復(fù)合特異性卵黃抗體對(duì)18～28日齡犢牛生長(zhǎng)、腹瀉和免疫力的影響

楊春濤　刁其玉　司丙文　馬俊南　孔路欣　屠　焰

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，奶牛營(yíng)養(yǎng)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100081)

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復(fù)合特異性卵黃抗體對(duì)18～28日齡犢牛生長(zhǎng)、腹瀉和免疫力的影響

楊春濤刁其玉司丙文馬俊南孔路欣屠焰*

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，奶牛營(yíng)養(yǎng)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100081)

摘要：本文旨在飼糧中添加復(fù)合特異性卵黃抗體(IgY)探究其對(duì)18～28日齡犢牛生長(zhǎng)、腹瀉和免疫力的影響。選取初生中國(guó)荷斯坦公犢牛20頭，10日齡之前飼喂鮮奶，之后隨機(jī)分為2組，對(duì)照(CON)組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)(IGY)組在基礎(chǔ)飼糧中日添加45 mg/kg BW的復(fù)合特異性IgY。預(yù)試期為犢牛11～17日齡，期間進(jìn)行代乳品過(guò)渡，正試期為18～28日齡。分別于犢牛18和28日齡晨飼前稱重，每天記錄犢牛采食量并進(jìn)行糞便評(píng)分。試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天(28日齡)晨飼前頸靜脈采血，測(cè)定血清中總抗氧化能力(T-AOC)和堿性磷酸酶(AKP)活性以及免疫球蛋白、一氧化氮(NO)、溶菌酶(LZM)濃度。結(jié)果表明：飼糧添加復(fù)合特異性IgY雖然對(duì)犢牛平均日增重和料重比無(wú)顯著影響(P>0.05)，卻有助于降低犢牛的糞便評(píng)分和腹瀉率，作用顯著(P<0.05)；IGY組較CON組極顯著提高了犢牛血清中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)和免疫球蛋白A(IgA)的濃度(P<0.01)，分別提高7.19%、5.71%和8.50%；IGY組T-AOC極顯著高于CON組(P<0.01)，而NO濃度卻顯著低于CON組(P<0.05)；IGY組血清LZM濃度極顯著低于CON組(P<0.01)，復(fù)合特異性IgY對(duì)血清AKP活性卻無(wú)顯著影響(P>0.05)。結(jié)果提示，飼糧中添加復(fù)合特異性IgY通過(guò)提高犢牛免疫球蛋白濃度和抗氧化能力以及發(fā)揮IgY本身抗原抗體反應(yīng)，增強(qiáng)犢牛免疫能力和抵抗外界應(yīng)激能力，降低了腹瀉率，促進(jìn)了犢牛健康。

關(guān)鍵詞：犢牛；卵黃抗體；腹瀉；抗氧化能力；免疫能力

在現(xiàn)代畜牧業(yè)發(fā)展的過(guò)程中，抗生素作為治療、預(yù)防動(dòng)物疾病以及促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的飼料添加劑，已經(jīng)給生產(chǎn)及人類的健康帶了巨大的挑戰(zhàn)[1]。尋找抗生素有效的替代品已經(jīng)成為滿足畜牧業(yè)健康、綠色、高效和環(huán)保發(fā)展要求的研究熱點(diǎn)。卵黃抗體(immunoglobulin of yolk,IgY)是家禽經(jīng)過(guò)特定抗原免疫后，機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)通過(guò)血液循環(huán)在卵細(xì)胞蓄積并儲(chǔ)存在卵黃中形成的相應(yīng)特異性抗體[2]。IgY具有較強(qiáng)的耐酸、耐熱、耐高滲、抗離子強(qiáng)度和抗特定酶解的能力[3]，能有效地通過(guò)反芻動(dòng)物前胃與真胃，在腸道發(fā)揮免疫抗體作用；同時(shí)還可以經(jīng)腸道吸收轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)在非腸道部分發(fā)揮作用[2]。隨著IgY研究的不斷深入，其作為免疫強(qiáng)化劑正在逐漸被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)中。Rahimi等[4]與Mahdavi等[5]分別使用含有抗沙門氏菌與抗大腸桿菌的IgY飼喂雛雞研究發(fā)現(xiàn)，IgY不僅可以抑制病原菌在腸黏膜的黏附作用，還可以改善雛雞腸道健康指數(shù)以及提高機(jī)體免疫應(yīng)答。在仔豬上，羅淡彬[6]與程學(xué)慧等[7]分別在飼糧中添加IgY，能夠有效抑制病原菌對(duì)仔豬空腸上皮細(xì)胞的黏附，顯著提高早期斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能和免疫力，降低仔豬的腹瀉率。Vega等[8]與Dhama等[9]利用含有單一抗輪狀病毒的特異性IgY飼喂?fàn)倥?，發(fā)現(xiàn)IgY通過(guò)激活腸黏膜抗體分泌細(xì)胞免疫反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，降低了犢牛腹瀉率與死亡率。目前的研究主要集中在單一特異性IgY對(duì)幼齡家畜免疫力的調(diào)節(jié)作用上，然而關(guān)于抵抗多種致病菌與病毒引起的復(fù)合性疾病的復(fù)合特異性IgY，對(duì)幼齡反芻動(dòng)物尤其在犢牛上的應(yīng)用研究很少。復(fù)合特異性IgY作為抗生素的替代品，對(duì)于提高免疫系統(tǒng)未發(fā)育完善的犢牛機(jī)體免疫力以及更好地適應(yīng)外界環(huán)境具有重要的意義。因此，本試驗(yàn)旨在飼糧中添加復(fù)合特異性IgY探究其對(duì)犢牛腹瀉和免疫力的影響，為復(fù)合特異性IgY在幼齡反芻動(dòng)物培育中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧

