短鏈氯化石蠟C10 (50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎的發(fā)育毒性

劉麗華，馬萬(wàn)里，劉麗艷，李一凡

(哈爾濱工業(yè)大學(xué) 市政環(huán)境工程學(xué)院 城市水資源與水環(huán)境國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國(guó)際持久性有毒物質(zhì)聯(lián)合研究中心，哈爾濱 150090)

?

短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎的發(fā)育毒性

劉麗華，馬萬(wàn)里，劉麗艷，李一凡

(哈爾濱工業(yè)大學(xué) 市政環(huán)境工程學(xué)院 城市水資源與水環(huán)境國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 國(guó)際持久性有毒物質(zhì)聯(lián)合研究中心，哈爾濱 150090)

摘要:為評(píng)價(jià)短鏈氯化石蠟對(duì)斑馬魚胚胎的發(fā)育毒性，以斑馬魚為模式生物，觀察不同質(zhì)量濃度的短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)暴露24，48，72和96 h后斑馬魚胚胎/幼魚的死亡率、孵化率、畸形率和體長(zhǎng).結(jié)果表明，C10(50.2% Cl)在斑馬魚的早期發(fā)育階段可引起一系列非致死效應(yīng)和致死效應(yīng).高質(zhì)量濃度(1 000和10 000 μg/L)短鏈氯化石蠟可導(dǎo)致96 h斑馬魚胚胎死亡率顯著升高(達(dá)100%)，48 h抑制胚胎的孵化，并誘發(fā)一系列的發(fā)育畸形.C10(50.2% Cl)在斑馬魚幼魚中引起的畸形表型主要包括脊柱彎曲，卵黃畸形，心包囊腫，尾部畸形和魚鰾發(fā)育缺陷.低質(zhì)量濃度組和高質(zhì)量濃度組C10(50.2% Cl)均能夠抑制斑馬魚幼魚的生長(zhǎng)速度，目前的環(huán)境質(zhì)量濃度已具有一定程度的水生生態(tài)風(fēng)險(xiǎn).

關(guān)鍵詞:短鏈氯化石蠟；斑馬魚；胚胎；發(fā)育毒性

Study on developmental toxicity of short-chain chlorinated paraffins

短鏈氯化石蠟(short chain chlorinated paraffins，SCCPs)是氯化石蠟中的一類，碳鏈長(zhǎng)度為10～13個(gè)碳原子，常見含氯質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%～75%[1-2].短鏈氯化石蠟比中鏈和長(zhǎng)鏈氯化石蠟更容易從各類終端產(chǎn)品中釋放進(jìn)入環(huán)境，并且對(duì)水生態(tài)環(huán)境和哺乳動(dòng)物顯現(xiàn)出更強(qiáng)的毒性[3]，具有潛在的致癌性[4]，因而備受關(guān)注.短鏈氯化石蠟被廣泛用作金屬加工潤(rùn)滑劑、密封劑、橡膠和紡織品阻燃劑、皮革加工助劑、油漆涂料添加劑和塑化劑[2,5].伴隨著氯化石蠟的大量生產(chǎn)和使用，環(huán)境中短鏈氯化石蠟的污染問(wèn)題也隨之而來(lái)，短鏈氯化石蠟在各類環(huán)境介質(zhì)如空氣、水體、土壤、沉積物、污水污泥、室內(nèi)灰塵、野生動(dòng)物甚至母乳中均被檢出[6-13].目前，短鏈氯化石蠟在中國(guó)自然水體中的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)很少.2011年，北京高碑店湖水體中短鏈氯化石蠟總質(zhì)量濃度范圍為162～176 ng/L[7]，質(zhì)量濃度水平高于2005年日本某河流(7.6～31 ng/L)[14]和2004年加拿大圣勞倫斯河 (15.74～59.57 ng/L)[6]，低于2004年西班牙某河流(300～1 100 ng/L)[14].有研究表明，氯化石蠟對(duì)哺乳動(dòng)物的肝臟、甲狀腺和腎臟有毒性作用[15-17].美國(guó)國(guó)家毒理學(xué)規(guī)劃處早期的研究顯示，氯化石蠟工業(yè)品C500C(58% Cl)可導(dǎo)致小鼠和大鼠肝腫瘤、腎小球腺瘤或腺癌、濾泡細(xì)胞腺瘤或甲狀腺癌的發(fā)生率顯著增加，具有致癌性[18].非洲爪蟾胚胎暴露于氯化石蠟工業(yè)品CP 56-12 (C12, 56% Cl)后出現(xiàn)發(fā)育畸形，表明其具有胚胎毒性和致畸性[1].另有研究顯示，短鏈氯化石蠟對(duì)北美鳉和日本青鳉的胚胎發(fā)育產(chǎn)生毒性作用,其中短鏈氯化石蠟工業(yè)品(C10-13, 58% Cl)的最小可觀察效應(yīng)質(zhì)量濃度(lowest observed effect concentration，LOEC)和最大無(wú)觀察效應(yīng)質(zhì)量濃度(no observed effect concentration，NOEC)為620.5和280 μg/L.[19-20]，實(shí)驗(yàn)室合成品C10H15.3Cl6.7的LOEC和NOEC為370和50 μg/L[21].另外，短鏈氯化石蠟具有內(nèi)分泌干擾毒性.有研究表明，短鏈氯化石蠟可降低小鼠和大鼠體內(nèi)甲狀腺素總T4的濃度，并引起促甲狀腺素TSH和尿苷二磷酸葡醛酸轉(zhuǎn)移酶(UDPGT)水平升高，導(dǎo)致甲狀腺功能紊亂[22-23].

