(yǎng)，初步研究了長(zhǎng)春花幼苗對(duì)銅脅迫的生長(zhǎng)響應(yīng)、吸收積累、基因表達(dá)及生物堿合成的特性。研究結(jié)果表明，在外源銅脅迫下，藥用植物長(zhǎng)春花幼苗根和葉干重表現(xiàn)為低濃度的上升和高濃度的降低，并在300 μmol·L-1Cu時(shí)達(dá)到峰值，與對(duì)照差異顯著(P<0.05)。而幼苗的根系耐性指數(shù)先上升后下降，在200 μmol·L-1Cu時(shí)達(dá)到峰值。Cu金屬進(jìn)入長(zhǎng)春花幼苗體內(nèi)絕大部分積累在根部。長(zhǎng)春花葉片中含有的長(zhǎng)春堿在外源銅脅迫條件下其含量有一定程度上的增加，并且隨著處理濃度的增加使之呈現(xiàn)出規(guī)律性變化，在300 μmol·L-1Cu時(shí)達(dá)到峰值，甚至到達(dá)CK的2.7倍。結(jié)果可為進(jìn)一步驗(yàn)證長(zhǎng)春花是否可以作為一種新的Cu超富集植物提供參考依據(jù)。

長(zhǎng)春花；銅脅迫；長(zhǎng)春堿；Cu超富集植物

近年來，隨著工業(yè)活動(dòng)加劇，導(dǎo)致全球生態(tài)破壞及環(huán)境污染日趨嚴(yán)峻，環(huán)境問題已嚴(yán)重威脅到人類的健康與生存。其中，重金屬元素對(duì)土壤的破壞作用尤為突出。在過去的半個(gè)多世紀(jì)，由于自然或人為的原因，全球排放到環(huán)境中的銅達(dá)9.39×105t[1]。在重金屬脅迫的條件下，一般植物都會(huì)不同程度地從根系吸收各種重金屬，貯存在植株根部或運(yùn)輸?shù)降厣喜?，吸收?shù)量的多少受植物種類及根際微生物群落組成、pH值、氧化—還原電位、重金屬種類和濃度以及土壤的理化性質(zhì)等多方面因素的影響[2]。Cu作為重要的重金屬污染物，以其毒性強(qiáng)，危害大，在植物體內(nèi)易積累，難降解的特性受到人們的廣泛關(guān)注[3]。Cu雖然是植物生長(zhǎng)發(fā)育的必需元素，也是人體正常代謝所必需的微量元素，其在常量時(shí)對(duì)生物有益，但過量時(shí)則導(dǎo)致毒害，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致植物細(xì)胞死亡。據(jù)報(bào)道，過量的銅在形態(tài)建成和發(fā)育上，主要表現(xiàn)在根長(zhǎng)降低，葉片數(shù)量減少并產(chǎn)生較低的生物量，同時(shí)葉片發(fā)黃，葉片脈間失綠[4～5]。在生理上，重金屬影響植物最直接的表現(xiàn)是葉綠素含量減少導(dǎo)致光合作用減弱[6]。因此，對(duì)Cu的毒害機(jī)制的研究對(duì)于植物的生長(zhǎng)發(fā)育、生理變化及品質(zhì)的改良均具有重要的意義。

長(zhǎng)春花(Catharanthusroseus(L.) G. Don)為夾竹桃科(Apocynaceae)長(zhǎng)春花屬(Catharanthus)的藥用植物[7]。原產(chǎn)于非洲東海岸，現(xiàn)廣泛分布于世界各地,我國(guó)的廣東、廣西、云南、海南、貴州、四川以及江浙等地均有栽培。長(zhǎng)春花生殖能力強(qiáng)，可全年開花結(jié)果，且種子數(shù)量巨大，生活周期短，使其在不同生境下表現(xiàn)出較強(qiáng)的可塑性和耐受性。鑒于長(zhǎng)春花代謝過程中具有多種生物堿的生物活性,本文以長(zhǎng)春花為研究材料，探討其在Cu脅迫下的生長(zhǎng)特性、金屬吸收積累、生物堿合成特性,以期為更好的開發(fā)利用長(zhǎng)春花藥用資源奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為長(zhǎng)春花種子，由海正藥業(yè)有限公司浙江富陽長(zhǎng)春花種植基地所提供，試驗(yàn)所用外源銅為CuSO4·5H2O均為分析純。