本試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)設(shè)計(jì)，分為2組。對(duì)照(CON)組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)(IGY)組在基礎(chǔ)飼糧中添加復(fù)合特異性IgY(由大連賽姆生物工程技術(shù)有限公司提供)。復(fù)合特異性IgY由2種復(fù)合抗原(細(xì)菌性抗原：F4、F5、F6、F18、F41+SLT-IIv+STa-LTb+SEM-AJ01；病毒性抗原：TGEV+PEDV+RV+SEM-AJ01；SEM-AJ01為高效佐劑)免疫母雞后，通過(guò)機(jī)體免疫應(yīng)答將產(chǎn)生的特定抗體轉(zhuǎn)移到卵黃中制得。復(fù)合特異性IgY日添加量為45 mg/kg BW?；A(chǔ)飼糧為不含抗生素和微生物制劑的代乳品和開(kāi)食料，其中代乳品是依照國(guó)家發(fā)明專利CN 02128844.5由北京精準(zhǔn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究中心生產(chǎn)提供?；A(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)選用自然分娩、初生重為40 kg左右的中國(guó)荷斯坦公犢牛20頭。隨機(jī)分為2組，每組10頭。犢牛出生后1 h內(nèi)保證采食足夠初乳，隨后飼喂鮮奶至10日齡，11～17日齡為試驗(yàn)預(yù)試期，期間進(jìn)行代乳品過(guò)渡，18日齡全部換成代乳品，18～28日齡為正試期。代乳品用煮沸后冷卻到50～60 ℃熱水按干物質(zhì)占12.5%比例沖泡成乳液，待溫度降至40 ℃左右飼喂?fàn)倥＃刻旆?次飼喂(08:00和15:00)，每頭犢牛每天飼喂量為體重的12%。試驗(yàn)過(guò)程中根據(jù)犢牛體重將復(fù)合特異性IgY添加到代乳品乳液中，攪拌均勻后飼喂?fàn)倥！Ｔ囼?yàn)期開(kāi)食料自由采食，并保證干凈、充足水源。犢牛采用犢牛島單獨(dú)培養(yǎng)，每個(gè)犢牛島占地為1.6 m×3.6 m。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1　Composition and nutrient levels of basal diets (air-dry basis)　%

1)預(yù)混料為每千克開(kāi)食料提供The premix provided the following per kg of the starter：VA 15 000 IU，VD 5 000 IU，VE 50 mg，F(xiàn)e 90 mg，Cu 12.5 mg，Mn 30 mg，Zn 90 mg，Se 0.3 mg，I 1.0 mg，Co 0.5 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平為實(shí)測(cè)值。Nutrient levels were measured values.

