經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療終末期肝病的臨床療效

趙世民， 鄭林華， 韓 英， 蘇小青， 侯靜芳

（1.陜西省西安大興醫(yī)院， 陜西 西安 710016 2.陜西省西安市西京醫(yī)院， 陜西 西安 710032 3.陜西省黃陵縣人民醫(yī)院， 陜西 黃陵 727000 4.陜西省西安市第一醫(yī)院， 陜西 西安 710002）

經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療終末期肝病的臨床療效

趙世民1， 鄭林華2， 韓 英2， 蘇小青3， 侯靜芳4

（1.陜西省西安大興醫(yī)院， 陜西 西安 710016 2.陜西省西安市西京醫(yī)院， 陜西 西安 710032 3.陜西省黃陵縣人民醫(yī)院， 陜西 黃陵 727000 4.陜西省西安市第一醫(yī)院， 陜西 西安 710002）

目的：觀察經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療乙型肝炎相關(guān)終末期肝病（HBV -ELD）的臨床療效。方法：選擇100例經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療的HBV-ELD患者作為觀察組，另選擇同時(shí)期健康體檢者50名作為對照組；對比觀察組治療前后的肝功指標(biāo)，測定兩組的IFN-γ、IL-6、IL-10水平并進(jìn)行比較。結(jié)果：治療12月后，觀察組的白蛋白（Alb）、膽固醇（CHOL）、凝血酶原活動(dòng)度（PTA）、MELD評分和Child-pugh評分均較治療前顯著改善（P均＜0.05）；觀察組治療前后的IFN-γ無顯著差異（P＞0.05），與對照組比較也無顯著差異（P＞0.05）；觀察組治療12月后的IL-6、IL-10水平較治療前顯著降低（P均＜0.05）。結(jié)論：經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療HBVELD療效顯著，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)患者機(jī)體免疫微環(huán)境、抑制肝臟炎癥反應(yīng)有關(guān)。

終末期肝??； 乙型肝炎病毒（HBV）； 自體外周血干細(xì)胞

本研究采用肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療HBV-ELD，獲得了較好的臨床效果。現(xiàn)將有關(guān)資料整理報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇我院2012年12月至2014年12月收治的100例HBV-ELD患者作為研究對象，所有

患者入組前均經(jīng)臨床、肝功能生物化學(xué)、影像學(xué)以及既往病史檢測確診為HBV失代償期肝硬化。排除：合并其他肝病、感染性疾病或惡性腫瘤等疾??；入組前1月合并曲張靜脈出血、自發(fā)性腹膜炎、活動(dòng)性肝性腦病等嚴(yán)重并發(fā)癥。包括，男性76例，女性24例；年齡35～58歲，平均（45.3±5.4）歲。另選擇同時(shí)期健康體檢者50例作為對照組，男性31例，女性19例；年齡37～59歲，平均（45.5±5.7）歲。兩組在性別比例和年齡方面的差異不顯著（P＞0.05），具有可比性。研究方法符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)并報(bào)經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理會(huì)研究同意，所有入組患者與患者充分溝通，患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 治療方法：觀察組患者于接受干細(xì)胞移植前7d給予抗乙肝病毒藥物治療，將患者HBV載量控制在檢測下限。采用粒細(xì)胞集落刺激因子（GCSF）動(dòng)員患者自體外周血干細(xì)胞（PBSCs），體外富集并經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注至患者體內(nèi)，術(shù)畢拔出穿刺導(dǎo)管，局部按壓15min后送至病房。

1.3 觀察內(nèi)容：檢測并記錄觀察組治療前和治療后12月的白蛋白（Alb）、膽固醇（CHOL）、凝血酶原活動(dòng)度（PTA）、MELD評分和Child-pugh評分，檢測對照組與觀察組治療前和治療后12月的干擾素-γ（IFN-γ）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：本組數(shù)據(jù)采用SPSS15.0軟件包進(jìn)行處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，治療前后比較采用相關(guān)樣本t檢驗(yàn)，均以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 肝功能改善情況：治療12月后，觀察組的Alb、CHOL、PTA、MELD評分和Child-pugh評分均較治療前顯著改善（P均＜0.05），見表1。

