在不同飼料中添加加熱滅活的植物乳酸桿菌P—8對(duì)大菱鲆幼魚抗氧化能力和血清生化指標(biāo)的影響

張瑞艷+何艮+周慧慧

摘要：將植物乳酸菌P-8以滅活的形式添加到大菱鲆幼魚的兩種基礎(chǔ)飼料中，旨在研究滅活植物乳酸桿菌（HK-LP）對(duì)大菱鲆飼料中豆粕替代魚粉的影響。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)取血測(cè)定血清超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、丙二醛（MDA）、堿性磷酸酶（ALP）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活力和總蛋白（TP）、膽固醇（TCHO）、甘油三酯（TGK）含量。結(jié)果顯示，D因素和P因素在AST、ALP、TGK和SOD有顯著交互作用（P<0.05）。D因素ALT、TCHO、TP、TGK、MDA和SOD有顯著性影響（P<0.05）；P因素對(duì)SOD、ALP、AST、ALT、TGK和TP有顯著性影響（P<0.05），且對(duì)血清生化指標(biāo)ALP、AST、ALT、TGK和TP有極顯著影響（P<0.01），血清TCHO、MDA呈下降趨勢(shì)，但未達(dá)到顯著水平（P>0.05），CAT呈上升趨勢(shì)，但未達(dá)到顯著水平（P>0.05）。由此得知，在豆粕替代45%魚粉蛋白飼料中添加一定濃度的滅活乳酸桿菌P-8對(duì)大菱鲆幼魚血清生化指標(biāo)和抗氧化能力有顯著性影響。

關(guān)鍵詞：滅活植物乳酸桿菌P-8；大菱鲆；豆粕；抗氧化能力；血清生化指標(biāo)

大菱鲆是原產(chǎn)于歐洲的一種天然良種，因其對(duì)生態(tài)環(huán)境的超強(qiáng)適應(yīng)能力、快速的生長(zhǎng)速度以及優(yōu)良的品質(zhì)，成為各國(guó)競(jìng)相引種的對(duì)象。自從20世紀(jì)末我國(guó)水產(chǎn)科學(xué)家雷霽霖院士從英國(guó)引進(jìn)以來(lái)，大菱鲆產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展并產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益，中國(guó)目前已經(jīng)成為世界大菱鲆人工養(yǎng)殖大國(guó)。然而近些年來(lái)隨著人們對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物需求量的不斷攀升，魚粉卻出現(xiàn)產(chǎn)量下降價(jià)格飆升，魚粉短缺已成為一個(gè)全球性問(wèn)題。因此水產(chǎn)飼料中植物飼料的使用受到高度的關(guān)注。豆粕由于其蛋白含量高、氨基酸相對(duì)平衡、價(jià)格合理[1]而成為重要的魚粉替代蛋白源。但是，豆粕中的胰蛋白酶抑制因子和血球凝集素等抗?fàn)I養(yǎng)因子以及氨基酸的不平衡性和可利用性限制其在魚類飼料中的用量。研究表明，全脂大豆或浸提豆粕會(huì)抑制生長(zhǎng)，降低飼料效率[2]。豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子會(huì)損傷腸道[3]，影響腸道內(nèi)的微生態(tài)環(huán)境[4]，抑制消化酶的活性[5]，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。某些含抗?fàn)I養(yǎng)素的植物源飼料原料可引發(fā)急性中毒癥狀；但在正常飼喂條件下，通常只有長(zhǎng)期攝食某種特定植物才會(huì)產(chǎn)生輕微的負(fù)面效應(yīng)。這類效應(yīng)包括干擾消化過(guò)程及生長(zhǎng)、降低飼料效率、胰腺肥大癥、低血糖、肝功能障礙、異性生殖和免疫抑制。能否在低魚粉含量條件下尋找到一種促進(jìn)生長(zhǎng)的安全有效的添加劑顯得尤為重要。

