HemoCue Hb 201+ 分析儀測(cè)定血紅蛋白結(jié)果的可比性研究

楊新平　王偉　項(xiàng)明方　劉志恒

[摘要] 目的 評(píng)估便攜式HemoCue Hb 201+分析儀急性失血后輸血的指導(dǎo)意義。 方法 選擇2013年6月～ 2015年5月間深圳市第二人民醫(yī)院全麻術(shù)中因急性失血可能需要輸血的患者共208例，血標(biāo)本采集后，分別采用HemoCue Hb 201+分析儀及SYSMEX XE-2100型血細(xì)胞分析儀測(cè)定同一標(biāo)本的Hb，所測(cè)得的數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)分析，并采用Bland-Altman 法評(píng)價(jià)兩種檢驗(yàn)方法的一致性。 結(jié)果 HemoCue Hb 201+分析儀和中心實(shí)驗(yàn)室SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀測(cè)得的Hb具有良好的相關(guān)性（y = 15.9297 + 0.8086x，r=0.888，P<0.001）。兩種方法檢測(cè)Hb差值95%的一致性限度超出臨床可接受范圍。 結(jié)論 HemoCue Hb 201+分析儀在急性失血后Hb的檢測(cè)具有較好的準(zhǔn)確性，并且迅捷，對(duì)術(shù)中輸血具有良好的指導(dǎo)意義；但與標(biāo)準(zhǔn)方法的一致性尚有不足，二者不能相互取代。

[關(guān)鍵詞] HemoCue Hb 201+分析儀/儀器設(shè)備；血液生化分析/儀器設(shè)備；血紅蛋白測(cè)定

[中圖分類號(hào)] R446.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2016）09-140-04

[Abstract] Objective To assess the guiding significance of portable HemoCue Hb 201+ analyzer in blood transfusion after acute blood loss. Methods 208 patients with blood transfusion after acute blood loss during general anesthesia from June 2013 to May 2015 in the second people's hospital of shenzhen were selected， after blood specimen collection， the Hb of same specimen was respectively tested by HemoCue Hb 201+ analyzer and SYSMEX XE-2100 blood cell analyzer simultaneously， the taken data was relatively analyzed， the consistency between the two testing methods was evaluated by Bland-Altman method. Results The measured Hb of HemoCue Hb 201+ analyzer and SYSMEX XE-2100 automatic blood analyzer in central Laboratory had good correlation （y=15.9297+0.8086x， r=0.888， P<0.001）. The consistency limit of the 95% Hb difference tested by the two methods was beyond the clinically acceptable range. Conclusion HemoCue Hb 201+ analyzer in Hb testing after acute blood loss had good accuracy and fast， which had good guiding significance for intraoperative blood transfusion. This was inadequate compared the consistency of standard method， these two methods could not replace each other.

[Key words]HemoCue Hb 201+ analyzer or instrumentation； Blood biochemical analysis or instrumentation； Hemoglobin determination

在外科手術(shù)過(guò)程中，選擇一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的血紅蛋白（Hb）測(cè)定儀器實(shí)時(shí)掌握術(shù)中血紅蛋白的變化，以指導(dǎo)術(shù)中合理輸血，是麻醉醫(yī)生面臨的一大難題[1-2]。在臨床工作中，通常的流程是，臨床工作人員采集血液標(biāo)本后由相關(guān)人員送入中心實(shí)驗(yàn)室，中心實(shí)驗(yàn)室多采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定血紅蛋白。這種方法雖結(jié)果準(zhǔn)確，但所需時(shí)程長(zhǎng)，不能作為手術(shù)過(guò)程中實(shí)時(shí)血紅蛋白變化的監(jiān)測(cè)[3-5]。隨著科技的發(fā)展，多種床旁便攜式血紅蛋白分析儀已應(yīng)用于許多醫(yī)院的麻醉科以及ICU等，以獲得血

