丙型肝炎病毒核心抗原檢測的臨床價值

余建華　陳瑜　常琪

摘要：目的 探討血清中丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）檢測的臨床價值。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測HCV-cAg；采用化學(xué)發(fā)光方法檢測HCV-Ab；采用實時熒光定量PCR方法檢測HCV-RNA。結(jié)果 137例HCV-Ab陽性標(biāo)本中HCV-RNA與HCV-cAg檢測兩種方法通過Kappa檢驗得出的結(jié)論一致性較好（P<0.001，Kappa=0.893）；HCV-RNA和HCV-cAg陽性檢出率分別為40.15%和37.96%，采用配對卡方檢驗，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.571，P>0.05）。55例HCV-RNA陽性標(biāo)本中HCV-RNA拷貝數(shù)對數(shù)值與HCV-cAgOD均值之間有良好的正相關(guān)性（r=0.882，P<0.05）。結(jié)論 HCV-cAg檢測操作簡便，能夠縮短診斷丙肝病毒感染的時間，其水平一定程度上能反應(yīng)丙型肝炎患者體內(nèi)HCV復(fù)制程度，具有較好的臨床實用價值。

關(guān)鍵詞：丙型肝炎病毒抗體；丙型肝炎病毒-RNA；丙型肝炎病毒核心抗原

丙型肝炎病毒（HCV）是丙型病毒性肝炎的病原體，主要經(jīng)血液傳播，是目前引起輸血后肝炎最常見和最嚴(yán)重的病原體。丙型肝炎能引起急性和慢性肝炎，其感染慢性化占75%～85%，且慢性丙型肝炎與肝硬化和原發(fā)性肝癌關(guān)系密切[1]。我國丙型病毒性肝炎的報告病例數(shù)呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢，嚴(yán)重威脅人民的生命健康。由于目前尚無針對HCV的有效疫苗可供臨床使用，因此對于丙肝感染的及早檢出并通過一系列有效措施阻斷其在易感人群間的傳播就顯得尤為重要。近年來，陸續(xù)出現(xiàn)了一些關(guān)于HCV核心抗原（HCV-cAg）可以縮短丙肝感染檢測窗口期，提高感染檢出率的報道[2-3]。本文通過檢測丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）陽性患者血清中HCV-cAg、HCV-RNA來探討HCV-cAg檢測在臨床的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 137例HCV-Ab陽性血清標(biāo)本來自我院2014年1月～2015年5月門診和住院患者，其中男性76例，女性61例，年齡16～68歲，平均39.7歲。所有標(biāo)本均空腹抽取靜脈血離心分離血清，經(jīng)HCV-Ab檢測陽性，選取S/CO>3.0標(biāo)本，于-20℃冰箱保存?zhèn)錅y。

1.2 儀器與試劑 HCV-cAg酶免試劑盒購自湖南康潤藥物有限公司，儀器為意大利亞特斯全自動酶免分析儀；HCV-RNA試劑購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司，儀器為廈門安普利公司熒光定量PCR檢測儀；HCV-Ab試劑為雅培公司原裝試劑，儀器為雅培i2000化學(xué)發(fā)光儀。

1.3檢測方法 HCV-cAg采用ELISA方法；HCV-RNA采用實時熒光定量PCR方法；HCV-Ab采用化學(xué)發(fā)光方法檢測。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用率（%）表示，比較采用配對χ2檢驗；采用Pearson進(jìn)行相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HCV-cAg與HCV-RNA檢測結(jié)果的一致性分析137例HCV-Ab陽性標(biāo)本中，HCV-cAg陽性標(biāo)本52例，HCV-RNA陽性標(biāo)本55例，兩種檢驗方法通過比較Kappa檢驗結(jié)果（P<0.001，Kappa值=0.893），可認(rèn)為這兩種檢驗方法得出的結(jié)論一致性較好，見表1。

2.2 HCV-cAg與HCV-RNA陽性檢出率比較137例HCV-Ab陽性標(biāo)本中，HCV-RNA陽性檢出率為40.15%（55/137）大于HCV-cAg陽性檢出率37.96%（52/137），HCV-cAg與HCV-RNA陽性檢出率相比較采用配對χ2檢驗，差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.571，P>0.05）。

