康定獨(dú)活種子揮發(fā)油化學(xué)成分的研究

鄭立，高必興，蘭志瓊，鄧晶晶，盧先明，艾青青，陳玲

·品種品質(zhì)·

康定獨(dú)活種子揮發(fā)油化學(xué)成分的研究

鄭立，高必興，蘭志瓊，鄧晶晶，盧先明，艾青青，陳玲

目的：分析康定獨(dú)活種子揮發(fā)油的化學(xué)成分，以期為康定獨(dú)活種子的開發(fā)利用以及種子質(zhì)量評價(jià)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取康定獨(dú)活揮發(fā)油，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）對其揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行測定及分析，歸一化法測定其相對含量。結(jié)果：檢出134個(gè)色譜峰，鑒定出47個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的76.03%。結(jié)論：首次通過科學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)康定獨(dú)活種子揮發(fā)油中主要成分為醇類、酯類化合物，其中1-辛醇（41.99%)、丁酸辛酯(14.86%)、醋酸辛酯（4.03%）、異丁酸辛酯（1.59%）等，占總揮發(fā)油量62.47%。

康定獨(dú)活;種子;揮發(fā)油;GC-MS

目前，我國藥用獨(dú)活因產(chǎn)地不同而形成不同的商品，著名的有川獨(dú)活、資丘獨(dú)活、恩施獨(dú)活、巴東獨(dú)活、浙獨(dú)活等[1]。從古今多種本草學(xué)論著來看，獨(dú)活的原植物是有多種的，大多數(shù)屬于傘形科當(dāng)歸屬（Angelica L.）和獨(dú)活屬（Heracleum L.）的植物，也有五加科樟木屬（Atalia L.）的植物[2]。其中康定獨(dú)活來源于傘形科獨(dú)活屬植物康定獨(dú)活Heracleum souliei de Boiss. Herb.的干燥根。主產(chǎn)于四川西部和西北部，生長于海拔2600-3500米的山坡上[3]?？刀í?dú)活資源豐富，在主產(chǎn)地甘孜州、阿壩州常作為止血良藥供臨床藥用，也常被作為藏藥“珠佳”用以殺蟲，治潰瘍，麻風(fēng)，疥瘡，止血?？刀í?dú)活種子資源豐富，且與其根一樣富含揮發(fā)油。但目前國內(nèi)外尚未有對康定獨(dú)活種子揮發(fā)油成分鑒定的研究。本文首次采用水蒸氣蒸餾的方法從康定獨(dú)活的種子中提取出揮發(fā)油，并運(yùn)用GC-MS法分析其主要的化學(xué)成分,為進(jìn)一步開發(fā)利用該潛在藥用資源及為其種子質(zhì)量評價(jià)提供科學(xué)的依據(jù)。

1 儀器和材料

1.1 儀器與試劑

色譜柱Agilent Technologies 7890A GC System；水為蒸餾水；其余試劑均為分析純。

1.2 材料

供試材料經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院盧先明教授鑒定為傘形科獨(dú)活屬植物康定獨(dú)活Heracleum souliei de Boiss. Herb.的干燥種子。

2 方法

2.1 康定獨(dú)活種子揮發(fā)油的提取

參考《中國藥典》2015年版四部通則揮發(fā)油測定法甲法提取[4]。提取的揮發(fā)油用無水Na2SO4干燥，封裝備用，得油率為8%（v/w）。

2.2 康定獨(dú)活種子揮發(fā)油定性分析

2.2.1 氣相色譜-譜分析條 色譜柱為Agilent 19091S-433HP-5MS(0.25 mm×30 m×0.25 μm)；進(jìn)樣口溫度280℃；載氣為氦氣，流量：1.0 mL/min；分流比50∶1，進(jìn)樣量1 μL；升溫程序柱溫60 ℃，保持3 min，以5 ℃/min升至120 ℃，再以2 ℃/min升至180 ℃，最后20 ℃/min升至260 ℃，然后保持至分析完成。

2.2.2 氣相色譜-質(zhì)譜分析條件 電離方式：EI，電子轟擊能：70 eV；離子源溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃；掃描范圍：50～500 amu；掃描頻率：2.1次/s。

3 結(jié)果

取適量康定獨(dú)活種子揮發(fā)油，用正己烷溶解稀釋，過0.22 μm微孔濾膜。揮發(fā)油成分經(jīng)過質(zhì)譜計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索（質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫NIST08）與CAS號查詢，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)，綜合各項(xiàng)分析鑒定，確定其成分，共確定47種化合物，占總揮發(fā)油的76.03%，具體結(jié)果見表1、圖1。

