黃芪注射液對病毒性心肌炎患兒Th1/Th2平衡的影響

李軍紅，殷小成（.衡陽市婦幼保健院兒科重癥監(jiān)護室，湖南400；.南華大學附屬第一醫(yī)院，湖南衡陽400）

·論著·

黃芪注射液對病毒性心肌炎患兒Th1/Th2平衡的影響

李軍紅1，殷小成2
（1.衡陽市婦幼保健院兒科重癥監(jiān)護室，湖南421001；2.南華大學附屬第一醫(yī)院，湖南衡陽421001）

目的探討黃芪注射液對病毒性心肌炎（VMC）患兒Th1/Th2平衡的影響。方法選取2014年1月至2015年12月在衡陽市婦幼保健院及南華大學附屬第一醫(yī)院兒科住院的VMC患兒68例，隨機分為常規(guī)組和黃芪組，各34例。常規(guī)組給予常規(guī)治療，黃芪組在常規(guī)治療基礎上加用黃芪注射液，治療14 d后，評價兩組患兒臨床療效，收集治療前后血清，通過酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定Th1型細胞因子干擾素-γ（IFN-γ）及Th2型細胞因子白介素4（IL-4）濃度，并計算IFN-γ/IL-4比值，另取同期30例健康兒童作為正常對照組。結果黃芪組總有效率高于常規(guī)組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與正常對照組比較，常規(guī)組與黃芪組血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值均明顯增加，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；而血清IL-4濃度明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；兩組治療后血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值較治療前均下降，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；血清IL-4濃度較治療前升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；相對于常規(guī)組治療后，黃芪組治療后血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值均降低，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），但血清IL-4濃度升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論黃芪注射液對VMC患兒有良好的治療作用，可引起Th1/Th2平衡向Th2偏移，促進受損心肌的恢復。

黃芪；心肌炎；病毒性疾病；干擾素Ⅱ型；白介素4

【Abstract】Objective To explore the effects of Radix Astragali Injection on the Th1/Th2 balance in child patients with viralmyocarditis（VMC）.M ethods Sixty-eightcases of VMC in our hospitals from January 2014 to December 2015 were random ly divided into the conventional group and Astragali Radix group，34 cases in each group.The conventional group was treated with the conventional therapy.Based on this，the Radix Astragali group was added with Radix Astragali Injection.After14 d treatment，the clinical curative effects were evaluated.Serum was collected before and after treat ment.ELISA was used to detect the concentrations of Th1 cytokine interferon-γ（IFN-γ）and Th2 cytokine interleukin-4（IL-4），and then the ratio of IFN-γto IL-4was calculated.In addition，30 healthy children served as normal control group in the same period.Results The total effective rate in Radix Astragali group was significantly higher than thatin the conventional group with statistically significant difference（P＜0.05）. In the comparison with the normal control group，serum IFN-γconcentration and the ratio of IFN-γto IL-4 in the conventional group and Radix Astragali group were significantly increased，while serum IL-4 concentration was significantly decreased，the differences were statistically significant（P＜0.01）.The serum IFN-γconcentration and the ratio of IFN-γto IL-4 after treatment in both Radix Astragali group and conventional group were decreased compared with before treatment，butserum IL-4 concentration was increased，the differences were statistically significant（P＜0.01）.Moreover，in the comparison with the conventional group after treatment，serum IFN-γconcentration and the ratio of IFN-γto IL-4 after treatment in the Radix Astragali group were decreased，while serum IL-4 concentration was increased（P＜0.01）.Comparing with the conventional group after treatment，the serum IFN-γ concentration and the radioof IFN-γto IL-4both decreased in the Astragali group after treatment with out statistically significant difference（P＞0.05），while theserum IL-4 concentration increased with statistically significant difference（P＜0.05）.Conclusion Radix Astragali Injection has a better curative effect in the treatment of VMC children patients，can cause the shift of Th1/Th2 balance to Th2，thereby promotes the recovery of impaired myocardium.

【Key words】Astragalus membranaceus；Myocarditis；Virus diseases；Interferon TypeⅡ；Interleukin-4