1.2 試驗(yàn)處理

試驗(yàn)設(shè)置3個(gè)處理濃度組：200，300，400 μmol·L-1(以純Cu2+計(jì))，對(duì)照組不添加任何Cu金屬。為保證長(zhǎng)春花生長(zhǎng)環(huán)境的統(tǒng)一性從播種到處理均在溫室培養(yǎng)，試驗(yàn)中選取長(zhǎng)勢(shì)相同的長(zhǎng)春花幼苗進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為光照6級(jí)(day)/光照0級(jí)(night)，光照時(shí)間為6:00～18:00，濕度80%，溫度28℃(day)/25℃(night)。幼苗在長(zhǎng)春花發(fā)芽后移栽于裝有珍珠巖、下部有孔的黑色營(yíng)養(yǎng)杯中，定期對(duì)幼苗澆灌1/2濃度的Hogland營(yíng)養(yǎng)液，待長(zhǎng)出第三對(duì)葉片開始進(jìn)行外源銅的處理。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)及生物量測(cè)定

長(zhǎng)春花幼苗整株取出，洗凈，用直尺測(cè)量幼苗的根長(zhǎng)(cm)及株高(cm)；將幼苗在70℃烘干至恒重，用分析天平測(cè)定生物量；根系耐性指數(shù)=各處理根長(zhǎng)(cm)/對(duì)照的根長(zhǎng)(cm)[8]。

1.3.2 重金屬含量的測(cè)定

采用原子吸收分光光度計(jì)，分別稱取烘干的根，莖，葉樣品為0.05,0.1,0.2 g，經(jīng)混合酸(硝酸∶高氯酸=4∶1)消化，測(cè)定Cu2+含量(μg·g-1)。

1.3.3 長(zhǎng)春花生物堿的含量

(5)CT檢查前,醫(yī)護(hù)人員應(yīng)向受檢者做好宣教工作,囑其在檢查過程中不要?jiǎng)觼韯?dòng)去,避免造成檢查圖像模糊或偽影,造成受檢者需重新檢查,增加醫(yī)療費(fèi)用,也會(huì)導(dǎo)致醫(yī)療資源浪費(fèi)。

采用吲哚類生物堿含量的測(cè)定方法；分別稱取70℃下烘干48 h的長(zhǎng)春花葉片和根0.1～0.2 g，經(jīng)過超聲，離心后提取上清液，在40℃條件下減壓濃縮至干，復(fù)容過濾后供HPLC檢測(cè)。

1.3.4 長(zhǎng)春花RNA的提取與分析

分別稱取0.3 g長(zhǎng)春花的根和葉，采用TRIZOL試劑法進(jìn)行總RNA的提取，通過1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA的完整性及純度進(jìn)行檢測(cè)，分光光度計(jì)檢測(cè)其濃度，經(jīng)PCR和qRT-PCR技術(shù)測(cè)定得出相關(guān)關(guān)鍵酶基因的表達(dá)量。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件處理，差異顯著性分析采用SPSS16.0軟件進(jìn)行Duncan檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1外源銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花幼苗生長(zhǎng)及生物量的影響

