原生質(zhì)體培養(yǎng)及其在果樹育種上的應(yīng)用

馬寶山++周麗紅

摘 要：現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷創(chuàng)新和進(jìn)步，為植物組織培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展提供了良好的前提條件，有效促進(jìn)了果樹育種事業(yè)的良好發(fā)展。原生質(zhì)體培養(yǎng)在當(dāng)前果樹育種事業(yè)方面發(fā)揮了十分重要的作用，且具有良好的應(yīng)用前景。本文主要從原生質(zhì)體培養(yǎng)所需要的材料入手，對(duì)原生質(zhì)體的具體培養(yǎng)工作進(jìn)行細(xì)致的分析和說明，并詳細(xì)介紹了原生質(zhì)體培養(yǎng)在果樹育種中的實(shí)際應(yīng)用情況。

關(guān)鍵詞：原生質(zhì)體；培養(yǎng)；果樹育種；應(yīng)用

中圖分類號(hào)：S66 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.11974/nyyjs.20160832046

原生質(zhì)體，主要是指那些去除了細(xì)胞壁被質(zhì)膜所包圍的、具有生活力的“裸露細(xì)胞”，植物體中的這些細(xì)胞能在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行植株的再生，從而促進(jìn)作物的生長(zhǎng)。原生質(zhì)體因?yàn)槠洳皇芗?xì)胞壁的影響，因而在進(jìn)行外源DNA和一些遺傳物質(zhì)、細(xì)胞器等方面能量的攝取過程中，能夠更加高效，同時(shí)這些細(xì)胞還能夠和一些其他物種的細(xì)胞進(jìn)行融合，重新形成不同的品種。

1 原生質(zhì)體培養(yǎng)情況

1.1 原生質(zhì)體培養(yǎng)所需要的材料

在進(jìn)行原生質(zhì)體的培養(yǎng)工作時(shí)，需要選擇合適的材料，將原生質(zhì)進(jìn)行有效的分離。原生質(zhì)體使用分離材料的類型、基因型和生理狀態(tài)有所不同，從而產(chǎn)生的分離培養(yǎng)效果也是有所不同的。植物的組織、細(xì)胞和各類器官都是可以進(jìn)行外植體培養(yǎng)的重要原料，想要培養(yǎng)出不同的物種，就需要選擇不同的外植體。對(duì)植物體進(jìn)行材料分離前的事先處理，能有效保持原生物質(zhì)的完整性，同時(shí)還能夠有效保證和提高原生質(zhì)體的產(chǎn)量。在實(shí)際進(jìn)行植物體原生質(zhì)體的分離工作時(shí)，需要使用到果膠酶、離析酶、纖維素酶以及半纖維素酶等物質(zhì)，其中纖維素酶和果膠酶是常用的分離物質(zhì)，這2種物質(zhì)直接作用的方向是不同的。植物體在確定具體使用的酶液類型時(shí)，需要根據(jù)試驗(yàn)得出相應(yīng)的結(jié)論。同時(shí)還需要對(duì)滲透壓穩(wěn)定劑的使用進(jìn)行重視，這種試劑能夠在維持植物體的穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用，并且還能夠影響到原生質(zhì)體后期的培養(yǎng)和細(xì)胞分裂[1]。

