李曉梅 ,閆佰鵬 ,史兆國 ,趙德寶 ,巨玉鑫
(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,甘肅 蘭州 730070;2.甘肅省康樂縣草灘鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,甘肅 康樂 731500)
肉鴿法氏囊、脾臟和胸腺的形態(tài)學(xué)、組織學(xué)觀察
李曉梅1,閆佰鵬1,史兆國1,趙德寶2,巨玉鑫1
(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,甘肅 蘭州 730070;2.甘肅省康樂縣草灘鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,甘肅 康樂 731500)
[目的]為今后研究肉鴿免疫功能提供其免疫器官的形態(tài)學(xué)、組織學(xué)觀察依據(jù)。[方法]選取40日齡的肉鴿,摘除法氏囊、脾臟和胸腺進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察;通過制作常規(guī)石蠟切片,蘇木精—伊紅染色,顯微照相進(jìn)行組織學(xué)觀察。[結(jié)果]40日齡肉鴿法氏囊黏膜上皮完整,黏膜固有層腔上囊小結(jié)數(shù)量減少,體積變小,中間出現(xiàn)空泡,淋巴細(xì)胞減少;法氏囊小結(jié)中皮質(zhì)和髓質(zhì)界限不明顯,小結(jié)周圍有大量的結(jié)締組織增生,導(dǎo)致法氏囊免疫功能降低。脾臟各組織結(jié)構(gòu)發(fā)育趨于完善,細(xì)胞排列緊密。胸腺髓質(zhì)中淋巴細(xì)胞較少,可見胸腺小體;皮質(zhì)中淋巴細(xì)胞較多。[結(jié)論]40日齡的肉鴿法氏囊開始萎縮,免疫功能降低,而脾臟和胸腺免疫功能正常。
肉鴿;法氏囊;脾臟;胸腺;形態(tài)學(xué);組織學(xué);石蠟切片;觀察
1.1 實(shí)驗(yàn)動物40日齡健康肉鴿16只(公、母各半),頸靜脈放血處死,解剖并觀察其法氏囊、脾臟和胸腺形態(tài);之后摘取法氏囊、脾臟和胸腺,剔除脂肪后放入10%的中性福爾馬林溶液中固定保存[1],備用。
1.2 試驗(yàn)方法
1.2.1 主要儀器與試劑:石蠟切片機(jī)(Leica RM2235型,德國徠卡儀器公司)、光學(xué)顯微鏡、數(shù)碼顯微鏡(BA210型,麥克奧迪實(shí)業(yè)集團(tuán)有限公司)、蘇木精染色液、伊紅染色液、甲醛、二甲苯和乙醇等。
1.2.2 石蠟切片制作:取出已固定好的法氏囊、脾臟和胸腺組織進(jìn)行修塊,取最大橫截面,經(jīng)自來水充分沖洗(過夜)、梯度乙醇(85%→95%→95%→100%→100%)脫水,之后經(jīng)過如下處理后制成石蠟切片:浸蠟,石蠟包埋,連續(xù)切片(切片厚5 μm),蘇木精—伊紅染色,中性樹膠封片。使用光學(xué)顯微鏡對法氏囊、脾臟和胸腺組織切片進(jìn)行觀察并用數(shù)碼顯微鏡拍照[2]。
2.1 形態(tài)學(xué)觀察
2.1.1 肉鴿法氏囊形態(tài)學(xué)觀察:法氏囊位于泄殖腔后上方,開口于肛道。外觀長橢圓形,呈乳白色[3]。
2.1.2 肉鴿脾臟形態(tài)學(xué)觀察:脾臟附在肌胃和腺胃的連接處,脾質(zhì)軟,外觀為圓形或鈍三角形,呈棕紅色或紫紅色[3-4]。
圖1 40日齡肉鴿法氏囊
2.1.3 肉鴿胸腺形態(tài)學(xué)觀察:胸腺位于頸部兩側(cè)皮膚之下,為不規(guī)則的兩串[4-5],呈淡黃色或淡紅色,沿頸靜脈分布,直到胸腔入口的甲狀腺上。
2.2 組織學(xué)觀察
2.2.1 肉鴿法氏囊組織學(xué)觀察:母鴿與公鴿的法氏囊組織結(jié)構(gòu)無明顯差異(見圖1)。40日齡肉鴿法氏囊黏膜上皮完整,黏膜固有層腔上囊小結(jié)(如圖1C中A1箭頭所指)數(shù)量變少,體積變小,中間出現(xiàn)空泡(如圖1B中A2箭頭所指),淋巴細(xì)胞減少。法氏囊小結(jié)中皮質(zhì)和髓質(zhì)界限不明顯,周圍大量的結(jié)締組織增生(如圖1D中A3箭頭所指)。
2.2.2 肉鴿脾臟組織學(xué)觀察:母鴿與公鴿脾臟組織結(jié)構(gòu)無明顯差異(見圖2)。40日齡肉鴿脾臟的白髓和紅髓較明顯,脾小結(jié)內(nèi)淋巴細(xì)胞較多,排列緊密,有細(xì)胞呈同心圓排列(如圖2B中B1和B2箭頭所指),中心明顯。有不發(fā)達(dá)的脾小梁,或無真正的脾小梁。
