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      兩種方法對乙型病毒性肝炎血清標(biāo)志物檢測結(jié)果分析

      2016-06-27 05:56:05梁坤鈴葉景聯(lián)
      國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志 2016年11期
      關(guān)鍵詞:定性定量

      林 城,梁坤鈴,葉景聯(lián)

      (1.廣東省東莞市石排醫(yī)院檢驗科 523327;2.廣東省東莞市石碣醫(yī)院檢驗科 523290)

      ·臨床研究·

      兩種方法對乙型病毒性肝炎血清標(biāo)志物檢測結(jié)果分析

      林城1,梁坤鈴2,葉景聯(lián)2

      (1.廣東省東莞市石排醫(yī)院檢驗科523327;2.廣東省東莞市石碣醫(yī)院檢驗科523290)

      摘要:目的比較乙型病毒性肝炎(以下簡稱乙肝)兩對半(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe 、抗-HBc)定量與定性檢測的差異及臨床意義。方法采用化學(xué)發(fā)光法(CLIA)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)對197份臨床標(biāo)本同時檢測,并進行對比分析。另對2 344份臨床標(biāo)本進行CLIA檢測結(jié)果分析。結(jié)果兩種方法檢測結(jié)果經(jīng)配對χ2檢驗差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。2 344份臨床標(biāo)本中抗-HBs≥10 mU/mL有1 264例,>100 mU/mL有843例,占抗-HBs>10 mU/mL比例為66.59%。結(jié)論定性的ELISA成本低廉,操作簡單,基本可以滿足臨床的預(yù)防性篩查,而定量CLIA具有靈敏、特異、定量等優(yōu)點,有利于指導(dǎo)臨床對HBV感染治療方案的選擇、療效監(jiān)測及為保證機體有足夠抵抗HBV感染能力作出判定。

      關(guān)鍵詞:乙肝兩對半;定量;定性

      乙型肝炎病毒(HBV)是一種危害人類健康的常見病毒,能誘發(fā)肝臟疾病,從而對感染者及其家庭造成不良影響。乙型病毒性肝炎(以下簡稱乙肝)的預(yù)防、診斷與治療等很大程度依賴乙肝兩對半的檢測,目前實驗室常用的檢測方法為ELISA,該方法成本低廉能滿足一般臨床需求;而化學(xué)發(fā)光法(CLIA)靈敏度較高可預(yù)防漏檢,且定量測定能早期診斷乙肝,并為臨床提供動態(tài)的數(shù)據(jù),具有良好的應(yīng)用價值。本研究采用CLIA與ELISA兩種方法同時檢測197份臨床標(biāo)本,并對結(jié)果進行對比分析,另外也分析了CLIA檢測的2 344份臨床標(biāo)本結(jié)果,現(xiàn)報道如下。

      1材料與方法

      1.1標(biāo)本來源隨機抽取來自東莞市石排醫(yī)院門診與住院部197份共乙肝兩對半測定的標(biāo)本,同時采用CLIA和ELISA分別做定量和定性測定。另選取2015年1~10月來東莞市石排醫(yī)院門診與住院部進行CLIA定量檢測的標(biāo)本2 344份。所有標(biāo)本均采集靜脈血,與當(dāng)天分離血清進行檢測。

      1.2儀器與試劑采用鄭州安圖Lumo CLIA化學(xué)發(fā)光檢測儀;定性ELISA采用THERMO MULTISKAN熱電 MK3酶標(biāo)儀。均用e-Lisa全自動加樣儀、深圳匯松PW-960全自動酶標(biāo)洗板機。鄭州安圖生物工程股份有限公司生產(chǎn)的HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc定量檢測試劑盒;中山生物工程有限公司生產(chǎn)的ELISA定性試劑盒。

      1.3方法HBV血清學(xué)標(biāo)志物定量檢測采用CLIA,定性檢測采用ELISA,兩種方法均嚴(yán)格按照試劑盒說明書要求執(zhí)行,各自配以質(zhì)控品和臨床標(biāo)本進行檢測。

      1.4判定方法ELISA定性結(jié)果參照試劑說明書中的判定方法,CLIA檢測的不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果:HBsAg>0.05 U/mL判為陽性,反之為陰性;抗-HBs≥10 mU/mL判為陽性,反之為陰性;HBeAg、抗-HBe和抗-HBc參照試劑說明書中的判定方法。

