蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉生長(zhǎng)、體組成、體色和非特異性免疫的影響

孟素宣　史東杰　秦佳　畢鵬飛　林誠(chéng)麗　白東清　梁擁軍

摘要：研究了蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉（Cyprinus carpio L.）生長(zhǎng)、體組成、體色和血清免疫指標(biāo)的影響。選用360尾初始體重為（120.24±4.36） g的錦鯉隨機(jī)分為6組，每組20尾，3個(gè)重復(fù)，以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照組，用蠅蛆粉替代基礎(chǔ)飼料中20%、40%、60%、80%和100%的魚(yú)粉，配置6種試驗(yàn)飼料（G0、G20、G40、G60、G80、G100），養(yǎng)殖周期60 d。結(jié)果表明，蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)試驗(yàn)魚(yú)成活率、肌肉水分、粗灰分、鈣、總磷、血清堿性磷酸酶（AKP）無(wú)顯著差異（P>0.05）。蠅蛆粉替代魚(yú)粉G20組-G60組試驗(yàn)魚(yú)的終末體重、WGR、SGR無(wú)顯著差異（P>0.05），而G80組、G100組顯著降低（P<0.05）。G20組、G40組試驗(yàn)魚(yú)的FCR較對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05），G60組-G100組試驗(yàn)魚(yú)FCR顯著升高（P<0.05）。蠅蛆粉替代組試驗(yàn)魚(yú)的肌肉粗蛋白含量隨替代水平的增加而逐漸升高，G20組-G60組與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05），而G80組、G100組顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。各替代組粗脂肪、血清超氧化物歧化酶（SOD）隨替代水平的增加，均顯著降低（P<0.05）。蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉體色的影響，除G20組無(wú)顯著差異（P>0.05）外，其他各試驗(yàn)組色度值均顯著升高（P<0.05）。綜上所述，以生長(zhǎng)性能、肌肉成分、體表色度值和血清非特異性免疫作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，蠅蛆粉替代魚(yú)粉的比例不宜超過(guò)60%。

關(guān)鍵詞：錦鯉（Cyprinus carpio L.）；蠅蛆粉；魚(yú)粉；生長(zhǎng)性能；體組成；體色；非特異性免疫

中圖分類(lèi)號(hào)：S965.8；S816.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）08-2066-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.08.037

Abstract：This experiment aims to explore the impact of substituting maggot meal for fish meal on growth performance， body composition， body color and some serum immune indicates. 360 Cyprinus carpio L.， with an original weight of （120.24±4.36）g apiece， were selected and divided at random into three parallel groups. The control group fed on basal feed. Six types of experimental feed （G0， G20， G40， G60， G80 and G100） were compounded over the course of 60 days by substituting maggot meal for 0%，20%， 40%， 60%， 80% and 100% of fish meal in basal feed respectively. The results showed that substitution of maggot meal for any amount of fish meal did not make any significant difference for experimental fish in terms of survival rate， muscular water， crude ash， carbon， total phosphorus and AKP（P>0.05）. For G20 and G60， such substitution did not show any significant difference in terms of final weight， WGR and SGR of the experimental fish（P>0.05） and for G80 and G100， it decreased significantly （P<0.05）. For G20 and G40， FCR of the experimental fish did not show any significant difference with that of the control group （P>0.05）. For G60 and G100， FCR of the experimental fish rose significantly（P<0.05）. Muscular crude protein content of the experimental fish rose proportionately with the addition of the substitution level. For G20 and G60， there was no significant difference compared with the control group， and it was much higher in G80 and G100 than in the control group（P<0.05）. Crude fat and SOD in substitution groups fell significantly with the addition of the substitution（P<0.05）. As for the impact of the substitution on body color， the chromatic values increased significantly in all experimental groups （P<0.05）except in G20 （P>0.05）. To sum up， the ratio of substitution of maggot meal for fish meal may not preferably exceed 60% with assessment indicates of growth performance， muscle composition， body-surface chromatic values and some serum non-specific immunity.

