尿胰蛋白酶抑制劑對嚴重膿毒癥患者血清TNF-α、IL-8和IL-10水平的影響

戴全喜，王赤華

(1.湖北省紅安縣中醫(yī)醫(yī)院 檢驗科，湖北 黃岡 438400；2.湖北省黃岡市疾病預(yù)防控制中心 檢驗科，湖北 黃岡 438000)

尿胰蛋白酶抑制劑對嚴重膿毒癥患者血清TNF-α、IL-8和IL-10水平的影響

戴全喜1，王赤華2Δ

(1.湖北省紅安縣中醫(yī)醫(yī)院 檢驗科，湖北 黃岡 438400；2.湖北省黃岡市疾病預(yù)防控制中心 檢驗科，湖北 黃岡 438000)

目的 探討尿胰蛋白酶抑制劑對嚴重膿毒癥患者血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-8(IL-8)和白細胞介素-10(IL-10)水平的影響。方法 選取86例重度膿毒癥患者為研究對象，采用隨機數(shù)字表法將其分為實驗組(43例)，對照組(43例)，2組患者均給予對癥治療，實驗組在此基礎(chǔ)上給予尿胰蛋白酶抑制劑靜脈注射，比較2組患者治療前后血清TNF-α、IL-8和IL-10水平的變化。結(jié)果 治療前2組患者血清TNF-α、IL-8和IL-10水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后2組患者TNF-α、IL-8水平均顯著降低(P<0.05)，IL-10水平顯著升高(P<0.05)，實驗組改善水平高于對照組(P<0.05)；實驗組患者總有效率為86.05%顯著高于對照組65.12%(P<0.05)；治療前2組患者的APACHE-II評分與認知功能評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后APACHE-II評分顯著降低(P<0.05)，實驗組顯著低于對照組(P<0.05)，治療后認知功能評分顯著升高(P<0.05)，實驗組顯著高于對照組(P<0.05)； 實驗組不良反應(yīng)發(fā)生率2.33%，顯著低于對照組20.93%(P<0.05)。結(jié)論 尿胰蛋白酶抑制劑可以有效地改善重度膿毒癥患者炎癥因子水平，提高總有效率，降低APACHE-II評分，改善認知功能，減少不良反應(yīng)。

尿胰蛋白酶抑制劑；膿毒癥；腫瘤壞死因子-α；白介素-8；白介素-10

膿毒癥是指由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，臨床上該病的發(fā)病率極高，據(jù)統(tǒng)計[1],全球每年有超過1800萬嚴重膿毒癥病例，我國每年約有75萬例膿毒癥患者，且該數(shù)字正以每年1.5%～8.0%的速度上升。目前，膿毒癥抗感染治療雖然取得較大的進展，但是由于該病的發(fā)病機制尚未完全明確，因此，治療和預(yù)后效果并不完善。有關(guān)資料顯示[2]，機體的炎癥反應(yīng)是嚴重膿毒癥發(fā)展的中心關(guān)鍵環(huán)節(jié)。炎癥因子水平的變化成為膿毒癥病情發(fā)展的關(guān)鍵。研究表明[3]，尿胰蛋白酶抑制劑能夠抑制機體過度炎癥反應(yīng)，具有保護臟器的功能。因此，研究尿胰蛋白酶抑制劑對嚴重膿毒癥患者血清壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素-8(interleukin-8，IL-8)和白介素-10(interleukin-10，IL-10)水平的影響有重要作用。為此，本研究特選取86例膿毒癥患者作進一步研究，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取湖北省紅安縣中醫(yī)醫(yī)院2012年4月～2014年6月收治的86例重度膿毒癥患者為研究對象，采用隨機數(shù)字表法將其分為實驗組(43例)，對照組(43例)，其中對照組男26例，女17例，年齡41～81歲，平均(59.32±6.15)歲，實驗組男24例，女19例，年齡41～85歲，平均(59.45±6.54)歲，2組患者在性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。納入標(biāo)準：①年齡≥35歲；②符合2001年國際膿毒癥會議制定的重度膿毒癥診斷標(biāo)準[4]；③自愿簽訂知情同意書。排除標(biāo)準：①合并自身免疫系統(tǒng)疾??；②伴有急性心肌梗死、急性腦血管疾病；③伴有嚴重惡性腫瘤，預(yù)期生存時間<3個月；④伴有嚴重神經(jīng)系統(tǒng)疾病，無法正常溝通交流。