      1.5表述方法以1、2、3、4、5分別代表乙肝兩對半中HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe 、抗-HBc,并以陽性項目的序號為該模式的代碼,如檢測結(jié)果為HBsAg陰性、抗-HBs陽性、HBeAg陰性、抗-HBe陽性、抗-HBc陽性,則該模式代碼為“2、4、5”,依此類推。

      1.6統(tǒng)計學(xué)處理兩種方法的結(jié)果用配對以率表示,采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

      2結(jié)果

      2.1乙肝兩對半5項采用兩種方法檢測的陽性結(jié)果比對見表1。采用CLIA與ELISA對197例臨床標(biāo)本同時檢測,兩種方法的結(jié)果經(jīng)配對χ2檢驗,HBsAgχ2=0.50,P>0.05;抗-HBsχ2=2.25,P>0.05;HBeAgχ2=0.00,P>0.05;抗-HBeχ2=0.50,P>0.05;抗-HBcχ2=1.33,P>0.05,5項指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。兩種方法的符合率最低都超過95%。

      表1  乙肝兩對半5項采用兩種方法檢測的陽性

      2.2CLIA檢測2 344份標(biāo)本定量檢測結(jié)果的模式及抗-HBs>100 mU/mL的構(gòu)成見表2。

      表2  2 344份抗-HBs>100 mU/mL檢測結(jié)果的

      注:1代表HBsAg,2代表抗-HBs,3代表HBeAg,4代表抗-HBe,5代表抗-HBc;-表示無數(shù)據(jù)。

      3討論

      本研究結(jié)果顯示,CLIA與ELISA對乙肝兩對半5項檢測項目的符合率都達95%以上,與文獻[1-3]報道一致。經(jīng)配對χ2檢驗,5項指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),由此說明兩種方法都能滿足對乙肝兩對半5項檢測項目的檢測要求。因此在日常工作中,若對人群進行預(yù)防性篩查,選用成本較低廉、操作簡單、適合大批量測定的ELISA即可。

      定性ELISA靈敏度不如CLIA,易造成漏檢,且只能提供“陰”或“陽”的結(jié)果,無法達到HBV感染動態(tài)觀察和反映感染者體內(nèi)各檢測項目具體濃度的目的。而CLIA是在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的基礎(chǔ)上與免疫反應(yīng)相結(jié)合建立的新技術(shù)。它不僅具有免疫反應(yīng)的特異性,而且具有化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的高靈敏度,能較準(zhǔn)確地提供各HBV標(biāo)志物的濃度變化,間接反映體內(nèi)HBV復(fù)制的活躍程度,是評價HBV感染后病情轉(zhuǎn)歸的重要依據(jù),也是抗病毒治療的療效考核指標(biāo)之一[4]。我國乙肝感染者數(shù)量龐大,其中存在一定數(shù)量的低濃度感染者和感染早期的帶毒者,可能會由于試驗方法的低靈敏度而漏檢,造成HBV通過手術(shù)、輸血和母嬰傳播等途徑傳播,因此低濃度HbsAg的出現(xiàn)可作為乙肝的早期診斷。本文對比的197份標(biāo)本中有2份HBsAg低濃度標(biāo)本,ELISA檢測為陰性,CLIA為陽性,濃度為0.25~0.40 U/mL,CLIA靈敏度較高,可及時檢測出低濃度HBsAg,縮短窗口期,及早發(fā)現(xiàn)HBV感染,為判斷病情提供依據(jù)[5-6]。