Key words：Cyprinus carpio L.；maggot meal；fish meal；growth performance；bod composition；body color；non-speeific immunity

魚(yú)粉因蛋白質(zhì)含量高，且富含多種氨基酸、脂肪酸和維生素，具有適口性強(qiáng)、易消化等特點(diǎn)，成為魚(yú)類(lèi)飼料中應(yīng)用最為廣泛的蛋白質(zhì)源。由于海洋捕撈的限制以及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，魚(yú)粉的生產(chǎn)量難以滿(mǎn)足市場(chǎng)的需求量，導(dǎo)致魚(yú)粉價(jià)格昂貴，從而限制了其在水產(chǎn)飼料的使用[1，2]。因此，尋找低成本、易獲得的飼料蛋白質(zhì)源部分或者全部替代飼料中魚(yú)粉，從根本上降低水產(chǎn)養(yǎng)殖成本，成為了水產(chǎn)營(yíng)養(yǎng)與飼料學(xué)專(zhuān)家研究的熱點(diǎn)。

蠅蛆粉是一種新型昆蟲(chóng)蛋白質(zhì)源，是由家養(yǎng)活體蠅蛆加工研制而成。蠅蛆繁殖周期短、飼養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)單、易獲取，且價(jià)格相對(duì)低廉。蠅蛆粉蛋白質(zhì)含量高，氨基酸、維生素和礦物質(zhì)含量豐富且全面，富含抗菌肽、凝集素、溶菌酶等生物活性物質(zhì)，目前已經(jīng)成功應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)[3-5]。研究表明，在飼料中添加適量的蠅蛆粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）[6，7]、中國(guó)對(duì)蝦（Fenneropenaeus chinensis）[8]、尼羅羅非魚(yú)（Oreochromis niloticus）[9，10]、青魚(yú)（Mylopharyngodon piceus）[11]、三疣梭子蟹（Portunus trituber chinensis）[12]、黃顙魚(yú)（Peltobagrus fulvidraco）[13]等均具有良好的效果，可部分或全部替代對(duì)照組飼料中的魚(yú)粉成分。

錦鯉（Cyprinus carpio L.）隸屬于鯉形目（Cypriniformes）鯉科（Cyprinidae）鯉屬（Cyprinus）為鯉魚(yú)的變種，由于體格健美、色彩艷麗、泳姿優(yōu)雅被譽(yù)為“水中活寶石”、“會(huì)游泳的藝術(shù)品”[14，15]，是中國(guó)重要的觀賞魚(yú)養(yǎng)殖對(duì)象。從目前的養(yǎng)殖情況來(lái)看，錦鯉養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展亟待解決兩個(gè)問(wèn)題：①飼料成本問(wèn)題，為了達(dá)到理想的鑒賞效果，在飼料中添加適量的天然增色物質(zhì)（如螺旋藻、蝦青素、紅酵母等），增加體表鮮艷度，但飼料成本較高；②大規(guī)格商品魚(yú)病害問(wèn)題，錦鯉一旦發(fā)生病害，體表?yè)p傷，則無(wú)法出售。近年來(lái)，由于錦鯉養(yǎng)殖業(yè)迅速擴(kuò)大，對(duì)其營(yíng)養(yǎng)飼料進(jìn)行了研究，但是主要集中于不同蛋白質(zhì)水平、不同脂肪水平、不同增色劑添加量對(duì)錦鯉生長(zhǎng)、體組成、體色、免疫等方面的影響[16-18]。有關(guān)錦鯉飼料中替代蛋白質(zhì)源對(duì)其生長(zhǎng)、體組成、體色和免疫研究的報(bào)道尚少，有關(guān)蠅蛆粉在錦鯉飼料中的應(yīng)用尚未見(jiàn)到。因此，本試驗(yàn)以錦鯉為研究對(duì)象，探討蠅蛆粉作為主要蛋白質(zhì)源以不同水平替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉生長(zhǎng)性能、體組成、體色和免疫的影響，以期為蠅蛆粉在觀賞魚(yú)飼料中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚(yú)粉、豆粕、雙低菜粕為主要蛋白源，面粉為糖源，大豆磷脂為脂肪源，配置試驗(yàn)基礎(chǔ)飼料。以基礎(chǔ)飼料為對(duì)照組，用蠅蛆粉替代基礎(chǔ)飼料中20%、40%、60%、80%和100%的魚(yú)粉，配置6種試驗(yàn)飼料（G0、G20、G40、G60、G80、G100），6種飼料設(shè)計(jì)配方及營(yíng)養(yǎng)組成見(jiàn)表1。所有飼料原料均由北京友誼恒遠(yuǎn)飼料有限公司提供，并由該公司粉碎加工，過(guò)80目篩，然后加水混勻，用123系列平模飼料顆粒機(jī)（河南省鄭州市友邦機(jī)械廠(chǎng)生產(chǎn)125系列平模顆粒機(jī)125系列平模顆粒機(jī)）將其制成粒徑為2.00 mm的顆粒飼料，自然冷卻后裝入密封袋，分組貼標(biāo)簽，-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。蠅蛆粉?gòu)于合肥大元生物科技有限公司，粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、水分、鈣、磷含量分別為56.84%、11.58%、6.75%、8.79%、1.16%和1.24%。

