互葉百千層提取物對仔豬血清溶菌酶的影響

雷小文?

（贛州市畜牧研究所，江西??贛州??341000）

互葉百千層提取物對仔豬血清溶菌酶的影響

雷小文

（贛州市畜牧研究所，江西??贛州??341000）

溶菌酶是動物機(jī)體非特異性免疫的重要指標(biāo)。通過測定仔豬血清中溶菌酶的含量變化來評價互葉百千層提取物對仔豬非特異性免疫力的影響。以灌服方式給仔豬飼喂不同濃度的提取物，以黃芪多糖、長效土霉素、以及不添加藥物的空白組作為試驗(yàn)對照；觀察測定仔豬腹瀉發(fā)病率、死亡率，檢測血清中溶菌酶含量。結(jié)果顯示，該提取物能夠顯著提高仔豬血清中溶菌酶的含量，效果可與黃芪多糖媲美。該試驗(yàn)結(jié)果對提高植物提取物在防治仔豬腹瀉中的開發(fā)與運(yùn)用具有重要的意義。

溶菌酶；互葉百千層提取物；黃芪多糖；仔豬；非特異性免疫

溶菌酶在醫(yī)藥衛(wèi)生、食品生產(chǎn)保存等領(lǐng)域用途廣泛，具有抗菌、消炎、抗病毒等作用［1-2］；近年來，溶菌酶在動物疾病預(yù)防中的應(yīng)用研究逐漸引起研究人員的重視，其在提高畜禽非特異性免疫、殺滅病原微生物等方面具有很好的效果［3］。仔豬腹瀉是危害仔豬健康的主要疾病之一，仔豬一旦發(fā)生腹瀉，不僅死亡率高，而且治愈后的仔豬往往生長發(fā)育受阻，飼料轉(zhuǎn)化率下降［4］。對于仔豬腹瀉的防治，使用微生態(tài)制劑和中草藥制劑是有效防治仔豬腹瀉，防止抗生素過量使用導(dǎo)致仔豬腸道微生態(tài)失衡的有效手段［5］。

互葉百千層，別名澳洲茶油，是原產(chǎn)于澳洲的一種具有抗菌、抗病毒、消炎、促進(jìn)傷口修護(hù)等功能的植物，鑒于其廣泛的生物學(xué)功能，其樹葉提取物在醫(yī)療衛(wèi)生、預(yù)防保健、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用逐步得到重視［6］?；ト~百千層樹葉提取物成分復(fù)雜，經(jīng)過提取脫毒后用于動物體能夠提高動物機(jī)體免疫力；本文通過研究互葉百千層樹葉提取物飼喂仔豬后血清溶菌酶的變化，探討其對提高仔豬非特異性免疫力的影響以及對機(jī)體內(nèi)殺菌、抗病毒的功能，為下一步開展互葉百千層樹葉提取物用于防治仔豬腹瀉提供基礎(chǔ)。

1　試驗(yàn)材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

大長二元母豬6頭其所產(chǎn)仔豬總計(jì)64頭，均由贛州市某種豬場提供；互葉百千層提取物由無錫市晨芳生物科技有限公司提供；傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗購置于上海海利生物工程有限

公司；黃芪多糖（98%濃度）購置于北京生泰爾有限公司；20%長效土霉素（得米先）購置于美國輝瑞動物保健品有限公司。懷孕母豬料和仔豬哺乳料購置于贛州雙胞胎股份有限公司。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)分組

本次實(shí)驗(yàn)共分為6組（I、II、III、IV、V、VI），每組1頭母豬，及所產(chǎn)仔豬；母豬均為二胎母豬，不同母豬產(chǎn)仔時間前后相差不超過2天，配種公豬均為杜洛克；母豬均在產(chǎn)前2周肌肉注射傳染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)苗。I、II、III、IV、V、VI組試驗(yàn)各組產(chǎn)仔數(shù)分別為11頭、10頭、11頭、11頭、11頭、10頭。

