離子色譜法同時測定白酒中3種甜味劑方法探討

楊仁君，孫　潔，李好轉(zhuǎn)，孫立臻，郭學(xué)鳳

（山東景芝酒業(yè)股份有限公司，山東景芝262119）

離子色譜法同時測定白酒中3種甜味劑方法探討

楊仁君，孫潔，李好轉(zhuǎn)，孫立臻，郭學(xué)鳳

（山東景芝酒業(yè)股份有限公司，山東景芝262119）

用離子色譜法同時測定白酒中甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉3種人工合成甜味劑，避免了氣相色譜、液相色譜等儀器測定時存在的假陽性及柱前衍生復(fù)雜性的問題。樣品只需簡單前處理即可直接進樣測定。本方法分析速度快、靈敏度高，可用于白酒廠中對甜味劑的日常檢測，從而實現(xiàn)快速監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量的目的。

離子色譜； 白酒； 甜蜜素； 安賽蜜； 糖精鈉

甜味劑是一類重要的食品添加劑，近幾年來，有些酒類企業(yè)為了自身利益，在酒中添加甜味劑以改善口感，也有部分企業(yè)因原材料進貨把關(guān)不嚴(yán)，使用含有甜味劑的酒用香精香料，造成白酒產(chǎn)品中甜味劑超標(biāo)。研究表明，攝入高劑量的甜味劑會對人體的肝臟和神經(jīng)系統(tǒng)造成傷害，甚至引發(fā)癌癥，因此人工合成甜味劑的合理使用，不僅關(guān)系到產(chǎn)品的質(zhì)量，更與廣大消費者的健康密不可分。我國強制性國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，禁止在蒸餾酒中使用甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉等甜味劑。如何快速、準(zhǔn)確地檢測白酒中的相關(guān)甜味劑成為白酒質(zhì)量控制的重要工作。

目前，酒中相關(guān)甜味劑的測定主要有氣相色譜法、液相色譜法、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等幾種檢測方法。氣相色譜法測定白酒中甜蜜素，存在著假陽性的問題；液相色譜法測定甜蜜素需柱前衍生處理，操作復(fù)雜，且單次進樣只能檢測1種或2種甜味劑，耗費大量的人力、物力和時間，檢測過程繁瑣，效率低下；而液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法設(shè)備昂貴，普及性并不廣。本研究建立了一種用離子色譜法一次進樣同時檢測白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜3種甜味劑的方法，提高了工作效率。所建立的方法精密度和準(zhǔn)確性均較好，且樣品前處理簡單，操作簡便，適用于白酒中3種甜味劑的測定。

1　材料與方法

1.1材料、試劑及儀器

樣品：1#、2#、3#白酒樣品分別為一品景芝吉品（42%vol）、一品景芝妙品（46%vol）、一品景芝尚品（53%vol），白酒樣品為本公司產(chǎn)品。

試劑：甜蜜素（5000 mg/L，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心）；安賽蜜（1000 mg/L，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心）；糖精鈉（1000 mg/L，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心）；超純水（Milli-Q Refemence，電阻率為18.2 MΩ/cm）；C18固相萃取小柱；0.22 μm尼龍濾膜；pH試紙。

儀器設(shè)備：ICS-5000型離子色譜儀（Dionex，美國）；Chromeleon 6.80色譜工作站；進口超純水機（Merck Millipore）；抑制器：ASRS型抑制器4 mm。

1.2實驗方法

1.2.1標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制

分別將甜蜜素5000 mg/L、安賽蜜1000 mg/L、糖精鈉1000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，稀釋成濃度均為50 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

1.2.2混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別取甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液一定體積，置于同一個10 mL的容量瓶中，用超純水定容到刻度，配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，見表1。

表1　甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉混合標(biāo)準(zhǔn)液的配制

1.2.3樣品溶液的制備

取10 mL白酒樣品，水浴除去酒精，再加水定容到10 mL，調(diào)整樣品溶液pH值至9～10，再用C18固相萃取小柱過濾，棄去最初濾液約20 mL，收集其他濾液，用0.22 μm尼龍濾膜過濾，直接進樣分析。

1.2.4離子色譜分析條件

色譜分析柱：IonPacAS17-C陰離子交換分析柱（250×4 mm）與IonPacAG17-C保護柱（50×4 mm）。

淋洗液：用淋洗罐調(diào)解KOH，1～3 min 6 mM；13.1～23 min 70 mM；23.1～26 min 6 mM。

淋洗液流速：1.0 mL/min。

抑制器：ASRS型抑制器4 mm，外接水模式，抑制電流為175 mA。

進樣量：25 μL。模塊溫度：30℃。

1.2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

分別稀釋甜蜜素5000 mg/L、安賽蜜1000 mg/L、糖精鈉1000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，配成濃度均為50 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液；分別取甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液各40 μL、100 μL、300 μL、500 μL、800 μL、1000 μL，置于6個10 mL的容量瓶中，用超純水定容到刻度，配制成0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.5 mg/L、2.5 mg/L、4.0 mg/L混合系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，見表1。在選定的色譜條件下測定，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖1。

