LXA4, ALDH1及PLGF在子宮內(nèi)膜異位癥患者中的表達(dá)及意義

馬 睿, 劉 潔, 成佳景

(同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,上海 200072)

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·臨床研究·

LXA4, ALDH1及PLGF在子宮內(nèi)膜異位癥患者中的表達(dá)及意義

馬 睿, 劉 潔, 成佳景

(同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,上海 200072)

目的 觀察脂氧素A4(LXA4)、乙醛脫氫酶1(ALDH1)和胎盤生長因子(placental growth factor, PLGF)在子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis, EMT)患者中的表達(dá)及意義。方法 選取2012年1月至2014年1月經(jīng)病理診斷為EMT的患者165例為異位內(nèi)膜組，選擇同期健康婦女30例為健康對(duì)照組。根據(jù)r-AFS將EMT分為Ⅰ期45例、Ⅱ期48例,Ⅲ期37例和Ⅳ期35例,根據(jù)痛經(jīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)分為： 0分53例,1分43例,2分37例和3分32例。觀察異位內(nèi)膜組和正常對(duì)照組的LXA4、ALDH1和PLGF水平變化及EMT患者的LXA4、ALDH1和PLGF水平與EMT分期和痛經(jīng)評(píng)分的關(guān)系。結(jié)果 異位內(nèi)膜組的LXA4水平明顯低于正常對(duì)照組(P<0.01),ALDH1和PLGF水平明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)。隨著EMT分期的升高和痛經(jīng)評(píng)分的增加,LXA4水平明顯降低(P<0.01),而ALDH1和PLGF水平明顯升高(P<0.01)。結(jié)論 LXA4、ALDH1和PLGF的異常表達(dá)與EMT的發(fā)生發(fā)展具有重要聯(lián)系,聯(lián)合檢測對(duì)EMT的早期診斷具有重要意義。

脂氧素A4； 乙醛脫氫酶1； 胎盤生長因子； 子宮內(nèi)膜異位癥

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis, EMT)是一種良性疾病,具有與惡性疾病類似的侵襲、種植和轉(zhuǎn)移能力,其主要臨床表現(xiàn)為腹痛、不孕和腹腔粘連,嚴(yán)重影響患者的生存和生活質(zhì)量,由于病因及機(jī)制未明,導(dǎo)致治療效果不佳,病情遷延不愈[1-2]。EMT形成的學(xué)說中主要有子宮內(nèi)膜種植學(xué)說、炎癥反應(yīng)學(xué)說和最近提出的干細(xì)胞學(xué)說等。胎盤生長因子(placental growth factor, PLGF)是血管內(nèi)皮生長因子成員,與其相應(yīng)受體結(jié)合后,主要誘導(dǎo)血管生成,在種植學(xué)說中具有重要作用。免疫脂氧素A4(lipoxin A4, LXA4)對(duì)多種炎癥介質(zhì)和炎性細(xì)胞具有顯著的負(fù)調(diào)節(jié)作用,被稱為炎癥反應(yīng)的內(nèi)在“剎車信號(hào)”,在EMT的炎癥學(xué)說中具有重要的影響。乙醛脫氫酶1(aldehyde dehydro-genase 1, ALDH1)是乙醛氧化乙酸的細(xì)胞溶質(zhì)酶,是正常細(xì)胞和干細(xì)胞的共同標(biāo)記物。目前，LXA4、ALDH1和PLGF聯(lián)合檢測是否能作為EMT早期診斷指標(biāo)尚不清楚。本研究采用檢測EMT外周血中LXA4、ALDH1和PLGF水平，觀察其對(duì)EMT診斷和治療的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月至2014年1月在同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院經(jīng)病理診斷為EMT的患者165例,為異位內(nèi)膜組,平均年齡(34.83±4.38)歲,平均孕次(2.26±0.76)次,根據(jù)美國生殖協(xié)會(huì)分期標(biāo)準(zhǔn)(r-AFS)將EMT分為I期45例、Ⅱ期48例,Ⅲ期37例和Ⅳ期35例,根據(jù)痛經(jīng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)分為： 0分53例,1分43例,2分37例和3分32例。選擇同期在我院健康體檢的健康婦女30例,為正常對(duì)照組,均為放置宮內(nèi)節(jié)育器前刮取子宮內(nèi)膜,經(jīng)病理證實(shí)為正常子宮內(nèi)膜,年齡24～50歲，均年齡(34.29±3.49)歲,孕次為1～4次，平均孕次(2.32±0.74)次。兩組3個(gè)月內(nèi)均未經(jīng)激素治療；無高血壓,糖尿病和冠心病等慢性疾病；無肝炎,結(jié)核和肺炎等急慢性疾??；無婦科惡性腫瘤和自身免疫性疾??；均知情同意。兩組年齡、孕次等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 血液標(biāo)本的采集 所有的患者在入院第1天予以抽取空腹血 3ml,在常溫下靜置 1h,離心半徑8cm,3000r/min，離心20min后,取其上清液,在 -80℃ 條件下保存。用ELISA檢測LXA4、ALDH1和PLGF水平。采用Elx800型全自動(dòng)酶標(biāo)儀,試劑盒購自R&D公司,嚴(yán)格按照試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行操作。