紅蛋白的實(shí)時(shí)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)[5]。HemoCue Hb 201+是近年來(lái)臨床應(yīng)用較多的一種床旁快速血紅蛋白監(jiān)測(cè)儀器。我們應(yīng)用此儀器測(cè)定Hb，將其測(cè)定結(jié)果與中心實(shí)驗(yàn)室的SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)結(jié)果的作對(duì)比，評(píng)價(jià)兩種儀器結(jié)果的相關(guān)性和一致性，從而為HemoCue Hb 201+ 分析儀應(yīng)用于臨床術(shù)中輸血評(píng)估提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2013年6月～2015年5月共3年間擇期手術(shù)的全麻患者，納入標(biāo)準(zhǔn)為：術(shù)前血紅蛋白≥90g/L，術(shù)中出血量>800mL，估計(jì)可能需要輸血者。共收集病例208例，其中顱腦外科手術(shù)79例，脊柱外科手術(shù)66例，其他骨科手術(shù)15例，胸肺手術(shù)13例，婦產(chǎn)科手術(shù)9例，肝臟手術(shù)6例，胃腸道手術(shù)6例，胰腺手術(shù)3例，其他手術(shù)11例?；颊咝g(shù)前ASA 評(píng)級(jí)Ⅰ～Ⅲ級(jí)，其中男116例，女92例，年齡18～83歲，平均（49.8±24.44）歲，體重38～90kg，平均（65.62±19.783）kg。

1.2 研究方法

所在患者在麻醉插管成功后，穿刺上肢動(dòng)脈監(jiān)測(cè)動(dòng)脈壓。在術(shù)中估計(jì)需要輸血前取動(dòng)脈血3mL。其中1mL動(dòng)脈血標(biāo)本抽血后即刻經(jīng)HemoCue Hb 201+分析儀（采用疊氮化高鐵血紅蛋白法）行Hb測(cè)定。另2mL動(dòng)脈血標(biāo)本注入乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）抗凝真空管，迅速將管內(nèi)血標(biāo)本與抗凝劑充分混勻，15min內(nèi)送入本院中心實(shí)驗(yàn)室，用SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀（采用十二烷基月桂酰硫酸鈉血紅蛋白法）測(cè)定血Hb濃度。結(jié)果出來(lái)后，電話報(bào)告至手術(shù)間，記錄獲得Hb數(shù)值的時(shí)間。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

定量數(shù)用（）的形式表示，采用SPSS18.0 軟件進(jìn)行相關(guān)分析和線性回歸分析，采用Medcalc軟件進(jìn)行一致性分析（Bland‐Altman 法），以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 分別采用兩種方法檢測(cè)血Hb值及相關(guān)性分析

術(shù)中全部208例患者在取得血標(biāo)本后，即刻經(jīng)HemoCue Hb 201+分析儀檢測(cè)血Hb，均在2min（120s）時(shí)獲得數(shù)據(jù)，測(cè)得血Hb 值為40～173g/L，平均（78.47±22.23）g/L。另一份血標(biāo)本送中心實(shí)驗(yàn)室行急診檢驗(yàn)，經(jīng)SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀測(cè)定血Hb值后，即刻電話通知結(jié)果，獲得數(shù)據(jù)時(shí)間為42～75min平均（52.33±15.471min），測(cè)得的Hb值為38～175g/L，平均（77.22±24.03）g/L。見(jiàn)表1。

兩種方法所測(cè)得血Hb濃度具有顯著的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)r=0.888（P<0.0001），相關(guān)系數(shù)的95%置信區(qū)間為（0.914～0.978），直線回歸方程為： y=15.9297 + 0.8086 x，其中y為HemoCue Hb 201+測(cè)得Hb值，x為中心實(shí)驗(yàn)室SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀測(cè)得的Hb值。見(jiàn)圖1。

2.2 兩種檢驗(yàn)方法的一致性分析（Bland‐Altman法）

以中心實(shí)驗(yàn)室SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀測(cè)得的Hb值為橫坐標(biāo)，以兩種方法測(cè)得的血紅蛋白結(jié)果差值d為縱坐標(biāo)，并以差值的均數(shù)d±1.96×差值的標(biāo)準(zhǔn)差（sd）為95%的一致性限度，標(biāo)繪出散點(diǎn)圖（圖2）。兩種測(cè)量方法差值的95%一致性限度為（20.5，-23），208個(gè)散點(diǎn)中有14個(gè)散點(diǎn)位于95%的一致性限度之外，比例為6.73%（14/208），大于5%。

