時空因素對火山優(yōu)勢樹種根際真菌群落多樣性的影響1)

張建峰 周奇 田磊 馬麗娜 田春杰

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長春，1301182) (中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所)

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時空因素對火山優(yōu)勢樹種根際真菌群落多樣性的影響1)

張建峰 周奇 田磊 馬麗娜 田春杰

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，長春，1301182) (中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所)

以五大連池地區(qū)噴發(fā)年代相差較大的老黑山(0.02萬年前)、東焦得布山(80萬年前)和南格拉球山(200萬年前)3座火山南北坡為代表，采用PCR-DGGE聯(lián)用技術(shù)研究了火山優(yōu)勢樹種根際真菌多樣性。結(jié)果表明：(1)采用UPGMA法對根際真菌群落結(jié)構(gòu)相似性的分析表明，3座火山根際真菌群落結(jié)構(gòu)相似性隨著火山噴發(fā)后時間的延長先不變后升高；但南坡和北坡根際真菌群落結(jié)構(gòu)相似性不同。(2)運用BIODAP軟件對根際真菌群落多樣性的分析表明，3座火山南北坡的均勻度無明顯變化，均為0.99；3座火山南坡豐富度和多樣性指數(shù)均隨火山噴發(fā)后時間的延長先降低后增加；北坡豐富度和多樣性指數(shù)均隨火山噴發(fā)后時間的延長先持平后增加。(3)采用SPSS分析軟件對土壤理化性質(zhì)和根際真菌多樣性的相關(guān)性分析表明，3座火山南北坡豐富度和多樣性指數(shù)與土壤有機(jī)質(zhì)之間相關(guān)顯著(p<0.05)。

五大連池；時空因素；根際真菌；變性梯度凝膠電泳

Laoheishan, Dongjiao Mountain and the south and north slopes of South Gamla Ball Shan, which have large differences in age, were selected as representatives of Wudalianchi volcanic rock to study the diversity of rhizosphere fungi, using PCR-DGGE combination technology. Using UPGAMA method in structural similarity analysis of rhizosphere fungi community, the structural similarity of rhizosphere fungi community for the three volcanoes displayed a trend of being constant before increasing with the time extension of the volcano eruption, indicating that time was one of the factors affecting rhizosphere fungal community. The structural similarity of rhizosphere fungi community for the south slope was different compared to the north slope, showing that the slope direction was also one of the factors affecting rhizosphere fungal community. Using BIODAP software to analyze the diversity of rhizosphere fungi, the evenness of both the three volcanoes’ south slope and north slopes was the same index of 0.99. The changing trends for the abundance and diversity index of rhizosphere fungi of the three-volcano south slopes was the same, which seemed to be increasing after first decreasing with volcanic eruption. The variation trend for the abundance and diversity index of rhizosphere fungi of the three volcanoes’ south slopes was also the same, which is constant before increasing with the time extension of the volcano eruption, indicating that time can change the diversity of rhizosphere fungi. Using SPSS software to do the correlation analysis for the soil physical-chemical properties and the diversity of rhizosphere fungi, the abundance and diversity index of rhizosphere fungi of the three-volcano north and south slopes were significantly associated with the soil organic matter (p<0.05). The abundance and diversity index of rhizosphere fungi of the three-volcano north and south slopes were positively related to the total soil nitrogen, available nitrogen, pH, available phosphorus, and available potassium, but the correlation was not significant.

土壤真菌是指以土壤為活動場所完成全部或部分生活史的真菌，主要包括腐生或共生在土壤或母質(zhì)中的真菌區(qū)系[1-3]。1886年，Adametz從土壤中首次分離得到11株真菌[1]。根際真菌是土壤真菌主要組成部分之一，其以藻狀菌和半知菌中的絲孢菌成員為主。根際真菌多樣性受到采樣方法、植物種類、季節(jié)、土壤類型和土壤理化性質(zhì)等多種因素的影響[4-5]。Nemergut et al.[6]對高山和北極地區(qū)土壤微生物結(jié)構(gòu)隨季節(jié)的變化趨勢的研究表明，土壤微生物種群多樣性受到季節(jié)因素的影響顯著。慕東艷等[7-8]研究表明，黑龍江省藥用植物根際真菌多樣性豐富，其中青霉屬(Penicillium)、曲霉屬(Aspergillus)、木霉屬(Trichoderma)和鐮孢菌屬(Fusarium)是其優(yōu)勢種群；藥用植物的種類和采樣地點對根際真菌種群結(jié)構(gòu)也有影響。王超等[9]研究表明，根際真菌在低肥中數(shù)量最多，中肥土壤中最少。有研究[10-12]表明，隨著同種植物生長時期的增加根際真菌數(shù)量不斷增加，在成熟期達(dá)到最多，但是根際真菌種類無明顯區(qū)別。本研究以五大連池火山群中噴發(fā)年代差異較大的老黑山(0.02萬年前)、東焦得布山(80萬年前)及南格拉球山(200萬年前)為研究對象，采用變性梯度凝膠電泳(DGGE)法，探討了優(yōu)勢樹種根際真菌群落多樣性與時空的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 樣品預(yù)處理

