不同產(chǎn)地黃芩中黃芩苷含量的測定

鞠康　劉耀武　王甫成

（亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院　安徽亳州　236800）

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不同產(chǎn)地黃芩中黃芩苷含量的測定

鞠康劉耀武王甫成

（亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院安徽亳州236800）

文章以甘肅、山東、內(nèi)蒙古、山西黃芩為材料，比較不同產(chǎn)地黃芩藥材中黃芩苷的含量。依據(jù)《中國藥典》2010年版第一部中所制定的黃芩測定方法，采用HPLC法，加之以甲醇-水-磷酸（比例：47：53：0.2）為流動相，且流速設(shè)定為1ml/min，檢測波長280 nm，柱溫25℃，測定黃芩中黃芩苷含量。結(jié)果顯示：不同產(chǎn)地黃芩藥材中黃芩苷的含量有很大差異，其中山東黃芩比其他產(chǎn)區(qū)黃芩中的黃芩苷含量高。由此得出山東產(chǎn)黃芩有效成分含量普遍較高的結(jié)論。

黃芩；HPLC；黃芩苷

黃芩具有清熱燥濕、涼血解毒、安胎的功效。［1］黃芩產(chǎn)地較多，主要以甘肅、山東、內(nèi)蒙古、山西為主，由于加工方法不一，所以其主要成分含量有一定差別，本文依據(jù)用HPLC法測定不同產(chǎn)地黃芩中黃芩的含量，為臨床用藥及市場采購提供理論依據(jù)。

一、黃芩概述

（一）來源與形態(tài)特征。黃芩來源于唇形科植物黃芩ScutellariabaicalensisGeorgi的干燥根。［2］采摘時間為春、秋二季，去除多余的根莖須和泥沙，晾曬后除去多余的粗皮，曬干。黃芩為多年生草本植物，高大約為30到70cm。主根粗大并略呈現(xiàn)圓椎形狀，外皮顯褐色。單葉對生，卵狀披針形或線狀披針形，長1到4cm，寬0.4到1.2cm，其先端或鈍或急尖，基部圓形，全緣，具睫毛，背面有腺點，光滑或僅在中脈有短毛；具短柄或無柄?？偁罨ㄐ蝽斏?，花偏向一邊；花萼鐘狀，被白色長柔毛，先端五裂；花冠藍紫色，二唇形，長度約2cm，表面覆蓋有白色短柔毛。

（二）黃芩的生物學(xué)特性。黃芩易生長在石礫質(zhì)或粘土質(zhì)的山坡泥土中。在干燥的荒山坡、土崗及草原型石礫質(zhì)山地的向陽處較為多見。同時黃芩的生長喜溫和氣候，喜光，耐旱、耐寒。其所生長的土質(zhì)多為中性或者偏堿性且土質(zhì)疏松、肥沃的土壤中。［3］黃芩的生長發(fā)育：其種子一般具有60% -80%的發(fā)芽率，在適當(dāng)季節(jié)播種后，當(dāng)所處地溫有15-18℃且濕度足夠時，大概10天前后就能長出幼苗，30到50天出齊。首年黃芩幼苗植株生長速度比較緩慢，每年6月份開花，花期很長，可延續(xù)2～3個月。果實于每一年的9月份成熟，10月份的時候其地上部分會首先逐漸枯萎，翌年4月則會返青生長，以此生長周期約3～4年以上，其根、頭中心部逐漸枯朽，最終成為枯芩。

（三）產(chǎn)地分布。黃芩產(chǎn)于冀、遼、陜、魯、蒙、黑等地區(qū)。早期黃芩產(chǎn)量最多的省份是山西，現(xiàn)以蒙及東三省產(chǎn)量為最大，河北承德所產(chǎn)黃芩質(zhì)量為最優(yōu)。較之于野生黃芩，家種黃芩主要分布在山東、山西、內(nèi)蒙古、陜西、甘肅、東北等地區(qū)。