由于短鏈氯化石蠟中同系物和異構(gòu)體組成復(fù)雜，受試物化學(xué)品難以獲得，目前關(guān)于短鏈氯化石蠟不同組分的毒性數(shù)據(jù)，尤其是發(fā)育毒性數(shù)據(jù)非常少.本實(shí)驗(yàn)以斑馬魚胚胎和幼魚作為敏感動(dòng)物模型，研究了短鏈氯化石蠟中的C10組分C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎的發(fā)育毒性.

1實(shí)驗(yàn)

1.1實(shí)驗(yàn)試劑

本實(shí)驗(yàn)受試物為一種短鏈氯化石蠟合成品C10-SCCP(C10H18Cl4)，碳鏈長(zhǎng)度為10個(gè)碳，氯質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50.2%，由德國(guó)慕尼黑工業(yè)大學(xué)Mehmet Coelhan教授提供.DMSO購(gòu)自Sigma-Aldrich 公司.

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

成年斑馬魚飼養(yǎng)在循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中，飼養(yǎng)用水充分曝氣，并經(jīng)過(guò)生物過(guò)濾器和UV光照處理，水溫28.5 ℃，光/暗周期為14/10 h，每日喂食2次，控制培養(yǎng)1個(gè)月后開始采集胚胎.胚胎采集前1天晚上將雌魚和雄魚按2∶1的比例放入配魚箱中，中間用擋板隔開.采集當(dāng)天早上8:00取出擋板開始配魚，大約1 h后收集胚胎.不同配魚箱中的胚胎用吸管取出清洗后收集到同一個(gè)培養(yǎng)皿中混勻，待胚胎發(fā)育至2 hpf (受精后小時(shí)數(shù))時(shí)在顯微鏡下挑選發(fā)育正常的胚胎進(jìn)行染毒.

1.3染毒與測(cè)定

選取產(chǎn)卵后2 h發(fā)育進(jìn)入囊胚期的健康胚胎，用吸管吸至培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿放入20枚胚胎，分別加入25 mL新鮮的染毒液，染毒質(zhì)量濃度梯度設(shè)置為0, 0.01, 0.1, 0.5, 1, 10, 100, 1 000和10 000 μg/L(含體積分?jǐn)?shù)0.1‰ DMSO)，每個(gè)質(zhì)量濃度組設(shè)置3個(gè)平行樣.將培養(yǎng)皿置于28.5 ℃的培養(yǎng)箱中，每24 h 更換新鮮的染毒液，及時(shí)清除死亡的胚胎，同時(shí)記錄死亡胚胎數(shù)目.胚胎發(fā)育至96 hpf 時(shí)每個(gè)培養(yǎng)皿采集10條幼魚照片，用Image J軟件測(cè)量斑馬魚幼魚的體長(zhǎng)，記錄和計(jì)算斑馬魚胚胎的存活率、畸形率和孵化率.

