血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測在肝癌診斷中的應(yīng)用

沈聰龍　鄭麗萍福州市傳染病醫(yī)院肝膽外科，福建福州　350000

血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測在肝癌診斷中的應(yīng)用

沈聰龍鄭麗萍
福州市傳染病醫(yī)院肝膽外科，福建福州350000

［摘要］目的 檢測不同患者樣本中拮抗劑Ⅱ誘導(dǎo)的蛋白 （protein induced by vitamine K absence or antagonist-Ⅱ，PIVKA-Ⅱ）、甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）的含量，研究PIVKA-Ⅱ、AFP在肝癌診斷中的應(yīng)用。方法 選取我院2013年9月～2016年1月的住院患者血清樣本共計(jì)259例，檢測PIVKA-Ⅱ、AFP含量。結(jié)果（1）在103例肝癌標(biāo)本中，PIVKA-Ⅱ的陽性率為70.9%，AFP的陽性率41.7%，經(jīng)過χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=17.76，P＜0.01）；（2）血清PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）檢測肝癌的靈敏度為70.2%；血清AFP（≥10 ng/mL）檢測肝癌的靈敏度為69.9%。聯(lián)合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測肝癌的靈敏度84.5%，較單獨(dú)PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）或單獨(dú)AFP （χ2=12.11，P＜0.05）檢測均有顯著差異。結(jié)論 PIVKA-Ⅱ用于診斷肝癌靈敏度和特異性均優(yōu)于AFP，可以顯著提高對(duì)肝癌診斷的靈敏度和特異性。PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測能更好更快地對(duì)肝癌做出早期診斷。

［關(guān)鍵詞］肝細(xì)胞癌；甲胎蛋白；人異常凝血酶原；診斷

肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是肝臟最常見的惡性腫瘤，占全球腫瘤發(fā)生率的第五位，死亡率的第三位［1，2］。肝癌早期診斷尚缺乏有效檢測手段，大部分患者發(fā)現(xiàn)時(shí)多屬中晚期，手術(shù)切除率低，術(shù)后復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率高，嚴(yán)重影響預(yù)后。甲胎蛋白（AFP）是肝癌早期診斷常用的腫瘤標(biāo)志物，AFP作為早期肝癌診斷的靈敏度為39%～64%，特異度為76%～91%［3，4］，靈敏度偏低，且其他疾病也可能引起AFP的升高，特別是慢性肝炎、肝炎肝硬化患者。異常凝血酶原為肝細(xì)胞癌新型腫瘤標(biāo)志物的一種，其主要是指維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導(dǎo)的蛋白（PIVKA-Ⅱ）所引發(fā)的肝細(xì)胞難以有效合成凝血因子的現(xiàn)象。研究顯示PIVKA-Ⅱ已逐漸成為臨床上診斷肝細(xì)胞癌的特異性腫瘤標(biāo)志物，且具有較高的診斷特異性。多個(gè)研究［5-7］結(jié)果顯示，PIVKA-Ⅱ診斷肝癌的靈敏度為28%～89%，特異度為87%～96%；有研究顯示［8］，合理地對(duì)甲胎蛋白（AFP）檢測與PIVKA-Ⅱ進(jìn)行聯(lián)合使用可顯著提高肝癌診斷的敏感性。本研究以本院就診患者的血清為樣本，進(jìn)行血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測在肝癌診斷中應(yīng)用的研究?，F(xiàn)報(bào)道如下。

l對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選取我院2013年9月～2016年1月的住院患者血清樣本共計(jì)259例，其中肝癌患者血清樣本103例，其中男63例，女40例，年齡22～79歲，平均（43.5± 9.9）歲。肝炎肝硬化患者血清樣本83例，其中男45例，女38例，年齡19～76歲，平均（44.6±8.9）歲。慢性肝炎患者73例（未合并肝硬化），男39例，女34例，年齡20～75歲，平均（46.8±7.8）歲；所有患者均自愿參與本次研究，且均自愿簽署知情同意書，患者均無精神疾病，可配合本次研究；排除合并有精神疾病不能配合本次研究的患者，排除不愿參與本次研究的患者，排除中途退出的患者。三組患者臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

