五味子揮發(fā)油中萜類、芳香族和脂肪族化合物的成分分析*

劉　華，郭江濤，王知斌，陳亞軍，吳高松，楊炳友，匡海學(xué)（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 教育部北藥基礎(chǔ)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 黑龍江省中藥及天然藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150040）

五味子揮發(fā)油中萜類、芳香族和脂肪族化合物的成分分析*

劉華，郭江濤，王知斌，陳亞軍，吳高松，楊炳友，匡海學(xué)
（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 教育部北藥基礎(chǔ)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 黑龍江省中藥及天然藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150040）

目的：研究五味子揮發(fā)油中的化學(xué)成分。方法：采用水蒸汽蒸餾提取五味子中的揮發(fā)油成分，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法全掃描模式檢測(cè)，采用DB-1701毛細(xì)管色譜柱（60mm×0.25mm×0.25μm），進(jìn)樣量1μL，分流比為5∶1，載氣為高純He；電子轟擊電離方式，能量70eV，倍增電壓1070V。結(jié)果：在五味子揮發(fā)油中檢出了85個(gè)峰，鑒定了43個(gè)化合物，用面積歸一法計(jì)算各個(gè)成分的百分含量。鑒定出的揮發(fā)油占揮發(fā)油總量的66.25%。其中萜類化合物24種，芳香族化合物13種，脂肪族化合物6種，分別占58.70%、5.52% 和2.23%。結(jié)論：五味子揮發(fā)性成分較復(fù)雜，含有豐富的萜類和芳香族成分，對(duì)五味子的揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。

五味子；揮發(fā)油；萜類化合物；芳香族化合物；脂肪族化合物

五味子為木蘭科植物五味子的干燥成熟果實(shí)，習(xí)稱“北五味子”，分布于我國東北、華北等地。性甘味酸，具有收斂固澀，益氣生津，補(bǔ)腎寧心等藥理作用。用于治療久嗽虛喘，夢(mèng)遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗盜汗，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，心悸失眠等[1]。五味子果實(shí)和種子揮發(fā)油中的主要成分為萜類，還有少量的醇、酸等含氧成分[2]。有文獻(xiàn)報(bào)道，采用高效液相色譜法對(duì)五味子4個(gè)主要活性成分含量測(cè)定及其質(zhì)量進(jìn)行了評(píng)價(jià)研究[3]。五味子為我國寶貴緊缺的中藥材，其粉碎后入藥，揮發(fā)油成分口服后可以進(jìn)入人體體內(nèi)。因此，我們有必要對(duì)五味子揮發(fā)油成分進(jìn)行成分分析。目前，對(duì)其揮發(fā)油的開發(fā)利用和藥理作用的研究還處于基礎(chǔ)階段。本文綜述了五味子揮發(fā)油成分的GC-MS分析研究，以期為五味子的綜合開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1　儀器與藥材

1.1儀器

Agilent7890A/5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；7693型自動(dòng)進(jìn)樣器（美國Agilent公司）；5975C數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；NIST標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖（美國Finnig公司）；賽多利斯BT 25S天平（Sartorius，1/10萬）；DB-1701毛細(xì)管色譜柱（60mm×0.25mm×0.25μm）。

1.2藥材和試劑

無水Na2SO4（AR）；水為重蒸水；載氣為高純He（99.99%）；甲醇（色譜純，美國Sigma-Aldrich公司）；其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1揮發(fā)油的提取

稱取100g五味子粉碎，置于500mL圓底燒瓶中，加水200mL水，蒸餾水浸泡12h，于電熱套中微沸回流提取10h，蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油，得到含水特殊香氣的黃色油狀物，無水硫酸鈉干燥后得0.29mL，計(jì)算含量為0.29（v/w）%，封裝備用。

2.2測(cè)試條件

2.2.1氣相條件DB-1701（60mm×0.25mm×0.25 μm）高效毛細(xì)管色譜柱；分流比5∶1；程序升溫，起始溫度80℃，保持5min，再以3℃·min-1的速率上升至250℃并保持5min，總分析時(shí)間為70min；載氣流速1.2mL·min-1。

2.2.2質(zhì)譜條件電離方式：EI源；電子能量70eV；離子源溫度230℃；質(zhì)譜接口溫度280℃；溶劑延遲6min；掃描模式：全掃描模式；質(zhì)量掃描范圍：20～ 550；檢測(cè)器增益0.3。

3　結(jié)果

采用GC-MS對(duì)五味子揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行了分析，得到樣品的總離子流圖（圖1），共分離出85個(gè)組分，將各組分質(zhì)譜數(shù)據(jù)由NIST質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索并結(jié)合有關(guān)參考文獻(xiàn)等，鑒定了其中49個(gè)化合物，用峰面積歸一化法計(jì)算各成分在揮發(fā)油的相對(duì)含量，表1。

圖1　五味子揮發(fā)油化學(xué)成分總離子流圖Fig.1　Ion flow diagram of S.Chinensis fruits volatile oil chemical composition

由圖1和表1所知，GC-MS檢測(cè)，其成分的質(zhì)譜圖經(jīng)計(jì)算機(jī)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索，按各色譜峰的質(zhì)譜裂解碎片圖與文獻(xiàn)核對(duì)基峰、質(zhì)荷比和相對(duì)豐度進(jìn)行比較，并結(jié)合有關(guān)圖譜解析，分別對(duì)各色譜峰加以確認(rèn)，從而鑒定五味子揮發(fā)油的化學(xué)成分。采用峰面積歸一化法測(cè)得各組分的相對(duì)百分含量。在五味子揮發(fā)油中共檢出85個(gè)色譜峰，鑒定出43個(gè)化合物。占揮發(fā)油量的66.25%。其中萜類化合物24種，芳香族化合物13種，脂肪族化合物6種，分別占58.70%，5.52%，和2.23%。萜類成分所起的抗病殺菌作用是十分明顯的且其生物活性是多方面的，是某些已用于生產(chǎn)中藥的主要有效成分[4]。下面我們分別列舉了其中含量最高的化合物及其結(jié)構(gòu)如（圖2）。它們含量依次為：27.07%，1.77%，0.44%。

