慢性蕁麻疹患者血清25羥基維生素D水平檢測及意義

李兆鳳 史同新 王君 路金明 徐敬星 黃勇 王曉羽

266071 青島大學醫(yī)學院（李兆鳳、王曉羽）；青島大學附屬醫(yī)院皮膚科（史同新、王君、路金銘）；青島市立醫(yī)院皮膚科（徐敬星、黃勇）

慢性蕁麻疹患者血清25羥基維生素D水平檢測及意義

李兆鳳 史同新 王君 路金明 徐敬星 黃勇 王曉羽

266071 青島大學醫(yī)學院（李兆鳳、王曉羽）；青島大學附屬醫(yī)院皮膚科（史同新、王君、路金銘）；青島市立醫(yī)院皮膚科（徐敬星、黃勇）

目的檢測慢性蕁麻疹患者血清25羥基維生素D水平，探討25羥基維生素D（25HVD）在慢性蕁麻疹（CU）發(fā)病中的作用。方法收集50例CU患者及40例健康對照血清，同時應(yīng)用CU癥狀評分標準（UAS）對疾病進行評分；用 ELISA測定血清25HVD、干擾素γ（IFN?γ）、白細胞介素4（IL?4）、免疫球蛋白E（IgE）水平。所得數(shù)據(jù)采用t檢驗、秩和檢驗、直線相關(guān)回歸分析進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果CU組血清25HVD水平［（15.20±7.72）μg/L］明顯低于對照組［（21.54± 8.31）μg/L，t=3.75，P＜ 0.05］，且兩組25HVD水平分布比較，差異有統(tǒng)計學意義（H=17.9，P＜0.05）。UAS評分重度組25HVD水平［（15.57±7.38）μg/L］與輕度組［（14.86±6.28）μg/L］差異無統(tǒng)計學意義（t=0.37，P＞0.05）。CU組血清IFN?γ水平明顯低于對照組（t=15.34，P＜0.05），但血清IL?4和IgE水平明顯高于對照組（t值分別為6.54，4.88，均P＜0.05）。CU組血清25HVD水平與IFN?γ水平呈正相關(guān)（r=0.738，P＜0.05），與IL?4水平呈負相關(guān)（r=-0.689，P＜0.05），與IgE水平無相關(guān)性（r=-0.271，P＞0.05）。結(jié)論 CU患者血清25HVD水平明顯降低，可能通過介導(dǎo)Th1細胞/Th2細胞失衡參與CU的發(fā)生。

蕁麻疹；維生素D；干擾素γ；白細胞介素4；免疫球蛋白E；疾病嚴重程度指數(shù)

慢性蕁麻疹（CU）發(fā)病原因及機制仍不明確。近年國外有報道維生素D與CU發(fā)病密切相關(guān)［1?2］，其機制不明。我們通過測定分析CU患者血清25羥基維生素D（25?hydroxy vitamin D，25HVD）、干擾素γ（IFN?γ）、白細胞介素4（IL?4）、免疫球蛋白E（IgE）的水平，以探討25HVD在CU發(fā)病中的作用。

一、對象

收集2014年12月至2015年4月于青島大學附屬醫(yī)院皮膚科門診就診的CU患者50例。其中男21例，女29例，年齡21～50歲（36.5±11.2）歲，病程4個月至5年。病例入選標準：①每天或幾乎每天皮膚發(fā)生風團；②病程＞6周；③無糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、維生素D類藥物以及鈣劑服用史，停用抗組胺藥≥3 d。排除標準：①病因明確的蕁麻疹；②孕婦；③肥胖者（BMI＞ 25 kg/m2）；④濕疹、接觸性皮炎、過敏性鼻炎等過敏性疾病患者；⑤有全身嚴重疾病史或自身免疫性疾病史。對照組40例來自同期在體檢中心體檢的健康人，其中男16例、女24例，年齡（36.8±10.9）歲。CU患者組與健康對照組性別（χ2=0.04，P＞0.05）和年齡（t=0.43，P＞0.05）比較，差異均無統(tǒng)計學意義。本研究經(jīng)青島大學附屬醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，患者均簽署知情同意書。