1.4統(tǒng)計(jì)分析方法

將所有數(shù)據(jù)求出平均值和標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SE)，使用 SigmaPlot 12.0 軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析(one-way ANOVA)和雙因素方差分析(two-way ANOVA)檢驗(yàn)處理組和對(duì)照組之間的差異顯著性.P<0.05為差異顯著，用*表示；P<0.01和P<0.001為差異極顯著，用**和***表示.

2結(jié)果與討論

2.1短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎/幼魚存活率的影響

在斑馬魚胚胎暴露于短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)的過(guò)程中，胚胎/幼魚在4個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)(24，48，72，96 hpf)的死亡率統(tǒng)計(jì)見圖1.可以看出，胚胎死亡率隨著SCCPs質(zhì)量濃度的升高和暴露時(shí)間的延長(zhǎng)而升高.10 mg/L暴露組72 h時(shí)胚胎的死亡率顯著高于24 h(P=0.022)和48 h (P=0.022)，96 hpf時(shí)與對(duì)照組相比出現(xiàn)顯著死亡(P<0.001)，死亡率急劇升高達(dá)100%.對(duì)照組在全部觀察時(shí)間點(diǎn)均沒(méi)有出現(xiàn)胚胎死亡，其他處理組也均未觀察到顯著死亡情況.

圖1短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎/幼魚死亡率的影響

Fig.1Effects of C10(50.2% Cl)on the death rates in zebrafish embryo/ larvae

2.2短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎孵化率的影響

統(tǒng)計(jì)胚胎在24，48，72和96 hpf時(shí)的孵化率，用以評(píng)估短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl) 對(duì)胚胎孵化過(guò)程的影響.如圖2所示，斑馬魚胚胎在24 hpf后開始孵化，到48 hpf時(shí)對(duì)照組的胚胎孵化率達(dá)75%，此時(shí)1 000和10 000 μg/L暴露組的孵化率顯著低于對(duì)照組(P<0.001)，分別為43.3%和47.7%.72 hpf時(shí)，對(duì)照組和0.01 μg/L暴露組中孵化率達(dá)100%，而其他處理組中的胚胎均未完全孵化，孵化率為91.7%～98.3%.

圖2　短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎孵化率的影響

Fig.2Effects of C10(50.2% Cl)on the hatching rates in zebrafish embryo

2.3短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎/幼魚畸形率的影響

如圖3所示，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)的暴露導(dǎo)致斑馬魚胚胎和幼魚出現(xiàn)一系列的發(fā)育畸形，其中出現(xiàn)比例較高且表型最明顯的幾種畸形類型為脊柱彎曲(SC)、卵黃囊腫(YD)、心包囊腫(PE)、尾部畸形(MT)和魚鰾發(fā)育缺陷(USB).從圖4可以看出，在24 hpf時(shí)，并未觀察到畸形胚胎.48 hpf時(shí)，1 000和10 000 μg/L暴露組幼魚最早出現(xiàn)SC、YD和MT，與對(duì)照組相比畸形率也顯著升高，分別為18.3%和46.7%.隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，1 000和10 000 μg/L暴露組畸形表型和畸形率也隨之增加，到72 hpf時(shí)所有畸形表型均出現(xiàn)，畸形率也達(dá)最大值，分別為56.7%和100%.

圖3　短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)導(dǎo)致的畸形表型

Fig.3Typical malformation types in zebrafish larvae exposed to C10(50.2% Cl)

圖4短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎/幼魚畸形率的影響

Fig.4Effects of C10(50.2% Cl)on the malformation rates in zebrafish embryo/ larvae

2.4短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚幼魚體長(zhǎng)的影響

以96 hpf斑馬魚幼魚體長(zhǎng)為觀察終點(diǎn)，評(píng)估短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚幼魚生長(zhǎng)速度的影響.如圖5所示，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)的暴露抑制了斑馬魚幼魚的生長(zhǎng)速度.96 hpf時(shí)，0.5、1 000和10 000 μg/L暴露組的幼魚平均體長(zhǎng)分別為(3.62±0.00)、(3.60±0.01)和(3.08±0.01) cm，顯著低于對(duì)照組體長(zhǎng)(3.72±0.00) cm.