最近飼料添加劑越來(lái)越多地用作魚類免疫刺激劑[6]，在這些添加劑里使用最廣泛和效果最顯著的就是益生菌。對(duì)益生菌的定義包括活的或者死的微生物細(xì)胞代謝產(chǎn)物，能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道菌群和刺激免疫酶活，不一定是活菌，只要能對(duì)宿主產(chǎn)生益生作用[7]。有益生功能的細(xì)菌無(wú)論是以活菌形式添加[8-9]還是以滅活菌的形式添加[10-14]都顯示出積極的促健康性能。加熱滅活的植物乳酸桿菌（HK-LP）賦予了乳酸菌新的性能。乳酸菌是不耐高溫高壓的，但是HK-LP能夠抵抗飼料制粒過(guò)程中的高溫高壓，最近五年內(nèi)這種新性能在農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物飼料中得到廣泛應(yīng)用[15-16]。由于口服活的益生菌可能會(huì)將活的細(xì)菌引進(jìn)到開放水環(huán)境中，又引發(fā)人們對(duì)水產(chǎn)業(yè)新的擔(dān)憂。在這種擔(dān)憂下，滅活菌因?yàn)椴粫?huì)與其他的水生生物相互作用而不存在安全隱患，替代活菌制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖上嶄露頭角[12]。滅活菌和活菌在免疫反應(yīng)方面的許多對(duì)比研究結(jié)果顯示加熱滅活的酪酸菌在鮸魚身上有明顯的免疫調(diào)節(jié)性能[17]；加熱滅活的創(chuàng)傷弧菌疫苗比福爾馬林滅活的疫苗在牙鲆身上能更好地引起免疫應(yīng)答[18]；加熱滅活的小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌能夠保持小鼠免疫調(diào)節(jié)性能[19]。HK-LP用作小白鼠免疫刺激劑誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生白介素12和抗癌抗菌素，增加伽馬干擾素的生成，進(jìn)而抑制病毒繁殖和其他的T細(xì)胞并活化啟動(dòng)巨噬細(xì)胞吞噬作用[20]；日糧中添加HK-LP能夠提高健康成年人[21]和肉雞[16]的免疫力。

肉食性魚類不適應(yīng)消化含高植物蛋白的飼料，其飼料中添加豆粕易引發(fā)其腸道炎癥。腸粘膜作為魚類免疫系統(tǒng)的第一道非特異性免疫屏障，受到損害后，致病菌會(huì)侵入機(jī)體。普遍認(rèn)為腸道有益菌群和腸道上皮細(xì)胞間的相互作用在動(dòng)物腸道粘膜免疫方面起了重要作用。乳酸菌通過(guò)生物拮抗作用改善試驗(yàn)動(dòng)物腸道微生態(tài)環(huán)境，增強(qiáng)腸道上皮細(xì)胞的屏障層，調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，抑制有害菌的感染和腸內(nèi)腐敗。本試驗(yàn)希望通過(guò)滅活植物乳酸桿菌的益生功能削弱豆粕帶來(lái)的消極作用，調(diào)節(jié)大菱鲆腸道健康，改善其營(yíng)養(yǎng)狀況，促進(jìn)大菱鲆幼魚生長(zhǎng)，提高大菱鲆幼魚的免疫力，從而提高大菱鲆對(duì)豆粕這種植物蛋白源的耐受力，提高植物蛋白在肉食性魚類飼料中的替代比。

1材料和方法

1.1飼料制作

植物乳酸菌菌種由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程實(shí)驗(yàn)室提供，菌種以凍干形式保存的，MRS肉湯培養(yǎng)基37 ℃培養(yǎng)24 h活化，80%甘油保存在-80 ℃冰箱中作為菌種保存?zhèn)溆谩RS瓊脂培養(yǎng)基劃線培養(yǎng)48 h，挑取單菌落，接種于MRS肉湯培養(yǎng)基24 h，16 500 g離心10 min，PBS洗滌三次重懸，MRS瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)48～36 h計(jì)數(shù)。

