多基因聯(lián)合檢測(cè)對(duì)晚期胃癌個(gè)體化化療效果的研究

石坤和 高瑛 顧淵

多基因聯(lián)合檢測(cè)對(duì)晚期胃癌個(gè)體化化療效果的研究

石坤和 高瑛 顧淵

目的 探討核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1（ERCC1）和β微管蛋白Ⅲ基因（TUBB3）聯(lián)合檢測(cè)對(duì)晚期胃癌個(gè)體化化療效果的影響。方法 收集2013年6月至2015年6月晚期胃癌患者50例，將其隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組各25例。觀察組根據(jù)ERCC1、TUBB3基因mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果選擇不同的化療方案；對(duì)照組不進(jìn)行基因檢測(cè)，采用DCF方案化療；21d為1個(gè)周期。兩組均化療≥4個(gè)周期。觀察比較兩組的化療效果及毒副反應(yīng)。結(jié)果 觀察組有效率為68.00%，高于對(duì)照組的56.00%，但兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組均未出現(xiàn)與化療相關(guān)的死亡事件，化療的主要毒副反應(yīng)為骨髓抑制、消化道反應(yīng)、黏膜炎、肝腎功能損害、心臟毒性等方面。其中兩組的骨髓抑制、消化道反應(yīng)、黏膜炎發(fā)生率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 ERCCl和TUBB3聯(lián)合檢測(cè)并基于其的化療方案對(duì)晚期胃癌患者具有安全性高、毒副反應(yīng)少的優(yōu)點(diǎn)，可提高化療效果。

晚期胃癌 基因檢測(cè) 核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1 β微管蛋白Ⅲ基因

胃癌是世界范圍內(nèi)高發(fā)病率惡性腫瘤之一［1］，給人們的生命健康造成嚴(yán)重?fù)p害。大量臨床研究和基礎(chǔ)試驗(yàn)表明［2，3］，特異性腫瘤分子標(biāo)志物即相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平是識(shí)別患者之間差異的重要依據(jù)，實(shí)現(xiàn)對(duì)這些靶標(biāo)的檢測(cè)是實(shí)施腫瘤個(gè)體化治療的前提和基礎(chǔ)。本研究探討與晚期胃癌患者化療藥物密切相關(guān)的核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因l（Excision Repair Cross Complementing gene-1，ERCCl）和β微管蛋白Ⅲ基因（β-Tubulin-Ⅲ，TUBB3）聯(lián)合檢測(cè)對(duì)晚期胃癌個(gè)體化化療效果的影響。報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集2013年6月至2015年6月本院收治的晚期胃癌患者50例，其中男28例，女22例；年齡42～80歲，平均年齡（59.73±12.64）歲。低分化癌23例、中分化癌16例、高分化癌11例。將50例患者隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組各25例，兩組患者性別、年齡、病理分化等基本資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。所有患者均簽署知情同意書。

1.2 基因mRNA檢測(cè) 通過DNA液相芯片技術(shù)，對(duì)胃癌組織中ERCC1、TUBB3的mRNA表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，并以所有檢測(cè)樣本上述基因mRNA表達(dá)量的中位數(shù)為界值，分為“高表達(dá)組”和“低表達(dá)組”。具體步驟：（1）可獲得病理活檢組織樣本。（2）裂解樣品釋放RNA。（3）捕獲目標(biāo)RNA。（4）信號(hào)放大。（5）Luminex檢測(cè)獲得結(jié)果。

1.3 化療方案 （1）觀察組：根據(jù)ERCC1、TUBB3基因mRNA表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果，均為低表達(dá)者8例，選擇DCF方案（多西紫杉醇+順鉑+氟尿嘧啶）；僅ERCC1低表達(dá)者6例，選擇FOLFOX4方案（奧沙利鉑+氟尿嘧啶）；僅TUBB3低表達(dá)者5例，選擇TF方案（紫杉醇+氟尿嘧啶）；均為高表達(dá)者6例，選擇FOLFIRI方案（伊立替康+氟尿嘧啶）。藥物劑量：多西紫杉醇，60mg/m2，靜脈滴注ld；順鉑，60mg/m2，靜脈滴注1～4d；氟尿嘧啶600mg/m2（聯(lián)合用藥時(shí)）或750 mg/m2（單藥時(shí)），靜脈滴注1～5d；21d為1個(gè)周期。（2）對(duì)照組：不進(jìn)行基因檢測(cè)，采用DCF方案化療，藥物劑量同觀察組，21d為1個(gè)周期。兩組均化療≥4個(gè)周期。