1.2.2 痛經(jīng)評(píng)分評(píng)定 痛經(jīng)的評(píng)分嚴(yán)格按照參考文獻(xiàn)進(jìn)行評(píng)定,無痛經(jīng),無需服藥為0分；需要服藥,痛經(jīng)不影響正常工作和生活者為1分；痛經(jīng)服藥后緩解,對(duì)日常工作有影響為2分,痛經(jīng)經(jīng)服藥后,仍嚴(yán)重影響工作和生活者為3分。

1.2.3 觀察指標(biāo) 觀察異位內(nèi)膜組和正常對(duì)照組的LXA4、ALDH1和PLGF水平變化,及EMT患者的LXA4、ALDH1和PLGF水平與EMT分期和痛經(jīng)評(píng)分的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組LXA4,ALDH1和PLGF水平的變化

異位內(nèi)膜組的LXA4水平明顯低于正常對(duì)照組(P<0.01),ALDH1和PLGF水平明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)，見表1。

表1 各組LXA4,ALDH1和PLGF水平的變化

2.2 不同EMT分期患者LXA4、ALDH1和PLGF水平的變化

隨著EMT分期的升高,LXA4水平明顯降低(P<0.01),而ALDH1和PLGF水平明顯升高(P<0.01)，見表2。

表2 不同EMT分期患者LXA4、ALDH1和PLGF水平的變化

與Ⅰ期比較,aP<0.01；與Ⅱ期比較,bP<0.01；與Ⅲ期比較,cP<0.01

2.3 不同痛經(jīng)程度EMT患者LXA4、ALDH1和PLGF水平的變化

隨著痛經(jīng)程度增加,LXA4水平明顯降低(P<0.01),而ALDH1和PLGF水平明顯升高(P<0.01)，見表3。

表3 EMT患者不同痛經(jīng)程度患者LXA4、

與0分比較,aP<0.01；與1分比較,bP<0.01；與2分比較,cP<0.01

3 討 論

本研究表明，EMT患者中血清LXA4水平明顯低于健康對(duì)照組,這可能與EMT患者體內(nèi)過度的炎癥反應(yīng),導(dǎo)致機(jī)體的LXA4合成障礙,致使EMT患者機(jī)體的炎癥反應(yīng)失調(diào),引起機(jī)體的EMT疾病的發(fā)生發(fā)展。LXA4是一種炎癥消退介質(zhì),具有抗炎和促進(jìn)炎癥消退的作用,被認(rèn)為內(nèi)源性介質(zhì),主要通過跨膜途徑,經(jīng)酶氧化花生四烯酸催化合成,其功能具有促進(jìn)炎癥消退,抗炎,抑制組織增生,抗纖維化的作用,同時(shí)其還有減少炎癥引發(fā)的痛覺和水腫的作用[3]。研究[4]表明，EMT的發(fā)病機(jī)制與炎癥反應(yīng)和血管生長具有密切關(guān)系,LXA4在EMT的發(fā)生發(fā)展中起到關(guān)鍵性作用。有研究發(fā)現(xiàn)阻斷5-脂氧化酶可以減少花生四烯酸生成LXA4水平,證實(shí)5-脂氧化酶是生成5-脂氧化酶的關(guān)鍵酶,至于其是否參與EMT還需進(jìn)一步研究。本研究表明，隨著EMT分期和疼痛評(píng)分的增加，LXA4水平出現(xiàn)明顯降低,說明EMT患者隨著疾病分期和痛經(jīng)評(píng)分的增加,患者的炎癥反應(yīng)更為嚴(yán)重,機(jī)體的LXA4水平明顯降低,導(dǎo)致EMT疾病的發(fā)生發(fā)展,其究竟如何引起EMT疾病的發(fā)生發(fā)展還需進(jìn)一步研究。炎癥反應(yīng)和炎癥介質(zhì)在EMT的炎癥學(xué)說中具有重要作用,故LXA4可能成為早期診斷EMT的有用指標(biāo)。