2.3 HCV-RNA陽性標(biāo)本中HCV-RNA拷貝數(shù)與HCV-cAg吸光度（OD值）之間的相關(guān)性55例HCV-RNA陽性標(biāo)本中HCV-RNA拷貝數(shù)對數(shù)值與HCV-cAgOD均值之間有良好的正相關(guān)性（r=0.882，P<0.05），見表2。

3 討論

丙型肝炎病毒核心抗原是丙肝病毒顆粒的結(jié)構(gòu)蛋白，是導(dǎo)致丙型肝炎體液免疫的重要蛋白，在各亞型丙型肝炎病毒中高度保守，血清中的丙肝病毒核心抗原非常穩(wěn)定，是比較理想的丙肝病毒感染標(biāo)志物[4-5]。

臨床上對于診斷丙型肝炎病毒感染多采用ELISA檢測HCV-Ab[6]，因其可同時檢測多個抗原位點，操作簡便等優(yōu)點。但由于廠家之間使用丙型肝炎基因重組抗原質(zhì)量及各抗原片段包被比例的不同，各廠家試劑間的敏感性和特異性存在著一定差異，從而會導(dǎo)致檢測結(jié)果不一致[7]。另外因感染丙型肝炎后HCV-Ab出現(xiàn)較慢，平均約70 d，容易導(dǎo)致HCV感染的漏診[8]。此外，由于酶標(biāo)抗體是廣譜抗人IgG抗體，對吸附在固相上的IgG抗體無篩選作用，這就降低了檢測的特異性，容易產(chǎn)生假陽性結(jié)果[9]。

目前認(rèn)為HCV-RNA是反映HCV復(fù)制最直接最可靠的指標(biāo)，HCV-RNA具有早期、敏感性和特異性較高等特點，但HCV-RNA檢測對實驗室有特殊要求，費用也比較高，在常規(guī)工作和多數(shù)基層醫(yī)療單位還難以開展。本實驗結(jié)果顯示137例HCV-Ab陽性標(biāo)本中，HCV-cAg和HCV-RNA兩種檢驗方法通過比較Kappa檢驗結(jié)果（P<0.001，Kappa=0.893），可認(rèn)為這兩種檢驗方法得出的結(jié)論一致性較好，即診斷結(jié)果基本一致。HCV-RNA與HCV-cAg陽性檢出率分別為40.15%和37.96%，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.571，P>0.05）。本實驗HCV-cAg檢出率與某些報道[10]不一致，這可能與標(biāo)本選取和不同廠家試劑敏感性、特異性不同有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示HCV-RNA陽性標(biāo)本中HCV-cAgOD均值與HCV-RNA拷貝數(shù)對數(shù)值之間具有良好的正相關(guān)性（r=0.882，P<0.05），說明HCV-cAg一定程度上可以反映體內(nèi)丙肝病毒復(fù)制的活躍程度。

本實驗結(jié)果中有5例HCV-RNA陽性但HCV-cAg陰性樣本，可能是慢性丙肝病毒感染，目前低于核心抗原的最低檢測值。另有2例HCV-cAg陽性而HCV-RNA陰性樣本，可能是非特異性抗體干擾導(dǎo)致的假陽性，具體原因有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，筆者認(rèn)為HCV-cAg檢測不需要特殊的儀器，操作簡便，縮短了發(fā)現(xiàn)丙肝病毒感染的時間，可以彌補抗體檢測的不足，在一定程度上還可作為HCV-RNA的替代或補充檢測指標(biāo)，對評價HCV感染、復(fù)制和治療具有重要的臨床應(yīng)用價值。在無條件開展HCV-RNA檢測的基層醫(yī)療單位可以同時檢測HCV-cAg和HCV-Ab，達(dá)到早期診斷的目的。在已開展HCV-RNA檢測的醫(yī)院，最好也開展HCV-cAg檢測，以避免RNA波動期或RNA樣本降解造成的HCV-RNA假陰性。HCV-RNA、HCV-cAg和HCV-Ab同時檢測不但可以盡早檢出和早期防治丙型肝炎感染，也可以減少由于輸血后丙型肝炎引起的醫(yī)療糾紛。

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編輯/張燕