表1 觀察組的肝功能改善情況比較（±s）

時(shí)間Alb（g/L）CHOL（mmoL/L）PTA（%）MELD評分（分）Child-pugh評分（分）治療前29.51±3.822.96±0.9851.48±15.4913.61±4.258.72±3.65治療后12月40.05±5.463.72±0.9772.48±14.257.96±2.165.78±2.06 t 5.9365.3296.9355.09376.295 P 0.0020.0020.0010.0020.001

2.2 細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)效果：觀察組治療前后的IFN-γ差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），與對照組比較也差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組治療前的IL-6、IL-10與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組治療12月后的IL-6、IL-10水平較治療前降低差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組治療后的IL-6與對照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但I(xiàn)L-10差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 觀察組患者治療后的細(xì)胞因子變化情況（±s）

表2 觀察組患者治療后的細(xì)胞因子變化情況（±s）

a觀察組治療前與對照組比較；b觀察組治療后與對照組比較；c觀察組治療前與治療后比較

時(shí)間IFN-γ（pg/mL）對照組 觀察組IL-6（pg/mL）對照組 觀察組IL-10（pg/mL）對照組 觀察組治療前3.0±0.62.0±0.51.4±0.513.2±5.23.5±1.222.3±6.3治療后3.4±0.81.8±0.85.4±1.7 ta1.6355.6385.932 Pa0.3620.0020.002 tb1.5621.9354.935 Pb0.3320.4290.003 tc5.9345.6385.332 Pc0.0010.0010.001

3 討 論

干細(xì)胞是具有無限期自我更新、多向分化潛能的細(xì)胞群體，雖然其存在數(shù)量很少，但其作用強(qiáng)大。干細(xì)胞能夠在特定環(huán)境下或誘導(dǎo)下分化成各種細(xì)胞，在體內(nèi)可以發(fā)育成為功能完善的組織或器官，且在特定微環(huán)境下可以修復(fù)損傷。干細(xì)胞的這種特性為促進(jìn)肝細(xì)胞細(xì)胞分化、修復(fù)肝功能提供了可能。根據(jù)分化潛能和來源的不同，干細(xì)胞分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞，而外周血干細(xì)胞便屬于成體干細(xì)胞。李翠瑩等［1］采用臍血干細(xì)胞與自體外周血干細(xì)胞移植治療有肝硬化腹水的慢性重癥肝病，2種方法治療后的患者白蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、總膽紅素均較治療前有大幅度改善，且2種方法治療后的上述3指標(biāo)比較未見顯著差異，研究認(rèn)為，臍血干細(xì)胞與自體外周血干細(xì)胞治療慢性重癥肝病的效果類似。李梅等［2］對比了自體外周血干細(xì)胞移植與綜合內(nèi)科方法治療失代償期肝硬化，治療后24周，干細(xì)胞移植組患者的白蛋白、凝血酶原時(shí)間、Child評分均較治療前明顯改善，且優(yōu)于綜合內(nèi)科方法，認(rèn)為經(jīng)肝動(dòng)脈自體外周血干細(xì)胞移植治療失代償期肝硬化可在一定程度上改善患者的低蛋白血癥及凝血功能，微創(chuàng)、安全、有效。其他相關(guān)報(bào)道也得出與之類似的結(jié)果［3］。表明經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療晚期肝病療效確切。

