HBV前S1抗原、HBV血清標(biāo)志物和HBV-DNA的檢測(cè)結(jié)果分析

蔣姣姣　孟　偉　李　萍　何　躍

(昆明醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 個(gè)舊　661000)

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HBV前S1抗原、HBV血清標(biāo)志物和HBV-DNA的檢測(cè)結(jié)果分析

蔣姣姣孟偉李萍何躍

(昆明醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 個(gè)舊661000)

目的通過對(duì)HBV前S1抗原與HBV血清標(biāo)志物及HBV-DNA的檢測(cè)結(jié)果的分析，探討三者的相關(guān)性，確定HBV前S1抗原臨床檢測(cè)的價(jià)值。方法應(yīng)用ELISA方法對(duì)160例HBeAg陽性標(biāo)本和25例HBeAg陰性標(biāo)本進(jìn)行前S1、HBVM檢測(cè)，并與HBV-DNA熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果比較分析。結(jié)果HBV前S1抗原和HBV-DNA在HBeAg陽性標(biāo)本組中的檢出率明顯高于其在HBeAg陰性組中的檢出率(P<0.01)；前S1抗原與HBV-DNA檢出相關(guān)性差異無顯著性(P>0.05)；經(jīng)相關(guān)回歸分析，前S1抗原與HBV-DNA陽性檢出率呈正相關(guān)。結(jié)論HBV-DNA的檢測(cè)是目前檢測(cè)乙肝病毒最靈敏、特異的方法，而HBV前S1抗原檢測(cè)可作為HBV活動(dòng)性復(fù)制的血清學(xué)指標(biāo)，三者聯(lián)合檢測(cè)更有利于乙肝患者的臨床診斷、療效觀察和預(yù)后判斷。

HBV前S1抗原；HBV血清標(biāo)志物；HBV-DNA

自從丹氏發(fā)現(xiàn)乙型肝炎病毒35年以來[1]，人們對(duì)乙型肝炎的研究探索取得了很大的進(jìn)展。診斷乙型肝炎已不僅僅局限于血清兩對(duì)半和HBV-DNA，各種各樣的檢測(cè)技術(shù)不斷被發(fā)現(xiàn)。HBV前S1抗原是近幾年來發(fā)現(xiàn)的乙型肝炎病毒早期診斷的標(biāo)志。它是HBV-DNA的S區(qū)前S1基因編碼產(chǎn)物，僅存在于具有傳染性的完整Dane顆粒表面，具有很高的特異性，在HBV侵入肝細(xì)胞的過程中起著重要作用[2～4]。本研究通過回顧性分析HBV有關(guān)血清學(xué)指標(biāo)的檢測(cè)，研究各指標(biāo)間的相關(guān)性，評(píng)價(jià)前S1抗原在乙肝診斷中的價(jià)值。

1　材料與方法

1.1標(biāo)本來源2015年6月至2015年12月收集的160例昆明醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院住院及門診病人HBsAg陽性血清為檢測(cè)樣本，另以25例HBsAg陰性、HBeAg陰性的血清作為對(duì)照組。

1.2方法

1.2.1HBV-DNA檢測(cè)采用Taqman熒光定量PCR技術(shù)，澳大利亞CorbetteResearch公司生產(chǎn)的RotorGene-2000實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀，上海復(fù)星醫(yī)藥集團(tuán)生產(chǎn)的試劑。標(biāo)準(zhǔn)參照品由試劑盒提供，檢測(cè)方法嚴(yán)格按照說明書操作。

1.2.2乙肝病毒前S1抗原檢測(cè)采用雙抗體夾心法(ELISA)，試劑由阿爾法生物技術(shù)有限公司提供，操作按說明書。采用KHB Wellscan K3酶標(biāo)儀判讀結(jié)果。

1.2.3HBV血清標(biāo)志物檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)，上?？迫A實(shí)業(yè)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)試劑，操作按說明書。上?？迫AKHB Wellwash 4K2洗板機(jī)，KHB Wellscan K3酶標(biāo)儀判讀結(jié)果。

2　結(jié)　果

2.1乙型肝炎患者統(tǒng)計(jì)根據(jù)HBV血清標(biāo)志物不同模式分組。其HBV前S1抗原和HBV-DNA檢測(cè)及統(tǒng)計(jì)結(jié)果比較見表1和表2。

表1　不同HBV血清標(biāo)志物組前S1抗原檢測(cè)及統(tǒng)計(jì)結(jié)果的比較

注:＊為該組前S1抗原的檢出率與 Ⅰ組比較，P<0.01。

表2 不同HBV血清標(biāo)志物組HBV-DNA檢測(cè)及統(tǒng)計(jì)結(jié)果的比較

注:＊為該組HBV-DNA的檢出率與Ⅰ組比較，P<0.01；△為該組HBV-DNA含量與Ⅰ組比較，P<0.01。

從表1和表2可見，在Ⅰ組的39例標(biāo)本中，前S1抗原陽性31例，檢出率為79.5%(31/39)，HBV-DNA陽性35例，檢出率為89.7%(35/39)；在Ⅱ～ Ⅳ組模式的121例標(biāo)本中，前S1抗原陽性39例，檢出率為32.2%(39/121)，HBV-DNA陽性30例，檢出率為24.8%(30/121)，Ⅰ組中的前S1抗原與HBV-DNA的檢出率明顯高于Ⅱ～ Ⅳ組。不同HBV血清學(xué)模式的前S1抗原與HBV-DNA的檢出率相比較無顯著差異性(χ2=2.449、1.321、0.343、0.007，均P>0.05)。HBV前S1抗原與HBV-DNA有較好的相關(guān)性(r=0.8760，P<0.01)。