圖5短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚體長(zhǎng)的影響

Fig.5Effects of C10(50.2% Cl)on the body length in zebrafish larvae

3討論

本實(shí)驗(yàn)的目的是研究短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎/幼魚的早期發(fā)育毒性.根據(jù)國(guó)內(nèi)外的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，自然水體中短鏈氯化石蠟的質(zhì)量濃度范圍在0.01～1.10 μg/L.因此，本研究染毒質(zhì)量濃度涵蓋了環(huán)境質(zhì)量濃度相似水平，同時(shí)設(shè)置了高劑量染毒組，以利于觀察染毒物的毒理學(xué)終點(diǎn)效應(yīng).研究結(jié)果表明，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)可引起胚胎/幼魚的死亡，抑制胚胎的孵化和幼魚生長(zhǎng)，并導(dǎo)致一系列的發(fā)育畸形.

斑馬魚胚胎對(duì)于C10(50.2% Cl)的敏感性導(dǎo)致胚胎出現(xiàn)顯著死亡，且呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系.C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎96 h的LC50為1～10 mg/L，這與Fisk在日本青鳉魚胚胎中得到的C10H15.5Cl6.5的LC50值2.7～9.6 mg/L相似[21]，但遠(yuǎn)高于SCCPs目前在環(huán)境中的質(zhì)量濃度.本研究結(jié)果表明，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)具有一定的致死毒性，但在目前的環(huán)境質(zhì)量濃度下不會(huì)直接導(dǎo)致魚類的顯著死亡.

短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)的暴露可引起胚胎孵化時(shí)間推遲，從而降低孵化率.暴露于1 000和10 000 μg/L高質(zhì)量濃度中的胚胎48 hpf時(shí)孵化率顯著低于對(duì)照組，表明高質(zhì)量濃度的C10(50.2% Cl)會(huì)推遲胚胎的孵化過(guò)程.Fisk在日本青鳉魚胚胎實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)SCCPs有類似的作用，但并不顯著[21].孵化時(shí)間是水生生物幼體發(fā)育過(guò)程中的重要指標(biāo).外源性污染物可能會(huì)改變胚胎發(fā)育過(guò)程中的信號(hào)，而這些信號(hào)是胚胎從絨膜中解脫出來(lái)所必須的[24].本研究結(jié)果表明，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚胚胎的孵化過(guò)程產(chǎn)生一定的影響，且影響程度取決于C10(50.2% Cl)的質(zhì)量濃度，但在目前的環(huán)境質(zhì)量濃度下尚不會(huì)直接影響魚類的胚胎孵化過(guò)程.

胚胎暴露于外源性污染物時(shí)可以觀察到發(fā)育過(guò)程中的各種畸形現(xiàn)象[25-26]，胚胎的發(fā)育毒性比急性毒性更加敏感.本研究中，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)的暴露導(dǎo)致斑馬魚胚胎出現(xiàn)多種畸形表型，暴露于1 000和10 000 μg/L高質(zhì)量濃度中的胚胎從48 hpf開始畸形率顯著高于對(duì)照組和其他處理組，高質(zhì)量濃度的C10(50.2% Cl)顯示出較強(qiáng)的致畸毒性.此外， C10(50.2% Cl)的發(fā)育毒性還表現(xiàn)為對(duì)斑馬魚幼魚的生長(zhǎng)速度的影響.本研究顯示，該影響不僅出現(xiàn)在高質(zhì)量濃度暴露組中，在較低質(zhì)量濃度(0.5 μg/L)暴露時(shí)也有發(fā)生.另有研究顯示，非洲爪蟾胚胎暴露于氯化石蠟工業(yè)品CP 56-12 (C12, 56% Cl) 后也產(chǎn)生了生長(zhǎng)抑制效應(yīng)[1].本研究結(jié)果表明，短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)對(duì)斑馬魚早期發(fā)育具有顯著的發(fā)育毒性，目前的環(huán)境質(zhì)量濃度可能已具有一定程度的水生生態(tài)風(fēng)險(xiǎn).

4結(jié)論

1)10 000 μg/L的短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)可導(dǎo)致斑馬魚胚胎96 hpf死亡率顯著升高.

2)1 000和10 000 μg/L的短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)可顯著抑制胚胎48 hpf的孵化過(guò)程.