臨床可以接受的界限參考美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)法案修正案[6]（CLIA88）規(guī)定的血紅蛋白檢測(cè)以靶值±7%為準(zhǔn)。兩種儀器測(cè)定Hb的一致性限度的95%可信區(qū)間超過(guò)臨床可以接受的界限（-5.40，5.40）g/L。其中有19個(gè)散點(diǎn)（19/208，9.13%）的值高于這個(gè)界限，有49個(gè)散點(diǎn)（49/208，23.56%）的值低于這個(gè)界限，僅有126個(gè)散點(diǎn)（126/208，60.58%）的值在臨床可接受的界限范圍內(nèi)。

3 討論

在手術(shù)失血期間，麻醉醫(yī)生常常需要監(jiān)測(cè)患者血紅蛋白水平，以指導(dǎo)術(shù)中合理輸血[1-2]。我國(guó)血紅蛋白測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法根據(jù)衛(wèi)生部頒布的氰化高鐵血紅蛋白法[7]，但操作過(guò)程中需要使用較大毒性試劑，對(duì)環(huán)境造成污染。因此，國(guó)際上均不采用此法作為臨床檢驗(yàn)的方法。目前常用的是十二烷基月桂酰硫酸鈉血紅蛋白（SLS-Hb）法，經(jīng)自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)，和標(biāo)準(zhǔn)的氰化高鐵血紅蛋白法有良好的一致性。但此方法需將血液標(biāo)本送入檢驗(yàn)科室進(jìn)行分析，耗時(shí)較長(zhǎng)，不能及時(shí)獲得的血紅蛋白數(shù)值。本組患者中，即使通過(guò)術(shù)中急查的方式檢測(cè)血Hb值，血標(biāo)本經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)、處理、自動(dòng)分析和結(jié)果回報(bào)后，獲得Hb結(jié)果的時(shí)間為42～75min，平均（52.33±15.471） min。這么長(zhǎng)的時(shí)間，在需要爭(zhēng)分奪秒決定是否輸血的手術(shù)中，往往難以接受的。

隨著科技發(fā)展，各類便攜式檢測(cè)儀器的出現(xiàn)，使得即時(shí)檢測(cè)血紅蛋白數(shù)值得以實(shí)現(xiàn)[8-9]。HemoCue Hb 201+分析儀是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外快速檢測(cè)Hb的儀器之一，它被廣泛應(yīng)用于街頭獻(xiàn)血者的篩查，其測(cè)定血紅蛋白精密度好，檢測(cè)結(jié)果可靠 [9-12]。研究表明Hb在低于12.5g/dL時(shí)，HemoCue Hb 201+測(cè)定的Hb值與標(biāo)準(zhǔn)方法的相關(guān)性良好，而當(dāng)Hb高于18g/dL時(shí)，兩種方法測(cè)定的Hb值即失去線性相關(guān)關(guān)系[13-14]。街頭獻(xiàn)血者大部分是血紅蛋白濃度正常的人，即使篩選出貧血患者，往往是慢性貧血，其血漿容量是正常的，最常見(jiàn)類型為缺鐵性貧血所導(dǎo)致的小細(xì)胞低色素性貧血。隨著HemoCue Hb的廣泛應(yīng)用，亦有研究者將之應(yīng)用快捷的疾控機(jī)構(gòu)現(xiàn)場(chǎng)血紅蛋白測(cè)定和術(shù)中快速失血后輸血的評(píng)估[15-16]。對(duì)于后者，由于急性失血和血液稀釋引起的急性貧血， HemoCue Hb 201+分析儀測(cè)定Hb能否準(zhǔn)確估計(jì)貧血的程度和出血量，它與中心實(shí)驗(yàn)室測(cè)定Hb之間的一致性如何，還有待評(píng)估。Akhtar K等[16]認(rèn)為在術(shù)中應(yīng)用HemoCue法可以準(zhǔn)確地檢測(cè)血紅蛋白的含量，并優(yōu)于其他的快速方法。國(guó)內(nèi)劉芳等[17-18]亦有類似的報(bào)道。