二、材料與方法

（一）儀器設(shè)備與實驗材料。

1.儀器設(shè)備。

表1　儀器設(shè)備

表2　實驗材料

3.實驗藥材與性狀特征。

實驗藥材。取近期采集產(chǎn)地為內(nèi)蒙古、甘肅、山東、山西的黃芩樣品。采用薄層鑒別的方式確定本次試驗所選用的為唇形科類植物黃芩干燥的根部。

藥材性狀。呈圓錐形狀，扭曲，長8至25cm，直徑1至3cm。表皮為棕黃色或深黃色，且會有少量的疣狀細(xì)根痕，上部相對比較粗糙，并且有扭曲的縱皺或不規(guī)則的網(wǎng)紋形狀，下部可見順紋和細(xì)皺較為明顯。質(zhì)硬而且比較脆，容易折斷，斷面處可呈現(xiàn)黃色，中間有紅棕色，氣微，味苦。藥材性狀見下圖：

（二）試驗方法。

1.色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性實驗［4］。C18色譜柱（4.6mm× 250mm）、黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品、含量測定以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：甲醇-水-磷酸（其比例為47：53：0.2）；紫外檢測波長為280nm。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應(yīng)不低于2500。流速為1ml/min，柱溫25℃，對照品、供試品進樣量均為10μm。

2.供試品溶液的制備。分別精密稱取黃芩樣品（粗粉：過二號篩）0.3002g、0.3006g，分別置具塞錐形瓶中，加入70%乙醇40ml，在水浴鍋上以89.5攝氏度的溫度加熱回流3小時，取下，置通風(fēng)櫥下冷卻，用漏斗濾過，濾液置于100ml容量瓶中，用少量70%乙醇分?jǐn)?shù)次洗滌容器和殘渣，洗液濾入同一量瓶中，加70%乙醇定容至刻度，搖勻。再精密移取1ml，置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，最后用0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

3.標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備。精密稱取在60℃減壓干燥4h后的黃芩苷對照品1.650mg，放入25ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每1ml含0.066mg的溶液，即得。

4.測定法。根據(jù)上述色譜條件分別精密吸取黃芩苷對照品溶液與黃芩供試品溶液各10μl，依次注入高效液相色譜儀中，根據(jù)圖譜，依據(jù)外標(biāo)法分析數(shù)據(jù)，計算結(jié)果，即得。

5.精密度與重復(fù)性試驗。取同一濃度黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照含量測定方法及色譜條件進行測定，重復(fù)5次測定峰面積，黃芩苷RSD平均值為0.12%，該方法精密度高，具有較高的可靠性。

重復(fù)性：取對照品溶液連續(xù)進樣5針，峰面積的RSD為0.12%（標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：應(yīng)不大于2.0%）；理論板數(shù)：3100（標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：應(yīng)不低于2500）；分離度：2.1（標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：應(yīng)大于1.5）。

6.數(shù)據(jù)處理。數(shù)據(jù)處理采用EXCEL統(tǒng)計分析軟件進行處理和計算，以平均值來表示。

三、實驗結(jié)果與分析

（一）黃芩苷對照品含量圖譜。

圖1　黃芩苷含量圖譜Figure1　baicalin contentin the map

（二）不同產(chǎn)區(qū)黃芩樣品黃芩苷含量圖譜。

圖2　山東黃芩黃芩苷含量圖譜Figure2　shandong scutellaria baicalin contentin map

圖3　山西黃芩黃芩苷含量圖譜Figure3　scutellaria baicalin contentin shanxi

圖4　內(nèi)蒙古黃芩黃芩苷含量圖譜Figure4　scutellaria baicalin contentin InnerMongolia

圖5　甘肅產(chǎn)黃芩黃芩苷含量圖譜Figure5　gansu scutellaria baicalin content

以同樣的色譜條件分析黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品和供試品，出峰時間為橫坐標(biāo)，峰高為縱坐標(biāo)，繪制含量圖譜。圖1峰面積測得值為40.4009，圖2峰面積測得值為29.5742，圖3峰面積測得值為26.7127，圖4峰面積測得值為20.9028，圖5峰面積測得值為17.4801。數(shù)據(jù)記錄如表3所示。