表1 康定獨(dú)活種子揮發(fā)油分析結(jié)果

29(3aS,3bR,4S,7R,7aR)-7-methyl-3-methylidene-4-(propan-2-yl)octahydro-1H-cyclopenta[1,3]cyclopropa[1,2]benzene24.038204C15H240.06 30(+)-花側(cè)柏烯25.085202C15H220.39 31l-b-Bisabolene25.235204C15H240.27 32異戊酸龍腦酯25.545238C15H26O20.11 331H-Benzocycloheptene,2,4a,5,6,7,8-hexahydro-3,5,5,9-tetramethyl-, (4aR)-26.186204C15H240.08 34γ-欖香烯27.233204C15H240.04 35欖香素27.607208C12H16O30.07 36Butanoic acid, dodecylester28.792256C16H32O20.25 37反-十氫化萘29.882204C15H240.06 386,10,14-三甲基-2-十五烷酮40.725268C18H36O0.07 39十九烷43.225268C19H400.08 40十七烷 52.220240C17H360.02 41葉綠醇52.872296C20H40O0.02 42茴芹內(nèi)酯53.225246C13H10O50.04 43軟木花椒素57.113244C15H16O30.05 44正三十四烷59.602478C34H70-0.01 45二十一烷61.792296C21H440.09 46十八烷63.950254C18H380.03 47亞油酸64.623280C18H32O20.26

圖1 康定獨(dú)活種子揮發(fā)油總離子流圖

4 結(jié)論與討論

經(jīng)鑒定，共確定康定獨(dú)活種子揮發(fā)油中47種化合物，占總揮發(fā)油的76.03% 。其中主要含有醇類，酯類，烯類。如1-辛醇、丁酸辛酯、右旋萜二烯，分別占揮發(fā)油含量的41.99%、14.86%、0.63%，其他還有醛類、烷類等物質(zhì)。另外還檢識出一類香豆素類物質(zhì)軟木花椒素，含量占總揮發(fā)油的0.05%?；谡n題組前期研究發(fā)現(xiàn)，康定獨(dú)活根與其種子揮發(fā)油都主要以醇類，酯類為主。兩者都含有1-辛醇、異丁酸辛酯、丁酸辛酯、甲基丁香酚四種成分，其中康定獨(dú)活揮發(fā)油1-辛醇（7.12%）、乙酸-2-氯-1,3-苯基丙基酯（12.14%）、異戊酸龍腦酯(5.55%)含量較高。

本文首次采用水蒸氣蒸餾法提取康定獨(dú)活種子揮發(fā)油，結(jié)合高必興[5]關(guān)于白亮獨(dú)活生藥學(xué)研究基礎(chǔ)，下一步應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)確定升溫程序，分流比，進(jìn)樣口溫度，進(jìn)樣量等最佳條件，以此建立一個(gè)以氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析康定獨(dú)活種子揮發(fā)油成分的方法，為進(jìn)一步開發(fā)和利用該潛在藥用資源提供科學(xué)依據(jù)。

[1] 張才煜,張本剛,楊秀偉.獨(dú)活的化學(xué)成分研究[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),2007,23(4)：241-245.

[2] 周剛,馬寶花.中藥獨(dú)活的研究進(jìn)展[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2012, 16：15-16.

[3] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會編.中國植物志[M].第55卷第3分冊[M].北京：科學(xué)出版社,1992：202.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(四部)[S].2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2015：203-204.

[5] 高必興,鄧晶晶,鄭 佳,盧先明.GC-MS分析白亮獨(dú)活揮發(fā)油成分[J].中藥與臨床,2014,05：9-10.

（責(zé)任編輯：胡慧玲）

Research of volatile oil of Duhuo seed in Kangding

/ZHENG Li, GAO Bi-xing, LAN Zhi-qiong, DENG Jing-jing, LU Xianming, AI Qing-qing, CHEN Ling//(School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective:To investigate the chemical composition of volatile oil of Duhuo seed in Kangding, in order to provide experimental evidence for the quality evaluation and development and utilization of Duhuo seed.Method:Volatile oil in Duhuo seed was extracted by steam distillation. Gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS) were used to detect the chemical composition of volatile oil, and the volatile oil content was measured using relative content normalization method.Result:134 peaks were detected, and 47 compounds were identified accounting for 76.03% of the total volatile oil.Conclusion:There are mainly alcohols and esters including 1-octanol (41.99%), butyric acid octyl ester (14.86%), acetic acid octyl ester (4.03%), isooctyl ester (1.59%) which accounting for 62.47% of volatile oil in Duhuo seed.

Duhuo in kangding; seeds; volatile oil; GC-MS

R282.6

A

1674-926X(2016)05-002-03

四川省藏藥標(biāo)準(zhǔn)的制定(301-377)；中藥飲片調(diào)劑包裝貯藏養(yǎng)護(hù)技術(shù)研究-成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥基礎(chǔ)基地科研訓(xùn)練及科研能力提高項(xiàng)目子課題（J1310034-07）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

鄭立（1995-），女（漢族），本科生，主要研究方向?yàn)橹兴幤贩N質(zhì)量與資源開發(fā)

Tel：18408210842 Email：1095148157@qq.com

蘭志瓊（1979－），女（漢族），博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，第四批四川省中醫(yī)藥管理局學(xué)術(shù)帶頭后備人選，主要從事中藥品種質(zhì)量與資源開發(fā)的教學(xué)、科研工作

Tel：028-61800231 Email：lanlan1979512@126.com

2015-10-27