柿蒂提取物抑制氯化鋇誘導的大鼠快速室性心動過速的研究

張治平　林筍鎂　馬超

柿蒂提取物抑制氯化鋇誘導的大鼠快速室性心動過速的研究

張治平林筍鎂馬超

325800 蒼南，蒼南縣人民醫(yī)院

【摘要】目的觀察柿蒂提取物對快速性室性心動過速的抑制作用。方法柿蒂經(jīng)煮沸提取(柿蒂水提液)，并經(jīng)正丁醇萃取分成正丁醇部分(提取物1)和殘余部分(提取物2)。采用氯化鋇誘導大鼠快速性心律失常模型，觀察上述提取物療效并與利多卡因進行比較。結果柿蒂水提液對氯化鋇誘導的室性心動過速有微弱的抑制作用，持續(xù)時間短；其提取物1可顯著的抑制快速性室性心動過速，而提取物2則無作用，提取物1起作用與利多卡因大致相當，均能在給藥15 min后抑制室性心動過速。結論柿蒂的正丁醇提取物具有明顯的抗室性心動過速的作用。

【關鍵詞】柿蒂；快速性室性心動過速；氯化鋇；提取物

柿蒂屬于理氣藥，為止呃要藥，凡是胃氣上逆所致呃逆均可應用，歷代經(jīng)典方中有柿蒂湯(《濟生方》)、丁香柿蒂湯(《癥因脈治》)?，F(xiàn)代大量的文獻也證實柿蒂顯著的抑制呃逆的功效、包括對腫瘤化療藥物、腦中風等原因引起的頑固性呃逆的治療作用，且療效較好[1]。20世紀70和80年代發(fā)現(xiàn)柿蒂水提液具有抗心律失常、鎮(zhèn)靜作用以及抗驚厥的作用。早期的研究表明0.5%的柿蒂水提液具有明顯的抗室性快速性心律失常的作用，包括對抗氯仿、氯化鋇、哇巴因以及烏頭堿誘發(fā)的室性心律失常[2]。但是,是何種成分和如何發(fā)揮抗心律失常作用，目前均不太明了。為此，我們對柿蒂抗心律失常的有效成分進行初步研究。

材料與方法

一、提取柿蒂的方法

柿蒂為市售藥物，正丁醇、氯化鋇均為分析純，購自溫州市金山試劑公司。氯化鋇臨用前配置。稱取100 g柿蒂，將其粉碎成粉，稱取10.5 g，加入雙蒸水50 ml，煮沸加熱15 min，冷卻后取上清液；重復上述過程2次，將3次所得的上清液合并(記為：水提液)，定容至150 ml。吸取50 ml水提液，加入20 ml正丁醇，震蕩24 h，靜止分層，吸取上清液，同樣方法萃取4次，將所得上清液合并，氮氣吹干，加入雙蒸水調至相當于生藥3.5 g/ml(記為：提取物1)備用。另將萃取后殘留液體濃縮成水溶液3.5 g/ml(記為：提取物2)。

二、快速性心律失常大鼠模型的制備

采用經(jīng)典的氯化鋇誘導方法制備快速性心律失常大鼠模型。200～250 g雄性SD大鼠30只。大鼠用水合氯醛按350 mg/kg體質量腹腔注射麻醉，固定于加熱板上(37℃)，將心電圖電極插入大鼠的皮下，連接心電圖機，設定走速為25 mm/s，電壓幅度為1 mV。按0.1 ml/100 g舌下靜脈注射生理鹽水作為對照描記心電圖。5 min后，按0.1 ml/100 g舌下注射0.75%的氯化鋇溶液，誘導快速性室性心動過速模型，并持續(xù)描記心電圖，以反復出現(xiàn)陣發(fā)性或持續(xù)性心動過速型、或出現(xiàn)不典型心電圖作為制模成功。將制備成功的快速性心律失常模型大鼠隨機分為柿蒂水提液組、柿蒂提取物1組、柿蒂提取物2組、利多卡因對照組共4組，每組5只。

