金水丸薄層色譜鑒別研究

陳金素　李忠瓊　楊江媛

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金水丸薄層色譜鑒別研究

陳金素1李忠瓊2楊江媛1

1.云南省中醫(yī)醫(yī)院，云南昆明650021；2.云南省食品藥品檢驗所，云南昆明650011

目的：建立金水丸的薄層色譜鑒別方法。方法：對金水丸制劑中的藥味進行TLC鑒別方法研究，并進行方法學(xué)考察。結(jié)果：建立了金水丸中紫丹參、黃芩、枳殼、麥冬的薄層色譜鑒別方法。結(jié)論：所建立的方法簡便易行，專屬性強，重復(fù)性好，可用于金水丸制劑的質(zhì)量控制。

金水丸；薄層色譜；鑒別

金水丸為云南省中醫(yī)醫(yī)院制劑室制備的院內(nèi)中藥制劑，是由麥冬、地黃、山藥、茯苓、牡丹皮、紫菀、麻黃、枳殼、黃芩、紫丹參等十八味藥材制成的濃縮水丸，具有滋陰潤燥、止咳平喘的功效，臨床用于陰虛肺燥之咳喘等癥?，F(xiàn)行質(zhì)量標準僅對方中的牡丹皮、麻黃進行薄層色譜鑒別及丸劑的通則檢查，為進一步提高其質(zhì)量標準、更有效地控制其質(zhì)量，進行了有關(guān)藥味的薄層色譜鑒別研究，建立了金水丸中紫丹參、黃芩、枳殼、麥冬的薄層色譜鑒別方法，方法專屬性強、重復(fù)性好。

1　儀器與材料

1.1儀器FUNGILAB超聲儀；BINDER烘箱；sartorius BS224S天平；CAMAG REPROSTAR 3紫外光燈儀。

1.2材料硅膠G薄層板(批號：20152046，青島康業(yè)鑫藥用硅膠干燥劑有限公司；批號：20131118，青島海洋化工廠分廠；批號：20151118，煙臺維啟化工產(chǎn)品有限公司)；丹參酮IIA對照品(批號：110766-201520)、黃芩苷對照品(批號：110715-201318)、柚皮苷對照品(批號：110722-201312)、麥冬對照藥材(批號：121013-201310)均購自中國食品藥品檢定研究院；金水丸樣品(批號：20150319、20150630、20151029，云南省中醫(yī)醫(yī)院制劑室)；所用試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1紫丹參的鑒別取本品研細，過三號篩，稱取10g，加乙醚50mL，超聲處理10min，濾過，濾液揮干(藥渣備用)，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另按處方取除去紫丹參的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取丹參酮IIA對照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述3種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無斑點(見圖1)。

2.2黃芩的鑒別取“2.1”項下乙醚提取后的備用藥渣，揮干乙醚，加甲醇50mL，超聲處理60min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20mL溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3，用乙酸乙酯30mL振搖提取，取乙酸乙酯部分蒸干(水層備用)，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另按處方取除去黃芩的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取黃芩苷對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述3種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5%三氯化鐵乙醇溶液，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的深綠色斑點，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無斑點(見圖2)。

圖1　紫丹參鑒別TLC圖

圖2　黃芩鑒別TLC圖

2.3枳殼的鑒別取“2.2”項下的供試品溶液。另按處方取除去枳殼的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取柚皮苷對照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述3種溶液各2～4μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶6∶2)的下層溶液為展開劑，展開9 cm，取出晾干后，再展開一次，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，105℃加熱約5min，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無斑點(見圖3)。

圖3　枳殼鑒別TLC圖

2.4麥冬的鑒別取“2.2”項下乙酸乙酯提取后的備用水層，用氨試液調(diào)節(jié)pH至中性，再用水飽和正丁醇30mL振搖提取，取正丁醇部分蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為供試品溶液。另按處方取除去麥冬的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取麥冬對照藥材粉末1g，加甲醇30mL，超聲處理60min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20mL使溶解，用水飽和正丁醇30mL振搖提取，取正丁醇部分蒸干，殘渣加甲醇1mL使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述3種溶液各2～4μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(10∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱約2min至斑點顯色清晰，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個相同的淺紅色主斑點，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無斑點(見圖4)。