二、方法

1.CU患者病情評分及血清25HVD水平分級：用歐洲學會慢性蕁麻疹活動度評分（urticaria activity score，UAS）標準對CU患者進行評分及分組［3］，分值≤4為輕度組，＞4者為重度組。參考文獻［4?5］及試劑盒說明，本實驗以25HVD＜20 μg/L為缺乏，20～30 μg/L為不足，＞ 30 μg/L為正常。

2.血清收集及檢測：入選者3 d以上未服抗組胺藥物直接采集外周血，服用抗組胺藥物者囑其停藥后再采集，不能耐受瘙癢患者不納入實驗組。實驗組與健康對照組均在早晨空腹抽血，分離血清，在-20℃低溫冰箱保存待測。用酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定血清中的25HVD、IFN?γ、IL?4及總IgE水平。按試劑盒說明書操作。試劑盒由北京諾亞杰公司提供，為進口分裝產(chǎn)品。

3.統(tǒng)計學處理：用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行分析。計量資料數(shù)據(jù)結(jié)果以±s表示，組間計量資料比較采用獨立樣本t檢驗，兩組樣本水平分布比較采用秩和檢驗，組內(nèi)計量資料相關(guān)性分析采用直線相關(guān)回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

三、結(jié)果

1.CU組與對照組血清25HVD、IFN?γ、IL?4、IgE水平：CU組患者血清25HVD、IFN?γ水平均明顯低于對照組（均P＜0.05），IL?4、IgE水平明顯高于對照組（均P＜ 0.05）。見表1。

表1 慢性蕁麻疹（CU）患者和健康對照25HVD、IFN?γ、IL?4及IgE水平（±s）

表1 慢性蕁麻疹（CU）患者和健康對照25HVD、IFN?γ、IL?4及IgE水平（±s）

注：25HVD：25羥基維生素D；IFN?γ：干擾素γ；IL?4：白細胞介素4

分組CU組對照組t值P值例數(shù)50 40 25HVD（μg/L）15.20±7.72 21.54±8.31 3.75＜0.05 IFN?γ（ng/L）41.47±10.07 83.50±15.21 15.34＜0.05 IL?4（μg/L）5.22±2.17 2.70±1.21 6.54＜0.05 IgE（μg/L）43.26±15.27 30.22±12.95 4.88＜0.05

2.CU組UAS評分與血清25HVD水平：UAS評分重度組24例，輕度組26例。重度組25HVD水平為（15.57±7.38）μg/L，輕度組為（14.86±6.28）μg/L，差異無統(tǒng)計學意義（t=0.37，P＞0.05）。

3.CU組與對照組血清25HVD水平分布：CU組25HVD缺乏29例，不足17例，正常4例，對照組25HVD缺乏9例，不足24例，正常7例。CU組與對照組25HVD水平分布比較，差異有統(tǒng)計學意義（H=17.9，P＜0.05）。

4.CU組血清25HVD水平與IFN?γ、IL?4、IgE水平相關(guān)性：血清25HVD水平與IFN?γ水平呈正相關(guān)（r=0.738，P＜0.05），與IL?4水平呈負相關(guān)（r= ?0.689，P＜ 0.05），與IgE水平無相關(guān)性（r=?0.271，P＞0.05）。