選擇自體外周血干細(xì)胞治療晚期肝病具有以下優(yōu)點(diǎn)：向肝細(xì)胞分化的多能性和專能性，取材容易，損傷小，無移植排斥反應(yīng)，自體移植成功率高。本研究采用自體外周血干細(xì)胞經(jīng)肝動(dòng)脈輸注至肝臟內(nèi)部治療HBV-ELD。結(jié)果顯示，觀察組的Alb、CHOL、PTA、MELD評分和Child-pugh評分均較治療前顯著改善，表明自體外周血干細(xì)胞治療HBV-ELD可以改善肝臟合成功能，減輕終末期肝病的癥狀，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)改善患者生存質(zhì)量、延長患者生存時(shí)間的目的。目前，人們對于干細(xì)胞移植能有效改善終末期肝病患者肝功能的作用機(jī)制尚不明確。本研究觀察了HBV-ELD患者與健康對照組患者的IFN-γ、IL-6、IL-10，嘗試從干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制角度分析干細(xì)胞移植改善終末期肝病患者肝功能的作用機(jī)理。研究結(jié)果顯示，觀察組治療前后的IFN-γ水平與健康對照組相比，均不存在顯著差異，而觀察組治療前的IL-6、IL-10均明顯高于對照組，治療12月后，觀察組的IL-6、IL-10水平出現(xiàn)了大幅度降低，且與對照組相比也未見明顯差異，提示自體外周血干細(xì)胞移植后能夠促進(jìn)抗炎細(xì)胞的分化，調(diào)節(jié)機(jī)體的炎癥反應(yīng)。由此，我們推測，抑制炎性細(xì)胞因子的生成、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫微環(huán)境的平衡可能是改善患者肝功能的重要作用機(jī)制。IL-6是重要的促炎因子，可由T細(xì)胞、B細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞等多種細(xì)胞產(chǎn)生。IL-6通過促進(jìn)炎癥反應(yīng)來參與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)展。有研究結(jié)果顯示，隨著HBV-DNA載量的增高，IL-6等促炎因子均明顯升高，IL-6等促炎因子隨著肝臟損傷呈進(jìn)行性升高，并與損傷程度呈正相關(guān)，認(rèn)為炎性因子在乙肝的發(fā)病過程中有重要作用，可以將其作為了解乙肝體內(nèi)免疫狀態(tài)的指標(biāo)。這與本研究的結(jié)果比較類似。在本研究中，干細(xì)胞移植之后，觀察組抗炎因子IL -10出現(xiàn)了明顯下降，因?yàn)殡S著炎癥反應(yīng)被抑制，IL-10通過自我調(diào)節(jié)也逐漸下降以維持機(jī)體的免疫平衡。綜上所述，我們認(rèn)為，經(jīng)由肝動(dòng)脈輸注自體外周血干細(xì)胞移植治療HBV-ELD療效顯著，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)患者機(jī)體免疫微環(huán)境、抑制肝臟炎癥反應(yīng)有關(guān)。

［1］ 李翠瑩，趙景蘭，張利，等.臍血與自體外周血干細(xì)胞移植治療肝硬化腹水的療效比較［J］.中國輸血雜志，2010，23 （3）：182～184.

［2］ 李梅，黨雙鎖，田長印，等.自體外周血干細(xì)胞移植治療失代償期肝硬化［J］.肝臟，2015，18（4）：269～272.

［3］ 郭曉鐘，王迪，邵曉冬，等.自體骨髓干細(xì)胞移植治療失代償期肝硬化［J］.中華消化雜志，2009，29（7）：434.

Clinical Efficacy of Autologous Peripheral Blood Stem Cell Transplantation by Hepatic Artery Infusion in Treating End-stage Liver Diseases

ZHAO Shimin， et al
（Daxing Hospital of Xi'an，Shanxi Xi'an710016，China）

Objective：To observe the clinical efficacy of autologous peripheral blood stem cell transplantation by hepatic artery infusion in treating HBV-ELD.Methods：100 cases with HBV-ELD treated with autologous peripheral blood stem cell transplantation were selected as the observation group，and 50 healthy examiners were selected as the control group.The liver function indexes of the observation group before and after treatment were compared.IFN-γ，IL-6 and IL-10 level of two groups were determined and compared.Results：After 12-month treatment，Alb，CHOL，PTA，MELD score and Child-pugh score of the observation group improved evidently compared with that before treatment（P＜0.05）.IFN-γ before and after treatment of the observation group had no evident difference（P＞0.05），which had no evident difference compared with that of the control group（P＞0.05）.IL-6 and IL-10 level of the observation group reduced evidently after 12-month treatment（P＜0.05）.Conclusion：Autologous peripheral blood stem cell transplantation by hepatic artery infusion in treating HBV-ELD has evident efficacy.The mechanism may have relationship with adjusting organic immunological environment of the patients and inhibiting liver inflammation.

End-stage liver diseases； HBV； Autologous peripheral blood stem cell

1006-6233（2016）09-1411-04

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2016.09.002

國家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目，（編號(hào)：81400646）