1.2 方法

1.2.1 治療方法:2組患者均給予針對性原發(fā)病治療，以及充分抗感染和營養(yǎng)支持治療：及時尋找感染源，祛除感染源，或使用抗生素輔助治療，對于出現(xiàn)急性肺損傷患者以及機械輔助通氣以緩解組織缺氧，①哌拉西林鈉他唑巴坦鈉(華北制藥股份有限公司，規(guī)格：20 mL，批準文號：國藥準字H20073378)20 mL溶于250 mL濃度為5%的葡萄糖溶液中靜脈滴注，1次/天；②血必凈注射液(天津紅日藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格：10 mL；批準文號：國藥準字Z20040033)，50 mL溶于100 mL 0.9%NaCl靜脈滴注，于30～40 min完成，2次/天。

在此基礎(chǔ)上實驗組患者給予烏司他丁注射液(廣東天普生化醫(yī)藥有限公司，規(guī)格：1 mL:5萬單位，批準文號：國藥準字H20050505)20萬單位溶于50 mL 0.9%NaCl，使用微量注射泵靜脈持續(xù)注射1 h，2次/天。對照組使用等量的0.9%NaCl代替烏司他丁。

1.2.2 血清TNF-α、IL-8和IL-10檢測方法:2組患者均持續(xù)治療1個月，于治療前后同時抽取外周靜脈血5 mL,靜置待析出血清，后離心，取上層血清2 mL，放置于冰箱內(nèi)保存，待標(biāo)本收集完畢，采用酶聯(lián)免疫吸附測定血清TNF-α、IL-8和IL-10水平，靈敏度分別為20、10、32.5 pg/mL，試劑盒購自深圳晶美生物公司。

1.2.3 觀察指標(biāo):觀察比較2組患者治療前后血清TNF-α、IL-8和IL-10水平變化，觀察2組患者治療效果，以及不良反應(yīng)情況。治療前后對2組患者急性生理與慢性健康(APACHE-II)[5]進行評分，采用調(diào)差問卷的形式對患者的認知功能[6]進行評分，分值越高認知功能越強。療效評定標(biāo)準：①顯效：癥狀和體征消失，血常規(guī)正常；②有效:癥狀和體征好轉(zhuǎn)，血常規(guī)明顯改善；③無效：癥狀和體征未改善，甚至出現(xiàn)惡化現(xiàn)象。總有效率為顯效比例與有效比例之和。

2 結(jié)果

2.1 2組患者治療前后TNF-α、IL-8和IL-10水平變化 治療前2組患者血清TNF-α、IL-8和IL-10水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后2組患者TNF-α、IL-8水平均顯著降低(P<0.05)，IL-10水平顯著升高(P<0.05)，實驗組改善幅度明顯優(yōu)于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者治療前后TNF-α、IL-8和IL-10水平比較

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 2組患者治療前后APACHE-II與認知功能評分比較 治療前2組患者的APACHE-II與認知功能評分差異無統(tǒng)計學(xué)意義，治療后APACHE-II評分顯著降低(P<0.05)，實驗組顯著低于對照組(P<0.05)，治療后認知功能評分顯著升高(P<0.05)，實驗組顯著高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 2組患者治療前后APACHE-II與認知功能評分比較，分)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 2組患者治療效果的比較 實驗組總有效率顯著高于對照組(χ2=4.032，P<0.05)。見表3。

表3 2組患者治療效果的比較[n(%)]

