天水市2014～2015年羊小反芻獸疫免疫抗體檢測與分析

成小莉，王美菊，王玙

（天水市動物疫病預防控制中心，甘肅天水 741000）

天水市2014～2015年羊小反芻獸疫免疫抗體檢測與分析

成小莉，王美菊，王玙

（天水市動物疫病預防控制中心，甘肅天水 741000）

目的：掌握天水市羊小反芻獸疫免疫抗體水平和效果；方法：采用阻斷ELISA方法，對2014～2015年采自85個養(yǎng)殖場（戶）的1 340份羊血清進行PPR抗體檢測。結果：個體陽性率為79.25%，免疫合格養(yǎng)殖場（戶）72個，合格率為84.71%。檢測養(yǎng)殖場47個，場免疫合格率為91.49%，散養(yǎng)戶38個，散養(yǎng)戶免疫合格率為74.36%。結論：場戶群體和個體免疫抗體合格率均達到農業(yè)部要求70%以上的標準要求。

小反芻獸疫（PPR）；阻斷ELISA；抗體檢測

小反芻獸疫（PPR）是由小反芻獸疫病毒引起的小反芻獸的一種急性病毒性傳染病，以發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征。世界動物衛(wèi)生組織將其列為A類動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。1993年，該病在中東和南亞出現(xiàn)，2003年在印度和尼泊爾爆發(fā)流行，全年有29個國家官方報告發(fā)生PPR疫情，其中亞洲國家11個。截止到2007年12月，全球累計有39個國家（地區(qū)）報告存在PPR疫情，其中16個為亞洲國家（地區(qū)）。2007年，我國西藏首次發(fā)現(xiàn)并確診PPR疫情。據(jù)農業(yè)部獸醫(yī)局疫情公布數(shù)據(jù)顯示，2013年12月～2014年5月，全國先后有21個省市爆發(fā)PPR疫情。我省古浪縣于2014年1月發(fā)生一起羊疫情，死亡111只，撲殺951只羊，造成了嚴重的經濟損失。面對嚴峻的周邊疫情形勢，天水市小反芻獸疫免疫計劃對全市重點地區(qū)飼養(yǎng)的羊只實施了疫苗強制免疫，實行每年兩次集中免疫，每月一次補針免疫。為了掌握和評價天水市PPR免疫效果，筆者采集血清樣品進行了抗體監(jiān)測，現(xiàn)將檢測結果報告如下。

1　材料與方法

1.1樣品來源

血清樣品采自全市進行過PPR弱毒疫苗免疫且免疫時間在1月以上的85個養(yǎng)殖場戶（47個規(guī)模場、38個散養(yǎng)戶）。

1.2樣品采集時間

2014年11月140份、2015年2月900份、2015年5月108份、2015年11月192份，共計1340份（養(yǎng)殖場1156份，散養(yǎng)戶184份）。

1.3疫苗

新疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產的小反芻獸疫活疫苗，疫苗批號為：2014052-1和2015023-1。

1.4檢測試劑

中國動物衛(wèi)生與流行病學中心國家外來動物疫病診斷中心生產的小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測試劑盒，批號為201418和201504。

1.5試驗方法

用阻斷ELISA抗體檢測試劑盒說明書進行檢測。

1.5.1加樣在A1和B1孔中加入陽性血清50μL/孔，在C1和D1孔中加入陰性血清50μL/孔，在E1和F1孔中加入稀釋液50μL/孔；在其他樣品孔中加入稀釋液25μL/孔，在所有樣品孔中加入分別對應的待檢血清25μL/孔。

1.5.2溫育37℃孵育60min，冼板4次，最后一次拍干。

1.5.3加酶結合物按1∶5倍稀釋酶標單抗，每孔加50μL/孔，37℃孵育30 min；冼板4次，最后一次拍干。

1.5.4加底物每孔加底物溶液50μL；室溫避光10～15 min。

1.5.5測OD值每孔加終止液50μL，用450 nm波長測定各孔OD450 nm值。

1.6結果判定

按如下公式計算阻斷率（PB）：

當陽性對照阻斷率（PB）大于60，陰性對照阻斷率（PB）小于或等于40，試驗有效。計算待檢樣品阻斷率（PB），待檢樣品阻斷率（PB）大于50判為陽性，小于等于50則判為陰性。統(tǒng)計陽性樣品數(shù)即為免疫合格數(shù)。