病毒性心肌炎（viralmyocarditis，VMC）屬于兒科常見病，其發(fā)病機制主要與病毒的直接損傷作用和機體的免疫反應紊亂有關［1］。Th細胞主要分為Th1、Th2細胞兩大類型，其中Th1細胞產(chǎn)生干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子-β、白介素2（interleukin，IL-2）、IL-12、IL-18等細胞因子，Th2細胞產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-10、IL-13、單核細胞趨化蛋白-1等細胞因子。在生理狀況下，Th1、Th2型細胞因子處于一種動態(tài)平衡狀態(tài)，二者相互影響、相互作用，共同調(diào)控機體的免疫應答。近年來，有研究表明，當Th1型細胞因子占優(yōu)勢時，即發(fā)生Th1/Th2型細胞因子失衡，產(chǎn)生過度炎性反應，與VMC的發(fā)生、發(fā)展密切相關［2］。黃芪注射液是從豆科植物蒙古黃芪或莢膜黃芪的干燥根中提取的一種中藥制劑，已被廣泛用于VMC的治療，并顯示出較好的療效［3-4］。然而，黃芪注射液的抗VMC作用是否和其調(diào)整Th1/Th2型細胞因子平衡有關尚不清楚。因此，作者于2014年1月至2015年12月采用黃芪注射液治療VMC患兒，通過酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbentassay，ELISA）檢測治療前后血清IFN-γ、IL-4濃度，旨在進一步闡明黃芪注射液抗VMC的機制，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2014年1月至2015年12月在衡陽市婦幼保健院及南華大學附屬第一醫(yī)院兒科住院的VMC患兒68例，診斷均符合中華醫(yī)學會兒科學分會心血管學組制定的小兒VMC診斷標準［5］。按照隨機數(shù)字表法分為常規(guī)組和黃芪組，各34例。常規(guī)組患兒中男21例，女13例；年齡4～12歲，平均（8.54±4.38）歲；病程3～8 d，平均（5.26±2.79）d。黃芪組患兒中男19例，女15例；年齡5～13歲，平均（9.14±5.26）歲；病程4～9 d，平均（6.21±3.17）d。另選同期在衡陽市婦幼保健院進行健康體檢的30例正常兒童作為正常對照組，其中男17例，女13例；年齡4～14歲，平均（8.36±4.59）歲。三組患兒年齡、性別及常規(guī)組與黃芪組病程、病情嚴重程度比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療方法常規(guī)組與黃芪組均給予綜合治療，包括臥床休息、藥物治療（如維生素C、能量合劑、維生素E、輔酶Q10等）；在此基礎上，黃芪組患兒再采用黃芪注射液（成都地奧九鴻制藥廠生產(chǎn)，批號：0210094）進行治療，將5～10mL黃芪注射液加入5%葡萄糖液100～150mL中，靜脈滴注，每天1次，14 d為1個療程，療程結束后判斷療效。

1.2.2療效判定VMC患兒治療結束后進行療效判斷，顯效：臨床表現(xiàn)消失，心電圖及心肌酶譜恢復正常；有效：臨床表現(xiàn)消失，心電圖及心肌酶譜明顯好轉(zhuǎn)；無效：療程結束，臨床表現(xiàn)暫時消失，心電圖及心肌酶譜異常、無明顯好轉(zhuǎn)或反復［6］?？傆行?（顯效例數(shù)+有效例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

1.2.3標本收集VMC患兒分別于入院當時及療程結束后次日清晨空腹抽取肘靜脈血3mL，正常對照組患兒于體檢當天空腹抽取肘靜脈血3mL。立即送至檢驗科，以1 500 r/min離心10min，提取上層血清，-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4ELISA檢測血清IFN-γ、IL-4濃度采用雙抗體夾心ELISA檢測血清IFN-γ、IL-4濃度，ELISA試劑盒由深圳晶美生物工程公司提供，所有操作步驟嚴格按試劑盒說明書進行。

1.3統(tǒng)計學處理應用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，采用單因素方差分析；計數(shù)資料以率或構成比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1常規(guī)、黃芪組患兒臨床療效比較常規(guī)組、黃芪組總有效率分別為75.53%、94.12%，兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=19.83，P＜0.05），見表1。

表1　常規(guī)、黃芪組患兒臨床療效比較［n（%）］

2.2三組血清IFN-γ、IL-4濃度及IFN-γ/IL-4比較常規(guī)組與黃芪組血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值均高于正常對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；而血清IL-4濃度低于正常對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；治療前，黃芪組和常規(guī)組上述指標無明顯變化，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值均較治療前下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；血清IL-4濃度較治療前升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；相對于常規(guī)組治療后，黃芪組治療后血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值進一步減少，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），血清IL-4濃度進一步增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2　三組血清IFN-γ、IL-4濃度及IFN-γ/IL-4比較（±s）

表2　三組血清IFN-γ、IL-4濃度及IFN-γ/IL-4比較（±s）

注：與正常對照組比較，aP＜0.01；與同組治療前比較，bP＜0.05；與常規(guī)組治療后比較，cP＜0.05。

正常對照組（n=30）常規(guī)組（n=34）治療前治療后指標IFN-γ（pg/mL）IL-4（pg/mL）IFN-γ/IL-4 25.68±3.46 116.39±18.75 0.22 84.79±12.36a39.01±4.72a2.17a55.42±6.57b71.63±10.89b0.77b黃芪組（n=34）治療前治療后86.29±13.15a38.25±4.36a2.26a34.18±4.05bc95.32±14.38bc0.36bc

3　討論

黃芪是臨床上最常用的中成藥物之一，具有增強機體免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗應激及抗感染等多種藥效作用，而黃芪注射液是以黃芪為主要成分制成的中藥注射制劑，其主要成分包括黃酮、黃芪皂苷及黃芪多糖。大量臨床與動物研究已證實黃芪注射液有良好的抗VMC作用，其機制包括抗病毒、正性肌力、抗氧化應激、調(diào)節(jié)免疫、擴張血管平滑肌及改善微循環(huán)等［7］。本研究結果表明，黃芪組總有效率明顯高于常規(guī)組，且在治療過程中未發(fā)現(xiàn)任何不良反應，與文獻報道相符［3-4］，表明黃芪注射液治療VMC安全有效。

