近10年有關(guān)卒中后抑郁動物實驗的研究進展

車有路　章顯寶　肖偉

摘要：近年來隨著卒中后抑郁的發(fā)病率與日俱增，有關(guān)卒中后抑郁的動物實驗研究報道日益增多，相關(guān)文獻層出不窮。筆者通過查閱相關(guān)文獻，從卒中后抑郁的發(fā)病機制，動物模型的建立，針刺干預(yù)，中藥以及西醫(yī)藥物治療卒中后抑郁等幾個方面概述近10年有關(guān)卒中后抑郁動物實驗的研究進展，并提出研究中存在的問題。

關(guān)鍵詞：卒中后抑郁；動物實驗研究；綜述

卒中后抑郁（post stroke depression，PSD）是腦卒中后的最常見的并發(fā)癥之一，是腦卒中患者最常見的心理障礙，其患病率可高達20%～60%。卒中后抑郁可嚴重損害腦卒中患者的認知功能，影響患者的預(yù)后情況，增加患者癡呆及自殺的風險，給患者的家庭及社會帶來沉重的壓力。現(xiàn)將近10年關(guān)于卒中后抑郁的動物實驗研究進展綜述如下。

1 卒中后抑郁的發(fā)病機制

PSD的發(fā)病機制復(fù)雜，涉及神經(jīng)生物學、解剖學和社會學、心理學等諸多因素。在20世紀80年代，Robinson等就提出，腦內(nèi)參與情感調(diào)節(jié)的5-HT能神經(jīng)元和NE能胞體位于腦干，其軸突通過丘腦和基底節(jié)到達額葉皮質(zhì)，腦卒中病變累及上述部位可影響5-HT能神經(jīng)元和NE能神經(jīng)元及其通路，導(dǎo)致兩種遞質(zhì)水平降低而引起抑郁。Moller等利用正電子發(fā)射型計算機斷層顯像（PET）間接估計了5-HT受體活性，研究發(fā)現(xiàn)在急性卒中后5-HT神經(jīng)遞質(zhì)出現(xiàn)代謝的異常，尤其在邊緣系統(tǒng)和中縫核5-HT代謝的顯著下降，可能與抑郁的發(fā)生相關(guān)。臨床上使用5-輕色胺再攝取抑制劑可緩解PSD的癥狀，進一步支持PSD與單胺類神經(jīng)遞質(zhì)下降有關(guān)的觀點。Terroni等根據(jù)MRI研究結(jié)果顯示病灶影響邊緣-皮質(zhì)-紋狀體-蒼白球-丘腦神經(jīng)環(huán)，尤其是前額葉腹側(cè)和背側(cè)扣帶回皮層、海馬、杏仁核等易產(chǎn)生PSD，且以左側(cè)為著，而這種情況未見于腦橋背部和小腦。說明前額葉背外側(cè)皮質(zhì)環(huán)路在情緒 的調(diào)節(jié)中起著重要作用，腦內(nèi)該區(qū)域白質(zhì)纖維連接的改變可能也會影響情緒調(diào)節(jié)過程。這與控制情感的神經(jīng)環(huán)路主要分布在額顳葉、邊緣系統(tǒng)和腦干腹部及其皮層下聯(lián)系纖維的研究結(jié)果相一致。有學者認為，腦卒中"突如其來"的發(fā)生和其嚴重程度，使患者的工作和日常生活能力改變甚至喪失，導(dǎo)致患者心理應(yīng)激障礙、心理平衡失調(diào)，由此對抑郁癥的產(chǎn)生有一定的作用。