表3　不同產(chǎn)地黃芩樣品中黃芩苷的含量

四、結(jié)論

該實驗整個過程圍繞中國藥典2010年版一部中規(guī)定的方法，采用高效液相法測定黃芩藥材中黃芩苷的含量，方法既簡單、可靠，又可快速鑒別區(qū)分不同產(chǎn)地的黃芩藥材的含量高低，具有較好的精密度和準(zhǔn)確性，有利于全面控制藥材質(zhì)量，促進其制劑研究水平和藥效質(zhì)量控制的全面提高。中國藥典規(guī)定含黃芩苷（C15H22O10）不得少于9.0%。河北雖是黃芩的道地產(chǎn)地，由于亳州市場暫時無法取得樣品，以后有機會會進一步作出研究。本次實驗研究得出的結(jié)果如下：山東黃芩藥材比其他產(chǎn)區(qū)黃芩中的黃芩苷含量高，其中山東產(chǎn)地黃芩中黃芩苷的含量最高為16.02%，山西產(chǎn)地黃芩中黃芩苷的含量為14.47%，內(nèi)蒙古產(chǎn)地黃芩中黃芩苷的含量為11.14%，甘肅產(chǎn)地黃芩中黃芩苷的含量為9.02%。本次實驗研究結(jié)果為將來進一步對研究黃芩提供有力的數(shù)據(jù)。

根據(jù)以上實驗結(jié)果綜合分析，得出如下結(jié)論：不同產(chǎn)地黃芩苷的含量高低順序依次為山東>山西>內(nèi)蒙古>甘肅。

［1］侯家玉，方泰慧.中藥藥理學(xué)［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2011：41－44.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:2010年版一部［Z］．中國醫(yī)藥科技出版社，2010:282.

［3］譚仁祥.植物成分分析［M］.北京：科學(xué)出版社，2002：429.

［4］蘇蘇，王勇，燕吉敏，等.反相HPLC法測定不同產(chǎn)地黃芩中黃芩苷的含量［J］.復(fù)旦學(xué)報（自然科學(xué)版），2002，41（6）：714－716.

［5］郭東艷，王梅，唐志書.生黃芩煎煮過程中黃芩苷含量的動態(tài)變化規(guī)律及止血作用［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16 （12）:145.

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［責(zé)任編輯鄭麗娟］

Determination of the Content of Baicalin in Radix from Different Habitats

Ju KangLiu Yaowu Wang Fucheng
（Bozhou Vocational and Technical College，Bozhou，Anhui 236800）

Abstract:This paper，taking radix from Gansu，Shandong，Inner Mongolia，Shanxi as the materials，compared different origin of the content of Baicalin in radix，according to the Chinese Pharmacopoeia 2010 edition in the first set of Scutellaria baicalensis Georgi determination method by HPLC，coupled with methanol-water-phosphate（proportional to:47:53:0.2 mobile phase and the flow rate setting of 1ml/min，the detection wavelength was 280 nm，column temperature of 25 DEG C，in order to determine the content of Baicalin in Scutellaria baicalensis Georgi.The results showed that there was a great difference in the content of Baicalin in Radix and radix，and the content of Baicalin in Shandong was higher than that in other producing areas.The content of effective components of Radix Scutellariae in Shandong were generally higher in conclusion.

Radix；HPLC；Baicalin

R284.1

A

2095-0438（2016）08-0153-04

2016-03-11

鞠康（1983—），男，安徽亳州人，亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院講師，碩士，研究方向：中藥鑒定。

安徽省高等學(xué)校省級質(zhì)量工程（2015msgzs）；亳州市中藥質(zhì)量控制與市場研究創(chuàng)新團隊（2014）。