由表1可以看出200、300、400 μmol·L-1Cu3種處理均在不同程度上改變了長(zhǎng)春花生物量，其中根干重和葉干重表現(xiàn)為低濃度的上升和高濃度的降低，并在300 μmol·L-1Cu時(shí)達(dá)到峰值，與對(duì)照差異顯著(P<0.05)。地上部干物質(zhì)量/根系干物質(zhì)量(SDW/RDW)均小于CK(3.677)，而且隨著Cu濃度的增加呈現(xiàn)明顯的減少的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)，在400 μmol·L-1Cu處理?xiàng)l件下達(dá)到最小值(2.900)，降低了21.13%，說明長(zhǎng)春花在外源銅脅迫條件下地上部干物質(zhì)積累能力隨著Cu濃度的增加呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。

表1長(zhǎng)春花響應(yīng)銅脅迫條件下生物量的變化

Table1ThebiomasschangesinresponsetocopperstrssinC.roseus

濃度Concentration(μmol·L-1)根干重Dryweightofroot(g)莖干重Dryweightofstem(g)葉干重Dryweightofleaf(g)地上部干物質(zhì)量/根系干物質(zhì)量SDW/RDWCK0．1±0．020．06±0．010．31±0．043．6772000．11±0．010．05±0．010．33±0．013．3703000．13±0．030．07±00．39±0．063．4064000．09±0．020．04±0．010．22±0．052．900

表2長(zhǎng)春花響應(yīng)銅脅迫條件下耐受性的變化

Table2ThesurvivabilitychangesinresponsetocopperstressinC.roseus

濃度Concentration(μmol·L-1)根長(zhǎng)Rootlength(cm)株高Plantheight(cm)根冠比Rootshootratio根系耐性指數(shù)RTICK7．86±0．16．74±0．141．17±0．021．02008．19±0．155．28±0．171．55±0．071．0415606453007．36±0．325．39±0．211．37±0．010．9368108574006．46±0．245．37±0．121．21±0．060．822307040

2.2外源銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花幼苗銅金屬吸收積累的影響

由圖1可見，隨著Cu處理濃度的增大，長(zhǎng)春花幼苗體內(nèi)的重金屬含量先逐漸增加而后降低，在300 μmol·L-1Cu時(shí)達(dá)到峰值，幼苗葉片和根部里Cu含量分別是CK的12.70、44.12倍，與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)。在200～400 μmol·L-1Cu濃度范圍內(nèi)，幼苗根部的Cu含量均明顯高于地上部，分別是地上部的12.98、20.29和16.21倍，表明重金屬進(jìn)入幼苗體內(nèi)后主要積累于根部，因此Cu對(duì)根部的傷害較大。

圖1 銅脅迫條件下長(zhǎng)春花對(duì)葉和根中Cu的富集Fig.1 Cu accumulation of C.roseus in copper stress content of Cu in leaf and root

2.3 外源銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花幼苗生物堿的影響

植物次生代謝產(chǎn)物是植物在長(zhǎng)期進(jìn)化中對(duì)生態(tài)環(huán)境適應(yīng)的結(jié)果，許多植物在收到脅迫或其他侵染后，產(chǎn)生并積累小分子抗生物質(zhì)，如萜類、生物堿和異黃酮等，用以增強(qiáng)自身的抵抗力。由圖2可知，隨著不同濃度外源銅處理長(zhǎng)春花幼苗，葉片中文多靈含量明顯增加，在400 μmol·L-1Cu處理達(dá)到最高值，是CK的1.6倍。文多靈屬于次生代謝的萜類化合物，長(zhǎng)春花幼苗為抵抗外界環(huán)境的脅迫，自身合成較多的文多靈以增強(qiáng)自身的抵抗能力。由圖2可知，長(zhǎng)春堿的含量隨著外源銅處理濃度的增加呈現(xiàn)先逐步增加再降低的動(dòng)態(tài)變化，在300 μmol·L-1Cu時(shí)達(dá)到峰值，甚至到達(dá)CK的2.7倍。長(zhǎng)春花幼苗的長(zhǎng)春質(zhì)堿含量變化與長(zhǎng)春堿變化趨勢(shì)呈現(xiàn)出相似的規(guī)律，說明長(zhǎng)春質(zhì)堿在長(zhǎng)春花植株體內(nèi)處于比較穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)平衡。從圖2可以看出，長(zhǎng)春花響應(yīng)不同濃度外源銅脅迫條件下根中長(zhǎng)春質(zhì)堿含量明顯低于CK，并隨著濃度的增加而呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)的變化，在300 μmol·L-1Cu處理?xiàng)l件下根中長(zhǎng)春質(zhì)堿的含量最低，200、 400 μmol·L-1Cu含量相當(dāng)。