      HBV感染引起的肝炎是我國最突出的公共衛(wèi)生問題之一,兒童青少年的乙肝免疫預(yù)防更是國家的重點項目之一。隨著國家乙肝疫苗的免費接種推行,絕大多數(shù)新生兒自出生時就開始接種乙肝疫苗,但由于機體的免疫差異,盡管接種了乙肝疫苗,也不一定能產(chǎn)生可以抵抗HBV入侵的“中和”抗體???HBs的存在提示機體對HBV感染有免疫力,其持續(xù)存在意味著HBV的清除和乙肝的恢復(fù),是唯一指示乙肝疫苗免疫效果的血清學(xué)標(biāo)志物,滴度越高免疫力越強,持續(xù)時間也越長。關(guān)于抗-HBs與保護力的關(guān)系,世界標(biāo)準(zhǔn)未完全統(tǒng)一。目前普遍認(rèn)為,普通人群抗-HBs≥10 mU/mL有保護作用,但機體對HBV的免疫力較弱,荷蘭、比利時和瑞士等建議抗-HBs在10~100 mU/mL時需加強免疫[7]。高危人群,如HBV感染者家屬和醫(yī)務(wù)工作者,抗-HBs>100 mU/mL,才具有足夠的保護作用[8]。肝移植、血液透析及免疫抑制等患者定期檢測抗-HBs濃度,每次檢測值抗-HBs>100 mU/mL為宜[9]。因此通過測定抗-HBs的濃度變化,可對機體免疫狀況進行評估,為注射乙肝疫苗提供指導(dǎo)。本研究結(jié)果中抗-HBs≥10 mU/mL有1 264例,占53.92%(1 264/2 344),其中抗-HBs>100 mU/mL有843例,占抗-HBs≥10 mU/mL的 66.59%,由此表明有40%以上的受檢者抗-HBs濃度為10~100 mU/mL,對HBV病毒抵抗力較弱,需要加強疫苗接種,而且疫苗的效果因人而異???HBs濃度可能逐年下降,甚至消失,故有必要定期監(jiān)測抗-HBs濃度,保證機體有足夠抵抗HBV感染的能力[10]。

      HBV是專一的嗜肝病毒,它是威脅人類健康最為嚴(yán)重的傳染病之一,乙肝感染慢性化與肝硬化、肝癌的果因關(guān)系密切,所以對于乙肝的防治,需要不斷提高試驗的檢測靈敏度和篩查能力,以免漏檢,同時應(yīng)對乙肝疫苗的效果進行監(jiān)測,故定量測定乙肝標(biāo)志物濃度,可為臨床提供更準(zhǔn)確的依據(jù),也讓患者對病情更清楚了解,從而提高治療的信心,同時也增加對醫(yī)生信任感,從而改善醫(yī)患關(guān)系,促進疾病治療。

      參考文獻

      [1]關(guān)聳慧,劉偉.乙肝兩對半定量檢測結(jié)果的臨床意義[J].醫(yī)學(xué)信息,2014,27(12):146-147.

      [2]馬紅霞,周運恒,楊藺,等.ELISA法和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測血清HBsAg結(jié)果比較分析[J].檢驗醫(yī)學(xué),2010,25(6):473-474.

      [3]龍紹芬,黎鐵斌.乙肝兩對半定量檢測結(jié)果分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2012,30(2):187-188.

      [4]許文,鄺琳,張振琳.CLIA和ELISA檢測血清HBsAg及HBsAb的結(jié)果比較[J].現(xiàn)代診斷與治療,2014,25(7):1467-1468.

      [5]魏炘.淺談乙肝兩對半定量檢測的臨床意義[J].檢驗與診斷,2014,8(17):162.

      [6]徐紅珍,王露.兩種方法檢測乙肝血清學(xué)標(biāo)志物的比較分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué),2011,17(19):29-31.

      [7]李金明,張瑞.常用乙型病毒性肝炎血清學(xué)標(biāo)志物檢測結(jié)果報告解釋及臨床應(yīng)用[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2012,35(4):296-300.

      [8]徐曉玲,陳芳.乙型肝炎兩對半定量檢測結(jié)果分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(8):902-904.

      [9]張寶,李世龍,張文珍,等.河北省唐山地區(qū)乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物定量檢測與分析特征分析[J].中國實驗診斷學(xué),2014,18(11):1837-1840.

      [10]黃紹毅,劉晨華.乙型肝炎疫苗抗體持久性及免疫記憶研究新進展[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2013,29(17):2622-2624.

      △通訊作者,E-mail:107306723@qq.com。

      DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.052

      文獻標(biāo)識碼:A

      文章編號:1673-4130(2016)11-1566-03

      (收稿日期:2016-01-12修回日期:2016-03-26)

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