PLGF是血管內(nèi)皮生長因子的家族成員之一,最早從胎盤中分離純化得到,有3種不同蛋白亞型，分別為PLGF-1、PLGF-2和PLGF-3,是一種表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面跨膜酪氨酸激酶受體,含有7個(gè)免疫球蛋白細(xì)胞外區(qū)和1個(gè)激酶插入序列[5]。PLGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞受體結(jié)合后,通過介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的作用,增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞因子的作用,促進(jìn)血管的形成。在EMT的種植學(xué)說中，血管形成具有重要的作用。本研究表明，EMT患者的PLGF水平明顯高于健康對(duì)照組,隨著EMT病情的加重和痛經(jīng)評(píng)分的加重,PLGF水平也逐漸增加,與文獻(xiàn)[6]報(bào)道的結(jié)果一致,這可能與EMT患者體內(nèi)異位病灶的多種血管生長因子較正常婦女出現(xiàn)明顯增高有關(guān)。PLGF具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長,可以促進(jìn)新生血管的形成,導(dǎo)致異位腺體存活和進(jìn)一步發(fā)展。PLGF具有促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞間、內(nèi)皮細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞的黏附,使血管的通透性明顯增加,具有明顯相關(guān)性[7]。本研究推測異位內(nèi)膜中高表達(dá)PLGF可以通過異位內(nèi)膜腺體的新生血管的形成,為異位內(nèi)膜提供充分的血供及前提條件,因此PLGF可能成為早期診斷EMT的有用指標(biāo)。

ALDH1蛋白在體內(nèi)的主要作用為乙醛氧化的解毒酶,參與肝臟對(duì)酒精和體內(nèi)烷化劑的解毒。ALDH1是正常組織干細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞生長、分化的必須物質(zhì),可以作為正常組織干細(xì)胞的標(biāo)志物之一[8]。根據(jù)干細(xì)胞的理論,EMT病灶存在干細(xì)胞,具有自我增殖和分化的能力,是EMT病灶持續(xù)存活和不斷發(fā)展的根源。研究[9-10]已經(jīng)從卵巢子宮內(nèi)膜分離出具有自我復(fù)制和多分化功能的干細(xì)胞,為EMT疾病干細(xì)胞學(xué)說提供了依據(jù)。本研究表明，EMT組的ALDH1水平明顯高于健康對(duì)照組。國內(nèi)研究表明，EMT內(nèi)膜與非EMT的內(nèi)膜在侵襲、轉(zhuǎn)移和血管形成方面存在明顯的差異,同樣,EMT血清中的ALDH1水平明顯高于健康體檢的婦女,顯示這些差異特質(zhì)對(duì)EMT的發(fā)生起到?jīng)Q定性作用。隨著EMT嚴(yán)重程度的增加和痛經(jīng)評(píng)分的增加,機(jī)體的ALDH1水平出現(xiàn)明顯的增加,故異常表達(dá)的ALDH1可能導(dǎo)致干細(xì)胞功能的異常,認(rèn)為ALDH1可能成為EMT無創(chuàng)早期診斷的新指標(biāo),對(duì)于監(jiān)測EMT的發(fā)生發(fā)展和嚴(yán)重程度具有重要意義。

通過檢測分別與種植學(xué)說、炎癥學(xué)說和干細(xì)胞學(xué)說相關(guān)性的PLGF、LXA4和ALDH1水平,發(fā)現(xiàn)其都與EMT疾病的發(fā)生發(fā)展具有明顯聯(lián)系,說明EMT的各學(xué)說之間存在一定的聯(lián)系,聯(lián)合檢測血清PLGF,LXA4和ALDH1水平對(duì)EMT的早期診斷具有重要意義。

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Serum LXA4, ALDH1and PLGF levels in patients with endometriosis and their significance

MARui,LIUJie,CHENGJia-jing

(Dept. of Obstetrics and Gynecology, Tenth People’s Hospital, Tongji University, Shanghai 200072, China)

Objective To detect the serum levels of lipoxin A4(LXA4), aldehyde dehydrogenase 1 (ALDH1) and placental growth factor (PLGF) in patients with endometriosis (EMT). Methods One hundred and sixty five patients with EMT (EMT group) and 30 health women (control group) were enrolled in the study from January 2012 to January 2014. Forty five patients were classified as stage Ⅰ, 48 as stageⅡ, 37 as stage Ⅲ and 35 as stage Ⅳ, according to the American Association of Reproductive staging (r-AFS). Fifty three patients were classified as point 0,43 as point 1,37 as point 2 and 32 as 3, according to dysmenorrhea score. Serum levels of LXA4, ALDH1and PLGF were measured with ELISA method in endometriosis group and control group, and their relationship with EMT stage and dysmenorrhea score was analyzed. Results The serum levels of LXA4in EMT group were significantly lower and the levels of ALDH1and PLGF in EMT group were significantly higher than those in control group (allP<0.01). The levels of LXA4decreased and the levels of ALDH1and PLGF increased as the EMT stage and dysmenorrhea score increasing (P<0.01). Conclusion The results indicate that LXA4, ALDH1and PLGF may be involved in the development and advancement in EMT, and the detection of these markers might be of value in early diagnosis of EMT.

lipoxin A4; aldehyde dehydrogenase 1; placental growth factor; endometriosis

10.16118/j.1008-0392.2016.01.016

2015-08-31

馬 睿(1982—),女,主治醫(yī)師,碩士.E-mail: 27237293@qq.com

R 711.71

A

1008-0392(2016)01-0077-04