[1.萜類：（+）-花側(cè)柏烯 2.芳香族類：2,6-二叔丁基苯酚3.脂肪族類：6-甲基-3-環(huán)己烯-1-甲醇]圖2　五味子揮發(fā)油中萜類、芳香族類、脂肪族類化合物的代表成分Fig.2　Terpenoids，volatile oil，aromatic species，in S.Chinensis fruits

表1　五味子揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析結(jié)果Tab.1　Analysis of chemical components of the volatile oil from S.Chinensis fruits

4　討論

五味子廣泛分布于我國東北部山區(qū)、半山區(qū)，無性繁殖能力強(qiáng)，營養(yǎng)生長(zhǎng)旺盛。朱鳳姝報(bào)道的氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定北五味子中揮發(fā)油成分中，分離鑒定出了39種化學(xué)成分[5]。本文采用GC-MS技術(shù)對(duì)五味子揮發(fā)油成分進(jìn)行了成分分析，從五味子揮發(fā)油共檢出85個(gè)色譜峰，鑒定出43個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的66.25%。在我們所鑒定的化合物中萜類化合物24種，芳香族化合物13種，脂肪族化合物6種，分別占58.70%，5.52%，和2.23%。我們首先對(duì)對(duì)揮發(fā)油進(jìn)行了分類，并在萜類，芳香族類，脂肪族類這個(gè)角度對(duì)五味子揮發(fā)油進(jìn)行了成分分析。驗(yàn)證了五味子揮發(fā)油成分復(fù)雜，主要含有萜類化合物。我們查閱相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，五味子揮發(fā)油對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有調(diào)節(jié)作用,能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)非特異性刺激的防御能力[6]。對(duì)脾臟、肝臟、血壓有調(diào)節(jié)作用，對(duì)人的視力、聽力有強(qiáng)化功能[7]。目前，揮發(fā)油成分的研究已成為熱點(diǎn)，在降糖、降脂和降壓等作用對(duì)臨床疾病的防治也有重大指導(dǎo)意義，將是今后研究的一大方向。

［1］中國藥典.一部［S］.2015:67.

［2］谷昊,張?zhí)m杰,李晶,等.北五味子葉揮發(fā)油化學(xué)成分分析［J］.鞍山師范學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，11（2）:38-41.

［3］陳曉輝,劉玉磊,畢開順,等.GC法同時(shí)測(cè)定五味子揮發(fā)油中α-蒎烯、β-蒎烯、檸檬烯和乙酸龍腦醋的含量［J］.藥物分析雜志,2008,28（9）:1470-1473.

［4］付佳,王洋,閻秀峰.萜類化合物的生理生態(tài)功能及經(jīng)濟(jì)價(jià)值［J］.東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,31（6）:59-62.

［5］朱鳳姝,杜彬,李軍,等.氣相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定北五味子中揮發(fā)油成分［J］.食品與發(fā)酵工業(yè),2003,34（3）:149-152.

［6］張勝娜,吳素.南北五味子揮發(fā)油化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展［J］.中藥材,2007，30（1）:118-120.

［7］張珈郡,牛春艷.北五味子揮發(fā)油提取工藝及抗氧化性的研究［J］.糧食與食品工業(yè),2014,21（4）:38-40.

Analysis on terpenoids，aromatic and aliphatic compounds in schisandrae chinensis fruits*

LIU Hua，GUO Jiang-tao，WANG Zhi-bin，CHEN Ya-jun，WU Gao-song，YANG Bing-you，KUANG Hai-xue（Key Laboratory of Basic and Applied Research in North Medicine，Ministry of Education，Heilongjiang Key Laboratory of Drug
Efficacy Study Material of Traditional Chinese Medicine and Natural Product，Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin 150040，China）

Objective：To study the chemical components of volatile oils from Schisandrae Chinensis fruits.Method：The volatile oil was extracted by water-steam distillation and analyzed by GC-MS with capillary gas chromatographic column.A GC-MS-Full Scan method was established.The column was DB-1701capillary column（60mm×0.25mm×0.25μm）.The sample volume was 1μL with a split ratio of 5∶1.The carrier gas was 99.99%high purity Helium.Ionization was performed in electron impact ionization（EI）mode at 70 eV.Result：Eighty-nine chromatographic peaks were detected，among which forty-nine compounds have been identified.Use the area normalization method to calculate the percentage content of each compound.Identify the volatile oil of which accounted for 66.25%of the total volatile oil of S.Chinensis fruits.Among them 24 kinds of terpenoids，aromatic compounds of 13 species，6 kinds of aliphatic compounds，respectively 58.70%，5.52%and 2.23%.Conclusion：Essential oil of S.Chinensis fruits analysis，provides scientific basis for its further development and utilization.

S.Chinensis fruits；volatile oil；terpenoids；aromatic compound；aliphatic compound

R284.2

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20160827*

2016-04-06

國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（No.81573551）

劉華（1990-），男，山東聊城人，在讀研究生，從事中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制研究。

匡海學(xué)，博士，教授，從事中藥性味理論研究和中藥及天然藥物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。