2　結果

2.1個體檢測結果

2014～2015年，共對85個場（戶）的血清樣品分4次進行了PPR抗體檢測，檢測1 340份，陽性1 062份，陽性率為79.25%；其中規(guī)模場檢測1 156份，陽性935份，陽性率80.88%；散養(yǎng)戶184份，陽性127份，陽性率69.02%；結果詳見表1。

2.3各時間段檢測結果

2014年11月、2015年2月、2015年5月和2015年11月檢測份數(shù)依次分別140份、900份、108份和192份，陽性份數(shù)依次分別為123份、702份、79份和158份，陽性率依次分別為87.86%、78.00%、73.15%和82.29%。

3　結果分析與討論

表1　天水市羊小反芻獸疫免疫檢測結果統(tǒng)計

2.2場（戶）免疫合格情況

85個場（戶）中72個場（戶）免疫抗體陽性率在70%以上，合格率為84.71%。47個規(guī)模場中43個場抗體陽性率在70%以上，合格率為91.49%；38戶散養(yǎng)戶中29戶抗體陽性率在70%以上，合格率為74.36%；結果詳見表2。

表　天水市規(guī)模場和散養(yǎng)戶羊群體免疫合格結果統(tǒng)計

檢測結果顯示，85個養(yǎng)殖場（戶）的1 340份樣品個體免疫抗體合格率為79.25%，場（戶）群體小反芻獸疫免疫抗體合格率為74.36%，均達到農業(yè)部要求70%以上的標準要求。說明免疫效果良好，能較好地起到保護作用。

規(guī)模場免疫抗體合格率明顯高于散養(yǎng)戶。本次共檢測規(guī)模場47個，43個規(guī)模場抗體陽性率達到70%以上，合格率為91.49%；檢測散養(yǎng)戶38戶，29戶抗體陽性率在70%以上，合格率為74.36%；散養(yǎng)戶群體合格率雖然達標，但僅為74.36%，處于中低保護水平，存在不能完全抵抗病毒感染的風險。規(guī)模場合格率高可能與飼養(yǎng)管理和日常補免工作到位有關，而散養(yǎng)戶合格率低與養(yǎng)殖比較分散，日常補免工作難以到位，飼養(yǎng)管理措施跟不上有關。

從監(jiān)測的四個時間段分析，4次檢測結果變化沒有規(guī)律性。分析原因，可能和采樣方法有一定關系。本試驗中，各時間段采樣并不是固定于同一場戶或同群羊，由于不同羊群的個體差異，可能造成檢測結果的波動。

4　小結

檢測發(fā)現(xiàn)，雖然被檢測場戶的免疫抗體水平達到了比較理想的免疫效果，降低了疫情傳入天水市的風險，但也反映出免疫中的薄弱環(huán)節(jié)，散養(yǎng)戶的防疫應該引起足夠的重視。血清學抗體監(jiān)測無法區(qū)分免疫抗體和感染抗體，只能測出有沒有抗體或抗體效價的高低。因此，為更好地做好全市小反芻獸疫防控工作，要切實加強檢疫監(jiān)管和流行病學調查，綜合評估天水市小反芻獸疫疫情風險；完善應急機制，規(guī)范應急程序，充實應急物資儲備，做好各項應急準備工作；發(fā)現(xiàn)疫情或檢出陽性病例，立即采取應急處置措施。爭取到2020年實現(xiàn)全市退出免疫的目標。

［本文獲甘肅省首屆獸醫(yī)系統(tǒng)征文比賽二等獎］

（編輯：趙鵬飛）

S858.26

B

1006-799X（2016）17-0005-02

成小莉（1967-），女，甘肅秦安人，高級獸醫(yī)師，主要從事動物疫病防治工作。