#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.4 2組患者出現(xiàn)不良反應(yīng)情況 實驗組患者出現(xiàn)全身多處皮疹1例，不良反應(yīng)發(fā)生率2.33%，對照組全身多處皮疹2例，惡心3例，頭昏4例，不良反應(yīng)發(fā)生率20.93%，實驗組不良反應(yīng)發(fā)生率顯著低于對照組(P<0.05)。

3 討論

膿毒癥是臨床上較為常見的傳染性疾病，膿毒癥患者主要表現(xiàn)為全身發(fā)熱，心率加快，意識不清，器官功能障礙，嚴重影響患者的正常生活。膿毒癥的根本發(fā)病機制尚未完全明確，有關(guān)研究指出[7-8]，該病的發(fā)病機制主要與細菌內(nèi)毒素、炎癥介素、免疫功能紊亂、腸道細菌移位、凝血功能紊亂有關(guān)。其中炎癥介質(zhì)在膿毒癥的發(fā)生與發(fā)展過程中起著重要作用，膿毒癥中感染因素將會激活機體巨噬細胞系統(tǒng)以及炎癥細胞反應(yīng)，產(chǎn)生并釋放大量炎性介質(zhì)。當(dāng)機體處于膿毒癥狀態(tài)時，內(nèi)源性炎性介質(zhì)相互作用形成網(wǎng)絡(luò)效應(yīng)引起全身系統(tǒng)、器官損傷。目前，對于重度膿毒癥的預(yù)后上缺乏有效手段，研究表明[9-10]，尿胰蛋白酶抑制劑可以有效的緩解膿毒癥的炎癥反應(yīng)。積極探討尿胰蛋白酶抑制劑對膿毒癥患者體內(nèi)TNF-α、IL-8和IL-10水平的影響對于膿毒癥的預(yù)后評估具有指導(dǎo)意義。

烏司他丁是由肝臟分泌的一種具有廣譜蛋白酶抑制作用的糖蛋白，在本研究中使用烏司他丁代表尿胰蛋白酶抑制劑。烏司他丁屬于人體內(nèi)源性抑炎性物質(zhì)，可以有效的抑制膿毒癥患者體內(nèi)過度的炎癥反應(yīng)，減少細胞損傷[11-12]。膿毒癥患者體內(nèi)參與炎癥反應(yīng)的主要炎癥與抗炎因子為TNF-α、IL-8和IL-10，其中TNF-α是一種由巨噬細胞對細菌感染做出反應(yīng)產(chǎn)生的一種細胞因子，是炎癥反應(yīng)中釋放最早的內(nèi)源性炎癥介質(zhì)，當(dāng)機體處于正常狀態(tài)時，TNF-α的水平較低，當(dāng)機體受到損傷，巨噬細胞受到刺激大量產(chǎn)生并釋放TNF-α，促進內(nèi)皮細胞黏附分子的表達，損傷血管內(nèi)皮細胞[13]。IL-8是人體內(nèi)的一種炎癥介質(zhì)，當(dāng)機體處于正常狀態(tài)時，水平較低，當(dāng)機體發(fā)生炎癥反應(yīng)時IL-8被大量釋放，參與炎癥反應(yīng)，刺激中性粒細胞脫顆粒，釋放各種水解酶和氧自由基以及各種蛋白酶，損傷機體組織細胞。烏司他丁作為一種蛋白酶抑制劑可以有效降低TNF-α、IL-8水平，減輕機體炎癥反應(yīng)。膿毒癥患者均伴有多臟器的感染，誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞和巨噬細胞釋放細胞因子，合成和釋放IL-10，導(dǎo)致其水平升高。IL-10是一種多功能的負性調(diào)節(jié)因子，能夠參與免疫細胞、炎癥細胞等多種細胞的生物調(diào)節(jié)，在多種疾病中發(fā)揮了重要作用[14]。IL-10是由單核和T淋巴細胞分泌的一種抗炎癥介質(zhì)，可以抑制其他炎癥的發(fā)生。IL-10大量釋放抑制TNF-α、IL-8的合成與分泌，減輕機體的炎癥反應(yīng)。研究表明[15-16]，尿胰蛋白酶抑制劑可以有效地促進IL-10的合成，升高IL-10的水平，減輕患者的炎癥癥狀。

