星形細(xì)胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達(dá)觀察

韋迪岱，陳晉，鄭文明

(三亞市人民醫(yī)院，海南三亞 572000)

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星形細(xì)胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達(dá)觀察

韋迪岱，陳晉，鄭文明

(三亞市人民醫(yī)院，海南三亞 572000)

目的觀察星形細(xì)胞瘤組織中增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和高遷移率族蛋白B1(HMGB1)的表達(dá)變化。方法采用免疫組化SP法檢測70例份星形細(xì)胞瘤組織(腫瘤組)和20例份癌旁正常組織(癌旁組)PCNA、HMGB1，分析兩指標(biāo)間及其與星形細(xì)胞瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果腫瘤組及癌旁組PCNA陽性表達(dá)率分別為90.0%、45.0%，HMGB1陽性表達(dá)率分別為72.9%、0，兩組比較，P均<0.05。PCNA、HMGB1表達(dá)均與星形細(xì)胞瘤病理分級有關(guān)(P均<0.05)。星形細(xì)胞瘤組織中PCNA與HMGB1表達(dá)呈正相關(guān)(r=6.82，P<0.05)。PCNA陽性、陰性表達(dá)者生存期分別為(21.27±7.15)、(33.47±4.61)個(gè)月，HMGB1陽性、陰性表達(dá)者生存期分別為(20.58±6.33)、(35.18±4.55)個(gè)月，兩者比較，P均<0.05。結(jié)論星形細(xì)胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達(dá)升高，并與星形細(xì)胞瘤病理分級有關(guān)，陽性表達(dá)者預(yù)后差。

星形細(xì)胞瘤；高遷移率族蛋白B1；增殖細(xì)胞核抗原

星形細(xì)胞瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)常見腫瘤之一，根據(jù)其惡性程度可分為星形細(xì)胞瘤(WHOⅡ級)、間變型星形細(xì)胞瘤(WHO Ⅲ級)和膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(WHO Ⅳ級)。大量實(shí)驗(yàn)表明，星形細(xì)胞瘤的病理過程與腫瘤的增殖、侵襲性相關(guān)[1]。增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)是一種核蛋白，與細(xì)胞的增殖狀態(tài)密切相關(guān)，可作為反映腫瘤細(xì)胞增殖程度與判斷預(yù)后的指標(biāo)[2]。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)是一種細(xì)胞因子，研究認(rèn)為其參與了部分腫瘤的增殖、生長、浸潤與轉(zhuǎn)移。本研究觀察了星形細(xì)胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達(dá)變化，并探討其意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料收集2010年5月～2014年6月三亞市人民醫(yī)院收治的顱內(nèi)原發(fā)星形細(xì)胞瘤患者70例，男46例，女24例；年齡29～74(48.6±13.2)歲，其中≤40歲31例，>40歲39例；腫瘤直徑≤4 cm 24例，>4 cm 46例；按WHO 2007中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)[3]，Ⅰ、Ⅱ級23例，Ⅲ級26例，Ⅳ級21例。所有患者均經(jīng)病理證實(shí)且術(shù)前均未行放化療。手術(shù)留取原發(fā)星形細(xì)胞瘤組織70例份(腫瘤組)，另取20例份癌旁正常組織作為對照(癌旁組)。

1.2PCNA、HMGB1檢測方法采用免疫組化SP法。收集石蠟包埋的組織標(biāo)本，常規(guī)切片(厚4～5 μm)、脫蠟，蒸餾水漂洗3遍，加入5%BSA，4 ℃條件下放置30 min，分別加入一抗4 ℃條件下過夜，次日沖洗后加入二抗，DBA顯色，蘇木素復(fù)染，脫水、透明、封片后鏡檢。PBS代替一抗作為陰性對照，已知抗體陽性標(biāo)本作為陽性對照。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：HMGB1陽性染色為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色細(xì)小顆粒，PCNA陽性染色為細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色乃至棕褐色顆粒。每一張星形細(xì)胞瘤切片選取連續(xù)的10個(gè)高倍視野(400×)，每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，分別統(tǒng)計(jì)其中的所有陽性細(xì)胞，計(jì)算陽性率。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組PCNA、HMGB1表達(dá)比較腫瘤組及癌旁組PCNA陽性表達(dá)率分別為90.0%(63/70)、45.0%(9/20)，HMGB1陽性表達(dá)率分別為72.9%(51/70)、0，兩組比較，P均<0.05。

