類風濕關(guān)節(jié)炎患者外周血抗CCP抗體和免疫球蛋白檢測的臨床意義

張　軍

(皖南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院 弋磯山醫(yī)院　血液內(nèi)科細胞室，安徽　蕪湖　241001)

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·臨床醫(yī)學·

類風濕關(guān)節(jié)炎患者外周血抗CCP抗體和免疫球蛋白檢測的臨床意義

張軍

(皖南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院 弋磯山醫(yī)院血液內(nèi)科細胞室，安徽蕪湖241001)

目的：評價類風濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)患者外周血抗環(huán)瓜氨酸(cyclin citrullinated peptide，CCP)抗體、類風濕因子(rheumatoid factor，RF)、免疫球蛋白(IgM、IgA和IgG)水平在類風濕關(guān)節(jié)炎診斷中的作用。方法：收集97例RA患者外周血(活動期56例，靜止期41例)及健康體檢者50例外周血，評估RA患者關(guān)節(jié)疾病活動評分(disease activity score in 28 joints,DAS28)指標數(shù)值，采用ELISA方法檢測抗CCP抗體，免疫比濁法檢測RF和三種免疫球蛋白水平。結(jié)果：活動期RA患者外周血RF、IgM和IgG的水平高于靜止期RA患者和健康對照組(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學意義；靜止期RA患者除類風濕因子高于健康對照組外(P<0.05)，IgM、IgA和IgG的水平均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。按抗CCP抗體和RF檢測結(jié)果對RA患者進行分類后比較，CCP+RF+組IgG、IgM和DAS28水平最高，CCP+RF-組次之，其他兩組間無統(tǒng)計學差異。結(jié)論：抗CCP抗體、IgG和IgM與RA患者病情活動度相關(guān)，抗CCP抗體陽性具有更加嚴重的致病性，聯(lián)合檢測可為臨床提供個性化治療的實驗室依據(jù)。

抗CCP抗體；免疫球蛋白；類風濕關(guān)節(jié)炎；類風濕因子

類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)病因未明，以累及周圍關(guān)節(jié)組織為主要特征，被認為是由自身抗原引起的自身免疫性疾病，可能與感染因子和遺傳傾向相關(guān)[1]，自身抗原研究較多，但均未得到證實。抗CCP抗體具有早期診斷RA的價值，然而其陽性率較低，難以做到早診斷早治療。目前臨床尚缺乏根治及預(yù)防本病的有效措施，缺少個性化治療方案，臨床藥物治療副作用較大，本研究以抗CCP抗體和RF為分類指標，探討兩種抗體不同檢測結(jié)果指示的患者臨床各項檢測指標差異。

1　資料和方法

1.1研究對象收集皖南醫(yī)學院弋磯山醫(yī)院住院和門診97例RA患者，其中活動期RA患者56例，男性18例，女性38例，年齡23～68歲，平均(52.6±6.42)歲；靜止期RA患者41例，男性11例，女性30例，年齡24～67歲，平均(48.6±6.49)歲；對照組為50例本院正常健康體檢者，肝腎功能正常，無器質(zhì)性病變，性別、年齡與疾病組相匹配。RA患者活動度判斷依據(jù)關(guān)節(jié)腫脹、關(guān)節(jié)壓痛、晨僵、血沉、C反應(yīng)蛋白(CRP)等實驗室指標。RA診斷具體參照2010年ACR/EULAR關(guān)于RA新分類標準，均由有資質(zhì)的臨床醫(yī)師負責診斷。

1.2方法抗CCP抗體的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，試劑盒由新科生物提供，操作步驟嚴格按照說明書進行，應(yīng)用Bio-RAD酶標儀測量，主波長為450 nm，副波長為630 nm，檢測吸光度值(A值)，并將其在標準曲線下?lián)Q算成濃度值。類風濕因子、免疫球蛋白(IgM、IgA和IgG)、C-反應(yīng)蛋白(CRP)等血清學指標采用免疫比濁法檢測，檢測平臺為日立7600全自動生化分析儀。

類風濕關(guān)節(jié)炎活動度的評估采用C-反應(yīng)蛋白(CRP)式DAS28指數(shù)，DAS28的計算公式為：DAS28=[0.56×sqrt(TJC28)+0.28×sqrt(SJC28)+0.36×Ln(CRP+1)] ×1.10+1.15，其中，SJC關(guān)節(jié)被動活動時的腫脹數(shù)，28表示雙側(cè)膝關(guān)節(jié)、肩關(guān)節(jié)、肘關(guān)節(jié)、近端指間關(guān)節(jié)、掌指腕關(guān)節(jié)總數(shù)，TJC28表示上述28個關(guān)節(jié)的觸痛數(shù)，指數(shù)范圍為0～10。