四、討論

25HVD是維生素D的中間代謝產(chǎn)物，在循環(huán)系統(tǒng)中水平穩(wěn)定，被認為是評估維生素D狀態(tài)最可靠的指標。

我們發(fā)現(xiàn)CU患者外周血中25HVD水平明顯低于健康人，同時發(fā)現(xiàn)缺乏（25HVD ＜20 μg/L）的比例高達54%，顯著高于健康人，與既往研究一致［2］。提示維生素D缺乏可能參與CU發(fā)病。我們發(fā)現(xiàn)25HVD缺乏和不足的比例在CU患者均較高，且CU患者與健康人的25HVD分布差異有統(tǒng)計學意義。另外，不足的比例在健康人高達60%，推測原因可能是本研究在冬季和初春時開展，人們普遍接受日光照射量減少，維生素D合成減少。我們還發(fā)現(xiàn)CU患者外周血中25HVD水平與CU病情嚴重程度無關(guān)，考慮可能是25HVD水平對疾病嚴重程度無直接影響。

目前研究發(fā)現(xiàn)，CU的發(fā)生發(fā)展還與T輔助細胞亞群（Th1細胞和Th2細胞）的功能失調(diào)有關(guān)。本研究顯示，CU患者血清IFN?γ水平較健康人群明顯降低，而IL?4水平明顯高于健康人群，提示CU患者Th1/Th2失衡，與劉利君等［6］研究結(jié)果一致。我們同時發(fā)現(xiàn)，CU患者血清25HVD水平與IFN?γ水平呈正相關(guān)，與IL?4水平呈負相關(guān)。有研究顯示25HVD可介導(dǎo)其配體VDR復(fù)合體與IFN?γ啟動子區(qū)25HVD反應(yīng)成分結(jié)合，直接抑制IFN?γ表達［7］。這一結(jié)果提示，維生素D缺乏可能通過Th1/Th2失衡參與CU發(fā)生。

本研究結(jié)果顯示，盡管CU患者血清IgE水平明顯高于健康人群，但25HVD水平與IgE水平無明顯相關(guān)關(guān)系，這與Hypp?nen等［8］在過敏性疾病中的研究結(jié)果一致。但是，有關(guān)于兒童哮喘的研究顯示補充25HVD可降低血清中IgE水平和嗜酸性粒細胞計數(shù)，并推測維生素D3可通過調(diào)節(jié)IgE來增強免疫、提高療效［9］。因此，25HVD在IgE分泌合成中的作用機制及該機制在CU發(fā)病中的作用尚待研究。

［1］Saini SS.Chronic spontaneous urticaria:etiology and pathogenesis［J］.Immunol Allergy Clin North Am,2014,34（1）:33?52.DOI:10.1016/j.iac.2013.09.012.

［2］Chandrashekar L,Rajappa M,Munisamy M,et al.25?Hydroxy vitamin D levels in chronic urticaria and its correlation with disease severity from a tertiary care centre in South India［J］.Clin Chem Lab Med,2014,52（6）:e115?118.DOI:10.1515/cclm?2013?1014.

［3］Zuberbier T,Asero R,Bindslev?Jensen C,et al.EAACI/GA（2）LEN/EDF/WAO guideline:definition,classification and diagnosis of urticaria［J］.Allergy,2009,64（10）:1417?1426.DOI:10.1111/j.1398?9995.2009.02179.x.

［4］Durazo?Arvizu RA,Dawson?Hughes B,Sempos CT,et al.Three?phase model harmonizes estimates of the maximal suppression of parathyroid hormone by 25?hydroxyvitamin D in persons 65 years of age and older［J］.J Nutr,2010,140（3）:595 ?599.DOI:10.3945/jn.109.116681.

［5］Rorie A,Goldner WS,Lyden E,et al.Beneficial role for supple?mental vitamin D3 treatment in chronic urticaria:a randomized study［J］.Ann Allergy Asthma Immunol,2014,112（4）:376?382.DOI:10.1016/j.anai.2014.01.010.

［6］劉利君,陸潔,孫立新,等.卡介菌多糖核酸對慢性蕁麻疹患者外周血淋巴細胞分泌干擾素γ和白介素4的影響［J］.中華皮膚科雜志,2013,46（10）:740?742.DOI:10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2013.10.015.Liu L,Lu J,Sun X,et al.Influence of polysaccharide nucleic acid fraction of bacillus Calmette?Guerin on the secretion of interferon?γ and interleukin?4 by peripheral blood lymphocytes from patients with chronic urticaria［J］.Chin J Dermatol,2013,46（10）:740?742.DOI:10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2013.10.015.