1.2 原生質(zhì)體的具體培養(yǎng)工作

影響原生質(zhì)體分裂頻率最為重要的影響因素之一就是培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的主要成分是激素、有機(jī)物和無機(jī)物等。當(dāng)前原生質(zhì)體培養(yǎng)基中主要使用的是NT培養(yǎng)基和Km8T培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基在原生質(zhì)體的實(shí)際培養(yǎng)工作中具有十分重要的意義，能夠全面有效地促進(jìn)培養(yǎng)基中植物體的良好生長(zhǎng)。培養(yǎng)基中的附加物，是能夠隨著植物體培養(yǎng)物生長(zhǎng)情況進(jìn)行改變和添加的，且培養(yǎng)器官也會(huì)對(duì)實(shí)際的培養(yǎng)基附加物造成影響。滲透壓在原生質(zhì)體的發(fā)育中起著重要作用，因而在進(jìn)行原生質(zhì)體的培養(yǎng)過程中，需要對(duì)于摻加滲透壓調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基進(jìn)行調(diào)整，將滲透壓逐漸進(jìn)行減少，減少細(xì)胞因受傷害而無法生長(zhǎng)的情況出現(xiàn)。原生質(zhì)體在前期的培養(yǎng)工作中，需要使用一些高質(zhì)量高水平的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，只有這樣才能夠保證細(xì)胞壁的再生、細(xì)胞的分裂順利進(jìn)行，原生質(zhì)體初始的密度對(duì)于后期的植版效果具有十分重要的影響，如果密度過于大，將會(huì)不利于細(xì)胞的再生和分裂，影響到最終的培植效果?，F(xiàn)如今進(jìn)行原生質(zhì)體的培養(yǎng)工作時(shí)，通常使用的方法有固液結(jié)合培養(yǎng)的方法、液體淺層培養(yǎng)的方法、瓊脂島培養(yǎng)的方法以及看護(hù)培養(yǎng)的方法等。選擇合適的方法進(jìn)行原生質(zhì)體的培養(yǎng)，具有不同的實(shí)際作用，在進(jìn)行原生質(zhì)體培養(yǎng)工作的時(shí)候，需要給予足夠的重視[2]。

2 原生質(zhì)體培養(yǎng)在果樹育種中的實(shí)際應(yīng)用

原生質(zhì)體的體積較小，但是實(shí)際的群體卻十分大，培養(yǎng)體系中的理化因素對(duì)原生質(zhì)體的影響十分之大，因而在進(jìn)行原生質(zhì)體的培養(yǎng)工作時(shí)，產(chǎn)生的無性變異率要比一般細(xì)胞的效果好。使用非載體遺傳進(jìn)行相關(guān)操作時(shí)，原生質(zhì)體具有良好效果，它能獲取到外源物質(zhì)且不需要一些其他手段的輔助。將原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)積極應(yīng)用到現(xiàn)代果樹育種事業(yè)之中，需要進(jìn)行的重要工作是胚培育種，也就是常用的胚搶救，將一些因?yàn)槿狈I(yíng)養(yǎng)或者生理原因造成的成活率較低的樹苗進(jìn)行培養(yǎng)，對(duì)樹苗中的胚進(jìn)行早期的離體培養(yǎng)工作。很多核果類的果樹因?yàn)樯L(zhǎng)期發(fā)育期較短，一些胚胎在沒有完全成熟的情況下就被培育，影響到了后期的萌芽率，因而需要進(jìn)行相應(yīng)的胚培育種工作。胚培育種工作在實(shí)際實(shí)施的時(shí)候，能夠有效解決早熟品種繁育、三倍體育種和遠(yuǎn)緣雜交不育的情況。通過原生質(zhì)體獲取到相應(yīng)的外源基因，并做好相應(yīng)的轉(zhuǎn)移工作。在將外源基因進(jìn)行有效的轉(zhuǎn)移之后，能夠?qū)⒃|(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞進(jìn)行充分的融合，從而增強(qiáng)細(xì)胞的實(shí)際培育效果。一般在進(jìn)行這項(xiàng)工作的時(shí)候，都是使用人為的方法，將遺傳性狀不同的細(xì)胞重新融合，這對(duì)于提高樹種的多樣性具有良好的意義[3]。

3 結(jié)語

原生質(zhì)體培養(yǎng)是當(dāng)前進(jìn)行果樹育種的重要培養(yǎng)技術(shù)，對(duì)于發(fā)展果樹物種多樣性，促進(jìn)育種事業(yè)的有效發(fā)展提供了積極的作用。將原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)積極應(yīng)用在果樹育種的事業(yè)之中，將能夠起到有效的促進(jìn)作用。因而在進(jìn)行果樹育種工作時(shí)，需要做好原生物質(zhì)的培養(yǎng)工作，保證其培養(yǎng)效果。

參考文獻(xiàn)

[1]戴雪梅，黃天帶，孫愛花，等.植物原生質(zhì)體融合研究進(jìn)展及其在育種中的應(yīng)用[J].熱帶作物學(xué)報(bào)，2012，33（8）：1516-1521.

[2]石慶華，劉平，劉孟軍.果樹倍性育種研究進(jìn)展[J].園藝學(xué)報(bào)，2012，39（9）：1639-1654.

[3]高敏霞，葉新福.植物組織培養(yǎng)在核果類果樹上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)，2015（3）：107-108.