2　結(jié)果

2.1研究對象CRP、ESR及RA患者DAS28結(jié)果CRP、ESR和DAS28在3組研究對象間的比較詳見表1，活動期RA患者組外周血CRP、ESR和DAS28的水平均高于靜止期RA患者組(P<0.05)，健康對照組在3組中最低(P<0.05)。

表13組研究對象ESR、CRP和DAS28水平比較

組別CRP1/(mg/L)ESR1/(cm/h)CRP2/(mg/L)ESR2/(cm/h)DAS28靜止期RA(41例)19.3a(13.6b)25.6(16.2)4.3±1.6★5.5±1.8★2.9±1.7活動期RA(56例)34.8(21.1)38.5(22.7)6.2±2.4△6.5±1.9△6.9±2.8△健康對照(50例)6.8(3.7)2.2(1.3)1.9±0.91.4±0.8F/t/χ2值13.817.476.7149.33.9P值0.000.000.000.000.00

表23組研究對象血清RF和三種免疫球蛋白水平比較

組別RF-IgM/(IU/mL)IgG/(mg/dL)IgM/(mg/dL)IgA/(mg/dL)靜止期RA(41例)52.7a(99.7b)1038.5(810.5)219.3(96.4)362.7(107.2)活動期RA(56例)127.4(134.8)1347.1(1043.8)323.4(109.5)356.2(142.4)健康對照(50例)5.2(4.7)1144.7(565.3)220.8(106.1)334.1(91.9)χ2值28.59.52.53.9P值0.000.010.280.16

a表示中位數(shù)，b表示四分位數(shù)間距。

表33組研究對象血清RF和三種免疫球蛋白轉(zhuǎn)換后水平比較

組別RF-IgMIgGIgMIgA靜止期RA(41例)8.42±3.04△37.63±16.0516.27±7.5719.75±7.27活動期RA(56例)15.84±6.67△47.38±17.97★23.78±10.45△18.74±8.98健康對照(50例)2.17±1.2135.92±16.8714.07±7.3417.97±7.94F值123.83.118.60.5P值0.0000.0480.0000.586

△表示與靜止期相比P<0.01，★表示與健康對照相比P<0.05。

2.3抗CCP抗體和RF分類比較本研究進一步將97例RA患者按照抗CCP抗體和RF陽性情況分為四組，分別比較四組患者三種免疫球蛋白、CRP和DAS28分數(shù)水平的差異，結(jié)果見表4，其中，四組IgG、IgM和CRP指標均高于健康對照組；四組間比較，CCP+RF+組IgG、IgM和DAS28水平最高，其他指標無顯著差異，CCP+RF-組IgG、IgM和DAS28高于其他兩組，其余各組相應(yīng)指標比較無顯著差異。

表4不同陽性組抗CCP抗體和RF血清學指標轉(zhuǎn)換后比較

組別nIgGIgMIgACRPDAS28CCP+RF+4247.73±14.55△26.27±9.75△17.74±7.294.1±1.7△7.0±2.8△CCP+RF-1840.06±16.37★22.78±10.66△19.48±8.733.8±2.0△5.3±2.9★CCP-RF+2934.38±15.6915.70±7.4318.47±7.493.9±1.4△3.4±1.7CCP-RF-832.42±13.6815.35±7.8117.32±7.143.7±1.9△2.2±1.4健康對照5035.92±16.8714.07±7.3417.97±7.941.9±0.9F值4.6613.990.2116.3216.76P值0.0010.0000.9370.0000.000

△表示與健康對照相比P<0.01，★表示與健康對照相比P<0.05。

3　討論

類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)滑膜增生、腫脹、疼痛以及中性粒細胞浸潤，關(guān)節(jié)骨和軟骨的侵蝕和破壞反復(fù)發(fā)作后功能喪失[2]。RA的發(fā)病機制仍未得到闡明，目前認為細胞免疫和體液免疫共同參與了RA的發(fā)病，CD4+T細胞、B細胞、巨噬細胞和中性粒細胞浸潤關(guān)節(jié)滑膜相互聚集形成生發(fā)中心，其中，中性粒細胞在活動性RA患者滑膜浸潤細胞中的比例可高達90%，中性粒細胞和其他免疫細胞及分子間的相互作用是驅(qū)使和控制自身免疫炎癥反應(yīng)過程的關(guān)鍵，免疫復(fù)合物在中性粒細胞浸潤和活化過程中發(fā)揮著不可替代的作用[3-4]。RA診斷常用的血清學指標主要有抗CCP抗體、RF、血沉和CRP，抗CCP抗體是較好的早期診斷指標，也是鑒別類風濕患者是否易發(fā)展為侵蝕性骨損傷的靈敏指標。體液免疫的紊亂是導(dǎo)致類風濕關(guān)節(jié)炎發(fā)病的重要環(huán)節(jié)，外周血免疫球蛋白水平測定有助于判斷體液免疫狀態(tài)，多個文獻報道，RA患者常常出現(xiàn)血清免疫球蛋白的異常，本研究以此為基點重點探討RA患者免疫球蛋白水平的變化。