1.4 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) （1）療效評(píng)價(jià)：按照RECIST實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估化療效果［4，5］。完全緩解（CR）：目標(biāo)病灶均消失，且維持≥4周。部分緩解（PR）：基線狀態(tài)目標(biāo)病灶總直徑比所有目標(biāo)病灶直徑總和縮小≥30%，且維持≥4周。疾病進(jìn)展（PD）：目標(biāo)病灶增大或出現(xiàn)新病灶，且基線病灶最大徑之和增加≥20%。疾病穩(wěn)定（SD）：目標(biāo)病灶有縮小，但基線病灶最大徑之和縮小未達(dá)PR，或目標(biāo)病灶增大，但基線病灶最大徑之和增大未達(dá)PD。有效率（RR）= （CR+PR）例數(shù)/總例數(shù)×100%。（2）不良反應(yīng)評(píng)價(jià)：根據(jù)美國國家癌癥研究所（NCI）常見毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)化療期間的毒副反應(yīng)，觀察化療期間骨髓抑制程度、肝腎功能變化情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組化療效果的比較 見表1。

表1 兩組化療效果的比較（n）

2.2 兩組毒副反應(yīng)的比較 見表2。

表2 兩組毒副反應(yīng)的比較［n（%）］

3 討論

胃癌易出現(xiàn)淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腹腔種植等，有80%～90%胃癌患者最終進(jìn)入晚期階段，在治療手段上主要行姑息性全身化療以延長(zhǎng)晚期胃癌患者的生存時(shí)間，提高生存質(zhì)量［6］。由于胃癌異質(zhì)性大、病因復(fù)雜，目前晚期胃癌化療有效率低、中位生存時(shí)間短、化療副作用大，因此選擇適合不同患者的化療方案，即實(shí)現(xiàn)化療個(gè)體化至關(guān)重要［7，8］。

對(duì)晚期胃癌患者最基本的治療方式為化療。在2010年美國國家綜合癌癥網(wǎng)（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）指南中已推薦（1類）DCF方案為晚期胃癌一線化療方案［9，10］。但是DCF方案較高的＞Ⅲ°毒副反應(yīng)發(fā)生率、有限的生存獲益，以及患者對(duì)藥物敏感性的個(gè)體差異，限制了其臨床應(yīng)用，因此，如何提高化療效果、減少無效化療及降低化療藥物毒性即個(gè)體化化療方案的實(shí)現(xiàn)是臨床亟需解決的難題［11］。

本研究根據(jù)化療藥物敏感性相關(guān)基因的研究，聯(lián)合檢測(cè)晚期胃癌患者ERCCl、TUBB3基因的表達(dá)水平，探討基因檢測(cè)對(duì)制訂個(gè)體化化療方案的指導(dǎo)意義。ERCCl是核酸外切修復(fù)家族中的重要成員，可使DNA損傷迅速修復(fù)，在DNA鏈間交聯(lián)損傷中發(fā)揮重要作用，ERCCl的表達(dá)量多少直接影響DNA修復(fù)過程。TUBB3高表達(dá)可使藥物對(duì)細(xì)胞內(nèi)微管蛋白的特異性降低，從而產(chǎn)生耐藥。多項(xiàng)臨床研究均顯示低TUBB3表達(dá)水平的腫瘤患者接受紫杉醇類化療的效果較好，中位生存期較長(zhǎng)［12］。

本研究結(jié)果顯示，觀察組有效率為68.00%，高于對(duì)照組的56.00%，但兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組均未出現(xiàn)與化療相關(guān)的死亡事件，化療的主要毒副反應(yīng)為骨髓抑制、消化道反應(yīng)、黏膜炎、肝腎功能損害、心臟毒性等方面。其中兩組的骨髓抑制、消化道反應(yīng)、神經(jīng)毒性黏膜炎發(fā)生率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

1 Pasini F，F(xiàn)raccon AP，DE Manzoni G.The ro1e of chemotherapy in metastatic gastric cancer.Anticancer Res，2011，31（10）：3543～3554.