1.2 試驗(yàn)用魚(yú)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用錦鯉來(lái)自北京鑫淼水產(chǎn)總公司，購(gòu)回后暫養(yǎng)于北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所小湯山良種繁育中心二號(hào)溫室8號(hào)循環(huán)水養(yǎng)殖池（7.4 m×4.5 m×1.8 m）馴養(yǎng)15 d，養(yǎng)殖用水為天然溫泉水（約36 ℃）和地下井水混合而成，清新無(wú)污染，水溫為（18±1）℃，pH 7.4，DO≥5 mg/L，光照為自然光源。每日投喂兩次（9：30、17：00），投喂量為魚(yú)體重的3%～4%，根據(jù)魚(yú)體的攝食情況做適當(dāng)調(diào)整。養(yǎng)殖試驗(yàn)在該中心連棟溫室小型循環(huán)水養(yǎng)殖缸（1.5 m×1.5 m×1.5 m）內(nèi)進(jìn)行，實(shí)際養(yǎng)殖水容積為2.25 m3。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，選取體質(zhì)健壯，規(guī)格整齊的錦鯉360尾，初始體重（120.24±4.36） g，隨機(jī)分配于18個(gè)小型循環(huán)水養(yǎng)殖缸中，每缸20尾。將18個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)分為6個(gè)組（每組3個(gè)重復(fù)），記為G0-G100，分別投喂對(duì)應(yīng)的試驗(yàn)飼料。試驗(yàn)期間投喂、飼養(yǎng)條件與馴養(yǎng)時(shí)相同，每3天換去水體總?cè)莘e的1/3，補(bǔ)充等量水體。試驗(yàn)期為60 d。

1.3 樣品采集與分析

試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，測(cè)量每缸試驗(yàn)魚(yú)的初始體重，試驗(yàn)過(guò)程中記錄死魚(yú)的數(shù)量和重量。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，禁食24 h，測(cè)量每缸試驗(yàn)魚(yú)體重，拍照，并統(tǒng)計(jì)成活率。每缸隨機(jī)選取10尾試驗(yàn)魚(yú)，采用常規(guī)方法尾靜脈取血，4 ℃下5 000 r/min離心10 min，用于制備血清，測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）、堿性磷酸酶（AKP）的活性，上述指標(biāo)的測(cè)定采用北京澳聯(lián)雅實(shí)驗(yàn)設(shè)備中心試劑盒。隨后取背部肌肉，-20 ℃保存，用于測(cè)量試驗(yàn)魚(yú)肌肉體組成成分。

樣品中水分含量采用105 ℃常壓干燥法（GB/T6435-1986）、粗蛋白含量采用凱氏定氮法（GB/T 6432-1994）、粗脂肪含量采用乙醚抽提法（GB/T 6432-1994）、粗灰分含量采用550 ℃灼燒法（GB/T 6438-1992）、鈣含量采用乙二胺四乙酸（EDTA）滴定法（GB/T 6436-2002）、總磷含量采用鉬黃比色法（GB/T 6437-2002）進(jìn)行測(cè)定。

試驗(yàn)魚(yú)體色變化的記錄參照史東杰等[19]研究增艷物質(zhì)對(duì)血鸚鵡增艷效果的影響時(shí)采用的方法。試驗(yàn)時(shí)使用佳能5D Mark III數(shù)碼相機(jī)拍照，采用羅氏比色扇（南京銘奧儀器設(shè)備有限公司）比色，測(cè)得色度值。

