漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)檢查的假陽(yáng)性和假陰性原因分析

孫大菊,張文杰,高　鴿

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科細(xì)胞室，吉林 長(zhǎng)春130033)

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漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)檢查的假陽(yáng)性和假陰性原因分析

孫大菊,張文杰*,高鴿

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科細(xì)胞室，吉林 長(zhǎng)春130033)

漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)檢查是臨床診斷惡性腫瘤的最常用方法，其結(jié)果快速、準(zhǔn)確可靠、費(fèi)用低、特異性高，受到臨床廣泛認(rèn)可。但由于技術(shù)及細(xì)胞學(xué)形態(tài)等多方面因素影響，有時(shí)造成假陽(yáng)性和假陰性診斷[1]。本文為了總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，提高漿膜腔積液的陽(yáng)性檢出率，現(xiàn)將本細(xì)胞室2014年10月-2014年12月份的684例漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)標(biāo)本進(jìn)行假陽(yáng)性和假陰性原因分析，希望對(duì)細(xì)胞學(xué)工作者及臨床醫(yī)師有所幫助。

1資料與方法

1.1一般資料

收集我院2014年10月份-2014年12月份門診和住院病人送檢的684例漿膜腔積液標(biāo)本，其中胸水474例，腹水168例，心包積液42例。684例漿膜腔積液檢出惡性細(xì)胞194例，所有陽(yáng)性結(jié)果標(biāo)本經(jīng)肺穿刺活檢、淋巴結(jié)穿刺、纖支鏡刷片、肺泡灌洗液、痰、骨髓細(xì)胞學(xué)及手術(shù)病理結(jié)合臨床資料證實(shí)為惡性腫瘤。

1.2方法

684例標(biāo)本均由臨床醫(yī)師抽取統(tǒng)一送檢，標(biāo)本新鮮，靜置一段時(shí)間，取底層沉渣標(biāo)本全部離心，以保證最大限度的收集到更多的腫瘤細(xì)胞，提高陽(yáng)性檢出率。將每例標(biāo)本置2管(各50 ml)以2 500 r/min離心7 min，棄去上清液，取沉淀物涂片。如為血性標(biāo)本，離心后吸去上清液，取白細(xì)胞層涂片。本細(xì)胞室為提高陽(yáng)性檢出率，采取手工涂片和ZCR-A自動(dòng)沉降液基細(xì)胞制片兩種方法。手工涂片采用拉片法，厚薄均勻，輕輕涂片4-8張。ZCR-A自動(dòng)沉降液基細(xì)胞制片的過(guò)程：將吸取的離心后沉淀物放入保存液內(nèi)，在振蕩器上震蕩5min以上，將標(biāo)本放入離心機(jī)1500轉(zhuǎn)/分離心5 min，將離心后的保存液內(nèi)液體及刷子輕輕倒掉，依次放入制片機(jī)沉降倉(cāng)座中，按照機(jī)器操作步驟運(yùn)行。取材結(jié)束標(biāo)本潮干后在95%乙醇中固定15-30 min，巴氏染色，鏡檢。

2結(jié)果

2.1腫瘤細(xì)胞類型分析

684例漿膜腔積液標(biāo)本查出惡性細(xì)胞194例，檢出率占28.36%。194例陽(yáng)性標(biāo)本中，上皮性惡性腫瘤最多(腺癌163例占84.0%，小細(xì)胞癌12例占6.2%，癌型未定的6例占3.1%，鱗癌4例占2.1%)；非上皮性惡性腫瘤較少(惡性間皮瘤7例占3.6%，惡性淋巴瘤2例占1.0%)，見(jiàn)表1。

表1　194例惡性漿膜腔積液細(xì)胞學(xué)分型(構(gòu)成比%)

2.2細(xì)胞假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果分析

684例漿膜腔積液標(biāo)本中，脫落細(xì)胞學(xué)檢查陽(yáng)性194例，其中假陽(yáng)性2例，假陽(yáng)性率1.0%；陰性490例，其中假陰性8例，假陰性率1.6%。由于標(biāo)本送檢不及時(shí)、取材、制片、染色技術(shù)造成細(xì)胞形態(tài)改變和特殊的排列方式、閱片不認(rèn)真等多因素，造成某些陽(yáng)性標(biāo)本漏診，陰性標(biāo)本誤診為陽(yáng)性，從而引起假陽(yáng)性和假陰性現(xiàn)象，見(jiàn)表2。

表2　漿膜腔積液標(biāo)本脫落細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果

3討論

漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)的陽(yáng)性檢出率各家報(bào)道不一[2，3]，本組684例患者共檢出惡性細(xì)胞194例，檢出率占28.36%。后經(jīng)臨床和追蹤尋訪證實(shí)，2例為假陽(yáng)性，8例為假陰性；陽(yáng)性率占96.0%(192/200)，假陰性率占1.1%，假陽(yáng)性率占0.3%。造成漿膜腔積液脫落細(xì)胞學(xué)檢查假陽(yáng)性和假陰性的原因很多，現(xiàn)逐一分析，以期對(duì)我們?nèi)蘸蠊ぷ饔兴梃b。