2 卒中后抑郁動物模型的建立

有關(guān)卒中后抑郁的動物模型的建立，近年來國內(nèi)文獻報道多為復(fù)合模型即在卒中基礎(chǔ)上結(jié)合相應(yīng)應(yīng)激刺激構(gòu)建PSD模型。裘濤等[1]采用雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎后予以行為限制制作PSD大鼠模型，觀察大鼠自發(fā)性行為改變，海馬區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的變化。結(jié)果顯示：模型組大鼠水平運動得分、垂直運動得分、清潔動作次數(shù)與假手術(shù)組比較顯著下降（P<0.05；P<0.01），海馬區(qū)5-HT、5-HTAA、DA、NE水平與假手術(shù)組比較下調(diào)（P<0.05）。結(jié)論：大鼠雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎結(jié)合行為限制，可為卒中后抑郁的實驗及臨床研究提供較為理想的動物模型。劉福友[2]等采用大腦中動脈線栓法制備局灶性腦缺血大鼠模型，在此基礎(chǔ)上結(jié)合孤養(yǎng)、中度的不可預(yù)測應(yīng)激處理（chronic unpredictable mild stress，CUMS）復(fù)合制備腦卒中后抑郁大鼠模型。運用糖水實驗、敞箱實驗、被動躲避實驗評定腦卒中后抑郁大鼠的興趣感變化、自發(fā)活動和探究行為等抑郁行為學改變。采用熒光分光度法測定大鼠腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平。得到的結(jié)果是：①腦卒中后抑郁組腦卒中后第7，14d的體質(zhì)量顯著低于正常對照組（P<0.05；P<0.01）；②腦卒中后抑郁組糖水消耗量顯著低于正常對照組（P<0.01）；③腦卒中后抑郁大鼠敞箱活動低下，被動躲避缺陷；④腦卒中后抑郁組雙側(cè)額頂皮質(zhì)及腦干的去甲腎上腺素、5-羥色胺顯著降低。結(jié)論如下：在局灶性腦缺血大鼠模型的基礎(chǔ)上復(fù)合孤養(yǎng)和應(yīng)激處理可以制備出較理想的腦卒中后抑郁大鼠模型。范文濤[3]等選取SD成年大鼠，采用單側(cè)頸總動脈不全結(jié)扎制備局灶性腦缺血模型，聯(lián)合孤養(yǎng)和小劑量利血平皮下注射制備腦卒中后抑郁癥模型。結(jié)果提示：腦卒中后抑郁癥動物模型腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量降低；行為學表明活動減少，快感缺乏。充分模擬腦卒中后抑郁患者的核心癥狀，動物死亡率低，實驗重復(fù)性好，操作性較強，是腦卒中后郁抑癥的理想模型。李晶等[4]采用頸內(nèi)動脈線栓再灌注法制備局灶性腦缺血大鼠模型，結(jié)合孤養(yǎng)和慢性不可預(yù)見的溫和性應(yīng)激方法制備PSD大鼠模型，以體重、蔗糖水試驗、曠野試驗，Morris水迷宮試驗結(jié)果作為判定抑郁狀態(tài)的指標。結(jié)果顯示模型組和抑郁組大鼠體重明顯低于對照組，蔗糖水飲用量、曠野試驗水平和垂直運動與對照組相比明顯減少，有顯著差異（P<0.01），模型組和抑郁組相比沒有顯著差別。結(jié)論是用頸內(nèi)動脈線栓再灌注法制備局灶性腦缺血大鼠模型，結(jié)合孤養(yǎng)和慢性不可預(yù)見的溫和性應(yīng)激方法制備的PSD模型大鼠同時具備了腦缺血和抑郁的特點，經(jīng)抗抑郁藥物治療后癥狀明顯改善，說明PSD模型制備成功。

3 針刺干預(yù)PSD大鼠的實驗研究

卒中后抑郁患者不僅有精神障礙癥狀而且還存在肢體的活動障礙，采用體針治療卒中后抑郁可以顯著促進患者肢體的恢復(fù)，平衡患者臟腑的陰陽，調(diào)節(jié)患者氣血的虛實。龔燕等[13]采用單側(cè)頸總動脈不全結(jié)扎聯(lián)合孤養(yǎng)和小劑量利血平皮下注射制備復(fù)合型PSD大鼠模型。觀察各組大鼠的行為學變化；利用熒光分光光度法測定各組大鼠大腦海馬區(qū)NE和5-HT含量。結(jié)果顯示，與正常組相比，模型組大鼠糖水消耗量和腦內(nèi)NE、DA含量均明顯下降。電針能使PSD大鼠糖水消耗量和腦神經(jīng)遞質(zhì)NE、DA含量明顯增加。得到的結(jié)論是：電針治療PSD大鼠的機制可能與提高其海馬區(qū)5-HT和NE含量有關(guān)。孫培養(yǎng)等[14]選擇通督調(diào)神針法干預(yù)卒中后抑郁大鼠。結(jié)果：造模完成時，模型組和針刺組蔗糖水飲用量、水平及垂直運動得分、血漿中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量均較正常組降低，Zea Langa神經(jīng)行為學評分提高，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.01，P<0.05）；治療4w時，與正常組和針刺組比較，模型組大鼠蔗糖水飲用量、水平及垂直運動得分、血漿中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量均降低，Zea Langa神經(jīng)行為學評分提高，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05，P<0.01），而正常組與針刺組比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。得到的結(jié)論如下：通督調(diào)神針法可以改善PSD模型大鼠的行為，提高其血漿單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量，提示通督調(diào)神針法治療PSD機制可能是通過調(diào)節(jié)血漿單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量。劉丹等采用免疫組化法檢干預(yù)卒中后抑郁大鼠的研究進展測大鼠5-HT1AR及BDNF含量的變化，觀察從痰論治針刺選穴對預(yù)處理組治療組的干涉作用。結(jié)果顯示：針刺治療組及針刺預(yù)防組5-HT1AR與正常組接近，但明顯低于模型組。針刺治療組及針刺預(yù)防組BDNF在額葉皮質(zhì)的表達則顯著升高，卒中組大鼠BDNF表達低于針刺治療組，但仍顯著高于模型組。得到的結(jié)論是：模型組大鼠的5-HT1AR表達增加而BDNF的表達降低。從痰論治選穴，可以通過降低5-HT1AR的表達，增強BDNF的表達功能，對卒中后抑郁起到治療和治療作用。