盡管VMC的發(fā)病機制尚未完全闡明，但細胞因子的異常表達及其引起的細胞因子網(wǎng)絡平衡失調(diào)在VMC的發(fā)生、發(fā)展中占主導地位［8］。IFN-γ、IL-4分別為Th1、Th2型細胞因子的代表，二者間存在相互拮抗作用。當IFN-γ/IL-4比值升高時，即可促進VMC的發(fā)生、發(fā)展，而IFN-γ/IL-4比值降低則緩解VMC［9-10］。本研究結果顯示，常規(guī)組與黃芪組VMC患兒血清IFN-γ濃度、IFN-γ/ IL-4比值均明顯高于正常對照組，而血清IL-4濃度明顯低于正常對照組，提示VMC患兒中存在Th1/Th2平衡向Th1偏移。在炎癥早期，Th1細胞在T細胞輔助細胞介導的心肌損傷中占主導地位，在炎性細胞因子的作用下，血管內(nèi)皮細胞表面的配體表達上調(diào)，選擇蛋白與選擇蛋白配體的相互作用導致Th1細胞在炎癥病灶局部聚集，促進活化B細胞增生及抗體的產(chǎn)生，并增強自然殺傷細胞的殺傷作用，從而導致心肌細胞炎性損傷［11］。經(jīng)14 d治療后，常規(guī)組與黃芪組血清IFN-γ濃度、IFN-γ/ IL-4比值均較治療前下降；血清IL-4濃度較治療前升高，且黃芪組治療后血清IFN-γ濃度、IFN-γ/IL-4比值均較常規(guī)組治療后進一步降低，血清IL-4濃度則進一步升高，說明黃芪注射液有助于糾正VMC患兒Th1/Th2平衡失調(diào)，重新恢復Th2型細胞因子的優(yōu)勢地位，進而減少心肌細胞炎性損傷。

綜上所述，Th1/Th2平衡失調(diào)與VMC的發(fā)生、發(fā)展密切相關，黃芪注射液對VMC患兒有良好的治療作用，其機制可能與糾正Th1/Th2平衡失調(diào)并向Th2偏移有關，這些作用機制的揭示為指導臨床用藥提供了可靠的藥理學依據(jù)。

［1］Fung G，Luo H，Qiu Y，etal.Myocarditis［J］.Circ Res，2016，118（3）：496-514.

［2］曾曉春，孔清，伍偉鋒.Th1-Th2-Th17細胞因子在小鼠慢性心肌炎中的表達［J］.中國免疫學雜志，2015，31（12）：1601-1604.

［3］嚴愛民.黃芪注射液治療小兒病毒性心肌炎的療效觀察［J］.中西醫(yī)結合心血管病雜志，2015，3（27）：69-70.

［4］紀銘月.黃芪治療病毒性心肌炎的療效觀察［J］.臨床合理用藥雜志，2015，8（23）：48-49.

［5］吳鐵吉.病毒性心肌炎診斷標準（修訂草案）［J］.中華兒科雜志，2000，38（2）：75.

［6］王航雁，衣京梅，張曉飛，等.玉丹榮心丸治療病毒性心肌炎療效觀察［J］.實用兒科臨床雜志，2003，18（3）：216-217.

［7］王哲.黃芪注射液的臨床應用研究進展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學學報，2009，11（6）：266-268.

［8］Dominguez F，KühlU，Pieske B，etal.Updateon Myocarditisand Inflammatory Cardiomyopathy：Reemergence of Endomyocardial Biopsy［J］.Rev Esp Cardiol（EnglEd），2016，69（2）：178-187.

［9］王波，黃艷，顧堅，等.左卡尼汀對兒童病毒性心肌炎Th1/Th2平衡的影響［J］.湖北科技學院學報：醫(yī)學版，2016，30（1）：46-47.

［10］Liu L，Yue Y，Xiong S.NK-derived IFN-γ/IL-4 triggers the sexually disparatepolarization ofmacrophages in CVB3-inducedmyocarditis［J］.JMol CellCardiol，2014，76：15-25.

［11］BoH，Zhenhu L，Lijian Z.Blocking theCD40-CD40L interaction by CD40-Ig reduces disease progress in murinemyocarditis induced by CVB3［J］. Cardiovasc Pathol，2010，19（6）：371-376.

Effects of Radix Astragali Injection onbalance of Th1/Th2 in child patientsw ith viralmyocarditis

Li Junhong1，Yin Xiaocheng2

（1.Pediatric Intensive Care Unit，Hengyang Municipal Maternal and Child Health Care Hospital，Hengyang，Hunan 421001，China；2.Department of Pediatrics，F(xiàn)irstAffiliated Hospital，University of South China，Hengyang，Hunan 421001，China）

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.10.005

B

1009-5519（2016）10-1451-03

李軍紅（1973-），本科，主要從事兒科重癥研究工作。

（2016-04-02）