［7］Boonstra A,Barrat FJ,Crain C，et al.1alpha,25?Dihydroxyvitamin d3 has a direct effect on naive CD4+T cells to enhance the development of Th2 cells［J］.J Immunol,2001,167（9）:4974 ?4980.DOI:10.4049/jimmunol.167.9.4974.

［8］Hypp?nen E,Berry DJ,W jst M,et al.Serum 25?hydroxyvitamin D and IgE ?a significant but nonlinear relationship［J］.Allergy,2009,64（4）:613?620.DOI:10.1111/j.1398?9995.2008.01865.x.

［9］Hatami G,Ghasemi K,Motamed N,et al.Relationship between vitamin D and childhood asthma:a case?control study［J］.Iran J Pediatr,2014,24（6）:710?714.

Detection of serum levels of 25?hydroxy vitamin D in patients with chronic urticaria and its clinical significance

Li Zhaofeng,Shi Tongxin,Wang Jun,Lu Jinming,Xu Jingxing,Huang Yong,Wang Xiaoyu
Medical College of Qingdao University,Qingdao 266071,China（Li ZF,Wang XY）;Department of Dermatology,The Affiliated Hospital of Qingdao University,Qingdao 266003,China（Shi TX,Wang J,Lu JM）;Department of Dermatology,Qindao Municipal Hospital,Qingdao 266011,China（Xu JX,Huang Y）

ObjectiveTo measure serum levels of 25?hydroxyvitamin D（25HVD）in patients with chronic urticaria（CU）,and to explore its role in the occurrence of CU.MethodsPeripheral blood samples were obtained from 50 patients with CU and 40 healthy controls.The urticaria activity score（UAS）was used to assess the severity of CU and to group the patients with CU.Enzyme?linked immunosorbent assay（ELISA）was performed to measure the serum levels of 25HVD,interferon?γ（IFN?γ）,interleukin?4（IL?4）and immunoglobulin E（IgE）.Statistical analysis was carried out byttest,rank sum test and linear correlation analysis.ResultsThe serum level of 25HVD was significantly lower in the patients with CU than in the healthy controls（15.20±7.72vs.21.54±8.31 μg/L,t=3.75,P＜ 0.05）.Moreover,there was a significant difference in the distribution of serum 25HVD levels between the patients and healthy controls（H=17.9,P＜ 0.05）.However,no significant difference was observed in the serum level of 25HVD between severe and mild CU groups（15.57±7.38vs.14.86±6.28 μg/L,t=0.37,P＞0.05）.Compared with the control group,the patient group showed significantly decreased serum levels of IFN?γ（t=15.34,P＜ 0.05）,but increased serum levels of IL?4 and IgE（t=6.54,4.88,respectively,bothP＜ 0.05）.Among the patients with CU,the serum level of 25HVD was positively correlated with that of IFN?γ（r=0.738,P＜ 0.05）,but negatively correlated with that of IL?4（r=-0.689,P＜ 0.05）,and uncorrelated with that of IgE（r=-0.271,P＞0.05）.ConclusionThe serum level of 25HVD evidently decreased in patients with CU,and it may participate in the occurrence of CU by mediating the Th1/Th2 imbalance.

Urticaria;Vitamin D;Interferon?gamma;Interleukin?4;Immunoglobullin E;Severity of illness index

Shi Tongxin,Email:Shitx2006@163.com

2015?11?04）

（本文編輯：尚淑賢）

史同新，Email：Shitx2006@163.com

10.3760/cma.j.issn.0412?4030.2016.09.012

青島市民生科技計劃項目（14?2?3?19?nsh）

Fund program:Qingdao Livelihood,Science and Technology Project（14?2?3?19?nsh）