2.2HBV前S1抗原、HBeAg與HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果的比較見表3和表4。

表3　HBV前S1抗原與HBV-DNA的關(guān)系

注:HBV-DNA與HBV前S1抗原比，χ2=2.558，P>0.05。

表4　HBeAg與HBV-DNA的關(guān)系

注:HBV-DNA與HBeAg比，χ2=20.603，P>0.05。

由表3和表4可見,在96例HBV-DNA陽性的血清中,前S1抗原的檢出率為81.2%(78/96),HBeAg的檢出率為65.6%(63/96),HBV-DNA與前S1抗原檢出率差異無顯著性(P<0.01)。HBV-DNA與前S1抗原檢出符合率達(dá)80.6%(129/160)，HBV-DNA與HBeAg檢出符合率為69.4%(111/160)，兩者差異有高度顯著性(χ2=19.8，P<0.01)。從HBV-DNA與前S1抗原和HBeAg的相關(guān)性分析：前S1抗原與HBV-DNA、HBeAg與HBV-DNA、前S1抗原與HBeAg均呈正相關(guān)(r=0.6044、0.4023、0.3729，P<0.01)，前S1抗原與HBV-DNA的關(guān)系更密切。說明前S1抗原與HBV-DNA一樣能夠較好地反映HBV復(fù)制的情況。

3　討　論

國(guó)內(nèi)外眾多學(xué)者均證實(shí)，HBV感染者的血清及肝組織中，前S1抗原與HBV-DNA和HBeAg等復(fù)制指標(biāo)有密切的相關(guān)性[6]，而且其含量也與其他指標(biāo)呈正相關(guān)[7]。崔峰杰等[8]觀察前S1抗原的陽性率隨著HBV-DNA的拷貝數(shù)/ml增加而提高。

本組試驗(yàn)顯示不同HBV血清標(biāo)志物組，前S1抗原與HBV-DNA存在明顯的相關(guān)性。HBV-DNA與前S1抗原的檢出有較高的符合率(80.6%)，而HBV-DNA與HBeAg檢出率存在差異，提示前S1抗原作為HBV復(fù)制指標(biāo)較HBeAg更為敏感、準(zhǔn)確。

HBV前S1抗原在Ⅰ組(HBeAg陽性)血清中的檢出率明顯高于Ⅱ～Ⅳ組(HBeAg陰性)血清。說明前S1抗原在HBV感染的早期就能檢出，而且反映了在HBV感染者體內(nèi)，在HBeAg陽性向HBeAg陰性或抗HBe轉(zhuǎn)化過程中，病毒復(fù)制逐漸減少，前S1表達(dá)也隨之減少；另外在HBeAg陰性或抗HBe陽性組中HBV前S1抗原仍有32.2%的檢出率，HBV-DNA檢出率為2408%，兩者之間無顯著差異，提示一部分患者體內(nèi)HBV的復(fù)制仍在繼續(xù)進(jìn)行，病情不斷演變。原因[9]可能是HBV為逃避宿主的免疫反應(yīng)而發(fā)生的前C區(qū)變異導(dǎo)致HBeAg表達(dá)障礙，在肝細(xì)胞內(nèi)聚集，不能轉(zhuǎn)譯出HBeAg，但這并不意味著HBV的消除或復(fù)制水平的減低[10]。血中檢測(cè)HBeAg也可能是陰性，但如果這時(shí)HBV前S1抗原檢測(cè)為陽性，從某種程度上要比血中檢測(cè)HBeAg更能反映HBV的復(fù)制情況，可避免這種因HBV變異而產(chǎn)生的陰性誤導(dǎo)。

總之，HBV-DNA的檢測(cè)是目前檢測(cè)HBV最靈敏、特異的方法，以其為金標(biāo)準(zhǔn)，來評(píng)價(jià)HBV前S1抗原與HBeAg兩者在反映HBV復(fù)制上的價(jià)值。但是單獨(dú)檢測(cè)前S1抗原或HBeAg都存在局限性，不能全面反映HBV復(fù)制。文獻(xiàn)[11]報(bào)道：前S1出現(xiàn)在急性HBV感染的最早期，是病毒消除的最早跡象，其相對(duì)含量的消長(zhǎng)可提示乙肝的預(yù)后，陰轉(zhuǎn)較早的患者病程較短，預(yù)后良好，而HBV前S1抗原持續(xù)陽性則提示感染慢性化和疾病持續(xù)活動(dòng)。因此，前S1抗原檢測(cè)可作為乙肝病毒活動(dòng)性復(fù)制的血清學(xué)指標(biāo)。這三種檢測(cè)指標(biāo)的聯(lián)合運(yùn)用，更有利于乙肝患者的臨床診斷、療效觀察和預(yù)后判斷。

[1]徐蓓，姚光弼.血清乙型肝炎病毒前S1抗原檢測(cè)及其與病毒復(fù)制的關(guān)系[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志,2013,11(2):117-120.

[2]葉高任.內(nèi)科學(xué)[M].第5版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2013:880.

[3]周淑芬，宋佐莉. HBV前S1蛋白的檢測(cè)及其臨床意義探討[J] .疾病控制雜志,2014,2(3):194.

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蔣姣姣(1981—)，主管檢驗(yàn)師，本科，主要從事臨床檢驗(yàn)工作。

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1004-7115(2016)09-1036-02

10.3969/j.issn.1004-7115.2016.09.025

2016-05-03)