采用LUMIPULSE G1200全自動(dòng)免疫分析儀及配套AFP試劑盒（富士瑞必歐株式會(huì)社）檢測血清AFP濃度，AFP≥10 ng/mL為陽性，AFP≥200 ng/mL為肝癌判定值；PIVKA-Ⅱ測定時(shí)以測定結(jié)果不低于40 mAu/mL為肝癌。

1.3觀察指標(biāo)

觀察比較肝癌和非肝癌患者樣本中PIVKA-Ⅱ和AFP檢出情況，并對(duì)所有肝癌患者綜合血清標(biāo)志物檢測的靈敏度和特異度進(jìn)行比較。其中靈敏度=真陽性/（假陰性+真陽性）×100%，特異度=真陰性/（假陽性+真陰性）×100%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)本研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以（%）表示，并進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1肝癌和非肝癌患者樣本中PIVKA-Ⅱ和AFP檢出比較

在103例肝癌患者中PIVKA-Ⅱ檢出肝癌73例，AFP檢出肝癌43例，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，在肝癌患者的診斷中兩者存在顯著性差異（χ2=17.76，P＜0.01）。在共計(jì)156例非肝癌血清樣本中PIVKA-Ⅱ檢出陽性11例，AFP檢出陽性33例，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，在非肝癌的診斷中兩者存在顯著性差異（χ2=12.81，P＜0.01）。見表1。

表1　肝癌和非肝癌患者樣本中PIVKA-Ⅱ和AFP檢出比較［n（%）］

2.2患者綜合血清標(biāo)志物檢測的靈敏度和特異度比較

對(duì)選取259例標(biāo)本中，血清PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）檢測中真陽性73例，真陰性144例，假陰性31例，假陽性 11例，靈敏度為 70.2%，特異度為92.9%；血清AFP（≥10 ng/mL）檢測中真陽性72例，真陰性123例，假陰性31例，假陽性33例，靈敏度為69.9%，特異度為78.8%；聯(lián)合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測中，真陽性87例，真陰性138例，假陰性16例，假陽性18例，靈敏度為84.5%，特異度為88.5%（表2）。聯(lián)合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測陽性的靈敏度較單獨(dú)PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）或單獨(dú)AFP（χ2=12.11，P＜0.05）檢測均有顯著差異。

表2　血清PIVKA-II和AFP檢測肝癌的靈敏度和特異度比較

3　討論

肝癌是肝臟最常見的惡性腫瘤，發(fā)生率高，死亡率高［1，2］。我國為肝癌高發(fā)地區(qū)，全世界每年新發(fā)病例的55%發(fā)生在中國大陸，為我國癌癥死因的第二位。該病發(fā)病較為隱匿，患者發(fā)病初期多無明顯臨床癥狀，就診時(shí)病情多以發(fā)展至中晚期，手術(shù)切除率低，且術(shù)后易發(fā)生轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)，對(duì)患者健康的影響極大［9，10］。隨著CT、MRI等影像技術(shù)發(fā)展，部分小肝癌患者得以早期發(fā)現(xiàn)，5年生存率有了一定提高。但影像技術(shù)用于臨床診斷肝癌仍受地區(qū)及經(jīng)濟(jì)等多方面因素限制，在一定程度上對(duì)肝癌早期發(fā)現(xiàn)造成影響，導(dǎo)致患者喪失最佳治療時(shí)機(jī)。

甲胎蛋白作為臨床上診斷肝癌的常用標(biāo)志物，其靈敏度及特異性偏低［3］，且其他疾病也可能引起AFP的升高，特別是慢性肝炎、肝硬化患者，還有其他系統(tǒng)腫瘤、妊娠等［11，12］。需要敏感性更高的腫瘤標(biāo)志物協(xié)助肝癌早期診斷，以便提高肝癌手術(shù)切除率，降低術(shù)后復(fù)發(fā)率及轉(zhuǎn)移率，提高肝癌療效。