在本實驗的研究結(jié)果中，治療后實驗組患者TNF-α、IL-8水平顯著降低，且低于對照組，IL-10水平顯著升高，明顯高于對照組(均P<0.05)。與相關(guān)研究的結(jié)論是一致的。分析其原因：尿胰蛋白酶抑制劑通過抑制蛋白酶的活性，從而減少TNF-α、IL-8的釋放，升高IL-10的水平，緩解患者的炎癥反應(yīng)。此外，在本實驗的研究結(jié)果中還顯示，實驗組總有效率為86.05%顯著高于對照組65.12%(P<0.05)，治療后實驗組急性生理與慢性健康評分顯著低于對照組，且有效改善患者的認知功能，減少不良反應(yīng)，提高安全性。

綜上所述，炎癥介質(zhì)在膿毒癥的發(fā)展中起著重要作用，尿胰蛋白酶抑制劑可以有效的控制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，降低TNF-α、IL-8水平，升高IL-10水平，降低死亡率，減少不良反應(yīng)，具有良好的應(yīng)用前景。

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(編校：譚玲)

Effects of urinary trypsin inhibitor on serum levels of TNF-α, IL-8 and IL-10 in patients with severe sepsis

DAI Quan-xi1, WANG Chi-hua2Δ

(1. Department of Clinical Laboratory, Hong’an Hospital of Traditional Chinese Medicine, Huanggang 438400, China; 2. Department of Clinical Laboratory, Center for Disease Control and Prevention in Huanggang, Huanggang 438000, China)

ObjectiveTo explore the effect of urinary trypsin inhibitor on serum levels of tumor necrosis factor-α(TNF-α),interleukin-10(IL-8) and interleukin-10(IL-10) in patients with severe sepsis.Methods86 cases of patients with severe sepsis were devided into experimental group(with 43 cases) and control group(with 43 cases) by the random digital table method. The patients in the two groups were given symptomatic treatment, and the experimental group were given urinary trypsin inhibitor intravenous injection based on it. The changes of serum levels of TNF-α, IL-8 and IL-10 of the two groups before and after treatment were compared.ResultsThere were no differences in serum levels of TNF-α, IL-8 and IL-10 between the two groups before treatment, among which the levels of TNF-α and IL-8 of the two groups after treatment were significantly decreased after treatment(P<0.05), while the levels of IL-10 were significantly increased(P<0.05). The improvement levels of the experimental group were higher than those of the control group(P<0.05). There were no differences in scores of APACHE-II and cognitive function between the two groups before treatment, of which the scores of APACHE-II of the two groups after treatment were significantly decreased(P<0.05), and the score of the experimental group was lower than that of the control group(P<0.05). The scores of cognitive function of the two groups after treatment were significantly increased(P<0.05), of which the experimental group was higher than that of the control group(P<0.05). The incidence rate of adverse reactions in the experimental group was 2.33%,which was significantly lower than that of 20.93% in the control group(P<0.05).ConclusionUrinary trypsin inhibitor can effectively improve the levels of inflammatory factors in patients with severe sepsis, improve the total effective rate, reduce the APACHE-II score, improve cognitive function, and reduce adverse reactions.

urinary trypsin inhibitor; sepsis; tumor necrosis factor-α; interleukin-8; interleukin-10

湖北省科學(xué)技術(shù)廳(EK2014D210006000852)

戴全喜，女，大專，主管技師，研究方向：醫(yī)學(xué)檢驗，E-mail：75024505@qq.com；王赤華，通信作者，女，本科，副主任技師，研究方向：臨床檢驗及檢驗技術(shù)，E-mail：342411644@qq.com。

R459.7

A

10.3969/j.issn.1005-1678.2016.03.48