1.3測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1生長(zhǎng)性能和糞便評(píng)分

分別于犢牛18和28日齡晨飼前稱重，計(jì)算犢牛平均日增重(average daily gain,ADG)。試驗(yàn)期間每天記錄犢牛飼糧采食量，計(jì)算料重比。試驗(yàn)過(guò)程中采集有代表性的代乳品、開(kāi)食料樣品，依照AOAC(2000)[10]的方法測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分含量，其中，總能(GE)以PARR-6400全自動(dòng)氧彈量熱儀測(cè)定；粗蛋白質(zhì)(CP)含量以KDY-9830全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定；粗脂肪(EE)含量采用ANKOM-XT15i全自動(dòng)脂肪分析儀測(cè)定；同時(shí)采用常規(guī)方法測(cè)定干物質(zhì)(DM)、有機(jī)物(OM)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、鈣(Ca)和磷(P)含量。

每天觀察犢牛健康狀況并根據(jù)表2[11]進(jìn)行糞便評(píng)分。當(dāng)糞便評(píng)分≥2時(shí)記為1個(gè)腹瀉日；當(dāng)糞便評(píng)分>3時(shí)，對(duì)犢牛灌服電解液，有必要時(shí)進(jìn)行抗生素治療。計(jì)算腹瀉率和糞便指數(shù)：

腹瀉率(%)=(腹瀉頭數(shù)/總頭數(shù))×100； 糞便指數(shù)=糞便評(píng)分之和/總頭數(shù)。

表2　犢牛糞便評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 2　The evaluation rules of fecal of bull calves[11]

1.3.2血清指標(biāo)

于試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天(28日齡)晨飼前每頭犢牛頸靜脈采血5 mL，3 000 r/min離心20 min，收集血清分裝于1.5 mL離心管中，-20 ℃下保存。樣品分別采用免疫比濁法(松上A8全自動(dòng)生化分析儀)測(cè)定免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)濃度；采用生化法(日立7600生化儀)測(cè)定總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、一氧化氮(nitric oxide,NO)和溶菌酶(lysozyme,LZM)濃度及堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性，測(cè)定所需試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.4統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SAS 9.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行非配對(duì)t檢驗(yàn)分析，以P<0.05與P<0.01分別作為判斷差異顯著與極顯著的標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果

2.1復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛生長(zhǎng)的影響

由表3可知，試驗(yàn)期間2組犢牛初始重和末重均無(wú)顯著的差異(P>0.05)，然而飼糧添加復(fù)合特異性IgY有提高犢牛ADG的趨勢(shì)(P=0.082)。復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛平均日采食量和料重比無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表3　復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛生長(zhǎng)的影響Table 3　Effects of compound specific IgY on growth of calves

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

2.2復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛糞便評(píng)分的影響

由圖1可知，飼糧添加復(fù)合特異性IgY有助于降低犢牛的糞便評(píng)分，其中在犢牛20、22、23和25日齡時(shí)，IGY組糞便評(píng)分顯著低于CON組(P<0.05)。

折線節(jié)點(diǎn)標(biāo)注*表示組間差異顯著(P<0.05)。

Nodes of line with * mean significant difference between groups (P<0.05).

圖1復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛糞便評(píng)分的影響

Fig.1Effects of compound specific IgY on

fecal score of calves

2.3復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛腹瀉率和糞便指數(shù)的影響

由表4可知，雖然復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛糞便指數(shù)未造成顯著影響(P>0.05)，但I(xiàn)GY組腹瀉率顯著低于CON組(P<0.05)。

2.4復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清免疫球蛋白濃度的影響

由表5可知，飼糧添加復(fù)合特異性IgY較CON組極顯著提高了犢牛血清中IgG、IgM和IgA的濃度(P<0.01)，分別提高了7.19%、5.71%和8.50%。2.5復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清抗氧化能力的影響

由表6可知，復(fù)合特異性IgY對(duì)犢?？寡趸芰υ斐闪孙@著或極顯著影響(P<0.05或P<0.01)，其中IGY組血清T-AOC極顯著高于CON組(P<0.01)，而NO濃度卻顯著低于CON組(P=0.043)。2.6復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清免疫相關(guān)酶的影響

由表7可知，IGY組血清LZM濃度極顯著低于CON組(P<0.01)，然而復(fù)合特異性IgY對(duì)血清AKP活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表4　復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛腹瀉率和糞便指數(shù)的影響Table 4　Effects of compound specific IgY on diarrhea incidence and fecal index of calves

表5　復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清免疫球蛋白濃度的影響Table 5　Effects of compound specific IgY on serum immunoglobulin concentrations of calves　g/L