4 中醫(yī)藥物干預(yù)PSD大鼠的實驗研究

中醫(yī)認為卒中后抑郁屬于"中風"與"郁證"范疇，由于受到軀體病殘的困擾，最終情緒抑郁。裘濤等[1]采用雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎后予以行為限制制作PSD大鼠模型，隨機分為模型組、滌痰開竅解郁組、氟西汀組，并設(shè)假手術(shù)組，采用RP-HPLC-熒光檢測法測定大鼠海馬區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的變化，并觀察大鼠自發(fā)性行為改變。結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型組大鼠行為能力下降（P<0.01or0.05），海馬區(qū)5-HT，5-HIAA，DA，NE水平下調(diào)（P<0.05）。鹽酸氟西汀、滌痰開竅解郁湯治療后糖水試驗均較模型組有改善，腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平提高（P<0.05）。因此，滌痰開竅解郁湯可以改善卒中后抑郁大鼠的行為及腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平。沈曉明等對成年雄性SD大鼠采用雙側(cè)頸總動脈永久性結(jié)扎后予以行為限制的方法制備PSD大鼠模型，將造模成功的雄性SD大鼠隨機分為模型組、假手術(shù)組、氟西汀組以及舒郁顆粒高、中、低劑量組共6組，分別給予蒸餾水、氟西汀溶液及舒郁顆粒高、中、低（2.4，1.2，0.6g·kg-1）劑量i·g，22d后觀察大鼠自發(fā)性行為改變、海馬區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及TNF-α，IL 1β含量的變化。通過檢測大鼠行為學變化，舒郁顆粒高、中、低劑量組與氟西汀組各項指標無明顯差異，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），檢測大鼠腦組織海馬區(qū)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)及炎癥因子的含量，與模型組比較，舒郁顆粒高、中、低劑量組NE、DA、5-HT水平上升有顯著性差異（P<0.05），TNF-α及IL 1β含量均顯著下降（P<0.05），而與假手術(shù)組無明顯差異；與氟西汀組各項指標無明顯差異?？芍嬗纛w?？擅黠@改善卒中后抑郁大鼠的行為，提高卒中后抑郁大鼠模型海馬單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平，降低炎癥細胞因子含量水平。樊蔚虹等選用健康雄性SD大鼠100只，隨機分為三組，即柴胡疏肝散治療組、PSD模型組和正常組。除正常組外，其余兩組首先線栓法制備MCAO模型，并按longa評分標準進行評分，手術(shù)1w后開始復(fù)合制備PSD大鼠模型，同時柴胡疏肝散組（7.875g·kg-1·d-1），i·g，21d，模型組蒸餾水i·g。免疫組化法檢測大鼠海馬組織Bcl-2，Bax蛋白表達。結(jié)果顯示與正常組比較，模型組Bax蛋白陽性表達升高，Bcl-2蛋白表達下降（P<0.01）；柴胡疏肝散組與模型組比較，則明顯下調(diào)Bax蛋白表達（P<0.01），上調(diào)Bcl-2蛋白表達（P<0.01）。結(jié)論：柴胡疏肝散可通過下調(diào)Bax、上調(diào)Bcl-2蛋白的表達而抑制神經(jīng)細胞凋亡，從而發(fā)揮對PSD的治療作用。