2 Mariani M，Shahabi S，Sieber S，et a1.C1ass Ⅲβ-tubu1in （TUBB3）：more than a biomarker in so1id tumors.Curr Mo1 Med，2011，11（9）：726～731.

3 Jeong SH，Han JH，Kim JH，et a1.Bax predicts outcome in gastric cancer patients treated with 5～f1uorouraci1，1eucovorin，and oxa1ip1atin pa11iative chemotherapy.Dig Dis Sci，2011，56（1）：131～138.

4 楊洋，李良慶，陳群，等.ERCC1和TUBB3聯(lián)合檢測(cè)對(duì)晚期胃癌個(gè)體化治療的應(yīng)用分析.中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2014，17（1）：20～23.

5 Yun J，Kim KM，Kim ST，et a1.Predictive va1ue of the ERCC1 expression for treatment response and surviva1 in advanced gastric cancer patients receiving cisp1atin～based first-1ine chemotherapy.Cancer Res Treat，2010， 42（2）：101～106.

6 Hu HB，Kuang L，Zeng XM，et a1.Predictive va1ue of thymidy1ate synthase expression in gastric cancer：a systematic review with Meta～ana1ysis.Asian Pac Cancer Prev，2012，13（1）：261～267.

7 Takakura A，Kurita A，Asahara T，et a1.Rapid decomjugation of SNO38 g1ucuronide and adsorption of re1eased free SNO38 by intestina1 microorganisms in rat.Onco1 Lett，2012，3（3）：520.

8 顧術(shù)東，茅國新，張曙.晚期胃癌ERCC1和BRCA1表達(dá)與鉑類化療療效及預(yù)后關(guān)系.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2013，21（11）：2525～2528.

9 Hwang JE，Hong JY，Kim K，et a1.C1ass Ⅲ D-tubu1in is apredictive marker for Taxane-based chemotherapy in recurrent and metastatic gastric cancer.BMC Cancer，2013，13（39）：431.

10 周娟.多基因聯(lián)合檢測(cè)指導(dǎo)晚期胃癌個(gè)體化化療的研究.蘇州大學(xué)，2014.28.

11 Wei KK，Jiang L，Wei YY，et a1.The prognostic va1ue ofERCC1 expression in gastric cancer patients treated with p1atinum～based chemotherapy：a meta～ana1ysis.Tumour Bio1，2014，35（9）：8721～8731.

12 Yonemura Y，E1nemr A，Endou Y，et a1.Mu1tidiscip1inary therapy for treatment of patients with peritomea1 carcimomatosis from gastric cancer.Wor1d J Gastrointest Onco1，2010，15（2）：85～97.

Objective To investigate the influnce of excision repair cross-complementing gene l（ERCCl）and β-Tubulin-Ⅲ（TUBB3）combined detection of individual chemotherapy for advanced gastric cancer. Methods 50 cases of patients with advanced gastric cancer in our hospital from June 2013 to June 2015 were selected，and were randomly divided into observation group and control group，25 cases in each group. Different chemotherapy regimens were chosen in observation group based on ERCC1，TUBB3 gene mRNA expression test Results. DCF regimen was given to control group without genetic testing. 21 days was a treatment course，both groups were at least four cycles of chemotherapy. The efficacy and toxicity of chemotherapy was compared between the two groups. Results The effective rate of observation group was 68.00%，higher than 56.00% of control group，but the difference was significant（P＞0.05）. There were no death associated with chemotherapy ouucred in the two groups，main side effects of chemotherapy were bone marrow suppression，gastrointestinal reactions，mucositis，liver and kidney dysfunction，cardiac toxicity. The incidence of bone marrow suppression，gastrointestinal reactions，mucositis between the two groups was significant（P＜0.05）. Conclusion ERCC1 and TUBB3 multiple genes combined detection of individual chemotherapy for advanced gastric cancer has the advantages of high security，less toxicity，and can enhance the effect of chemotherapy.

Advanced gastric cancer Genetic testing Excision repair cross-complementing gene 1（ERCC1） β-Tubulin-Ⅲ（TUBB3）

200071 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬市中醫(yī)醫(yī)院外科