圖4　麥冬鑒別TLC圖

3　討論

處方中的紫丹參為云南省地方習(xí)用中藥材，收載于2005年版《云南省中藥材標準》第一冊，其薄層色譜鑒別以丹參酮IIA為對照，展開劑為苯-乙酸乙酯(19∶1)[1]，研究中比較了甲苯-乙酸乙酯(19∶1)[2]及石油醚(30～60℃)-乙酸乙酯(9∶1)，采用本文規(guī)定的展開劑能獲得良好分離，易于結(jié)果判斷，并避免了使用有毒試劑，利于檢驗者健康及環(huán)保。

《中國藥典》2015年版收載的黃芩及含黃芩成方制劑的薄層色譜鑒別多采用聚酰胺薄膜、硅膠G薄層板，展開劑為醋酸、甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶3∶1∶2)、乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5∶3∶1∶1)等[2]，經(jīng)試驗比較，使用本文規(guī)定的色譜條件能有效鑒別金水丸中的黃芩。

枳殼的鑒別采用《中國藥典》2015年版枳殼項下薄層色譜條件試驗時，柚皮苷Rf值較小且分離不佳，經(jīng)試驗通過二次展開可獲得有效分離。

麥冬的鑒別采用《中國藥典》2015年版麥冬項下方法試驗時，金水丸樣品色譜中斑點較多分離不佳。根據(jù)麥冬所含化學(xué)成分[3]，采用本文規(guī)定的方法并比較了展開劑①三氯甲烷-甲醇-水(13∶6∶2)的下層溶液、②三氯甲烷-甲醇(10∶4)、③三氯甲烷-甲醇(10∶1.5)，結(jié)果用①時斑點分離不佳、陰性干擾大，用②時目標斑點Rf值過大，采用③展開劑斑點分離良好且Rf值適中。

研究建立的4項薄層色譜鑒別，考察不同廠家的硅膠G預(yù)制板并經(jīng)不同實驗者試驗均可獲得良好重現(xiàn)性。同時也比較了不同溫濕度條件下的展開效果，各目標斑點的Rf值在不同條件下略有差異，但斑點能分離清晰，易于結(jié)果判斷。其中紫丹參鑒別的供試品溶液制備簡便，而黃芩、枳殼、麥冬鑒別中的供試品溶液制備方法均經(jīng)過優(yōu)化實驗建立。

[1]云南省食品藥品監(jiān)督管理局.云南省中藥材標準(第一冊)[S].昆明：云南美術(shù)出版社,2005：45.

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：301，577，735,1214.

[3]陳屏，徐東銘，雷軍.麥冬化學(xué)成分及藥理作用的研究現(xiàn)狀[J].長春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2004,20(1)：35.

Study on TLC Identification of Jinshuiwan

CHEN Jinsu1LI Zhongqiong2YANG Jiangyuan1

1.Yunnan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Kunming 650021,China；2.Yunnan Institute for food and drug control,Kunming 650011,China

Objective To establish the TLC identification method of Jinshuiwan.Method Create effective TLC identification method by studing of herbal medicines in prescription of jinshuiwan. Result The TLC identification method of Salviae yunnanensis Radix, Scutellariae Radix, Aurantii Fructus, Ophiopogonis Radix in Jinshuiwan preparation have been established. Conclusion The method is simple, specific, reproducible and can be applied to quality control of Jinshuiwan.

Jinshuiwan;TLC; Identification

陳金素(1968- )，女，學(xué)士，副主任藥師，主要從事中藥質(zhì)量控制。 E-mail：1248771045@qq.com

R284.1

A

1007-8517(2016)14-0016-03

2016.05.11)