2014年8月，以老黑山、東焦得布山和南格拉球山為樣地。根據(jù)海拔、坡度、植被等設(shè)置3～5個樣方(1 m×1 m)，進(jìn)行植物物種組成和蓋度調(diào)查。同時，采集優(yōu)勢樹種根部土壤，采樣深度為0～20 cm。將土樣混合，采用四分法取樣1.0 kg。將土壤放入密封塑料袋，附上標(biāo)簽，記錄采樣時間、采樣地點、生境、樣品編號等。將土壤樣品帶回實驗室，過18目篩(1 mm孔徑)后分3部分：一部份4 ℃保存；一部分-20 ℃保存；一部分于陰涼處風(fēng)干保存?zhèn)溆?。將風(fēng)干土樣內(nèi)的石塊、根莖及其他雜質(zhì)挑除，以排除生物有機(jī)體對土壤養(yǎng)分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的干擾。風(fēng)干后將同一個樣地不同樣方采集的土壤混合均勻，稱取0.5 g，作為該樣地的土壤樣品[13-14]。具體采樣信息見表1。

表1 五大連池3座火山南北坡采樣信息

火山名稱噴發(fā)年代坡向優(yōu)勢樹種白樺蒙古櫟五角槭黑樺落葉松胡枝子山楊榆樹椴樹老黑山0.02萬年前南坡三(18)四(13)一(20)北坡二(14)四(15)一(16)五(17)三(10)東焦得布80萬年前南坡一(12)五(11)二(19)四(23)三(22)北坡五(26)三(24)一(25)四(9)二(7)南格拉球200萬年前南坡一(5)二(8)三(6)四(21)北坡四(3)一(4)二(1)三(2)

注：優(yōu)勢樹種內(nèi)的漢字?jǐn)?shù)字表示優(yōu)勢樹種排序；括號內(nèi)的阿拉伯?dāng)?shù)字表示采樣序號。

1.2 研究方法

1.2.1 根際真菌DNA的提取

按TIANGEN公司的植物基因組DNA提取試劑盒(離心柱形)的操作步驟進(jìn)行根際真菌DNA的提取。然后使用Thermo公司生產(chǎn)的儀器NanoDROP2000c進(jìn)行根際微生物DNA質(zhì)量濃度和純度的測定[15-18]。

1.2.2 根際真菌18 S rDNA的PCR擴(kuò)增

18 S rDNA基因的擴(kuò)增[3，10，19]：將純化后的基因組DNA作為PCR的模板，采用對大多數(shù)真菌的18 S rDNA基因具有的簡并性的引物NS1/NS4和特異性的引物GC-fungal/NS1進(jìn)行兩輪PCR擴(kuò)增。第1輪PCR的引物為，NS1(5′-GTAGTCATATGGTTGTCTC-3′)和NS4(5′-CTTCCGTCAATTCCTTTAAG-3′)，擴(kuò)增產(chǎn)物片段長約1 400 bp；PCR擴(kuò)增體系(20 uL)為，Premix 10 μL，引物F和R各2 μL，DNA模板2 μL，ddH2O 4 μL；PCR擴(kuò)增程序為，94 ℃預(yù)變性4 min，35個循環(huán)的94 ℃變性30 s，52 ℃退火55 s，72 ℃延伸50 s，最后72 ℃保持10 min。第2輪PCR的引物為，GC-fungal (5′-CGCCCGCCGCGCCCCGCG-CCCGGCCCGCCGCCCCCGCCCCATTCCCCGTTACC-