3.1惡性漿膜腔積液的原發(fā)灶分析

惡性漿膜腔積液中腫瘤細(xì)胞主要是上皮性來(lái)源，其中腺癌占84.0%，以原發(fā)灶周圍型肺腺癌為主，因腫瘤位于肺周邊部，容易穿透胸膜脫落在胸水中；其次是乳腺癌、肺轉(zhuǎn)移癌和胃癌。腹水多為消化系統(tǒng)腫瘤來(lái)源，其次為卵巢癌。肝癌雖然伴血性腹水很常見(jiàn)，但癌細(xì)胞檢出率卻很低，可能與肝癌的位置及肝癌患者多伴有肝硬化有關(guān)，腹水多由門脈高壓引起。心包積液中的腺癌多為肺癌引起，其次為乳腺癌。漿膜腔積液鱗癌較少見(jiàn)，本組病例共檢出4例，占2.1%，可能與鱗癌的生長(zhǎng)部位有關(guān)，一般多以中央型為主，較少形成漿膜腔積液。本組病例中小細(xì)胞癌12例，占6.2%；另外有6例我們定為特殊分化的癌(癌型不定)，后經(jīng)組織病理和臨床證實(shí)2例為腺鱗癌，2例為大細(xì)胞癌，1例為肝細(xì)胞癌，1例為白血病。

3.2漿膜腔積液的細(xì)胞形態(tài)假象分析

惡性漿膜腔積液最常見(jiàn)的為腺癌，雖然不同組織的腺癌細(xì)胞在積液中的形態(tài)千變?nèi)f化，但都有著共同的形態(tài)學(xué)特征。即細(xì)胞呈三維立體的團(tuán)狀或球狀、核畸形、核仁大、核漿比增大、胞漿可見(jiàn)粘液分泌空泡。本組病例中有2例心包積液疑診為腺癌，細(xì)胞雖有核異質(zhì)改變但仔細(xì)觀察無(wú)三維立體結(jié)構(gòu)，后經(jīng)多次送檢并結(jié)合臨床證實(shí)為間皮細(xì)胞增生，我們也有文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)這種情況[4]。有4例腺癌患者為臨床經(jīng)過(guò)化療后，導(dǎo)致惡性腫瘤細(xì)胞褪變漏診。

漿膜腔積液中鱗癌比較少見(jiàn)，主要由于其未有明顯特征，容易漏診。一般在炎性壞死細(xì)胞背景下，可見(jiàn)少數(shù)小的癌細(xì)胞，外形多樣可呈梭形、纖維形、圓形及多邊形，核畸形明顯。本組有4例，3例為肺鱗癌，1例為宮頸鱗癌轉(zhuǎn)移。另外有2例我們?cè)\斷為陰性，經(jīng)復(fù)診以后發(fā)現(xiàn)有少許鱗癌細(xì)胞。

小細(xì)胞癌又稱燕麥細(xì)胞癌，在漿膜腔積液中常以小簇狀細(xì)胞團(tuán)分布，細(xì)胞核常為三角形、短梭形及卵圓形，細(xì)胞漿很少幾乎不見(jiàn)。由于細(xì)胞小量少而容易漏診。本組有2例經(jīng)復(fù)診后發(fā)現(xiàn)小細(xì)胞癌隱藏于淋巴細(xì)胞或間皮細(xì)胞的背景中，導(dǎo)致假陰性診斷。

我們有1例淋巴瘤的患者以大量的胸、腹水為主要首發(fā)表現(xiàn)，鏡下滿視野大量單克隆增生的幼稚淋巴細(xì)胞，具有明顯的異型性。細(xì)胞大，核染色質(zhì)深、粗，核分裂像多見(jiàn)，胞質(zhì)較少，后經(jīng)取淋巴結(jié)組織病理證實(shí)為彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤。

惡性間皮瘤是漿膜原發(fā)的腫瘤，有的細(xì)胞形態(tài)類似腺癌，但惡性間皮瘤一般彌漫分布，核多位于細(xì)胞中央，細(xì)胞間分界清楚。間皮瘤患者大部分不能根據(jù)積液的細(xì)胞學(xué)涂片確診，最后診斷依賴于X線、B超、組織病理及免疫組化。本組有7例通過(guò)病理組織切片，并加做細(xì)胞免疫化學(xué)染色CEA、Vimentin、EMA確診。

3.3漿膜腔積液檢查假陽(yáng)性和假陰性原因探討

(1)假陽(yáng)性：標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞退化脹大，胞漿出現(xiàn)空泡，誤將間皮細(xì)胞增生診斷為腺癌；標(biāo)本未及時(shí)固定，誤將退化的淋巴細(xì)胞診斷為小細(xì)胞癌或淋巴瘤[5]；細(xì)胞染色過(guò)深，也容易造成過(guò)診斷；卵巢交界性腫瘤腹水中有異型增生的細(xì)胞，有時(shí)誤診為腺癌，要仔細(xì)觀察。(2)假陰性：標(biāo)本離心時(shí)轉(zhuǎn)速低，時(shí)間短；取材時(shí)血細(xì)胞過(guò)多，有效腫瘤細(xì)胞少或沒(méi)有；涂片過(guò)厚，染色過(guò)淺；固定液不及時(shí)更換，使細(xì)胞成分脫落；閱片人不仔細(xì)或缺少經(jīng)驗(yàn)，造成漏診；以上原因[6,7]均可造成假陰性診斷。

參考文獻(xiàn)：

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*通訊作者

文章編號(hào)：1007-4287(2016)07-1130-02

(收稿日期：2015-06-24)