分別以魚粉（粗蛋白71.58，粗脂肪9.6）和豆粕（粗蛋白55.60，粗脂肪 2.0）為主要蛋白源，小麥粉作為糖源，配置兩種基礎(chǔ)飼料（FM，SM），基礎(chǔ)配方見表1。在兩種基礎(chǔ)飼料中添加加熱滅活菌，添加劑量為107CFU/g和109CFU/g，配制出6種等氮等能的試驗(yàn)飼料，依次分別對(duì)應(yīng)命名為FM組：S0A0，S0A7，S0A9；SM組：S45A0，S45A7，S45A9。在飼料制作過(guò)程中，所有原料粉碎后過(guò)320μm篩網(wǎng)，各原料按配比定量后混合均勻，然后加入適量的水揉勻，經(jīng)F（Ⅱ）-26型雙螺桿擠條機(jī)（華南理工大學(xué)，廣州）加工制成硬顆粒飼料（1.5 mm×2.0 mm，2.5 mm×3.0 mm），105 ℃烘干至飼料水分含量為10%左右，用塑料袋包裝，保存于-20 ℃冰柜中備用。從不同區(qū)域隨機(jī)取幾粒飼料，PBS溶解離心取上清，MRS瓊脂培養(yǎng)基劃線培養(yǎng)3 d，無(wú)菌落長(zhǎng)出。

1.2實(shí)驗(yàn)魚的來(lái)源、馴化與養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)在青島即墨七好生物科技有限公司進(jìn)行。大菱鲆魚苗從當(dāng)?shù)匾患矣鐖?chǎng)繁育的同一批魚苗。在開始正式實(shí)驗(yàn)前，幼魚放于循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中暫養(yǎng)2周，并以基礎(chǔ)飼料FM飽食投喂，使之逐漸適應(yīng)實(shí)驗(yàn)飼料和養(yǎng)殖環(huán)境。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，實(shí)驗(yàn)魚饑餓24 h，然后稱質(zhì)量，并挑選出規(guī)格一致（平均初始體質(zhì)量為（7.82± 0.68）g的大菱鲆進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)在18個(gè)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行，放養(yǎng)密度為30條/桶。每一桶為一組，每種飼料隨機(jī)投喂3組實(shí)驗(yàn)魚。每天飽食投喂2次（7：00和18：00）。養(yǎng)殖周期 10周。每天記錄投飼量，如有死魚記錄數(shù)量并稱重。實(shí)驗(yàn)期間海溫度為18～20 ℃，鹽度24‰～26‰，溶氧保持>7 mg/L。

1.3樣品收集

70 d生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)實(shí)驗(yàn)魚饑餓24 h，分別從每桶抽取5條魚，以1 mL無(wú)菌注射器從尾靜脈取血，室溫自然沉降2 h，然后4 ℃沉降4～6 h，分離血清并保存在-80 ℃冰箱，以備使用。

血清生化指標(biāo)：血清送至湖北武漢長(zhǎng)江水產(chǎn)研究所檢測(cè)，檢測(cè)指標(biāo)包括谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、總膽固醇（TCHO）、總蛋白（TP）、甘油三酯（TGK）。

免疫指標(biāo)：血清超氧化物歧化酶（ superoxide dismutase，SOD ）、丙二醛（ malonaldehyde，MDA） 濃度、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）采用相關(guān)的專用試劑盒測(cè)定（ 南京建成生物工程研究所，南京）。

1.4統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果利用雙因素方差分析（two-way ANOVA），若兩個(gè)因素之間存在交互作用，則利用單因素方差分析考察所有處理組之間的差異，若差異顯著，再進(jìn)行Turkeys 多重比較。如果HK-LP濃度對(duì)結(jié)果有顯著性影響，則利用單因素方差分析和Turkeys多重比較考察各濃度處理組各項(xiàng)指標(biāo)之間的差異；當(dāng)P<0.05時(shí)認(rèn)為存在顯著性差異。所有數(shù)據(jù)都采用SPSS17.0軟件進(jìn)行處理 。

5、誘食劑 （mg kg-1飼料）： 甜菜堿， 2； 硫代甜菜堿， 1； 蘇氨酸， 1； 丙氨酸 0.5； 5′-磷酸肌苷， 0.5.