1.2.2試驗(yàn)處理

I組：喂食互葉百千層提取物，在21日齡以內(nèi)通過灌服給藥，每頭豬每天為5?mL，分2次，每次2.5?mL；22日齡至28日齡（斷奶）則采取灌服給藥每頭豬為每天6?mL，一次給藥。

II組：喂食互葉百千層提取物，在21日齡以內(nèi)通過灌服給藥，每頭豬每天為6?mL，分兩次，每次3?mL；22日齡至28日齡（斷奶）則采取灌服給藥每頭豬為7?mL，一次給藥。

III組：喂食互葉百千層提取物，在21日齡以內(nèi)通過灌服給藥，每頭豬每天為7?mL，分兩次，每次3.5?mL；22日齡至28日齡（斷奶）則采取灌服給藥每頭豬為8?mL，一次給藥。

IV組：黃芪多糖組，每頭仔豬通過灌服給藥黃芪多糖顆粒每天5?g（用溫開水溶解），一次給藥完畢，一直用藥到28日齡。

V組：在仔豬3日齡、7日齡、21日齡給進(jìn)行長效土霉素注射液（20%）肌肉注射，分別為每頭豬0.5?mL、1?mL、1.5?mL。

VI組：空白對照組，仔豬不使用任何藥物，只進(jìn)行接種疫苗，做空白對照。

試驗(yàn)各組仔豬免疫程序如下：7?d 和21?d免疫豬氣喘病疫苗；15日齡接種豬藍(lán)耳病弱毒疫苗；24日齡接種豬瘟疫苗，一免。

1.2.3試驗(yàn)管理

試驗(yàn)全期做好仔豬保溫措施，每天進(jìn)行欄舍消毒，保證環(huán)境衛(wèi)生，采取自由飲水，試驗(yàn)期28?d；每日記錄仔豬發(fā)病率、死亡率。

1.2.4數(shù)據(jù)測定

在14日齡和28日齡時前腔靜脈采血，分離血清，測定溶菌酶含量。

1.2.5數(shù)據(jù)處理

分別對試驗(yàn)數(shù)據(jù)用excell進(jìn)行試驗(yàn)處理，對試驗(yàn)組和對照組進(jìn)行t值檢驗(yàn)，以測定試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1試驗(yàn)各組仔豬腹瀉發(fā)病死亡情況

試驗(yàn)各組在采取不同的處理后，仔豬發(fā)病率、腹瀉率、死亡率結(jié)果如表1。

從表1可以看出：試驗(yàn)II組的腹瀉頭數(shù)最低，且發(fā)病和死亡數(shù)也是最低的；添加互葉百千層植物提取物的I組、II組、III組在控制仔豬腹瀉方面都有一定效果，但I(xiàn)I組效果最佳。

2.2不同試驗(yàn)處理仔豬血清溶菌酶含量

試驗(yàn)不同處理組仔豬在14日齡和28日齡前腔靜脈采血，分離血清，測定溶菌酶含量，結(jié)果如表2。

對表2中的各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)，t＜0.05為差異顯著，t＜0.01為差異極顯著。對以上結(jié)果進(jìn)行分析，可以看出：

1）I組、II組、III組在用藥后14?d仔豬血清中溶菌酶的含量都大于VI組（空白對照組），分別高了0.31?U/ mL（t＞0.05）、0.61?U/mL（t＜0.05）、0.16?U/mL（t＞0.05）；用 藥 后28?d則分別高了0.88?U/mL（t＜0.05）、2.33?U/mL（t＜0.01）、0.73（t＜0.05）；因此，II組效果最佳，且在用藥后28?d對溶菌酶的誘導(dǎo)效果要明顯高于14?d。