3)1 000和10 000 μg/L的短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)可顯著誘發(fā)斑馬魚幼魚48、72和96 hpf的一系列發(fā)育畸形，主要包括脊柱彎曲、卵黃囊腫、心包囊腫、尾部畸形和魚鰾發(fā)育缺陷.

4)0.5、1 000和10 000 μg/L的短鏈氯化石蠟C10(50.2% Cl)均可顯著降低斑馬魚幼魚96 hpf的體長(zhǎng)，抑制斑馬魚幼魚的生長(zhǎng)，目前的環(huán)境質(zhì)量濃度已具有一定程度的水生生態(tài)風(fēng)險(xiǎn).

參考文獻(xiàn)

[2] United National Environment Program. Updated supporting document for the risk profile on short-chained chlorinated paraffins (UNEP/POPS/PROPRC.5/INF/18) [R]. Geneva: UNEP, 2009. http://chm.pops.int/Convention/POPsReviewCommittee/Chemicals/tabid/243/Default.aspx.

[3] Environment Canada. Environment Canada Priority substances program: CEPA assessment report, chlorinated paraffins [R]. Hull Quebec: Commercial Chemicals Branch, 1993. https://www.ec.gc.ca/toxiques-toxics/Default.asp?lang=En&n=148DE7B6-1.

[4] International Agency for Research on Cancer. Some flame retardants and textile chemicals, and exposures in the textile manufacturing industry [R]. Lyon: IARC, 1990. http://monographs.iarc.fr/ENG/Monographs/vol48/index.php.

[5] DE BOER J. Chlorinatedparaffins, in the handbook of environmental chemistry [M]. Berlin Heidelberg: Springer, 2010.

http://link.springer.com/book/10.1007/978-3-642-10761-0.

[6] MOORE S, VROMET L, RONDEAU B.Comparison of metastable atom bombardment and electron capture negative ionization for the analysis of polychloroalkanes [J]. Chemosphere, 2004, 54 (4): 453-459.[7] ZENG Lixi, WANG Thanh, WANG Pu, et al. Distribution and trophic transfer of short-chain chlorinated paraffins in an aquatic ecosystem receiving effluents from a sewage treatment plant [J]. Environ Sci Technol, 2011, 45 (13): 5529-5535.

[8] MARVIN C H, PAINTER S, TOMY G T, et al.Spatial and temporal trends in short-chain chlorinated paraffins in Lake Ontario sediment [J]. Environ Sci Technol, 2003, 37 (20): 4561-4568.

[9] WANG Thanh, HAN Shanlong, YUAN Bo, et al. Summer-winter concentration and gas-particle partitioning of short chain chlorinated paraffins in the atmosphere of an urban setting [J]. Environmental Pollution, 2012, 171: 38-45.

[10]HOUDE M, MUIR D C M, TOMY G T, et al.Bioaccumulation and trophic magnification of short-and medium-chain chlorinated paraffins in food webs from Lake Ontario and Lake Michigan [J]. Environ Sci Technol, 2008, 42 (10): 3893-3899.

[11]YUAN Bo, WANG Thanh, ZHU Nali, et al. Short chain chlorinated paraffins in mollusks from coastal waters in Chinese Bohai Sea [J]. Envion Sci Technol, 2012, 46 (12): 6489-6496.

[12]TOMY G T. The mass spectrometric characterization of polychlorinated n-alkanes and the methodology for their analysis in the environment [D]. Winnipeg, Manitoba: University of Manitoba, 1997.

[13]THOMAS G O, FARRAR D, BRAEKEVELT E, et al. Short and medium chain length chlorinated paraffins in UK human milk fat [J]. Environment International, 2006, 32 (1): 34-40.

[14]FEO M L, ELJARRAT E, BARCELO D. Occurrence, fate and analysis of polychlorinated n-alkanes in the environment [J]. Trends in Analytical Chemistry, 2009, 28 (6): 778-791.

[15]BUCHER J R, ALISON R H, MONTGOMERY C A, et al.Comparative toxicity and carcinogenicity of two chlorinated paraffins in F344/N rats and B6C3F1 mice [J]. Fund Appl Toxicol, 1987, 9 (3): 454-468.

[16]SERRONE D M, BIRTLEY R D N, WEIGAND W, et al.Toxicology of chlorinated paraffins [J]. Food Chem Toxicol, 1987, 25 (7): 553-562.