3討論

3.1復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛生長(zhǎng)和腹瀉的影響

朱錦蘭等[12]對(duì)肉鴨的研究表明，飼糧添加IgY通過(guò)提高血清中三碘甲腺原氨酸和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1濃度顯著提高了ADG。而本試驗(yàn)添加復(fù)合特異性IgY僅對(duì)犢牛ADG有提高的趨勢(shì)，對(duì)體重沒(méi)有顯著影響，這可能是由于試驗(yàn)周期短，IgY通過(guò)調(diào)節(jié)激素水平而產(chǎn)生促生長(zhǎng)作用的累積效應(yīng)還沒(méi)有到達(dá)顯著水平造成；也可能與試驗(yàn)動(dòng)物品種不同有關(guān)。

表6　復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清抗氧化能力的影響Table 6　Effects of compound specific IgY on serum antioxidant capacity of calves

表7　復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清免疫相關(guān)酶的影響Table 7　Effects of compound specific IgY on enzyme activity of immunity of calves

腹瀉是影響犢牛生長(zhǎng)發(fā)育的重要原因之一。目前，研究人員采用包括糞便評(píng)分在內(nèi)的糞便形態(tài)特點(diǎn)作為腹瀉嚴(yán)重程度的預(yù)示指標(biāo)去評(píng)價(jià)犢牛的健康狀況[13]。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)犢牛糞便連續(xù)評(píng)分，發(fā)現(xiàn)飼糧添加復(fù)合特異性IgY后糞便評(píng)分和腹瀉率較對(duì)照組顯著降低，這與Vega等[14]利用特異性IgY對(duì)犢牛腹瀉的研究結(jié)果一致。研究認(rèn)為，IgY可通過(guò)直接黏附于大腸桿菌或沙門氏菌等病原菌的菌毛或鞭毛上，使其不能黏附于腸道黏膜上皮細(xì)胞而被排除體外，導(dǎo)致腸道致病菌增殖減弱甚至減少，從而降低了犢牛腹瀉發(fā)生[2]。同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，犢牛通過(guò)口服特異性IgY還可以調(diào)節(jié)黏膜和系統(tǒng)免疫反應(yīng)，提高腸道尤其是十二指腸黏膜對(duì)特異型病毒的免疫防御，降低犢牛病毒性腹瀉發(fā)病率[14]。另外，觀察全期糞便評(píng)分與臨床癥狀還可以發(fā)現(xiàn)，犢牛在遭受外界應(yīng)激時(shí)，飼糧添加復(fù)合特異性IgY有助于推遲犢牛腹瀉發(fā)生峰的出現(xiàn)，并且縮短腹瀉發(fā)生的時(shí)間，這與Parreo等[15]利用添加特異性IgY的初乳對(duì)犢牛的腹瀉研究結(jié)果一致。

3.2復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清免疫球蛋白濃度的影響

腹瀉率與糞便指數(shù)可以直接觀察到犢牛健康狀況，而血清免疫球蛋白作為一種隱性指標(biāo)可以從機(jī)體內(nèi)部評(píng)價(jià)動(dòng)物免疫能力，兩者合理結(jié)合有助于全面分析試驗(yàn)結(jié)果[16]。剛出生犢牛體內(nèi)的免疫球蛋白主要是在腸道細(xì)胞“閉合”之前通過(guò)初乳獲得，血清中足量的免疫球蛋白對(duì)于提高犢牛機(jī)體的免疫力至關(guān)重要。其中IgM是免疫反應(yīng)起始階段主要的抗體；作為血清中主要的抗體，IgG在體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮著重要的角色；IgA則介導(dǎo)黏膜免疫反應(yīng)，主要功能是通過(guò)與非特異性免疫系統(tǒng)協(xié)同與感染病原菌發(fā)生免疫排斥作用[17]。研究表明，腹瀉犢牛血清中免疫球蛋白含量明顯低于健康犢牛[18]。從本試驗(yàn)可以看出，飼糧添加復(fù)合特異性IgY極顯著提高了犢牛血清IgG、IgA和IgM濃度。免疫球蛋白抗體分泌細(xì)胞(antibody secreting cells,ASC)主要分布在腸道(十二指腸、空腸和回腸)黏膜固有層，空腸、回腸淋巴集結(jié)以及腸系淋巴結(jié)。Parreo等[15]通過(guò)對(duì)輪狀病毒攻毒后的犢?？诜禺愋訧gY，發(fā)現(xiàn)較對(duì)照組在腸道黏膜檢測(cè)到IgM與IgA的ASC顯著減少，甚至沒(méi)有發(fā)現(xiàn)IgG的ASC，同時(shí)對(duì)于IgA的ASC應(yīng)答也明顯受到抑制。這就說(shuō)明飼糧添加特異性IgY可以直接在腸道與病原菌抗原發(fā)生免疫中和反應(yīng)，提高機(jī)體的被動(dòng)免疫能力[8]，而使血清中免疫球蛋白保持在一個(gè)較高的水平。然而，被動(dòng)性免疫抗體通過(guò)劑量依賴性方式對(duì)抗體介導(dǎo)的黏膜與機(jī)體免疫應(yīng)答系統(tǒng)的發(fā)育抑制作用，也有必要引起重視以及進(jìn)一步研究。