三、給藥干預及心電圖數(shù)據(jù)提取

快速性室性心動過速模型成功后描記5 min，同樣按照0.1 ml/100 g，柿蒂水提液、提取物1、提取物2或利多卡因(20 mg/kg)舌下靜脈注射。注射后描記心電圖15 min，在5、10和15 min時分別提取5 s范圍內的心電圖數(shù)據(jù)的平均值，加以統(tǒng)計。組間比較將心電圖各項指標數(shù)據(jù)除以自身的正常值，轉換成變化百分率，然后比較各組間差異。

四、 統(tǒng)計學處理

結果

一、柿蒂水提液對氯化鋇誘導大鼠心律失常的影響

柿蒂水提液對正常大鼠的心律并無太大的影響。柿蒂水提液(相當于生藥3.5 g/kg)對大鼠氯化鋇引起的心律失常具有輕微的拮抗作用(圖1，表1)，抑制時間并不持久，不能有效抑制氯化鋇誘導的快速性心律失常，同時增加劑量時出現(xiàn)了中樞抑制并死亡。

表1　　　柿蒂水提液對氯化鋇誘導

注：采用自身對照(n=5)，與生理鹽水比較，aP<0.01；與氯化鋇比較,bP<0.01

二、柿蒂提取物和利多卡因對氯化鋇引起大鼠心律失常的影響比較

柿蒂提取物1(相當于生藥3.5 g/kg)有明顯的抗氯化鋇所致大鼠快速性室性心律失常的作用；然而柿蒂提取物2(相當于生藥3.5 g/kg)則無明顯的抗心律失常的作用；利多卡因給藥后在5 min內即能顯著抑制室性心動過速，使之恢復正常(表2)。柿蒂提取物1的效果與利多卡因的效果相當，均能在給藥15 min后抑制室性心動過速(見圖2)。

圖1　柿蒂水提液對氯化鋇所致SD大鼠室性快速性心律失常的影響

表2　　　各組對氯化鋇引起大鼠心律失常的影響±s)

注：采用自身對照(n=5)，與生理鹽水比較，aP<0.05，bP<0.01；與氯化鋇比較,cP<0.05，dP<0.01

圖2　柿蒂提取物1和提取物2與利多卡因抗心律失常作用比較

三、柿蒂提取物1與利多卡因對氯化鋇所致大鼠心律失常作用的比較

柿蒂提取物1抗心律失常的主要指標經(jīng)百分比轉換后，進行組間比較。結果顯示，利多卡因和柿蒂取物1組大鼠注射氯化鋇后造成的快速性心率失常并無明顯差別；利多卡因和柿蒂提取物1均能降低心率和R波波幅。此劑量下柿蒂提取物1的作用與20 mg/kg的利多卡因的抗心律失常作用相當，對室性心動過速的高電壓有更明顯的抑制作用(表3)。

討論

柿蒂的多種成分包括硬脂酸、軟脂酸、琥珀酸、香草酸、山奈酚、三葉豆苷、金絲桃(糖)苷、β-谷固醇、β-谷固醇-β-D-葡萄糖苷、木栓酮、齊墩果酸、烏蘇酸和19β- 羥基烏蘇酸、19α,24-二羥基烏蘇酸、齊墩果酸、24-羥基齊墩果酸、熊果酸、沒食子酸、沒食子酸乙酯、槲皮素、白樺酸和馬尾柴酸[3-5]。

表3　　　柿蒂提取物1與利多卡因抗心律失常作用的比較

注：氯化鋇1是提取物1的模型對照(n=5)；氯化鋇2是利多卡因的模型對照(n=5)；與利多卡因比較,aP<0.05

本文對柿蒂的水提液的治療效果進行研究并與利多卡因的效果進行比較，發(fā)現(xiàn)柿蒂的水提液對氯化鋇誘導的室性心律失常有明顯的治療作用，水提液經(jīng)正丁醇提取物1含有明顯治療效果的成分。目前有文獻報道槲皮素具有抗心律失常的作用，其本身也具有致心律失常的作用[6-9]。但是槲皮素不溶于水，溶于冰醋酸。如前述我們的發(fā)現(xiàn)柿蒂抗心律失常的有效部分存在于其水提取液中，提示槲皮素不可能是柿蒂抗心律失常的主要部分。因此，推測柿蒂提取物可能存在另外一種或幾種抗心律失常成分。

