新疆部分規(guī)?；膛?chǎng)牛病毒性腹瀉調(diào)查

劉潔瓊　新疆兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站　830000

新疆部分規(guī)?；膛?chǎng)牛病毒性腹瀉調(diào)查

劉潔瓊新疆兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)工作總站830000

為了了解新疆部分規(guī)模化奶牛場(chǎng)BVDV的感染情況，對(duì)采集的奶牛血清、流產(chǎn)死胎和鼻拭子等組織病料應(yīng)用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻斷ELISA實(shí)驗(yàn)及牛病毒性腹瀉 （BVD）實(shí)時(shí)熒光RTPCR的方法進(jìn)行檢測(cè)，BVDV血清學(xué)檢測(cè)陽性率為63.8%，組織病料樣品中陽性率為13.46%，結(jié)果表明BVDV在新疆規(guī)?；膛?chǎng)中已存在感染，因此應(yīng)該對(duì)發(fā)病動(dòng)物進(jìn)行隔離或者淘汰，避免相互感染傳播，降低感染率。

牛病毒性腹瀉；阻斷ELISA；實(shí)時(shí)熒光RT-PCR

牛病毒性腹瀉（BVDV）又稱牛病毒性腹瀉-黏膜病，簡(jiǎn)稱黏膜病。與豬瘟病毒和羊邊界病病毒同屬黃病毒科瘟病毒屬。其特征為黏膜發(fā)炎、糜爛、壞死和腹瀉，還引起患畜的持續(xù)性感染，產(chǎn)生免疫抑制或免疫耐受現(xiàn)象。

BVDV是奶牛的主要病原之一，可引起奶牛多種病變或臨床綜合征。自1980年國內(nèi)首次報(bào)道該病以來，我國許多地區(qū)先后報(bào)道有該病的發(fā)生，給畜牧養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。新疆部分地區(qū)牛場(chǎng)有犢牛腹瀉和母牛流產(chǎn)等現(xiàn)象，影響和制約了奶牛業(yè)的發(fā)展。為了了解BVDV的感染情況，我們對(duì)采集的血清和組織病料應(yīng)用Ruminant BVD/BD p80-Serum阻斷ELISA實(shí)驗(yàn)及牛病毒性腹瀉（BVD）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR的方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果報(bào)告如下。

1　材料與方法

（1）樣品來源。血清學(xué)樣品。為了查明新疆地區(qū)部分規(guī)?；膛?chǎng)牛病毒性腹瀉感染狀況，2011～2014年，從A、B、C、D、E五個(gè)規(guī)?；?chǎng)采集存在流產(chǎn)、死胎、弱犢、肺炎和腹瀉等臨床表現(xiàn)的0～8歲齡奶牛的血液樣品。F場(chǎng)主要飼養(yǎng)生活在天山深處（巴音布魯克草原）的牦牛，上世紀(jì)50～60年代從青海引進(jìn)，經(jīng)過60年的繁衍，已經(jīng)適應(yīng)在天山深處的生活環(huán)境，臨床表現(xiàn)健康。病原學(xué)樣品。采集流產(chǎn)死胎的肝、脾和腎等組織59份，1～2月齡有咳嗽、流鼻涕癥狀的犢牛鼻拭子81頭份及耳組織31頭份，2月齡內(nèi)存在腹瀉癥狀犢牛的糞便37頭份，總共208頭份。

（2）主要試劑。Ruminant BVD/BD p80-Serum試劑盒（批號(hào)：1-BVD-015 03-2014）購自法國LSIVET公司，牛病毒性腹瀉（BVD）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒（批號(hào)BVD20140926P）。

（3）檢測(cè)方法。BVDV阻斷ELISA和實(shí)時(shí)熒光RT-PCR的檢測(cè)均參照試劑盒說明書進(jìn)行。

2　結(jié)果

（1）對(duì)6個(gè)牛場(chǎng)522份血清進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示有333份陽性，陽性率為63.8﹪，結(jié)果詳見表1。

表1　牛病毒性腹瀉抗體檢測(cè)結(jié)果

（2）采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法檢測(cè)的組織病料樣品中的陽性率為13.46%。在流產(chǎn)死胎和鼻拭子中檢出BVDV病毒，糞便和耳組織中未檢出該病毒，結(jié)果詳見表2。

表2　牛病毒性腹瀉病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

3　討論和分析

（1）本次調(diào)查的規(guī)模化奶牛場(chǎng)BVDV血清學(xué)檢測(cè)陽性率為63.8﹪，采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法檢測(cè)的組織病料樣品中陽性率為13.46%，并且所采牛群均未進(jìn)行BVDV疫苗免疫，說明BVDV在新疆規(guī)?；膛?chǎng)中已存在感染。我國內(nèi)蒙古部分地區(qū)的陽性率為62.5%，個(gè)別牛場(chǎng)陽性率高達(dá)100%［1］。從陜西、甘肅、寧夏、青海和四川五?。▍^(qū)）部分地區(qū)的黃牛群、牦牛群采集血清，用細(xì)胞中和試驗(yàn)檢測(cè)牛病毒性腹瀉/黏膜?。˙VD-MD）抗體，結(jié)果黃牛群BVD-MD陽性檢出率為46.15%，牦牛群BVD-MD陽性檢出率為30.08%［2］。

（2）此次檢測(cè)中牦牛陽性率為38.3%，其生活在天山深處，有機(jī)會(huì)接觸野生動(dòng)物和家養(yǎng)牛群，但牦牛群和野生動(dòng)物與家養(yǎng)牛群之間的傳播機(jī)制尚不明確，有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

（3）在OIE的陸生動(dòng)物診斷試驗(yàn)和疫苗手冊(cè)中推薦病料采集耳廓組織作為檢測(cè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，此次采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR的方法在發(fā)病犢牛的耳組織未檢測(cè)到BVDV陽性樣品，一種可能是確實(shí)耳廓樣品中不含有檢測(cè)病毒，另外一種可能是采集時(shí)機(jī)不是帶毒時(shí)間區(qū)段，再有一種可能是耳廓的核酸提取有問題，需進(jìn)一步驗(yàn)證。

（4）BVDV感染牛后引起患畜的持續(xù)性感染，產(chǎn)生免疫抑制或免疫耐受現(xiàn)象，而且很少出現(xiàn)臨床癥狀。多數(shù)動(dòng)物外觀健康但生產(chǎn)性能下降，這些外觀健康的持續(xù)性感染動(dòng)物在傳播中具有重要作用。因此，及時(shí)對(duì)發(fā)病動(dòng)物進(jìn)行隔離或者淘汰，避免相互感染傳播。對(duì)感染率高的牛群，可通過疫苗免疫的方法降低發(fā)病率，同時(shí)保持環(huán)境衛(wèi)生和消毒工作，減少有害致病菌的滋生。

［1］申之義，關(guān)平原，李平安等內(nèi)蒙古地區(qū)牛病毒性腹瀉-粘膜病流行病學(xué)調(diào)查.中國獸醫(yī)雜志，1995，21（8）：5-6.

［2］高雙娣，邱昌慶，周繼章等西北和西南五?。▍^(qū)）部分地區(qū)黃牛牦牛牛病毒性腹瀉/粘膜病血清學(xué)監(jiān)測(cè).中國獸醫(yī)科技，1999，29（7）：17-18.

兵團(tuán)重點(diǎn)領(lǐng)域科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目—集約化奶牛場(chǎng)奶牛繁殖障礙類傳染病流行病學(xué)調(diào)查與防控技術(shù)研究（2013BA004）。