[17]ELCOMBE C R, WATSON S C, WYATT I, et al.Chlorinated paraffins (CP): mechanisms of carcinogenesis [J]. Toxicologist, 1994, 14: 276.

[18]National Toxicology Program.Toxicology and carcinogenesis studies of chlorianted paraffins (C12, 60% Chlorine) (CAS No. 63449-39-8) in F344/N rats and B6C3F1mice (gavage studies) (Technical Report Series No. 308) [R]. North Carolina: NTP, 1986.

[19]HILL R W, MADDOCK B G.Effect of a chlorinated paraffin on embryos and larvae of the sheephead minnow (Cyprinodon variegatus)-(Study one) (Brixham Report BL/B/2326) [R]. Devon: Imperial Chemical Industries PLS, 1983.

[20]HILL R W, MADDOCK B G. Effect of a chlorinated paraffin on embryos and larvae of the sheephead minnow (Cyprinodon variegatus)-(Study two) (Brixham Report BL/B/2327) [R]. Devon: Imperial Chemical Industries PLS, 1983.

[21]FIRSK AA T, TOMY G T, MUIR D G C. Toxicity of C10-, C11-, C12-, and C14- polychlorinated n-alkanes to Japanese Medaka embryos [J]. Environmental Toxicology and Chemistry, 1999, 18 (12): 2894-2902.

[22]European Commission. European union risk assessment report, 1st priority list vol 4: alkanes, C10-13, chloro-[R]. Luxembourg: European Chemicals Bureau, 2000.

[23]WYATT I, COUTTS C T, ELCOMBE C R.The effect of chlorinated paraffins on hepatic enzymes and thyroid hormones [J]. Toxicology, 1993, 77 (1/2): 81-90.

[24]SANO K, INOHAYA K, KAWAGUCHI M, et al.Purification and characterization of zebrafish of hatching enzyme-an evolutionary aspect of the mechanism of egg envelope digestion [J]. Febs J, 2008, 275 (23): 5934-5946.

[25]HILL A J, TERAOKA H, HEIDEMAN W, et al.Zebrafish as a model vertebrate for investigating chemical toxicity [J]. Toxicol Sci, 2005, 86 (1): 6-19.

[26]CARNEY S A, PRASCH A L, HEIDEMAN W, et al.Understanding dioxin developmental toxicity using the zebrafish model [J]. Birth Defects Res A, 2006, 76 (1): 7-18.

(編輯劉彤)

doi：10.11918/j.issn.0367-6234.2016.08.021

收稿日期:2015-12-16

基金項(xiàng)目:城市水資源與水環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(哈爾濱工業(yè)大學(xué))自主課題(2013DX15)

作者簡(jiǎn)介:劉麗華(1984—)，女，博士研究生; 李一凡(1949—)，男，教授，博士生導(dǎo)師

通信作者:李一凡，ijrc_pts_paper@ yahoo.com

中圖分類號(hào):X171.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):0367-6234(2016)08-0127-04

C10(50.2% Cl) in zebrafish embryos

LIU Lihua, MA Wanli, LIU Liyan, LI Yifan

(International Joint Research Center for Persistent Toxic Pollutants (IJRC-PTS), State Key Laboratory of Urban Water Resource and Environment, School of Municipal and Environmental Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090, China)

Abstract:A zebrafish (Danio rerio) model was applied to evaluate the developmental toxicity of short-chain chlorinated paraffins (SCCPs). Death rates, hatching rates, malformation rates and body length were observed after the zebrafish embryos were exposed to different concentrations of C10(50.2% Cl) separately for 24, 48, 72 and 96 h. The results indicated that C10(50.2% Cl) could exert lethal and sub-lethal effects on the early life stage of zebrafish. Higher concentrations of C10(50.2% Cl) ( 1 000 and 10 000 μg/L) could not only cause significant death rates increase to 100% after 96 h exposure and hating delay after 48 h exposure, but also induce a series of malformations, including spinal curvature, yolk deformity, pericardial edema, malformation of tail and uninflated swim bladder. Since the growth inhibition of juvenile zebrafish caused by C10(50.2% Cl) on the exposure concentrations no matter high or low, SCCPs might be a risk to the aquatic ecology and fish development.

Keywords:SCCPs; zebrafish; embryo; developmental toxicity