2.2PCNA、HMGB1表達(dá)與星形細(xì)胞瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系結(jié)果見表1。由表1可知，PCNA、HMGB1表達(dá)均與星形細(xì)胞瘤病理分級有關(guān)(P均<0.05)。

2.3星形細(xì)胞瘤組織中PCNA與HMGB1表達(dá)的相關(guān)性星形細(xì)胞瘤組織中PCNA與HMGB1表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=6.82，P<0.05)。

表1　PCNA、HMGB1表達(dá)與星形細(xì)胞瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.4PCNA、HMGB1表達(dá)與星形細(xì)胞瘤患者預(yù)后的關(guān)系所有患者隨訪2 a以上。PCNA陽性、陰性表達(dá)者生存期分別為(21.27±7.15)、(33.47±4.61)個(gè)月，HMGB1陽性、陰性表達(dá)者生存期分別為(20.58±6.33)、(35.18±4.55)個(gè)月，兩者比較，P均<0.05。

3　討論

星形細(xì)胞瘤是常見的惡性腦腫瘤之一，惡性程度及病死率高。星形細(xì)胞瘤的典型特征為腫瘤侵襲性及轉(zhuǎn)移，目前認(rèn)為一些細(xì)胞調(diào)節(jié)因子及生物活性介質(zhì)在其中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。大量臨床試驗(yàn)表明，高表達(dá)侵襲性生物因子的患者預(yù)后較差。因此，尋找一個(gè)星形細(xì)胞瘤新的基因治療靶點(diǎn)尤為重要。

PCNA是一種S期細(xì)胞核內(nèi)大量表達(dá)的核蛋白之一，在DNA的合成調(diào)控中發(fā)揮至關(guān)重要的作用[4]。細(xì)胞無限增殖被認(rèn)為是腫瘤發(fā)生機(jī)制之一，腫瘤細(xì)胞的增殖活性與腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)[5]。有研究[6,7]表明，正常胃黏膜組織PCNA不表達(dá)，而胃癌組織中PCNA呈高表達(dá)，分化程度越低，含量越高。本研究顯示，腫瘤組PCNA陽性表達(dá)率高于癌旁組，PCNA表達(dá)與星形細(xì)胞瘤病理分級有關(guān)，PCNA陽性表達(dá)者生存期短于陰性表達(dá)者。

HMGB1是一種細(xì)胞因子，研究[8]認(rèn)為其參與了腫瘤的增殖、生長、浸潤與轉(zhuǎn)移。近年大量研究[9～12]證實(shí)，HMGB1與胃癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌的侵襲及淋巴、血液轉(zhuǎn)移相關(guān)。HMGB1在多種腫瘤和未成熟細(xì)胞中表達(dá)豐富，趨化作用可被其誘導(dǎo)產(chǎn)生，參與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移。本研究顯示，腫瘤組HMGB1陽性表達(dá)率高于癌旁組，HMGB1表達(dá)與星形細(xì)胞瘤病理分級有關(guān)，HMGB1陽性表達(dá)者生存期短于陰性表達(dá)者。我們推測，可能與HMGB1通過Ras、MAPK途徑，促使MAPKs磷酸化，進(jìn)而激活NF-κB，而NF-κB是一種重要的核轉(zhuǎn)錄因子，存在于真核細(xì)胞中，其與基因上啟動(dòng)子區(qū)的固定核苷酸序列結(jié)合啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄，從而完成細(xì)胞增殖與分化、腫瘤形成與轉(zhuǎn)移等一系列重要生物學(xué)功能[13]。

綜上，星形細(xì)胞瘤組織中PCNA、HMGB1的表達(dá)升高，并與星形細(xì)胞瘤病理分級有關(guān)，陽性表達(dá)患者預(yù)后差。

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