本組患者在手術(shù)過(guò)程中的均存在急性失血或/和血液稀釋，臨床判斷需緊急輸血。筆者采用HemoCue Hb 201+分析儀測(cè)定Hb，并和SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀（采用SLS-Hb）測(cè)定Hb值進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明：本研究發(fā)現(xiàn)血紅蛋白值在4 ～ 15g/dL區(qū)間內(nèi)兩種儀器所測(cè)得的血紅蛋白值相關(guān)性顯著，相關(guān)系數(shù)為0.888（P<0.0001），且具有線性關(guān)系，說(shuō)明HemoCue Hb 201+分析儀在術(shù)中急性失血時(shí)應(yīng)用來(lái)測(cè)定Hb是有良好的參考價(jià)值的。術(shù)中經(jīng)HemoCue Hb 201+分析儀檢測(cè)血Hb，均在2分鐘（120s）時(shí)獲得數(shù)據(jù)，非?？旖?。并且，測(cè)得血Hb平均值（78.47±22.23）g/L，95%CI為75.43～81.51g/L，正是臨床上需要輸血的區(qū)間。因此，這種快速而又較準(zhǔn)確的術(shù)中Hb檢測(cè)法，對(duì)輸血與否的評(píng)估，具有重要的指導(dǎo)意義。

同時(shí)，我們采用Bland‐Altman分析法[19]評(píng)價(jià)HemoCue Hb 201+分析儀在術(shù)中的應(yīng)用是否可以替代SYSMEX XE-2100全自動(dòng)血液分析儀，即采用疊氮化高鐵血紅蛋白法檢測(cè)Hb是否和實(shí)驗(yàn)室SLS-Hb血紅蛋白法是一致的。結(jié)果表明，兩種檢測(cè)指標(biāo)95%CI 均超出了臨床可接受的界限，故兩種檢測(cè)方法的一致性欠佳，尚無(wú)法進(jìn)行完全相互替代。兩種檢測(cè)方法的一致性欠佳產(chǎn)生的原因可能為多方面：首先，兩種儀器檢測(cè)原理不同，可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果存在一定差異。全自動(dòng)血液分析儀采用是SLS-Hb法[7]，測(cè)定原理為利用表面活性劑先將紅細(xì)胞溶解，釋放出血紅蛋白分子。血紅蛋白分子中的正二價(jià)鐵離子被氧化為正三價(jià)鐵離子，十二烷基硫酸鈉（SLS）的親水端與正三價(jià)鐵離子結(jié)合形成穩(wěn)定的SLS-Hb有色基團(tuán)。SLS-Hb在535nm有最大吸收峰，根據(jù)吸光度，即可求得血紅蛋白濃度。而HemoCue Hb 201+分析儀采用疊氮高鐵血紅蛋白法，其測(cè)定血紅蛋白的原理為[20]：取HemoCue Hb 201+血紅蛋白儀專用玻璃片， 虹吸法吸取10ul血至玻璃片微小孔內(nèi)， 與孔內(nèi)試劑發(fā)生反應(yīng)。在孔內(nèi)紅細(xì)胞膜被脫氧膽酸鈉裂解，釋放出血紅蛋白， 亞硝酸鈉將血紅蛋白轉(zhuǎn)換成高鐵血紅蛋白， 然后疊氮化鈉與高鐵血紅蛋白結(jié)合形成疊氮化高鐵血紅蛋白， 在570nm 和880nm 雙波長(zhǎng)測(cè)量紅細(xì)胞破壞后釋放出的血紅蛋白。兩者不同的校準(zhǔn)檢測(cè)體系有可能產(chǎn)生一定的系統(tǒng)誤差。方法機(jī)制不同，受影響因素亦不同， 在某些病理?xiàng)l件下， HemoCue Hb 201+分析儀測(cè)定結(jié)果可能會(huì)產(chǎn)生較大的偏差[18-21]。因此，在術(shù)中使用HemoCue Hb 201+分析儀時(shí)要求嚴(yán)格按照操作規(guī)程使用，定期進(jìn)行質(zhì)量控制，定期與實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行比對(duì)。

綜上所述，HemoCue Hb 201+分析儀應(yīng)用于急性失血后Hb測(cè)定具有較好的準(zhǔn)確性，并且迅捷，對(duì)術(shù)中輸血有良好的指導(dǎo)意義，但與標(biāo)準(zhǔn)方法的一致性尚有不足，二者不能相互取代。

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（收稿日期：2016-02-16）