研究發(fā)現(xiàn)PIVKA-Ⅱ是肝細(xì)胞癌新型腫瘤標(biāo)志物。若維生素K不足則極易對(duì)肝細(xì)胞合成凝血因子的現(xiàn)象造成影響，導(dǎo)致異常凝血酶原產(chǎn)生。對(duì)于肝癌患者，因癌細(xì)胞合成凝血酶原前體發(fā)生異常，導(dǎo)致凝血酶原前體羧化缺乏，進(jìn)而極易導(dǎo)致PIVKA-Ⅱ的生成量增加［4］。PIVKA-Ⅱ是臨床上不可缺少的檢查，且具有較高的診斷特異性，影響因素少。只有在Vitamin K缺乏患者，如嚴(yán)重阻塞性黃疸及華法林給藥患者中可引起PIVKA-Ⅱ升高。有研究［13］顯示在肝癌檢測方面PIVKA-Ⅱ的靈敏度明顯高于AFP。本研究結(jié)果顯示：在肝癌患者診斷中，PIVKA-Ⅱ陽性率70.9%，而AFP陽性率41.7%。二者相比，PIVKA-Ⅱ診斷率更高，兩者存在顯著性差異（χ2=17.76，P＜0.01），結(jié)果與國外研究［5-7］一致。另外，本研究結(jié)果顯示：在慢性肝炎、肝炎肝硬化患者診斷中，PIVKA-Ⅱ陽性率7.1%，而AFP陽性率21.2%，兩者存在顯著性差異（χ2=12.81，P＜0.01），結(jié)果表明PIVKA-Ⅱ不易受慢性肝炎、肝炎肝硬化等非肝癌因素的影響，而AFP診斷肝癌容易受到慢性肝炎、肝炎肝硬化的影響，與國外相關(guān)研究一致。如Tanaka Y等［14］研究結(jié)果顯示PIVKA-Ⅱ在肝癌與慢性肝病的鑒別診斷具有顯著差異，可排除肝炎肝硬化等慢性肝病的影響，作為診斷肝癌的敏感指標(biāo)。結(jié)合國內(nèi)外研究及本研究結(jié)果顯示：PIVKA-Ⅱ在用于診斷肝癌的靈敏性以及特異性均優(yōu)于AFP，且不易受慢性肝炎、肝炎肝硬化等非肝癌因素的影響，可作為肝癌早期篩查重要腫瘤標(biāo)志物［15］。

PIVKA-Ⅱ與AFP是獨(dú)立的腫瘤標(biāo)志物，二者無相互關(guān)聯(lián)。研究［15］已顯示PIVKA-Ⅱ與AFP水平無顯著相關(guān)性。基于這一點(diǎn)，可以通過聯(lián)合PIVKA-Ⅱ與AFP檢測來提高早期肝癌診斷。血清PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）其檢測肝癌的靈敏度為70.2%；血清AFP（≥10 ng/mL）檢測陽性的靈敏度為69.9%（表2）。聯(lián)合血清PIVKA-Ⅱ和AFP檢測陽性的靈敏度84.5%，較單獨(dú)PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）或單獨(dú)AFP（χ2= 12.11，P＜0.05）檢測均有顯著差異，結(jié)果顯示PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測可提高早期肝癌診斷，與Stefaniuk P等［8］研究結(jié)果一致。在肝癌早期篩查中，聯(lián)合PIVKA-Ⅱ、AFP檢測可提高肝癌篩查率。

本研究尚存在不足，本研究未納其他系統(tǒng)腫瘤病例，在后續(xù)的研究中會(huì)加以補(bǔ)充。

綜上所述，研究結(jié)果顯示，血清PIVKA-Ⅱ作為肝癌篩查的血清標(biāo)志物，其診斷靈敏度、特異性均高于AFP。而血清PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測能更好更快地對(duì)肝癌做出早期診斷，從而提高肝癌手術(shù)切除率，降低肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，改善預(yù)后。

［參考文獻(xiàn)］

［1］Ponting CB，Belgatd TG.Transcribed dark matter：Meaning or myth［J］.Hum Mol Genet，2010，19（R2）：R162-168．

［2］Costa FF.Non-coding RNAs：Meet thy masters［J］.Bioessays，2010，32（7）：599-608．

［3］ZM Magalotti D，Bianehi G，Gueli C，et al.Efieaey of a surveillance program for early detection of hepatocellular careirloma［J］.Cancer，1996：78：977-983．

［4］Inagaki Y，Tang W，Makuuchi M，et al．Clinical and molecular insights into the hepatocellular carcinoma tumour marker desgammacarboxyprothrombin［J］.Liver Int，2011，31 （1）：22-35．