1.4 指標(biāo)計(jì)算

選用成活率、增重率、飼料系數(shù)、特定生長(zhǎng)率作為主要生長(zhǎng)性能指標(biāo)，具體計(jì)算方法如下：

成活率（SR）=試驗(yàn)?zāi)~(yú)尾數(shù)/試驗(yàn)初魚(yú)尾數(shù)×100%；

增重率（WGR）=（終末體重-初始體重）/初始體重×100%；

飼料系數(shù)（FCR）=總投喂量/（終末體重+死魚(yú)重量-初始體重）；

特定生長(zhǎng)率（SGR）=（ln終末魚(yú)體重-ln初始魚(yú)體重）/飼養(yǎng)天數(shù)×100%/d

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示，采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析，用多重比較法進(jìn)行組間差異顯著性分析，顯著水平為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加不同比例蠅蛆粉對(duì)錦鯉生長(zhǎng)性能的影響

由表2可以看出，與對(duì)照組相比，蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉低水平替代組（G20、G40、G60）試驗(yàn)魚(yú)的終末體重、WGR、SGR無(wú)顯著差異（P>0.05），而高水平替代組（G80、G100）顯著降低（P<0.05）。低水平替代組試驗(yàn)魚(yú)的FCR較對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05），而替代水平超過(guò)60%時(shí)，隨替代比例增加，F(xiàn)CR顯著升高（P<0.05）。蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)各組試驗(yàn)魚(yú)SR無(wú)顯著影響（P>0.05），各試驗(yàn)組SR均為100%。

2.2 飼料中添加不同比例蠅蛆粉對(duì)錦鯉肌肉組成的影響

由表3可以看出，蠅蛆粉替代組試驗(yàn)魚(yú)的肌肉粗蛋白含量隨替代水平增加而逐漸升高，低水平替代組（G20、G40、G60）與對(duì)照組相比差異不顯著（P>0.05），而高水平替代組（G80、G100）顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。粗脂肪含量隨替代水平增加，與對(duì)照組相比，均顯著降低（P<0.05）。蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)試驗(yàn)魚(yú)肌肉水分、粗灰分、鈣和總磷含量無(wú)顯著差異（P>0.05）。

2.3 飼料中添加不同比例蠅蛆粉對(duì)錦鯉非特異性免疫指標(biāo)的影響

由表4可以看出，隨著蠅蛆粉替代魚(yú)粉水平的增加，各替代組試驗(yàn)魚(yú)血清超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著降低（P<0.05），且均低于對(duì)照組，但蠅蛆粉的添加未對(duì)錦鯉血清中堿性磷酸酶（AKP）活性產(chǎn)生顯著的影響（P>0.05）。

2.4 飼料中添加不同比例蠅蛆粉對(duì)錦鯉體色的影響

由表5可以看出，與對(duì)照組色度值相比，蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉體色的影響，除G20組無(wú)顯著差異（P>0.05）外，其他各試驗(yàn)組色度值均顯著升高（P<0.05）。