2.4外源銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花幼苗次生代謝關(guān)鍵酶基因的調(diào)控

長(zhǎng)春花生物堿合成途徑調(diào)控網(wǎng)路復(fù)雜，其中涉及到30多個(gè)關(guān)鍵酶基因和調(diào)控因子，長(zhǎng)春花的藥用價(jià)值生物堿有文多靈、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春質(zhì)堿合成部位主要在葉片中。由圖3可知，DAT基因和T16H基因在葉片中有表達(dá)，在根中幾乎沒有表達(dá)，可見DAT基因和T16H基因的表達(dá)對(duì)提高長(zhǎng)春花葉片中文多靈和長(zhǎng)春質(zhì)堿有重要的作用。在不同濃度外源銅脅迫下，300 μmol·L-1Cu處理濃度下T16H的基因表達(dá)量最多，是200 μmol·L-1Cu的15倍，CK的44倍。說明在外源銅的作用下可以促進(jìn)T16H基因的表達(dá)，從而提高長(zhǎng)春花葉片中文多靈的生物合成。

圖2 銅脅迫條件下長(zhǎng)春花葉、根中各生物堿含量的比較Fig.2 Comparison of the contents of alkaloids in leaves and roots of Catharanthusroseusunder copper stress

圖3 銅脅迫條件下長(zhǎng)春花生物堿合成基因相對(duì)表達(dá)量 A.合成途徑基因相對(duì)表達(dá)量；B.生物堿合成調(diào)控基因相對(duì)表達(dá)量Fig.3 The relative expression of the alkaloid biosynthesis genes in C.roseus under copper stress A. of genes in the biosynthetic pathway; B. Relative expression of genes in the regulation of alkaloid synthesis

圖4 不同時(shí)間內(nèi)銅脅迫對(duì)長(zhǎng)春花葉、根里生物堿合成基因相對(duì)表達(dá)量 A.葉中基因相對(duì)表達(dá)量；B.根中基因相對(duì)表達(dá)量Fig.4 The relative expression of the alkaloid biosynthesis genes in the leaves and roots of C.roseus in different time A. Relative expression of gene in leaf; B. Relative expression of gene in root

在不同時(shí)間內(nèi)300 μmol·L-1Cu處理濃度對(duì)長(zhǎng)春花幼苗的基因表達(dá)量存在差異(圖4)，300 μmol·L-1Cu的長(zhǎng)春花幼苗在2～4 h內(nèi)基因表達(dá)量增加明顯，其中T16H基因在4 h到達(dá)頂峰，是2 h前的4倍。TDC基因和STR基因在葉和根中都有表達(dá)，TDC基因在葉中表達(dá)量高于根，而STR基因正好與之相反。在不同的植物內(nèi)MAP3激酶是級(jí)聯(lián)蛋白可以調(diào)節(jié)不同壓力響應(yīng)生物的過程，植物需要適應(yīng)外部環(huán)境的各種變化，以維持自身正常的生長(zhǎng)發(fā)育，當(dāng)植物遭受低溫、干旱、病原物侵染等非生物和生物脅迫時(shí)，MAPK就會(huì)被激活[9]。由圖4中可見，在300 μmol·L-1Cu 濃度處理下4 h內(nèi)MAP3激酶都到達(dá)最高值，隨著時(shí)間增長(zhǎng)表達(dá)量明顯減低。