2結(jié)果

2.1血清生化指標(biāo)

D、P兩因素在血清指標(biāo)ALT、TP、TCHO沒(méi)有交互作用。HK-LP占主要作用，在不考慮基礎(chǔ)飼料因素時(shí)，隨著HK-LP添加濃度的增加，ALT活性顯著降低。添加豆粕后TCHO顯著降低；同全魚粉組，TCHO 隨HK-LP濃度增加呈下降趨勢(shì)，但是作用不顯著（P>0.05）?？偟鞍缀侩S著HK-LP添加濃度增加而顯著增加（P<0.05）。在血清AST、ALP、TGK指標(biāo)方面，D、P兩因素有交互作用（P<0.05）。豆粕45%替代組，隨著HK-LP濃度增加，AST活性顯著降低；全魚粉組，HK-LP三個(gè)處理間無(wú)顯著差異。S45R0組血清AST顯著高于S0R0（P<0.05），但添加HK-LP后S45R7和S45R9與對(duì)照組S0R0無(wú)顯著差異（P>0.05），即添加HK-LP使豆粕替代組的AST活力從顯著高于對(duì)照組變?yōu)榕c對(duì)照組無(wú)顯著差異。在同一飼料號(hào)組，ALP活力隨HK-LP濃度增加而顯著升高（P<005）；同一HK-LP添加濃度下，全魚粉和豆粕無(wú)顯著性差異（P>0.05）。當(dāng)HK-LP添加107時(shí)，全魚粉組和豆粕組的大菱鲆甘油三酯含量都顯著低于不添加組；同一飼料組，大菱鲆甘油三酯水平隨HK-LP添加濃度增加而顯著降低（P<0.05）（見表2）。

2.2血清抗氧化力

雙因素結(jié)果分析顯示SOD極顯著地受到D和P兩個(gè)因素的影響（P<0.05），D和P兩因素對(duì)SOD的影響有交互作用（P<0.05）。在不添加HK-LP時(shí)，豆粕飼料SOD活性顯著低于魚粉飼料。添加HK-LP后，SOD活性顯著升高。在豆粕替代45%魚粉組，SOD活性隨HK-LP添加劑量的增加而顯著升高，而在全魚粉組三個(gè)濃度處理間無(wú)顯著性差異。S45R0這一處理SOD活力極顯著低于FM組，而添加HK-LP后，S45R7活性高于S0R0，說(shuō)明含豆粕飼料添加HK-LP后SOD可以達(dá)到全魚粉的水平。CAT和MDA有著相反的變化趨勢(shì)，但是D、P兩因素沒(méi)有交互作用（P>0.05）。在對(duì)MDA影響上，飼料占主要因素，在不考慮P因素時(shí)，含豆粕飼料顯著提高了MDA含量（P<0.05）；在同一飼料組，MDA在HK-LP三個(gè)處理間沒(méi)有顯著性差異。CAT活力值在14.06～21.95之間，各處理組間均沒(méi)有顯著性差異（P>0.05，見表3）。表3攝食各處理組飼料大菱鲆的免疫酶活性的影響

飼料號(hào)