CGTTG-3′)和NS1(5′-GTAGTCATATGGTTGTCTC-3′)，擴(kuò)增產(chǎn)物片段長約500 bp；PCR擴(kuò)增體系(20 μL)為，Premix 10 μL，引物F和R各2 uL，DNA模板1 μL，ddH2O 5 μL；PCR擴(kuò)增程序為，94 ℃預(yù)變性4 min，35個循環(huán)的94 ℃變性30 s，52 ℃退火55 s，72 ℃延伸50 s，最后72 ℃保持10 min。

1.2.3 PCR反應(yīng)產(chǎn)物的變性梯度凝膠電泳

試劑與儀器：試劑有丙烯酰胺、雙丙烯酰胺、尿素、去離子甲酰胺等購自Sigma公司，PremixTaq混合液購自TAKARA生物公司。儀器主要有JY-CZ-B垂直電泳儀(北京君意東方電泳設(shè)備有限公司)，Genosens 1860凝膠成像系統(tǒng)(上海勤祥科學(xué)儀器有限公司)。

DGGE試驗操作[20-22]：對上述以GC-fungal/NS1為引物擴(kuò)增出的真菌目的條帶，進(jìn)行DGGE電泳檢測。電泳條件為，1×TAE電泳緩沖液，變性梯度為20%～40%，90 V電壓，12 h；電泳后獲得的凝膠，經(jīng)替代性核酸染料染色浸泡1 h后，于凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行觀察。

1.3 數(shù)據(jù)處理

用Quantity One分析軟件對凝膠圖像進(jìn)行圖譜和UPGAMA分析；用BIODAP軟件進(jìn)行根際真菌物種多樣性分析，包括豐富度，均勻度和相似度；運用SPSS軟件進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 根際微生物DNA質(zhì)量濃度和純度

使用儀器NanoDROP2000c對提取的根際微生物DNA進(jìn)行質(zhì)量濃度和純度測定。部分樣品的DNA質(zhì)量濃度和純度測定結(jié)果如表2所示。大量研究結(jié)果表明，樣品DNA的A260/A280比值為1.80～2.00，表明提取的樣品DNA適合18 S rDNA分析且純度較好，能夠直接用于PCR-DGGE等分析[23]。結(jié)果(表2)顯示，5個樣品的DNA質(zhì)量濃度為54.4～233.4 mg·L-1，能夠滿足試驗需要；5個樣品DNA的A260/A280比值為1.84～1.91，能夠直接進(jìn)行PCR-DGGE分析。結(jié)合表1、表2可知，不同山體和不同方向的優(yōu)勢樹種根際真菌DNA的質(zhì)量濃度和純度不同。

2.2 根際真菌的PCR擴(kuò)增

由表2可知，優(yōu)勢樹種根際真菌DNA的質(zhì)量濃度和純度符合試驗要求，可以作為樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增。對根際真菌18 S rDNA進(jìn)行兩輪PCR擴(kuò)增：第1輪引物為NS1/NS4，第2輪引物為GC-fung/NS1。對第1輪和第2輪擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果如圖1所示。由圖1a可知，第1輪PCR擴(kuò)增產(chǎn)物中進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳的部分樣品均能擴(kuò)增出單一的目的條帶，目的片段長度約1 500 bp，說明各個樣品的PCR擴(kuò)增具有很好的特異性，擴(kuò)增產(chǎn)物可以作為第2輪PCR的樣品。由圖1b所示，第2輪PCR產(chǎn)物中進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳的部分除樣品1外都能擴(kuò)增出單一的目的條帶，目的片段長度約500 bp，說明樣品的PCR擴(kuò)增具有很好的特異性，擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接用做DGGE樣品。樣品1除目的條帶(約500 bp)外，在1 500 bp左右還有一條條帶，可能原因是第2輪PCR時模板質(zhì)量濃度過高，導(dǎo)致模板剩余過多，在第2輪PCR的擴(kuò)增產(chǎn)物做瓊脂糖凝膠電泳時顯現(xiàn)出來。但DGGE樣品的片段大小為500 bp及以下，樣品1長約1 500 bp的片段在DGGE圖片中不能顯示，對最后結(jié)果無影響，因此，樣品1的PCR擴(kuò)增具有很好的特異性，擴(kuò)增產(chǎn)物可以直接用做DGGE樣品。

表2 五大連池火山優(yōu)勢樹種根際真菌部分樣品DNA質(zhì)量濃度和純度

樣品編號DNA質(zhì)量濃度/mg·L-1A260A280A260/A280165.01.2990.6801.912167.43.3471.7811.883233.44.6682.4751.89454.41.0880.5931.845106.82.1361.1471.86