3.3復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清抗氧化能力的影響

氧化應(yīng)激是機(jī)體在遭受有害刺激時(shí)，體內(nèi)高活性分子如活性氧自由基或活性氮自由基產(chǎn)生過(guò)多，機(jī)體氧化程度超出了對(duì)氧化物的清除能力，氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，從而引起的細(xì)胞或組織損傷[19]。其中T-AOC是機(jī)體拮抗氧化自由基的主要體系，制約和清除機(jī)體過(guò)多的自由基，保護(hù)細(xì)胞正常功能，維持機(jī)體的正常代謝[20]。從本試驗(yàn)結(jié)果可以看出，復(fù)合特異性IgY顯著提高了犢牛血清中T-AOC濃度，較高水平的T-AOC有助于及時(shí)清除體內(nèi)氧化過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，從而使機(jī)體處于氧化與抗氧化動(dòng)態(tài)平衡，保證動(dòng)物健康。然而未添加復(fù)合特異性IgY組犢牛的血清中NO濃度顯著高于添加組，這可能是由于代乳品中植物性蛋白質(zhì)對(duì)犢牛引起的應(yīng)激反應(yīng)產(chǎn)生了代償作用，造成了血清中高濃度的NO。同時(shí)研究還發(fā)現(xiàn)，代乳品中植物性蛋白質(zhì)含量越高，這種代償作用越明顯[20]。這就說(shuō)明飼糧添加復(fù)合特異性IgY有效地降低了外源應(yīng)激對(duì)犢牛產(chǎn)生的代償作用，從而提高犢牛對(duì)植物性蛋白質(zhì)的適應(yīng)能力。這一結(jié)果與犢牛糞便評(píng)分和腹瀉結(jié)果相一致。

3.4復(fù)合特異性IgY對(duì)犢牛血清免疫相關(guān)酶的影響

LZM作為機(jī)體非特異性免疫因子，參與機(jī)體多種免疫反應(yīng)，在正常防御和非特異性免疫中發(fā)揮著重要的作用[21]。LZM主要由單核巨噬細(xì)胞釋放，廣泛分布于動(dòng)物組織、體液和分泌液中，主要通過(guò)溶解細(xì)菌或真菌細(xì)胞壁，達(dá)到抗菌消炎、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力的作用[22]。本試驗(yàn)通過(guò)添加復(fù)合特異性IgY，顯著降低了犢牛血清中LZM的濃度，這說(shuō)明復(fù)合特異性IgY通過(guò)發(fā)揮自身的抗原抗體免疫反應(yīng)，有助于降低機(jī)體非特異性免疫反應(yīng)，降低外界刺激對(duì)犢牛產(chǎn)生的不良影響，提高機(jī)體適應(yīng)能力。AKP則在動(dòng)物組織、體液和分泌液中，通過(guò)改變細(xì)菌表面的結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)異己性使其易于被機(jī)體吞噬細(xì)胞吞噬和降解[16]。AKP與LZM發(fā)揮協(xié)同作用，共同增強(qiáng)機(jī)體抵抗外界病原菌感染能力。然而，從本試驗(yàn)結(jié)果卻發(fā)現(xiàn)，復(fù)合特異性IgY并沒(méi)有影響犢牛血清中AKP活性，這可能與犢牛當(dāng)時(shí)所處的狀態(tài)有關(guān)。