3討論

血清指標(biāo)是反應(yīng)魚類在遭遇營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境狀況改變時(shí)生理應(yīng)激反應(yīng)和綜合健康狀況的重要指標(biāo)[22]。谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）是廣泛存在于動(dòng)物線粒體中的重要氨基酸轉(zhuǎn)移酶，在機(jī)體蛋白質(zhì)代謝中起著重要的作用[23]。通常作為衡量肝臟功能的指標(biāo)，其分泌到血液里含量的多少取決于肝臟細(xì)胞受損傷的程度[24]。機(jī)體在正常狀態(tài)下AST和ALT存在細(xì)胞內(nèi)部，由于細(xì)胞膜的屏蔽作用不容易逸出，血液中AST和ALT活性極低，但魚體肝臟受到損傷后擴(kuò)散于血液中，血液中AST和ALT活性會(huì)升高。豆粕替代45%魚粉蛋白時(shí)AST和ALT都升高，但是當(dāng)大菱鲆飼喂含HK-LP飼料后，AST和ALT活性均有不同程度的降低，尤其是喂食含豆粕飼料組，添加HK-LP與不添加HK-LP相比，AST有顯著性降低，表明乳酸菌能夠在一定程度上對(duì)肝臟起到保護(hù)作用，這與朱學(xué)芝等[25]（2007）在凡納濱對(duì)蝦上取得的結(jié)果一致。血清中膽固醇和甘油三酯含量的變化情況是反映機(jī)體脂質(zhì)代謝功能正常與否的主要指標(biāo)。含豆粕飼料組大菱鲆血清的膽固醇與全魚粉組相比降低。當(dāng)植物蛋白源替代飼料中魚粉后，虹鱒[26]和舌齒鱸（Dicentrarchuslabrax）[27]血漿中的膽固醇也呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。研究表明，植物產(chǎn)物會(huì)降低陸生動(dòng)物體內(nèi)的膽固醇含量，主要是由植物產(chǎn)物中的類雌激素異黃酮所致[28]。陳京華[29]（2006）報(bào)道，使用豆粕替代魚粉蛋白后在替代的基礎(chǔ)上添加不同梯度的膽固醇飼喂牙鲆，結(jié)果表明豆粕替代魚粉后導(dǎo)致生長(zhǎng)和血漿膽固醇濃度顯著下降，但補(bǔ)充1%的膽固醇顯著提高其生長(zhǎng)和血漿膽固醇濃度，且與魚粉組無(wú)顯著差異。HK-LP組血清中甘油三酯減少，Mahmoud[30]也得出相似結(jié)論，認(rèn)為魚類飼料添加某一濃度的HK-LP會(huì)保持魚類血清低濃度膽固醇和甘油三酯含量。外源乳酸菌可能是通過(guò)調(diào)控機(jī)體的3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-Co A）還原酶及膽固醇7α-水解酶（CYP7A1）的合成和表達(dá)、降低膽固醇的重吸收等方式來(lái)降低機(jī)體膽固醇含量的[31]，也有體外試驗(yàn)結(jié)果表明乳酸菌菌體細(xì)胞通過(guò)吸收、共沉淀、酶解轉(zhuǎn)化等途徑降低介質(zhì)中膽固醇的含量，具體機(jī)制需要進(jìn)一步驗(yàn)證[32]。血清總蛋白（TP）是反映肝臟合成蛋白質(zhì)能力的重要指標(biāo)，該指標(biāo)下降通常表明動(dòng)物機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)[33]。虹鱒飼喂益生菌飼料試驗(yàn)中也得到類似結(jié)論[13-14]。酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（ALP）通常作為刺參免疫指標(biāo)，Yang 等[34]（2015）在海參上的研究，當(dāng)加熱滅活的植物乳酸菌L-137在飼料中添加005 g時(shí)，體液中ACP和AKP活性顯著提升。ALP參與消化外來(lái)蛋白、脂肪和糖類。Cheng[35]（1989）指出酸性磷酸酶是一種典型的溶酶體酶，在免疫反應(yīng)中能夠殺死和消化病原微生物，而堿性磷酸酶是一種多功能的酶，水解磷酸單酯基底，在堿性環(huán)境中擔(dān)當(dāng)磷酸變位酶[36]。Xing等[37]（2002）研究櫛孔扇貝試驗(yàn)中ALP活力高的試驗(yàn)處理組，免疫也強(qiáng)大。本試驗(yàn)含豆粕飼料沒(méi)有對(duì)ALP產(chǎn)生顯著性影響，但是在添加HK-LP后，ALP活性產(chǎn)生顯著性升高，表明HK-LP提高了大菱鲆免疫能力。Panigrahi等[13]（ 2010）指出血脂成分是重要的能源儲(chǔ)備，受到益生菌添加量的影響。