圖1 五大連池火山優(yōu)勢樹種根際真菌18 S rDNA PCR擴(kuò)增結(jié)果

2.3 南北坡根際真菌DGGE圖譜

由表1可知，老黑山、東焦得布山和南格拉球山南北坡的優(yōu)勢樹種。對3座火山南北坡優(yōu)勢樹種的根際真菌進(jìn)行DNA提取和PCR擴(kuò)增，最后通過DGGE試驗得到根際真菌的18 S rDNA圖譜(圖2)。

條帶的數(shù)量代表根際真菌群落的多樣性，條帶的亮度反映了根際真菌群落的豐度[24]。從圖2可以看出，a、d、e、f、g、I、j、k和m為樣品的廣譜性條帶，其中a、d、e、g、j和m條帶的亮度與其他相比較暗，說明這5個根際真菌種群的數(shù)量較少；f、i和k條帶較亮，說明這3個條帶的根際真菌種群數(shù)量較多。條帶b為樣品3和樣品26的特異性條帶，但樣品3的根際真菌種群的數(shù)量比樣品26多。條帶c為樣品10、14、15和樣品26的特異性條帶，其中樣品10的根際真菌種群的數(shù)量較其他樣品多。條帶l為樣品4和樣品1的特異性條帶且根際真菌種群的數(shù)量較多。條帶n為樣品5、11、12和13的特異性條帶，其中樣品5的根際真菌種群的數(shù)量最多。樣品6和樣品20共有一條特異性條帶o，同時它們的根際真菌種群的數(shù)量較多。條帶p為樣品1、3、4和樣品20的特異性條帶，樣品3與其他3個樣品相比具有較多的根際真菌種群的數(shù)量。由表1和圖2可知，山體和坡向是影響根際真菌多樣性的重要因素?？梢?，3座火山南北坡根際真菌具有豐富的種群多樣性，同時說明相同根際真菌種群在不同的樣品中的數(shù)量不同。

圖2 五大連池3座火山南北坡優(yōu)勢樹種根際真菌18 S rDNA的DGGE圖譜

2.4 火山南北坡根際真菌群落相似性

通過Quantity One軟件對DGGE圖譜采用非加權(quán)組平均法(UPGAMA)進(jìn)行聚類分析。結(jié)果如圖3所示，結(jié)合表1分析可知，3座火山南北坡優(yōu)勢樹種根際真菌相似度受到山體和坡向的影響。老黑山、東焦得布山和南格拉球山根際真菌群落結(jié)構(gòu)相似性均隨著火山噴發(fā)后時間的延長先不變后升高。3座火山中南格拉球山根際真菌群落結(jié)構(gòu)相似度最高，相似值為0.33；老黑山和東焦得布山根際真菌群落結(jié)構(gòu)的相似度相同，相似值為0.31。說明，在土壤發(fā)育晚期，根際真菌種群結(jié)構(gòu)處于一種相對平衡狀態(tài)，而在土壤發(fā)育早期和中期根際真菌群落結(jié)構(gòu)處于活躍狀態(tài)，根際真菌群落結(jié)構(gòu)有一定變動。大量研究結(jié)果表明，采用UPGAMA法進(jìn)行聚類分析時相似值高于0.6的2個群體之間具有較好的相似性[21，23]。說明時間是影響根際真菌群落結(jié)構(gòu)的主要因素之一。老黑山南坡根際真菌群落結(jié)構(gòu)相似度低于北坡，說明南坡根際真菌種群較多，可能原因是南坡溫度較高，土壤發(fā)育較快，植物生長繁殖速度快，導(dǎo)致根際真菌種群結(jié)構(gòu)較北坡復(fù)雜。東焦得布山南坡根際真菌種群結(jié)構(gòu)相似度高于北坡，可能原因是南坡溫度較高，土壤發(fā)育較快，根際真菌種群結(jié)構(gòu)變化幅度較小，從而使南坡根際真菌種群之間結(jié)構(gòu)相似度較高。南格拉球山南北坡根際真菌種群結(jié)構(gòu)相似度相同，說明根際真菌種群結(jié)構(gòu)處于一種相對穩(wěn)定的狀態(tài)。由以上結(jié)果可知，坡向也是根際真菌種群結(jié)構(gòu)的影響因素之一。