特異性IgY在降低犢牛腹瀉，提高免疫球蛋白、抗氧化能力以及免疫相關(guān)酶活性方面均表現(xiàn)出積極作用。然而特異性IgY經(jīng)幼齡動(dòng)物口服在胃腸道與致病性抗原發(fā)生的免疫中和反應(yīng)機(jī)制以及特異性IgY對(duì)腸道黏膜免疫細(xì)胞的免疫應(yīng)答機(jī)制的調(diào)節(jié)作用有待進(jìn)一步研究。同時(shí)母雞在免疫過(guò)程中蓄積在卵黃中大量的非特異性抗體對(duì)幼齡動(dòng)物產(chǎn)生的積極作用也應(yīng)該引起重視并加以充分利用，通過(guò)系統(tǒng)深入的研究使復(fù)合特異性IgY在生產(chǎn)中得到更好的應(yīng)用。

4結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，飼糧中添加復(fù)合特異性IgY通過(guò)提高犢牛免疫球蛋白濃度和抗氧化能力以及發(fā)揮卵黃抗體本身抗原抗體反應(yīng)，增強(qiáng)犢牛免疫能力和抵抗外界應(yīng)激能力，降低了腹瀉率，促進(jìn)了犢牛健康。

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(責(zé)任編輯王智航)

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.07.023

收稿日期：2016-01-18

基金項(xiàng)目：奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系北京市創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)；中國(guó)農(nóng)科院科技創(chuàng)新工程；國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題“華北農(nóng)區(qū)及北方大城市奶牛健康養(yǎng)殖生產(chǎn)技術(shù)集成及產(chǎn)業(yè)化示范”(2012BAD12B06)

作者簡(jiǎn)介：楊春濤(1987—)，男，河北邢臺(tái)人，碩士研究生，研究方向?yàn)榉雌c動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)。E-mail: yangchuntao0808@163.com *通信作者：屠焰，研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: tuyan@caas.cn

中圖分類號(hào)：S823

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)07-2176-08

*Corresponding author, professor, E-mail: tuyan@caas.cn

Effects of Composite Specific Immunoglobulin of Yolk on Growth,Diarrhea and Immunity of Calves Aged from 18 to 28 Days

YANG ChuntaoDIAO QiyuSI BingwenMA JunnanKONG LuxinTU Yan*

(Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing Key Laboratory for Dairy Cow Nutrition, Key Laboratory of Feed Biotechnology, The Ministry of Agriculture, Beijing 100081, China)

Abstract:This study aimed to investigate the effects of dietary supplementation of composite specific immunoglobulin (Ig) of yolk (IgY) on growth, diarrhea and immunity of calves aged from 18 to 28 days. Twenty new born Chinese Holstein bull calves were selected and fed fresh milk until 10 days of age, then were randomly assigned to one of two groups. Calves were fed a basal diet (CON group) or the basal diet daily supplemented with 45 mg/kg BW composite specific (IGY group). The pre-experiment was from 11 to 17 days of age when a milk replacer was gradually used, after that the formal experiment was carried out from 18 to 28 days of age. Weight of calves was recorded at 18 and 28 days of age, respectively. Feed intake and fecal score were recorded daily. Blood samples were obtained by jugular venipuncture from calves at 28 days of age. Serum total antioxidant capacity (T-AOC), the activity alkaline phosphatase (AKP) and concentrations of serum Ig, nitric oxide (NO) and lysozyme (LZM) were determined. The results showed as follows: dietary supplementation of IgY had no significant effects on average daily gain and feed to gain ratio (P>0.05). Compared with CON group, IGY group significantly decreased fecal score and diarrhea incidence (P<0.05). Serum concentrations of IgG, IgM and IgA in IGY group were significantly higher than those in CON group (P<0.01), and were increased by 7.19%, 5.71% and 8.50%, respectively. Serum T-AOC in IGY group was significantly higher compared to that in CON group (P<0.01), however, serum NO concentration was significantly decreased in CON group (P<0.05). Serum concentration of LZM in IGY group was significantly lower compared to that in CON group (P<0.01), but serum activity of AKP was not influenced (P>0.05). In summary, diets supplemented with composite specific IgY improve immunity and the capacity of resist to external stress by increasing serum Ig concentrations and antioxidant capacity, and developing antigen-antibody reaction of IgY to decrease diarrhea incidence and promote health of calves.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(7)：2176-2183]

Key words:calves; immunoglobulin of yolk; diarrhea; antioxidant capacity; immunity