近年來相關(guān)研究表明，血清免疫球蛋白水平升高的幅度與疾病病程和嚴重程度相關(guān)[5-6]?；顒悠赗A患者IgG、IgM和IgA水平高于靜止期，早期RA患者的IgG和IgA水平顯著高于靜止期RA患者，并且IgG和IgA水平與病情活動度呈正相關(guān)[7-9]。我們的結(jié)果表明，活動期RA患者免疫球蛋白的含量較正常人顯著升高，不同種類免疫球蛋白表現(xiàn)不同，且經(jīng)治療后未發(fā)現(xiàn)明顯變化，這可能與病程長短以及采取的治療方案的差異相關(guān)。動態(tài)觀察血清或關(guān)節(jié)引流液中免疫球蛋白含量的變化，有助于分析疾病的進展情況。

抗CCP抗體具有早期診斷RA的價值，且診斷效能顯著優(yōu)于類風濕因子等其他實驗室診斷常用的指標[10]。研究顯示，抗CCP抗體陽性RA患者和抗CCP陰性RA患者的遺傳特征和臨床表現(xiàn)均有所不同[11-12]，我們將RA患者按照抗CCP抗體和RF陽性情況分為四組，分別比較四組患者間三種免疫球蛋白、CRP和DAS28分數(shù)水平的差異，結(jié)果顯示，CCP+RF+組IgG、IgM和DAS28水平最高，IgA和CRP無顯著差異；CCP+RF-組IgG、IgM和DAS28高于其他兩組，其余各組相應(yīng)指標無顯著差異；抗CCP抗體和RF同時陽性RA患者的免疫球蛋白(IgG、IgM)水平顯著高于抗CCP抗體陰性RA患者，表明抗CCP抗體陽性RA患者和抗CCP抗體陰性RA患者發(fā)病機制可能存在差別，抗CCP抗體陽性RA患者致病性B淋巴細胞異?；罨钚愿?。

總之，我們的研究表明，免疫球蛋白檢測在類風濕關(guān)節(jié)炎患者體液免疫狀態(tài)的評價中具有重要意義，抗CCP抗體、IgG和IgM與RA患者病情活動度相關(guān)，抗CCP抗體陽性具有更加嚴重的致病性，臨床應(yīng)重視免疫球蛋白水平在評價RA患者病情活動度方面的價值，聯(lián)合檢測可為臨床個性化治療提供實驗室依據(jù)。

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Diagnostic implications of peripheral blood anti-CCP antibody and immunoglobulin levels for rheumatoid arthritis

ZHANG Jun

Department of Hematology,The First Affiliated Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 241001,China

Objective：To investigate the implications of determining the levels of peripheral blood anti-cyclin citrullinated peptide(anti-CCP) antibody,rheumatoid factor,and IgM,IgG and IgA for diagnosis of rheumatoid arthritis(RA).Methods:Peripheral blood was obtained from 97 patients with RA,including 56 of active RA and 41 of inactive RA,and another 50 healthy subjects undergoing physical examination as controls.Disease Activity Score(DAS28) was used to quantitatively measure the disease activity,ELISA to determine the serum anti-CCP antibody concentration,and immunoturbidimetric assay was performed to measure RF and IgM,IgG and IgA levels.The clinical data on the patients were also collected.Results:RA patients in active disease had higher concentration of peripheral blood anti-CCP antibody as well as higher IgM and IgG levels than in inactive RA and in healthy controls(P<0.05),whereas IgM,IgG and IgA levels were not significantly different in RA patients in inactive stage(P>0.05) except for higher RF levels than the controls(P<0.05).By the results of anti-CCP antibody and RF,the levels of IgG,IgM and DAS28 scoring were highest in CCP+RF+ group,followed by CCP+RF- group.No difference was found in another two groups.Conclusion:Levels of serum anti-CCP antibody,IgM and IgG are positively correlated with RA activity,and positive CCP antibody may indicate serious RA for patients.Importantly,integrated measurement of anti-CCP and immunoglobulin levels may provide laboratory evidence for RA patients on individualized therapy regimen.

anti-CCP antibody;immunoglobulin;rheumatoid arthritis;rheumatoid factor

1002-0217(2016)05-0460-04

2016-04-20

張軍(1980-)，男，主管檢驗師，(電話)15955388639，(電子信箱) 544372683@qq.com.

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A

10.3969/j.issn.1002-0217.2016.05.016