2.5 火山南北坡根際真菌多樣性

電泳圖譜中條帶的多少和亮度可反映樣品根際真菌的遺傳多樣性[25-26]。由表3可知，3座火山南坡豐富度和多樣性指數(shù)變化趨勢一致，隨著火山噴發(fā)后時間的延長豐富度和多樣性指數(shù)先降低后增加。3座火山北坡豐富度和多樣性指數(shù)變化趨勢也相同，均隨火山噴發(fā)后時間的延長先不變后增加。由表3可知，3座火山北坡和南坡的均勻度變化趨勢相同，都隨著火山噴發(fā)后時間的延長保持不變。說明，時間是影響根際真菌多樣性的因素之一。老黑山和南格拉球山豐富度和多樣性指數(shù)隨坡向的變化趨勢相同，都為南坡高于北坡。東焦得布山南北坡豐富度和多樣性指數(shù)差異不顯著，原因可能是南坡溫度較高，微生物和植物生長繁殖速度較快，土壤中營養(yǎng)成分被大量消耗，根際真菌可利用的營養(yǎng)成分減少，導(dǎo)致根際真菌多樣性降低。說明，坡向是影響根際真菌多樣性的因素之一。

圖3 五大連池火山優(yōu)勢樹種根際真菌DGGE圖譜UPGAMA聚類分析

火山名稱坡向豐富度均勻度多樣性指數(shù)老黑山南坡16.00±0.610.99±0.032.73±0.05北坡14.00±0.450.99±0.022.60±0.04東焦得布山南坡14.00±0.570.99±0.012.57±0.05北坡14.00±0.510.99±0.032.59±0.03南格拉球山南坡19.00±0.630.99±0.002.92±0.06北坡17.00±0.490.99±0.022.78±0.05

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2.6 火山土壤理化性質(zhì)和根際真菌多樣性的相關(guān)性

為揭示土壤理化性質(zhì)與根際真菌多樣性之間的關(guān)系，對各土壤理化指標(biāo)與根際真菌豐富度和多樣性指數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果如表4所示，老黑山、東焦得布山和南格拉球山南坡根際真菌豐富度和多樣性指數(shù)分別與土壤有機(jī)質(zhì)顯著相關(guān)(p<0.05)，豐富度和多樣性指數(shù)分別與土壤全氮、土壤速效氮、pH、土壤速效磷和土壤速效鉀正相關(guān)但相關(guān)性不顯著。3座火山北坡豐富度和多樣性指數(shù)分別與土壤有機(jī)質(zhì)顯著相關(guān)(p<0.05)，豐富度和多樣性指數(shù)與其他土壤理化指標(biāo)正相關(guān)但相關(guān)不顯著。

表4 五大連池火山優(yōu)勢樹種根際真菌多樣性與土壤理化性質(zhì)之間的相關(guān)性

坡向多樣性有機(jī)質(zhì)全氮速效氮pH速效磷速效鉀南坡豐富度0.919*0.9850.8700.4830.6690.642多樣性指數(shù)0.961*0.9370.9120.5240.7110.600北坡豐富度0.998*0.9720.6630.5610.8550.804多樣性指數(shù)0.973*0.9420.6920.5910.8250.833

注：*為在0.05水平顯著相關(guān)。

大量研究表明，pH是影響根際真菌生長的一個重要因子[27]，絕大多數(shù)真菌適宜生存在微酸性或中性環(huán)境中[28]。同時，Rousk et al.[29]研究發(fā)現(xiàn)與細(xì)菌相比，真菌對pH的敏感性較弱，真菌的多樣性與pH之間的相關(guān)性較小，驗證了本試驗中得到的關(guān)于根際真菌多樣性與pH之間相關(guān)性的結(jié)論。

