新生兒血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

邊興艷，趙　暉，姜振紅，張曉琳，劉競徽,楊曉巖

(遼寧省大連市兒童醫(yī)院　116012)

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·論著·

新生兒血培養(yǎng)病原菌分布及耐藥性分析

邊興艷，趙暉，姜振紅，張曉琳，劉競徽,楊曉巖

(遼寧省大連市兒童醫(yī)院116012)

目的了解大連市新生兒血培養(yǎng)病原菌分布及其對抗菌藥物的耐藥情況。方法對2014年8月至2015年8月住院的新生兒進(jìn)行常規(guī)血培養(yǎng)、鑒定、藥敏試驗(yàn)，對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果1 570例新生兒血培養(yǎng)標(biāo)本中共檢測出病原菌186株，陽性率為11.8%。其中革蘭陽性菌占74.2%(138/186)，并以表皮葡萄球菌為主。革蘭陰性菌占25.3%(47/186),以洋蔥伯克霍爾德菌為主。真菌1株，占0.5%。藥敏結(jié)果顯示革蘭陽性菌對青霉素、紅霉素耐藥率較高(80.0%～90.0%)，對萬古霉素、利奈唑胺、替考拉寧100.0%敏感；大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率最高(88.2%～100.0%)，對亞胺培南、阿米卡星100.0%敏感；對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉維酸、頭孢吡肟、頭孢他啶耐藥率均較低(0～10.0%)。洋蔥伯克霍爾德菌對替卡西林/克拉維酸和美羅培南耐藥率高于80.0%，對頭孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星、米諾環(huán)素和復(fù)方磺胺甲噁唑100.0%敏感。結(jié)論大連市新生兒血培養(yǎng)病原菌以革蘭陽性菌為主，凝固酶陰性葡萄球菌是主要病原菌，由于地區(qū)環(huán)境不同，病原菌及耐藥情況應(yīng)做定期監(jiān)測分析，為臨床合理使用抗菌藥物提供客觀、準(zhǔn)確的依據(jù)。

血培養(yǎng)；新生兒；耐藥性；病原菌

新生兒敗血癥是新生兒時(shí)期的嚴(yán)重感染性疾病，其治療成功的關(guān)鍵在于盡早明確病原菌，盡早選用有效的抗菌藥物，血培養(yǎng)是診斷新生兒敗血癥的金標(biāo)準(zhǔn)。本研究對本院臨床診斷的新生兒敗血癥患兒的血培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1標(biāo)本來源選擇本院新生兒科2014年8月至2015年8月送檢的1 570例新生兒敗血癥患兒的血培養(yǎng)標(biāo)本。新生兒敗血癥診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2003 年昆明會議制定的《新生兒敗血癥診療方案》的確診標(biāo)準(zhǔn)[1]。

1.2菌種分離與鑒定采用美國VersaTREK血培養(yǎng)系統(tǒng)按要求進(jìn)行培養(yǎng)；系統(tǒng)報(bào)警陽性后立即接種分離細(xì)菌，應(yīng)用法國生物梅里埃公司 VITEK 2 Compact全自動細(xì)菌鑒定分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定；質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC29213，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，來自大連市臨床檢驗(yàn)中心。

1.3藥敏試驗(yàn)方法藥敏檢測采用K-B紙片擴(kuò)散法，藥物敏感性試驗(yàn)按美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI-2013)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀。藥敏紙片來自英國Oxoid 公司。

2　結(jié)　果

2.1病原菌分離情況1 570例臨床診斷新生兒敗血癥患兒血培養(yǎng)陽性186例，檢出率為11.8%(186/1 570)。其中革蘭陽性菌138例，占74.2%(138/186)；革蘭陰性菌47例，占25.3%(47/186)；真菌1例，占0.5%。革蘭陽性菌中以表皮葡萄球菌為主，占革蘭陽性球菌的64.4%(89/138)，革蘭陰性菌中洋蔥伯克霍爾德菌占40.4%(19/47)，大腸埃希菌占27.7%(13/47)，肺炎克雷伯桿菌占21.3%(10/47)，其他細(xì)菌占10.6%(5/47)。結(jié)果見表1。

2.2主要病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性

2.2.1主要革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥率凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)對青霉素、紅霉素耐藥率較高(80.0%～90.0%)；對利福平、阿米卡星、亞胺培南、阿莫西林/克拉維酸、頭孢唑林耐藥率較低(0～13.3%)；復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率在45.5%～47.1%；對萬古霉素、利奈唑胺、替考拉寧均敏感。金黃色葡萄球菌對青霉素、紅霉素耐藥率較高，分別為93.2%和77.2%；對萬古霉素、利奈唑胺、替考拉寧均敏感，結(jié)果見表2。