3 討論

已有研究表明，外源重金屬進(jìn)入土壤后，植物自身可通過根系吸收進(jìn)入根細(xì)胞內(nèi)積累，并通過細(xì)胞間的運(yùn)輸向地上部移動(dòng)，但重金屬由于自身的化學(xué)性質(zhì)和螯合能力的不同，在植物體內(nèi)的積累和遷移能力都存在差異性[10]。Cu作為植物生長(zhǎng)發(fā)育的必需營(yíng)養(yǎng)元素比較容易被根系吸收，與細(xì)胞膜蛋白的活性位點(diǎn)結(jié)合，并隨著蛋白質(zhì)大分子轉(zhuǎn)運(yùn)到植物地上部[10]。本試驗(yàn)證明，Cu金屬進(jìn)入長(zhǎng)春花幼苗體內(nèi)絕大部分積累在根部，在外源Cu脅迫條件下長(zhǎng)春花的耐受性較好，并且具有良好的地上干物質(zhì)的積累能力，與李向科等在大麥中的研究結(jié)果基本相同[11]。

Cu是植物生長(zhǎng)所必需的微量營(yíng)養(yǎng)元素，適量的Cu能刺激酶活性，促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)。而過量的Cu加速幼苗根系產(chǎn)生大量活性氧，抑制各種酶活性，使根系受損，并影響到生物量的生成[12～14]。在本試驗(yàn)條件下，不同濃度Cu對(duì)長(zhǎng)春花幼苗的各部位干重，根長(zhǎng)表現(xiàn)為隨著處理濃度增加先上升后下降，在大麥和玉米中研究結(jié)果相同[15]。當(dāng)Cu的濃度為300 μmol·L-1時(shí)，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組出現(xiàn)顯著差異，根和葉的干重達(dá)到最大值。對(duì)于長(zhǎng)春花幼苗，其根系的耐性指數(shù)同樣表現(xiàn)為先上升后下降的趨勢(shì)，在Cu濃度達(dá)到200 μmol·L-1時(shí)達(dá)到峰值，這一研究與水稻中結(jié)果相同[16]。

藥用植物長(zhǎng)春花因其體內(nèi)含有顯著抗癌的活性成分如長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿而成為國(guó)際上研究和應(yīng)用最多的抗癌藥源之一[17～20]。已有報(bào)道指出，植物體內(nèi)生物堿的積累受到多種外界環(huán)境脅迫因子的誘導(dǎo)[21]。本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Cu脅迫能夠顯著提高生物堿的積累，并且這一代謝水平與基因水平結(jié)果基本相似。在Cu處理下，文多靈的含量隨處理濃度的增加而增加，在400 μmol·L-1Cu處理時(shí)達(dá)到最大值。文多靈合成途徑中3個(gè)關(guān)鍵酶，包括水苷草堿16-羥化酶(T16H)、脫乙酰氧基文朵靈-4-羥化酶(D4H)、脫乙?；亩囔`4-o-乙酰轉(zhuǎn)移酶(DAT)都需要在光照條件下才能表達(dá)[22]。水甘草堿16-羥化酶(T16H)是催化水甘草堿到文多靈途徑的第一個(gè)酶，存在于細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。脫乙?；亩囔`4-o-乙酰轉(zhuǎn)移酶(DAT)、脫乙酰氧基文朵靈-4-羥化酶(D4H)卻專一性地出現(xiàn)在見光的葉和莖中的乳汁細(xì)胞以及異細(xì)胞中，催化從它波寧到文多靈生物合成的反應(yīng)，將水甘草堿轉(zhuǎn)化成文多靈[22]。文多靈合成的最后一步反應(yīng)是由DAT催化的，該基因的轉(zhuǎn)錄同樣受到光的誘導(dǎo)[23]，并且DAT基因的表達(dá)量的大小直接關(guān)系到葉片中文多靈的含量。本試驗(yàn)選取長(zhǎng)春花生物堿合成過程中的幾個(gè)關(guān)鍵基因酶：TDC、STR、DTA、D4H、T16H。研究表明，在不同濃度Cu處理?xiàng)l件下關(guān)鍵酶基因表達(dá)量明顯增加，文多靈和長(zhǎng)春質(zhì)堿在基因酶的作用下催化和促進(jìn)長(zhǎng)春堿的合成，從而更好的提高長(zhǎng)春花吲哚類生物堿的含量。