2.2.3 肉鴿胸腺組織學(xué)觀察:母鴿與公鴿胸腺的組織結(jié)構(gòu)無明顯差異(見圖3)。40日齡肉鴿胸腺表面被覆有結(jié)締組織構(gòu)成的被膜,被膜深入實(shí)質(zhì)內(nèi)將其分成許多不完整的小葉。胸腺小葉大小不等,可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),周圍染色較深的為皮質(zhì)(如圖3C中C1所指),中央染色淺的為髓質(zhì)[4](如圖3C中C2所指)。
3.1 法氏囊法氏囊是肉鴿的體液免疫中樞器官,是B淋巴細(xì)胞分化發(fā)育的主要場所,也是免疫球蛋白基因分化及基礎(chǔ)基因庫形成和擴(kuò)展所必需的[5-6]。法氏囊壁由內(nèi)向外依次為黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜[7]。肉鴿法氏囊在40日齡時較發(fā)達(dá)。法氏囊黏膜上皮完整,黏膜固有層法氏囊小結(jié)數(shù)量變少,體積變小,中間出現(xiàn)空泡(見圖1B),淋巴細(xì)胞減少[8]。法氏囊小結(jié)中皮質(zhì)和髓質(zhì)界限不明顯,周圍大量的結(jié)締組織增生,導(dǎo)致法氏囊免疫功能降低,其中淋巴細(xì)胞數(shù)量大量減少逐漸變?yōu)榻Y(jié)締組織。與雞比較,肉鴿法氏囊外形呈長橢圓狀,雞法氏囊呈球形,肉鴿法氏囊組織結(jié)構(gòu)與雞相似,僅肉鴿固有層內(nèi)淋巴小結(jié)相對較為密集。
圖2 40日齡肉鴿脾臟
圖3 40日齡肉鴿胸腺
3.2 脾臟脾臟是肉鴿最大的淋巴器官。脾的表面被覆漿膜,漿膜下是致密結(jié)締組織和少量的平滑肌構(gòu)成的被膜,被膜伸進(jìn)實(shí)質(zhì)形成不發(fā)達(dá)的脾小梁,或無真正的小梁,僅在小梁動脈和靜脈外包有少量的結(jié)締組織[9]。脾的實(shí)質(zhì)由白髓和紅髓相間構(gòu)成,2種結(jié)構(gòu)所占的比例大致相等,沒有明顯的邊緣區(qū)(見圖2D),白髓由脾小結(jié)和動脈周圍淋巴組織鞘構(gòu)成。肉鴿和家禽一樣,動脈周圍淋巴鞘的分布范圍廣泛,它不僅環(huán)繞中央動脈周圍,而且部分分布到支動脈周圍。動脈周圍淋巴鞘有大量的小淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和一些漿細(xì)胞,脾小結(jié)的數(shù)量較少,其發(fā)生中心主要是B淋巴細(xì)胞[10]。紅髓充滿白髓之間,由脾竇和脾索構(gòu)成。脾索是相鄰血竇之間的結(jié)構(gòu),切片上呈條索狀,主要由網(wǎng)狀結(jié)締組織構(gòu)成[11]。肉鴿與雞相比,其脾臟組織結(jié)構(gòu)與雞的脾臟組織結(jié)構(gòu)相似,但脾小梁不如雞的發(fā)達(dá),且雞的脾臟實(shí)質(zhì)白髓和紅髓分界不明顯。其作用主要與免疫功能有關(guān),儲存血液作用很小。與哺乳動物相比,肉鴿的脾臟組織結(jié)構(gòu)有明顯差異。
3.3 胸腺胸腺是肉鴿的細(xì)胞免疫器官,表面被覆有結(jié)締組織構(gòu)成的被膜,被膜深入實(shí)質(zhì)內(nèi)將其分成許多不完整的小葉[12]。胸腺小葉大小不等,可分為皮質(zhì)和髓質(zhì),周圍染色較深的為皮質(zhì),中央染色淺的為髓質(zhì)(見圖3C)。皮質(zhì)由上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成支架,網(wǎng)狀細(xì)胞體積較大,胞質(zhì)淡染,網(wǎng)眼內(nèi)充滿中等大小的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,淋巴細(xì)胞數(shù)量多,故皮質(zhì)著色深。皮質(zhì)部小葉間隔明顯,間隔內(nèi)僅見小的毛細(xì)血管[13]。髓質(zhì)內(nèi)上皮網(wǎng)狀細(xì)胞較多,淋巴細(xì)胞相對減少,故著色淺,小葉間隔缺乏,髓質(zhì)融合,髓質(zhì)內(nèi)有含有均勻嗜酸性物質(zhì)的球形結(jié)構(gòu),髓質(zhì)內(nèi)血管豐富,巨噬細(xì)胞數(shù)量較多[14]。與雞相比,其組織結(jié)構(gòu)與雞胸腺組織結(jié)構(gòu)相似,僅胸腺小體不典型。
[1]王錫樂,劉艷華,賈玉萍,等.不同日齡商品代雛雞胸腺、法氏囊、脾臟重量與體重比動態(tài)規(guī)律[J].動物科學(xué)與動物醫(yī)學(xué),2004,9(21):1-4.