2）IV組（黃芪多糖）仔豬血清中溶菌酶含量在用藥后14?d和28?d分別比VI組（空白對照）高了0.77?U/mL （t＜0.05）、2.11?U/mL（t＜0.01）。

3）II組（互葉百千層植物提取物對溶菌酶誘導(dǎo)作用效果最佳）和IV組（黃芪多糖）進(jìn)行比較，都能明顯誘導(dǎo)仔豬血清溶菌酶的產(chǎn)生，且誘導(dǎo)效果2組之間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

表1　試驗(yàn)各組仔豬腹瀉發(fā)病死亡情況

表2　試驗(yàn)各組仔豬血清溶菌酶含量

4）V組仔豬血清中溶菌酶的含量與VI組（空白對照組）相比較，前者略低于后者0.08?U/mL（t＞0.05），且在28日齡更加明顯，降低了0.42?U/mL （t＜0.05）?？股氐氖褂迷谝欢ǔ潭壬弦种屏巳芫傅漠a(chǎn)生。

3　討論

溶菌酶具有提高畜禽非特異性免疫、殺滅病原微生物等功能，本試驗(yàn)通過對仔豬灌服互葉百千層植物提取物和黃芪多糖，以抗生素對照和空白對照作為參照，測定用藥后14日齡和28日齡仔豬血清溶菌酶的含量變化。結(jié)果表明：互葉百千層植物提取物能夠誘導(dǎo)仔豬多產(chǎn)生溶菌酶，誘導(dǎo)效果可以與黃芪多糖媲美，且該研究中還發(fā)現(xiàn)互葉百千層植物提取物對仔豬溶菌酶的誘導(dǎo)功能在用藥時間延長的情況下效果要大于黃芪多糖，這有待于進(jìn)一步驗(yàn)證。

互葉百千層植物提取物用于仔豬應(yīng)該選擇最佳有效劑量，用量過大或過小都會降低用藥效果，該研究中發(fā)現(xiàn)“在21日齡以內(nèi)每頭豬6?mL，22日齡至28日齡每頭豬7?mL”是最佳的用藥濃度。

抗生素組的仔豬血清溶菌酶含量低于空白對照組，這提示一些抗生素可能會抑制動物機(jī)體產(chǎn)生溶菌酶；因此，抗生素的使用雖然能夠有效防治仔豬疾病，但能夠抑制機(jī)體的部分非特異性免疫能力，這可能也是導(dǎo)致大量使用抗生素會導(dǎo)致仔豬頑固性腹瀉的原因之一。

［1］?戴清源，?陳祥貴，?李曉霞，?等.溶菌酶的研究進(jìn)展［J］?.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，?2005?（3）：33-34.

［2］?肖懷秋，?林親錄，?李玉珍，?等.溶菌酶及其在食品工業(yè)中的應(yīng)用［J］?.中國食物與營養(yǎng)，?2005?（2）：32-34.

［3］?鄒仕庚，?朱光道.溶菌酶及其在畜禽飼料中的應(yīng)用［J］?.畜禽業(yè)，?2007?（7）：2-3.

［4］?王紅寧.仔豬腹瀉成因及綜合防治技術(shù)措施［J］.中國畜牧雜志，2006，4（6）：5-8.

［5］?楊林.微生態(tài)制劑對仔豬腸道非特異性免疫防御機(jī)能的影響［D］.哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué).2001：7-21.

［6］?吳頔，謝吉蓉，宋琴，等.茶樹油作為天然抗菌劑的研究進(jìn)展［J］.中國藥學(xué)雜志，2013（21）：32-35.

2016-04-22）

江西省星火計(jì)劃項(xiàng)目“利用微生態(tài)制劑和中草藥綜合防治仔豬腹瀉技術(shù)”（編號：2013?2BBF61018）；江西省生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（編號：JXARS-03）；江西現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科研協(xié)同創(chuàng)新專項(xiàng)（編號：JXXTCX2015004-002）

雷小文（1983—），碩士研究生