5 西醫(yī)藥物干預(yù)PSD大鼠的實驗研究

PSD的西醫(yī)藥物治療包括原發(fā)病、并發(fā)癥和抑郁癥的治療?；颊咭蛐柰瑫r服用治療腦卒中、高血壓或其他并發(fā)癥的藥物，故在選擇藥物時，應(yīng)選擇相互作用小的藥物，所以新型抗抑郁劑有一定優(yōu)勢，更適于神經(jīng)系統(tǒng)疾病所致繼發(fā)性抑郁的治療。趙立波等采用CUMS結(jié)合孤養(yǎng)建立抑郁模型，MCAO術(shù)建立卒中模型PSD模型組和氟西汀組大鼠先建立卒中模型后建立抑郁模型，腹腔注射相應(yīng)藥物進行干預(yù)，連續(xù)給藥21d后，用酶聯(lián)免疫法和免疫組化SABC法檢測給藥后各組大鼠腦組織中5-HT，NE，NGF的表達。結(jié)果顯示與假手術(shù)組比較，抑郁模型組和PSD模型組大鼠腦組織中5-HT，NE，NGF表達均明顯降低（P<0.01）；與抑郁模型組和PSD模型組比較，氟西汀組大鼠腦組織中5-HT，NE，NGF表達均明顯升高（P<0.01），且氟西汀組與假手術(shù)組比較無顯著性差異（P>0.05）。可知氟西汀能顯著提高PSD模型大鼠腦組織中5-HT，NE，NGF水平。用Morris水迷宮試驗評價大鼠空間學習與記憶功能，用免疫組織化學方法分析海馬CA3區(qū)BDNF的表達。結(jié)果顯示：與對照組比較，模型組大鼠學習能力顯著下降（P<0.05）；而且BDNF陽性細胞數(shù)也較對照組下降，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），PSD大鼠經(jīng)文拉法辛5，10及20mg·kg-1·d-1治療后，認知功能和BDNF表達均顯著提高。得到的結(jié)論如下：文拉法辛能改善卒中后抑郁大鼠學習記憶障礙；這可能與增加海馬腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子有關(guān)。

6 研究存在的問題及展望

綜上所述，國內(nèi)外學者在論述PSD發(fā)病的因素時各有側(cè)重，具體的發(fā)病機制尚未明確?，F(xiàn)在多數(shù)學者認為其發(fā)病是由多種原因通過多種機制所致，與心身疾病的生物-心理-社會醫(yī)學模式相一致，可能是神經(jīng)生物學因素和社會心理因素共同作用的結(jié)果。

目前，關(guān)于PSD的研究大多建立在動物實驗的基礎(chǔ)上，制備的動物模型主要以缺血性卒中為主，但卒中的發(fā)病類型包括出血性卒中和缺血性卒中，關(guān)于出血性卒中后抑郁動物模型的制備相對較少，這方面的研究信息相對缺失。并且，一般情況下卒中后抑郁患者多合并高血壓病、血脂異常等基礎(chǔ)病，而這些在動物模型身上無法一一體現(xiàn)；同時，在動物實驗造模、治療、取材的過程中，都有可能出現(xiàn)一些輕微的誤差，如取材的不完整性等。這些都有可能導(dǎo)致實驗結(jié)果存在一定的誤差，以至于影響實驗的準確性。

其次，關(guān)于卒中后抑郁治療方法頗多，有針灸、中醫(yī)藥物、西醫(yī)藥物等。腦卒中后抑郁屬于"中風"與"郁證"范疇，運用中醫(yī)藥物治療時，應(yīng)綜合分析患者實際病情，并概括患者分型，從而辯證論治。針灸療法治療卒中后抑郁一方面可以幫助患者殘肢的功能恢復(fù)，間接有利于患者抑郁狀態(tài)的改變，另一方面疏肝行氣、調(diào)和陰陽，又起到直接改善患者情緒的作用。西醫(yī)藥物治療PSD的治療原則是早期、單一藥物、綜合、個體化、長期系統(tǒng)用藥。目前運用較為廣泛的是：三環(huán)類抗抑郁藥、5-HT再攝取抑制劑、NE再攝取抑制劑等，但西醫(yī)藥物的使用存在一定的副作用。

因此，尋求PSD的發(fā)病機制以及制備理想的PSD模型，尋找治療PSD有效的方法是目前亟待解決的問題，相信隨著分子生物學、神經(jīng)生物學等基礎(chǔ)學科的發(fā)展和西醫(yī)學技術(shù)的不斷介入，卒中后抑郁的發(fā)病機制研究正從多層次、多角度不斷深入。假以時日，肯定能提出卒中后抑郁的最佳治療方案。

參考文獻：

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編輯/蔡睿琳