3 小結(jié)與討論

Grabnr等[20]認(rèn)為蠅蛆粉營(yíng)養(yǎng)全面，所富含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的價(jià)值與進(jìn)口秘魯魚(yú)粉基本相似，研究蠅蛆粉作為替代魚(yú)粉的蛋白質(zhì)源具有重要的意義。在本試驗(yàn)中，蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉低水平替代組（G20、G40、G60）試驗(yàn)魚(yú)的終末體重、WGR、SGR無(wú)顯著差異（P>0.05），而高水平替代組（G80、G100）顯著降低（P<0.05）。低水平替代組試驗(yàn)魚(yú)的FCR較對(duì)照組無(wú)顯著差異（P>0.05），而替代水平超過(guò)60%時(shí)，隨替代比例的增加，F(xiàn)CR顯著升高（P<0.05）。這表明，蠅蛆粉可作為錦鯉配合飼料中魚(yú)粉的替代蛋白質(zhì)源，從而在一定程度上降低錦鯉飼料中魚(yú)粉的使用量，但是蠅蛆粉添加過(guò)量則會(huì)對(duì)錦鯉的生長(zhǎng)產(chǎn)生不利的影響。出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因，有3個(gè)原因：①蠅蛆粉與魚(yú)粉的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比例不同，比如蠅蛆粉中蛋氨酸、賴(lài)氨酸、多不飽和脂肪酸含量遠(yuǎn)低于魚(yú)粉，當(dāng)蠅蛆粉大量替代魚(yú)粉后，就會(huì)導(dǎo)致飼料中上述氨基酸、脂肪酸不平衡或者達(dá)不到錦鯉所需的含量；②可能與蠅蛆粉中含有魚(yú)類(lèi)難以消化的幾丁質(zhì)有關(guān)，當(dāng)蠅蛆粉替代魚(yú)粉的比例超過(guò)60%時(shí)，飼料中幾丁質(zhì)的含量可能超過(guò)了錦鯉的耐受范圍，導(dǎo)致消化不良；③蠅蛆粉替代組的飼料與對(duì)照組飼料的適口性不同，養(yǎng)殖過(guò)程中筆者發(fā)現(xiàn)投喂蠅蛆粉替代魚(yú)粉的飼料時(shí)，錦鯉的攝食速率明顯慢于對(duì)照組，且攝食量也不同程度地低于對(duì)照組，這說(shuō)明蠅蛆粉替代魚(yú)粉后，可能影響了飼料的適口性。綜合上述3個(gè)方面，蠅蛆粉大量替代魚(yú)粉后導(dǎo)致了飼料的利用率降低，從而導(dǎo)致錦鯉的增重率、特定生長(zhǎng)率表現(xiàn)出下降的現(xiàn)象。這一研究結(jié)果與蠅蛆粉替代魚(yú)粉在凡納濱對(duì)蝦、泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus）中的應(yīng)用相似[6，21]，而與Ogunji等[10]認(rèn)為蠅蛆粉可完全代替尼羅羅非魚(yú)飼料中魚(yú)粉使用量的觀點(diǎn)不同，這可能與試驗(yàn)魚(yú)的體質(zhì)、蠅蛆粉的加工工藝和富含的蛋白質(zhì)質(zhì)量有關(guān)。有關(guān)蠅蛆粉影響錦鯉生長(zhǎng)特性的生理機(jī)制還需要進(jìn)一步的深入研究。

在本試驗(yàn)中，隨著蠅蛆粉替代水平的增加，錦鯉背部肌肉的粗蛋白含量升高，粗脂肪含量卻顯著降低（P<0.05），說(shuō)明蠅蛆粉可降低錦鯉肌肉的脂肪沉積量。這可能與蠅蛆粉大量替代魚(yú)粉后，導(dǎo)致飼料中不飽和脂肪酸缺乏所致。這一研究結(jié)果與曾俊明等[6]用蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)凡納濱對(duì)蝦的研究結(jié)果相似，但與Ogunji等[10]對(duì)尼羅羅非魚(yú)的研究結(jié)果相反。

本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，蠅蛆粉替代魚(yú)粉對(duì)錦鯉體色的影響，除G20組無(wú)顯著差異（P>0.05）外，其他各試驗(yàn)組色度值均顯著升高（P<0.05），說(shuō)明蠅蛆粉對(duì)錦鯉體表色素的沉積具有促進(jìn)作用。但目前有關(guān)蠅蛆粉對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物體色影響的研究尚未見(jiàn)到，本試驗(yàn)所取得的結(jié)果是否為蠅蛆粉可以對(duì)錦鯉具有增色效果，還是蠅蛆粉的添加促進(jìn)了飼料中螺旋藻的增色作用，還有待進(jìn)一步研究。

目前已經(jīng)證實(shí)，堿性磷酸酶（AKP）與體內(nèi)代謝有密切關(guān)系，并直接參與磷的代謝。在本試驗(yàn)中高水平替代組G80、G100組的生長(zhǎng)性能顯著低于對(duì)照組，是否由于AKP活性的降低影響?hù)~(yú)體的代謝，從而影響?hù)~(yú)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收還有待進(jìn)一步的研究。隨著蠅蛆粉替代水平的提高，試驗(yàn)魚(yú)血清中的超氧化物歧化酶（SOD）呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢(shì)，蠅蛆粉大量添加是否會(huì)降低錦鯉的非特異性免疫功能有待進(jìn)一步研究。

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