表1　血培養(yǎng)病原菌的分布及構(gòu)成比

表2　革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

續(xù)表2　革蘭陽性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

注：-表示無數(shù)據(jù)。

2.2.2革蘭陰性細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率最高(88.2%～100.0%)；對亞胺培南、阿米卡星100.0%敏感；對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉維酸、頭孢吡肟、頭孢他啶耐藥率均較低(0～10.0%)；對左氧氟沙星和其他抗菌藥物耐藥率有所不同。洋蔥伯克霍爾德菌對替卡西林/克拉維酸和美羅培南耐藥率高于80.0%；對頭孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星、米諾環(huán)素和復(fù)方磺胺甲噁唑100.0%敏感。結(jié)果見表3。

表3　革蘭陰性菌對抗菌藥物的耐藥性(%)

注：-表示無數(shù)據(jù)。

3　討　論

新生兒敗血癥是細(xì)菌或真菌侵入新生兒血液循環(huán)，并在其中生長、繁殖、產(chǎn)生毒素，進(jìn)而引發(fā)的全身性炎癥反應(yīng)，是新生兒時(shí)期的嚴(yán)重感染性疾病。有研究顯示我國不同地區(qū)新生兒敗血癥血培養(yǎng)陽性率大約為4.6%～6.7%，早產(chǎn)兒檢出率高于足月兒[2-4]。本研究結(jié)果顯示,本院新生兒科血培養(yǎng)陽性率為11.8 %，均高于國內(nèi)其他地區(qū)，說明血培養(yǎng)陽性率因地區(qū)、年份、檢測方法和患者群體的不同存在很大差異。本院血培養(yǎng)以革蘭陽性球菌為主，占74.2%(138/186)，CNS居于首位，與文獻(xiàn)[2-4]報(bào)道一致。CNS 是棲于皮膚和黏膜表面的條件致病菌，正常情況下不致病，但在免疫力降低或接受侵入性治療如各種靜脈置管、胃腸營養(yǎng)時(shí)其感染風(fēng)險(xiǎn)會增加。有文獻(xiàn)報(bào)道CNS可通過靜脈滴注、氣管插管等侵入性操作造成患兒血行感染[5-6]。以往曾認(rèn)為 CNS 為污染菌，致病性弱，但有研究表明，CNS 具有胞外黏液物(ESS)等致病因子，有一定的致病能力[7]。由CNS引起的新生兒敗血癥國內(nèi)為39.2%～82.0%[2-4,8]，國外為30.6%～51%[9]，是引起晚發(fā)性敗血癥(LOS)的主要病原菌。同時(shí)CNS又是最常見的血培養(yǎng)污染菌，因此在強(qiáng)調(diào)無菌采血控制外源性污染的前提下，如何區(qū)分血培養(yǎng)中分離到的CNS是否是致病菌需要結(jié)合患兒臨床實(shí)際情況分析判斷。

本研究顯示，葡萄球菌對青霉素 G、紅霉素耐藥率均高于77.0%，與國內(nèi)其他地區(qū)的報(bào)道[3-5]類似，說明青霉素和紅霉素對于葡萄球菌存在普遍耐藥情況，已不能作為葡萄球菌感染的首選用藥。對利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧的耐藥率為0。這與這些藥物在兒科使用受限有關(guān)。對阿米卡星、對利福平、亞胺培南、阿莫西林/克拉維酸、頭孢唑林耐藥率較低(0～13.3%)。因此，亞胺培南、阿莫西林/克拉維酸、頭孢唑林、萬古霉素可作為新生兒葡萄球菌感染的首選治療藥物。CNS 的耐藥率普遍比金黃色葡萄球菌高，可能與抗菌藥物普遍應(yīng)用導(dǎo)致 CNS產(chǎn)生了多重耐藥有關(guān)。

本研究中分離出無乳鏈球菌9株，占4.8%(9/186)，介于其他研究報(bào)道的0.4%～15.2%[8,10-11]。無乳鏈球菌又稱B族鏈球菌(GBS)，是西方國家新生兒敗血癥、肺炎及腦膜炎的最常見病原菌之一。國外近幾年數(shù)據(jù)顯示新生兒敗血癥GBS陽性率在0.4%左右[12]。本組研究顯示，GBS的陽性率為0.57%(9/1 570)。過去國內(nèi) GBS 感染報(bào)道少，可能與國內(nèi)學(xué)者對該病認(rèn)識不足及國內(nèi)檢測手段局限有關(guān)。近幾年國內(nèi)有關(guān)新生兒感染GBS報(bào)道較前明顯增多，并顯示GBS感染高于國外相關(guān)報(bào)道[13]，提示 GBS 開始成為我國新生兒感染的重要病原菌。本研究藥敏結(jié)果顯示，GBS對左氧氟沙星耐藥率達(dá)62.5%，對利奈唑胺、頭孢唑啉耐藥率分別為12.5%和15.4%，對阿莫西林/克拉維酸耐藥率為0。青霉素是早發(fā)型GBS感染的首選藥物，對頭孢菌素類、萬古霉素高度敏感[14-15]。本院9例GBS感染患兒，應(yīng)用青霉素經(jīng)驗(yàn)治療，再根據(jù)藥敏結(jié)果應(yīng)用頭孢類抗菌藥物，或聯(lián)合應(yīng)用萬古霉素，大多數(shù)患兒好轉(zhuǎn)自動出院。