在正常情況下，動(dòng)物機(jī)體內(nèi)會(huì)不斷產(chǎn)生自由基和內(nèi)源性抗自由基的活性物質(zhì)，自由基的生成與機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)之間處于一種良好的動(dòng)態(tài)平衡中。魚類抗氧化指標(biāo)與魚體免疫系統(tǒng)息息相關(guān)。SOD和CAT是生物機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶，發(fā)揮著活性氧化劑清除劑的作用，在清除超氧自由基、過(guò)氧化氫和過(guò)氧化物以及阻止或減少羥基自由基形成等方面發(fā)揮重要作用。MDA是氧自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用，并因此形成的脂質(zhì)過(guò)氧化物，其高低可以間接反應(yīng)機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。在本研究中，含豆粕的飼料飼喂大菱鲆后，SOD活性降低相對(duì)的MDA含量升高，說(shuō)明豆粕替代45%魚粉蛋白會(huì)降低魚類抗氧化能力。類似地，楊嚴(yán)鷗等[38]（2006）研究發(fā)現(xiàn)豆粕替代魚粉蛋白，黃顙魚SOD和溶菌酶活力顯著性降低，即免疫力顯著降低， 而且豆粕添加量越大，免疫力就越低。張錦繡等[39]（2003）也發(fā)現(xiàn)豆粕能使建鯉的腸道發(fā)生病變，使建鯉的免疫力下降。這可能也是由于飼料豆粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子及氨基酸的不平衡等因素， 降低了魚類對(duì)飼料的消化、吸收， 而魚體在得不到良好的營(yíng)養(yǎng)條件時(shí)免疫力會(huì)下降。本研究在飼料中添加合適濃度HK-LP后，發(fā)現(xiàn)含豆粕飼料組抗氧化指標(biāo)能夠達(dá)到全魚粉水平，無(wú)顯著性差異，說(shuō)明HK-LP作為免疫刺激劑，提高了大菱鲆幼魚的抗氧化能力。滅活菌的益生作用已經(jīng)在很多試驗(yàn)中得到證實(shí)。Salinas等[40]（2008）研究指出加熱滅活的德式乳酸桿菌和枯草芽孢桿菌可以提高金頭鯛的補(bǔ)體活性、血清過(guò)氧化物酶活性和吞噬作用。相似，Irianto和Austin[41]（2002）也表示滅活菌可以刺激虹鱒的非特異性免疫。本研究結(jié)果表明HK-LP可以通過(guò)提高大菱鲆幼魚的免疫力，從而提高其對(duì)豆粕蛋白的耐受力。滅活菌的免疫調(diào)節(jié)能力可能是由于某一微生物成分的存在，比如多糖莢膜、肽聚糖和磷脂壁酸，都能夠有效地刺激免疫系統(tǒng)。益生菌或者某一組成部分刺激魚類免疫系統(tǒng)的機(jī)制還不是很明確。Dawood等[30]（2015）在真鯛飼料中添加加熱滅活的植物乳酸桿菌和β-葡聚糖，確定了兩因素在真鯛生長(zhǎng)、消化和非特異性免疫方面有交互作用。很多學(xué)者研究過(guò)益生菌和益生元之間的協(xié)同作用。加熱滅活的糞腸球菌和甘露寡糖配合使用增加了魚類體表粘液分泌量，抵御環(huán)境污染和應(yīng)激源[12]。益生元本質(zhì)是一種不能被動(dòng)物腸道自然消化的碳水化合物，通常與益生菌一起使用，通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)和刺激免疫系統(tǒng)來(lái)促進(jìn)生物長(zhǎng)期健康生長(zhǎng)。

目前尚沒(méi)有明確將滅活細(xì)菌歸于益生菌、免疫增強(qiáng)劑抑或口服疫苗的某一類別。然而使用滅活的細(xì)菌作為飼料添加劑對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖的益處亟待深入研究。

4結(jié)論

綜合分析，豆粕替代45%魚粉蛋白會(huì)降低大菱鲆幼魚的抗氧化能力，損害大菱鲆幼魚的肝臟，但是添加HK-LP能在一定程度上改善大菱鲆幼魚的免疫力，降低谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性，對(duì)肝臟有一定保護(hù)作用，從而提高大菱鲆對(duì)豆粕蛋白的耐受力。

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