［5］Lok AS，Steding RK，Everhart JE，et al.Des-gamma-carboxy prothrombin and alpha-fetoprotein as biomarkers for the early detection of hepatocellular carcinoma［J］.Gas troenterology，2010，138（2）：493-502．

［6］Marrero JA，F(xiàn)eng Z，Wang Y，et al．Alpha-fetoprotein，des-gamma carboxyprothrombin，and lectin-bound alphafetoprotein in early hepatocellular carcinoma［J］.Gastroenterology，2009，137（1）：110-118．

［7］Sharma B，Srinivasan R，Chawla YK，et al．Clinical utility of prothrombin induced by vitamin K absence in the de tection of hepatocellular carcinoma in Indian population［J］. Hepatol lnt，2010，4（3）：569-576．

［8］Stefaniuk P，Cianciara J，Wiercinska-Drapalo A.Present and future possibilities for early diagnosis of hepatocellu lar carcinoma［J］.World J Gastroenterol，2010，16（4）：418-424．

［9］吳在德，吳肇漢，等．外科學(xué)［M］.第7版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：522．

［10］Ng KM YT，Black D，Chu FC，et al.Prognostic determinants for survival after resection/ablation of a large hep atocellular carcinoma［J］.HPB（Oxford），2009，4：311-320．

［11］殷正豐.甲胎蛋白異質(zhì)體作為肝癌標(biāo)志物的臨床應(yīng)用［J］.實(shí)用腫瘤雜志，2004，19（1）：1-4．

［12］沈錚，沈霞.甲胎蛋白及其異質(zhì)體檢測的臨床應(yīng)用價(jià)值［J］.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2000，15（6）：361-366．

［13］Yamamoto K，Imamura H，Matsuyama Y，et al．AFP，AFPL3，DCP，and GP73 as markers for monitoring treatment response and recurrenceand as surrogate markers of clinic path logical variables of HCC［J］.J Gastroenterol，2010，45 （12）：1272-1282．

［14］Tanaka Y，Kashiwagi T，Tsutsumi H，et al．Sensitive measurement of serum abnormal abnormal prothrombin （PIVKA-Ⅱ）as a marker of hepatocellular carcinoma［J］. Hepatogastroenterology，1999，46（28）：2464-2468．

［15］辛文娟，趙文靜.GP73、AFP、CA-199聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2016，24 （7）：1083-1084.

［中圖分類號(hào)］R735.7

［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A

［文章編號(hào)］1673-9701（2016）19-0021-03

收稿日期：（2016-04-27）

Application of combined tests of serum PIVKA-Ⅱand AFP in the diagnosis of liver cancer

SHEN ConglongZHENG Liping
Department of Hepatobiliary Surgery，F(xiàn)uzhou Hospital of Infectious Diseases，F(xiàn)uzhou 350000，China

［Abstract］Objective To test the content of protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ（PIVKA-Ⅱ）and α-fetoprotein（AFP）in different patient samples，and to study the application of PIVKA-Ⅱand AFP in the diagnosis of liver cancer.Methods 259 serum samples of the patients who were hospitalized from September 2013 to January 2016 in our hospital were collected，and the contents of PIVKA-Ⅱand AFP were determined.Results（1）In 103 specimens of liver cancer，the positive rate of PIVKA-Ⅱwas 70.9%，and the positive rate of AFP was 41.7%.After chi-square test，both of the two were significantly different（χ2=17.76，P＜0.01）；（2）The sensitivity of serum PIVKA-Ⅱ（≥40 mAu/mL）in testing liver cancer was 70.2%；the sensitivity of serum AFP（≥10 ng/mL）in testing liver cancer was 69.9%.The sensitivity of combined test of PIVKA-Ⅱ（χ2=10.67，P＜0.05）and AFP（χ2=12.11，P＜0.05）in testing liver cancer was 84.5%，which was significantly different compared with single PIVKA-Ⅱor single AFP tests.Conclusion The sensitivity and specificity of PIVKA-Ⅱ in the diagnosis of liver cancer are better than AFP，which is able to significantly improve the sensitivity and specificity of liver cancer diagnosis.The combined test of PIVKA-Ⅱ and AFP is able to accomplish early diagnosis of liver cancer in a better and faster way.

［Key words］Liver cell cancer；AFP；Human plasma abnormal prothrombin；Diagnosis