[2]張勇.蛋雞和肉雞生長發(fā)育過程中胸腺組織結(jié)構(gòu)、T細(xì)胞及其亞群分布的研究[D].呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.
[3]楊蓉生,劉群.鴿子法氏囊和脾臟的形態(tài)組織學(xué)觀察[J].西南民族大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2006,32(5):1-4.
[4]方靜,崔恒敏,彭西,等.雛鴨胸腺生長指標(biāo)的動態(tài)觀測及組織學(xué)觀察 [N]. 中國獸醫(yī)科學(xué),2006,36(5):401-405.
[5]孫圣蘭,江清艷,傅偉龍.法氏囊及法氏囊素的研究概況[J].畜禽業(yè),2002(3):14-15.
[6]侯勇.雞法氏囊發(fā)育形態(tài)學(xué)研究[D].武漢:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2013(4):17-19.
[7]董淑珍,沈萍,楊彩然,等.中草藥對雞法氏囊和胸腺淋巴細(xì)胞的組織學(xué)觀察 [J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(16):9728-9729.
[8]ABBATE F,PFARRER C,JONES C J,et al.Agedependent changes in the pigeon bursa of Fabricius vasculature:a comparative study using light microscopy and scanning electron microscopy of vessel casts [J].J Anat,2007,211(3):387-398.
[9]王水蓮,劉進(jìn)輝,孫志良,等.不同時期雞法氏囊與脾臟的組織學(xué)觀察[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2005,31(2):199-202.
[10]MOORE R W,HARGIS B M,PORTER T E,et al.Ovoinhibitor in the chicken bursa ofFabricius:identification,isolation,and localization [J].Cell Tissue Res,2004,317(3):247-251.
[11]張英楠,楊樹寶,楊柳,等.雞脾臟組織結(jié)構(gòu)早期發(fā)育的動態(tài)觀察[J].中國家禽,2010,32(3):14-15.
[12]王云.雞胸腺發(fā)育形態(tài)學(xué)研究[D].湖北:華中農(nóng)業(yè)大學(xué),2010(5):14-22.
[13]馮昕煒,努爾勝·科肯,那孜古麗·阿曼太.雉雞免疫器官組織學(xué)觀察[J].中國畜牧獸醫(yī),2011,38(12):186-187.
[14]李升和,顧有方,王玨,等.硼中毒對固始雞生長性能及胸腺發(fā)育的影響 [J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2005,28(1):135-138.
Morphological and Histological Observation on Bursa of Fabricius,Spleen and Thymus of Boiler Pigeon
LI Xiao-mei1,YAN Bai-peng1,SHI Zhao-guo1,ZHAO De-bao2,JU Yu-xin1
(1.College of Animal Science and Technology,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China;2.Animal Husbandry and Veterinary Medicine Working Station of Caotan Township in Kangle County of Gansu Province,Kangle 731500,China)
[Objective]To provide morphological and histological foundation for the further study on immune function of immune organs of boiler pigeon. [Methods]The 40-day-old boiler pigeons were chosen in this study,and the main immune organs,including bursa of Fabricius,spleen and thymus,were collected to prepare paraffin sections by HE staining method and were morphologically observed and microphotographed.[Results]The structure of mucosa epithelium of bursa of Fabricius was intact.The number of nodule in lamina propria layer of bursa of Fabricius mucosa was fewer,and the size of the nodule was smaller.In lamina propria layer,the vacuoles were observed and the number of lymphocytopenia was fewer.The margin between the cortex and medulla of the nodule in bursa of Fabricius was not obvious,and the proliferation of a large number of connective tissue surrounding the nodule was observed,which resulted in the immune function reduction of bursa of Fabricius.The development of the tissues and structures of spleen were mature,and the cells arranged closely.The number of lymphocytopenia in the medulla of thymus was fewer,and the thymic corpuscle was observed.The number of lymphocytopenia in the cortex was more.[Conclusion]The bursa of Fabricius of 40-day-old boiler pigeon was atrophied,and its immune function was reduced.The immune function of spleen and thymus was normal.
boiler pigeon;bursa of Fabricius;spleen;thymus;morphology;histology;observation
Q954.6;S858.392.16
A文章順序編號:1672-5190(2016)01-0012-04
2015-12-29
項(xiàng)目來源:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)《禽生產(chǎn)學(xué)》重點(diǎn)課程建設(shè)項(xiàng)目資助。
李曉梅(1990—),女,碩士研究生,主要學(xué)習(xí)專業(yè)為動物養(yǎng)殖學(xué)。
史兆國(1966—),男,教授,碩士生導(dǎo)師,主要從事動物生產(chǎn)學(xué)研究工作。
(責(zé)任編輯:錢英紅)