有關(guān)報(bào)道指出，在植物所吸收的重金屬中只有極少的一部分對(duì)植物造成毒害，而大部分的重金屬則被結(jié)合在細(xì)胞壁上或儲(chǔ)存在液泡中，被扣留的重金屬是沒有任何的生理作用的，不會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生危害，這一特點(diǎn)是由植物對(duì)重金屬污染的耐性機(jī)制所決定的[24]。MAPK是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中關(guān)鍵的蛋白激酶，通過MAPKKK-MAPKK-MAPK三酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)對(duì)化學(xué)和生理應(yīng)激作出反應(yīng)，因此控制細(xì)胞的生存和適應(yīng)力。MAPK級(jí)聯(lián)途徑是普遍存在于動(dòng)物、植物和微生物系統(tǒng)中保守的信號(hào)傳導(dǎo)通路[25]。促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)在植物的生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)和抗逆等生理過程中起重要作用，能夠介導(dǎo)生物和非生物脅迫條件下的反應(yīng)信號(hào)通路[26]。本文通過在不用處理濃度和時(shí)間內(nèi)的基因的表達(dá)得知，Cu濃度為300 μmol·L-1處理4 h內(nèi)MAP3激酶達(dá)到峰值，隨后降低，這可能是由于當(dāng)處理時(shí)間過長(zhǎng)而超出植物自身的調(diào)節(jié)能力，從而出現(xiàn)Cu大量的積累，但是對(duì)于MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在長(zhǎng)春花滲透調(diào)節(jié)方面的作用研究尚不透徹，需進(jìn)一步研究。

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EffectsofCopperStressontheAlkaoidsofCatharanthusroseus

LIN Feng1GAO Mei-Jiao2YU Bo-Fan2CHEN Hua-Feng2*

(1.Liaoning Forestry Survey and Planning Institute,Shenyang 110122；2.Key Laboratory of Forest Plant Ecology,Ministry of Education,Northeast Forestry University,Harbin 150040)

WithCatharanthusroseus, we used perlite as the medium quality nutritional way to study the effects of copper stresson theresponses ofC.roseusseedling growth, accumulation, gene expression and characteristics of alkaloid synthesis. The dry weight of root and leaf ofC.roseusunder exogenous Cu stress levels was increased under low concentration,decreased under high concentration,and reached peak at 300 μmol·L-1, with significant difference compared with the control(P<0.05). The root tolerance index of seedlings was increased firstly, then decreased, and reached the peak at 200 μmol·L-1of Cu. Cu intoC.roseusseedlings was mostly accumulated in roots. But under the stress of exogenous Cu,C.roseusblade parameters, such as the accumulation of dry matter, was improved significantly, by presenting a regular change the concentration was increased, and reached the peak at 300 μmol·L-1Cu, even reaching as much as 2.7 times thanthe CK. TheC.roseushyperaccumulation plants can be usedas further reference basisfor Cu accumulation.

Catharanthusroseus;copper stress;vinblastine;hyperaccumulation plants of Cu

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31400337)

林楓(1977—)，男，高級(jí)工程師，主要從事植物和林業(yè)調(diào)查研究工作。

* 通信作者：E-mail:biginsect2002@163.com

2015-11-21

S567

A

10.7525/j.issn.1673-5102.2016.03.009