2　結(jié)果與討論

2.1甜味劑的色譜分離度

甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉這3種甜味劑在堿性條件下都成陰離子狀態(tài)，并具有較高的電導(dǎo)效應(yīng)。采用離子色譜二階梯度淋洗的方法，外接水模式，樣品過前處理小柱和0.22 μm尼龍濾膜，無需衍生化，直接進樣分析，3種甜味劑標(biāo)樣色譜圖見圖1。從圖1可看出，3種甜味劑在以上特定的分離條件下可以達到很好的分離效果。

圖1　3種甜味劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的離子色譜圖

2.2檢出限

本方法的檢出限以3倍信噪比（s/N）作為檢出限，確定3種物質(zhì)檢出限為甜蜜素0.012 mg/L，安賽蜜0.020 mg/L，糖精鈉0.018 mg/L。

2.3甜味劑相關(guān)系數(shù)、回收率和精密度

在0.2～4 mg/L范圍內(nèi)配制5個不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

以3種甜味劑的離子色譜峰面積為縱坐標(biāo)，相應(yīng)3種甜味劑濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)校正曲線，結(jié)果表明，3種甜味劑在濃度為0.2～4.0 mg/L線性范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)校正曲線線性良好，相關(guān)系數(shù)大于0.999（表2）。

準(zhǔn)確量取300 μL、500 μL和800 μL濃度為10 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)液，用酒樣定容至10 mL，分別配制成濃度為0.30 mg/L、0.50 mg/L、0.80 mg/L的加標(biāo)溶液。按照1.2.3所述方法處理樣品，根據(jù)1.2.4分離條件進樣分析，平行測定6次，計算各種甜味劑的回收率和精密度，所得數(shù)據(jù)見表2。

表2　甜蜜素、安賽蜜、糖精鈉的回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

由表2可知，通過對3種甜味劑相關(guān)系數(shù)來看，線性良好，回收率較高，說明了用該方法檢測白酒中甜味劑所得到的數(shù)據(jù)可靠。

2.4發(fā)酵白酒甜味劑的分析

以相對保留時間和色譜峰（面積）定性和定量，所得到的樣品圖譜見圖2。

圖2　白酒中甜味劑的離子色譜圖

2.5樣品測定

在以上建立的離子色譜條件下，對本公司1#一品景芝吉品（42%vol）、2#一品景芝妙品（46%vol）、3#一品景芝尚品（53%vol）樣品按照1.2.3前處理后進行測定，結(jié)果見表3。酒樣中3種甜味劑均未檢出，測定結(jié)果符合國家標(biāo)準(zhǔn)對蒸餾酒中甜味劑含量的要求。

表3　白酒中3種甜味劑的檢測結(jié)果

3　結(jié)論

本研究建立了一種用離子色譜法一次進樣能夠同時檢測白酒中甜蜜素、糖精鈉、安賽蜜3種甜味劑的方法，能準(zhǔn)確定量白酒中3種甜味劑含量，實驗證明，該方法無需衍生、簡單、快速、靈敏度高，可用于白酒廠中對甜味劑的日常檢測，從而實現(xiàn)快速監(jiān)控產(chǎn)品質(zhì)量的目的，確保為消費者提供優(yōu)質(zhì)安全的白酒產(chǎn)品。

［1］全國食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會釀酒分技術(shù)委員會.芝麻香型白酒：GB/T 20824—2007［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2007.

［2］中華人民共和國衛(wèi)生部.食品中環(huán)已基氨基磺酸鈉的測定：GB/T 5009.97—2003［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2004.

［3］中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)：GB 2760—2014［S］.北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2015.

［4］戴安公司.ICS系列離子色譜應(yīng)用技術(shù)專輯［R/OL］. （2008-12-21）.http://files.instrument.com.cn/ bbs/upfile/2008122171239.pdf.

［5］卜宇宏，李明，李靜.離子色譜測定白酒中甜蜜素、糖精鈉和安賽蜜［J］.釀酒，2011，38（5）：71-73.

［6］李紅艷.白酒中甜蜜素的無衍生離子色譜法檢測［J］.分析測試學(xué)報，2010（8）：859-863.

［7］岳志堅.毛細管氣相色譜法測定白酒中甜蜜素［J］.理化檢驗（化學(xué)分冊），2008（8）：785.

［8］梅婕，司冠儒，張溫清，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定白酒中6種甜味劑［J］.釀酒，2016，261（3）：122-124.

Simultaneous Determination of Three Kinds of Sweeteners in Baijiu by Ion Chromatography

YANG Renjun，SUN Jie，LI Haozhuan，SUN Lizhen and GUO Xuefeng
（Shandong Jingzhi Distillery Co.Ltd.，Jingzhi，Shandong 262119，China）

Three artificial sweeteners including sodium cyclamate，acesulfame potassium and saccharin sodium salt in Baijiu were detected simultaneously by ion chromatography，which excluded the problems of false positive results and pre-column derivatization complexity caused by gas chromatographic and liquid chromatographic instruments.Baijiu samples could be directly measured after simple pretreatment.This method had the advantages of fast analysis and high sensitivity，and it could be applied in daily detection of sweeteners in distilleries，thereby realizing quick monitoring on product quality.

ion chromatography；Baijiu；sodium cyclamate；acesulfame potassium；saccharin sodium salt

TS262.3；TS261.7；TS261.4

A

1001-9286（2016）09-0122-03

10.13746/j.njkj.2016242

2016-07-28

楊仁君（1975-），男，工程師，從事白酒質(zhì)量管理工作。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2016-08-12；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160812.1021.002.html。