3 結(jié)論與討論

土壤真菌具有高度分解和合成多種復(fù)雜有機(jī)物質(zhì)的能力，是生態(tài)系統(tǒng)中的重要組成部分。土壤真菌多樣性和結(jié)構(gòu)組成是衡量生態(tài)系統(tǒng)健康穩(wěn)定的重要指標(biāo)之一[30]。植物不同生長時期的根系分泌物是影響根際真菌群落多樣性的重要因素之一[31-36]。Feng et al.[37]研究發(fā)現(xiàn)土壤真菌的豐富度和多樣性指數(shù)與水分的相關(guān)性為正相關(guān)，與pH的相關(guān)性為負(fù)相關(guān)。有研究[38-39]表明，土壤真菌多樣性受土壤pH和土壤有機(jī)質(zhì)的影響。Hodge[40]的研究結(jié)果表明，AM真菌一方面能夠改良土壤，另一方面能夠促進(jìn)宿主植物對營養(yǎng)元素的吸收和利用[37]。大量研究結(jié)果表明，速效磷和速效氮在土壤中的含量過高時，能夠降低AM真菌的侵染率，減少根內(nèi)叢枝數(shù)量和土壤中孢子的數(shù)量[41]。林緣河灘沙棘灌叢的沙棘根際微生物總數(shù)和根際真菌數(shù)量高于陽坡干旱草地[42]。白愛芹等[43]研究結(jié)果表明，西坡土壤微生物AWCD值和多樣性指數(shù)高于南坡。趙彤等[44]研究結(jié)果表明，在森林植被區(qū)，陽坡SMBC和SMBN的含量高于北坡；在草原植被區(qū)規(guī)律則相反，表現(xiàn)為陽坡SMBC和SMBN的含量低于北坡。本試驗采用PCR-DGGE技術(shù)測定分析了老黑山、東焦得布山和南格拉球山南北坡根際真菌多樣性。采用儀器NanoDROP2000c測定根際微生物DNA質(zhì)量濃度和純度，結(jié)果表明，根際微生物DNA質(zhì)量濃度在50 mg/L以上，純度為1.8～2.0，說明DNA的純度滿足試驗需求。由DGGE圖譜可知，3座火山南北坡不同的優(yōu)勢樹種的根際真菌既具有廣譜性條帶又具有特異性條帶。通過Quantity One軟件對DGGE圖譜采用UPGAMA法進(jìn)行聚類分析。結(jié)果表明，老黑山、東焦得布山和南格拉球山3座火山根際真菌相似性變化趨勢為隨著火山噴發(fā)后時間的延長先不變后升高，說明時間是影響根際真菌群落結(jié)構(gòu)的主要因素之一。3座火山南坡根際真菌相似性與北坡不同，說明坡向能夠影響根際真菌群落結(jié)構(gòu)。3座火山南北坡的均勻度無明顯變化，均為0.99。3座火山南坡豐富度和多樣性指數(shù)的變化趨勢相同，均隨火山噴發(fā)后時間的延長先降低后增加；3座火山北坡豐富度和多樣性指數(shù)的變化趨勢也一致，均隨火山噴發(fā)后時間的延長先不變后增加。說明，時間能夠影響根際真菌群落多樣性。與張愛梅、白愛芹和趙彤等[42-44]研究結(jié)果相比，本試驗?zāi)媳逼仑S富度和多樣性指數(shù)無明顯的變化規(guī)律，原因可能是南北坡豐富度和多樣性指數(shù)受到時間因素的影響比坡向因素顯著。說明，坡向能夠影響根際真菌群落多樣性。采用SPSS分析軟件對土壤理化和根際真菌多樣性進(jìn)行相關(guān)性分析，3座火山南北坡豐富度和多樣性指數(shù)與土壤有機(jī)質(zhì)之間的相關(guān)性為顯著相關(guān)(p<0.05)，南北坡豐富度和多樣性指數(shù)與土壤全氮、速效氮、pH、速效磷和速效鉀的相關(guān)性為正相關(guān)，但相關(guān)性不顯著。本試驗?zāi)媳逼仑S富度和多樣性指數(shù)與pH的相關(guān)性與Feng et al.[37]研究結(jié)果不同，可能是受到母質(zhì)的影響。

綜上所述，噴發(fā)年代和坡向是影響火山優(yōu)勢樹種根際真菌群落多樣性的重要因素。同時，火山優(yōu)勢樹種根際真菌多樣性也受到土壤理化性質(zhì)的影響。本試驗結(jié)果為研究時空對根際真菌群落多樣性的影響提供了理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支持。

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Zhang Jianfeng, Zhou Qi(Jilin Agricultural University, Changchun 130118, P. R. China); Tian Lei, Ma Lina, Tian Chunjie

(Northeast Institute of Geography and Agroecology, Chinese Academy of Sciences)//Journal of Northeast Forestry University，2016,44(9)：86-92.

Wudalianchi; Temporal and spatial factors; Rhizosphere fungi; Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE)

1)長春市科技計劃項目(2013173)；吉林省教育廳項目(2016176)；吉林省自然科學(xué)基金項目(20140101017JC)。

張建峰，男，1973年5月生，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，副教授。E-mail:88657158@qq.com。

田春杰，中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，研究員。E-mail:tiancj@iga.ac.cn。

2016年1月27日。

S154.3;Q938.1

責(zé)任編輯：程 紅。