結合本文和以往研究結果，由于氯化鋇抑制鈉-鉀泵導致細胞內高鈉低鉀，通過鈉-鈣交換導致細胞內鈣增加，于是誘發(fā)振蕩性后電位使自律性增加。柿蒂提取物1對之有效抑制，提示柿蒂抗心律失常有效部分可能與細胞內外鈣平衡或鈉平衡有關，具體機理有待進一步研究。

柿蒂水提液提取物1(相當于生藥3.5 g/kg)有明顯的抗氯化鋇所致大鼠快速性室性心律失常的作用，然而柿蒂水提液提取物2(相當于生藥3.5 g/kg)則無明顯的抗心律失常的作用，但抗心律失常時并未出現(xiàn)中樞抑制或呼吸抑制作用，提示柿蒂的抗心律失常的有效部分在水提液正丁醇提取部分的水溶液中而非沉淀部分，并且柿蒂的抗心律失常成分與中樞抑制性成分不在同一部分。

綜上所述，柿蒂的提取物對室性心律失常有明顯的治療作用，但具體成份不清楚，有待進一步研究。

參考文獻

[1]王建濤, 胡廣春, 盛英科，呂春光. 承氣柿蒂湯治療重型顱腦損傷后頑固性呃逆. 中國中西醫(yī)結合外科雜志，2006，12(5)：501.

[2]張陽，沈麗娟，王長謙，劉金保，楊光筠，李曉紅，葉興麗，史純蓮，李國輝. 鹽酸戊乙奎醚治療烏頭堿中毒所致心律失常的體會. 新醫(yī)學, 2011, 42(9)：601-602.

[3]Matsuura S, Iinuma M. Studies on the constituents of the useful plants. IV. The constituents of calyx of Diospyros kaki. Yakugaku Zasshi，1977，97(4)：452-155.

[4]張曉凱. 柿蒂活性成分的研究. 湖北中醫(yī)學院，2008.

[5]潘旭, 具敬娥, 賈嫻, 李范鐘. 柿蒂化學成分的分離與鑒定. 沈陽藥科大學學報，2008，25 (5)：356-359.

[6]謝金東, 涂春香, 陳繼承, 張文杰. 丁香柿蒂湯及其拆方對小鼠離體小腸收縮活動的影響. 福建中醫(yī)學院學報，2010，20(4)：36-38.

[7]裴天仙, 徐長慶, 李濱, 張卓然，高秀香，于靖，李鴻珠，楊寶峰. 槲皮素對阿霉素致小鼠心肌損傷的保護作用及其機制. 藥學學報，2007，42 (10)：1029-1033.

[8]謝梅林, 顧振綸, 錢曾年. 槲皮素對在體大鼠心肌缺血再灌性心律失常的保護作用. 中國藥理學與毒理學雜志，1991，5(2)：90-92.

[9]毛棣華，肖東. 槲皮素對大鼠再灌性心律失常的保護作用及超微結構研究. 蘇州醫(yī)學院學報，1994，14(6):483-486.

(本文編輯：楊江瑜)

Research on persimmon extracts inhibit rapid ventricular arrhythmia in rats induced by barium chloride

ZhangZhiping,LinSunmei,MaChao.

ThePeople’sHospitalofCangnan,Cangnan325800，China

【Abstract】ObjectiveTo observe the function of persimmon extracts on inhibition of rapid ventricular tachycardia. MethodsKaki extracted after boiling (water extract of persimmon), and was divided into n-butanol part (extract 1) and residual part (extract 2)through n-butanol extraction. The model of barium chloride inducing rapid arrhythmia in rats was adopted to observe the effect of extract as mention before and to compare with lidocaine. ResultsThe water extract of persimmon had weak inhibition for ventricular tachycardia that were induced by barium chloride and the duration was short.The extract 1 significantly inhibited rapid ventricular tachycardia, and extract 2 had no effect. The function of extract 1 was roughly equivalent with lidocaine, and all of them could inhibit the rapid ventricular tachycardia after giving medicines 15 mins. ConclusionsN-butyl alcohol extract of persimmon calyx has obvious function to resist the rapid ventricular tachycardia.

【Key words】Persimmon calyx; Rapid ventricular tachycardia; Barium chloride; Extract

DOI:10.3969/j.issn.0253-9802.2016.06.005

(收稿日期：2015-11-06)

·基礎研究論著·