本研究血培養(yǎng)分離到的革蘭陰性桿菌前 3 位分別為洋蔥伯克霍爾德菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，與其他地區(qū)報(bào)道順序不同[2-4]。說明不同地區(qū)和年度有不同的流行趨勢。洋蔥伯克霍爾德菌是醫(yī)院內(nèi)感染的重要病原菌，呈逐年上升趨勢；其來源主要分布在兒童ICU和新生兒病房[16]。CLSI 2012年《抗菌藥物敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)》 指南中，建議選用的抗洋蔥伯克霍爾德菌藥物為頭孢他啶、米諾環(huán)素、美羅培南、復(fù)方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星。本研究顯示，洋蔥伯克霍爾德菌雖對頭孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星、米諾環(huán)素、復(fù)方磺胺甲噁唑100.0%敏感，鑒于新生兒用藥的限制，頭孢哌酮/舒巴坦可作為該菌感染的首選抗菌藥物。

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對阿米卡星、亞胺培南、頭孢西丁均100.0%敏感；對復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率較高，在70.0%左右；肺炎克雷伯菌對氨芐西林天然耐藥，大腸埃希菌對氨芐西林耐藥率也在88.2%，因此不宜選用。這些菌株對哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、磷霉素、頭孢吡肟、頭孢他啶表現(xiàn)出較低的耐藥率(0～10.0%)，因此臨床中以上抗菌藥物可作為首選藥物。

綜上所述，本院新生兒敗血癥患兒血培養(yǎng)病原菌以革蘭陽性球菌為主，CNS占比例較大且耐藥嚴(yán)重；常見革蘭陰性桿菌對氨芐西林、復(fù)方磺胺甲噁唑耐藥率高。因此掌握本地區(qū)病原菌的分布和當(dāng)前藥敏情況對制訂新生兒敗血癥經(jīng)驗(yàn)治療方案，指導(dǎo)臨床合理用藥具有重要的價(jià)值。

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Analysis of pathogens distribution and drug resistances in neonatal blood cultures

BIAN Xingyan,ZHAO Hui,JIANG Zhenhong,ZHANG Xiaolin,LIU Jinghui,YANG Xiaoyan

(DalianMunicipalChildren′sHospital,Dalian,Liaoning116012,China)

ObjectiveTo investigate the pathogens distribution in neonatal blood culture and their drug resistance to antibacterial drugs in Dalian City.MethodsThe routine blood culture,identification and drug sensitivity test were carried out in the hospitalized neonates from August 2014 to August 2015.And the obtained data were analyzed.ResultsA total of 186 strains of pathogenic bacteria were detected from 1 570 cases of neonatal blood culture and the positive rate was 11.8%.Gram positive bacteria accounted for 74.2%(138/186) and were dominated by Staphylococcus epidermidis.Gram negative bacteria accounted for 25.3%(47/186),which were mainly onion burkholderia bacterium.One strain was fungus,accounting for 0.5%.The drug sensitivity test results showed that Gram positive bacteria had the higher resistance rate to penicillin and erythromycin(80.0%-90.0%),100.0% sensitivity to vancomycin,linezolid and teicoplanin;E.coli and K.pneumoniae had the highest resistance rate to ampicillin (88.2%-100.0%),100.0% sensitivity to imipenem,amikacin,low resistance rate to piperacillin/tazobactam,cefoperazone/sulbactam,amoxicillin/clavulanic acid,cefepime and ceftazidime (0%-10.0%).The resistance rate of onion burkholderia bacterium to ticarcillin/clavulanate and meropenem was higher than 80.0%,which had 100.0% sensitivity to cefoperazone /sulbactam,levofloxacin,minocycline and compound sulfamethoxazole.ConclusionThe neonatal blood culture pathogen in Dalian City is dominated by Gram positive bacteria,coagulase negative staphylococcus is the main pathogen.Due to the different regional environmental,pathogens and drug resistance should be regularly monitored and analyzed to provide objective and accurate basis for clinical rational use of antibacterial drugs.

blood culture;neonate;drug resistance;pathogenic bacteria

2016-01-19修回日期：2016-05-04)

邊興艷，女，主任技師，主要從事兒科臨床免疫微生物研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.017

A

1673-4130(2016)15-2096-03