山東省2014
—2015年主要豬病的監(jiān)測

夏焱春，張玉玉，曾 昊，張梅潔，焦安琪，楊 杰，郭立輝，任素芳，陳 智，孫文博，于 江，陳 蕾，杜以軍，李 俊，吳家強1，（1.山東大學(xué)生命科學(xué)院，山東濟南 250100；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山東濟南 250100；.山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室，山東濟南 250100）

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山東省2014
—2015年主要豬病的監(jiān)測

夏焱春1，3，張玉玉2，3，曾 昊3，張梅潔3，焦安琪3，楊 杰3，郭立輝2，3，任素芳2，3，陳 智2，3，孫文博2，3，于 江2，3，陳 蕾2，3，杜以軍2，3，李 俊2，3，吳家強1，2，3
（1.山東大學(xué)生命科學(xué)院，山東濟南 250100；2.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，山東濟南 250100；
3.山東省畜禽疫病防治與繁育重點實驗室，山東濟南 250100）

摘 要：為給豬病防控措施的制定提供參考，2014—2015年對山東省主要豬群疫病進(jìn)行了抗原抗體檢測，分析其感染狀況與流行趨勢。結(jié)果顯示：2014—2015年間，豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）抗原陽性率由48.10%降低到40.56%，而其抗體陽性率由74.88%提高到84.39%。偽狂犬?。≒R）抗原陽性率由4.07%提高到10.86%，期間的野毒（gE）抗體陽性率和免疫（gB）抗體陽性率基本一致。豬瘟（CFS）抗原陽性率由25.80%降低到12.61%，而其抗體陽性率由56.46%提高到71.54%。除CFS在2014年第二季度高發(fā)外，PRRS和PR的發(fā)生無明顯季節(jié)性，三者的抗原陽性率與抗體陽性率大致呈負(fù)相關(guān)。豬流行性腹瀉（PED）抗原陽性率由65.48%提高到77.73%，其在2014年第三季度高發(fā)，而在2015年全年高發(fā)。傳染性胃腸炎（TGE）僅為零星發(fā)生。豬鏈球菌（SS）的抗原陽性率變化不大，平均為9%左右。副豬嗜血桿菌（HPS）抗原陽性率由30.42%降低到20.22%。總之，山東省PRRS 和CFS等疫病的抗原感染率呈下降趨勢，抗體陽性率呈上升趨勢，說明山東省的主要豬病得到一定程度地控制。同時，依據(jù)生豬養(yǎng)殖業(yè)中存在的問題，提出了相應(yīng)的防控對策。

關(guān)鍵詞：豬??；抗原；抗體；流行趨勢；對比分析

注：夏焱春、張玉玉并列第一作者

山東省是畜牧業(yè)大省，2014年的肉類總產(chǎn)量為764.16萬噸，占全國的9.11%。隨著山東省養(yǎng)豬業(yè)的迅速發(fā)展及規(guī)?；?、集約化程度的不斷提高，生豬疫病的發(fā)生及其對養(yǎng)豬生產(chǎn)的危害呈現(xiàn)日益加重的趨勢，主要表現(xiàn)為多病原混合感染、繼發(fā)感染，免疫抑制性疾病的危害加重等[1-2]。在各豬場的多重感染中，最為常見的混合感染為“PRRS +PCV2”或“PRRS +PCV2+HPS”，給豬場疫病綜合防控造成很大壓力[3-4]。

本研究針對山東省豬群主要流行病進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查、分析，并根據(jù)調(diào)查分析結(jié)果提出了相應(yīng)的防控對策。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品。病料和血清樣品采集于2014—2015年魯東、魯中、魯南、魯西、魯北等地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)豬場，基本覆蓋了山東省的生豬主產(chǎn)區(qū)。其中，病料為被動送檢樣品，采自臨床疑似發(fā)病豬群；血清為主動采集樣品，采自外觀健康的免疫豬群。

1.1.2主要試劑。Prime Script? One Step RT-PCR kit、DNA Marker DL2000購自Takara寶生物工程有限公司；RNA提取試劑盒Trizol購自Invitrogen公司；CSFV、PRRSV、PRV的 ELISA抗體檢測試劑盒購自IDEXX公司。

1.2方法

1.2.1抗原檢測。在病料中加入PBS研磨稀釋，對病毒抗原根據(jù)RNA提取試劑盒說明書提取RNA，并以此RNA為模板進(jìn)行RT-PCR擴增[5-7]；對細(xì)菌抗原按照經(jīng)典方法提取基因組DNA，然后進(jìn)行特異性PCR擴展[8]。擴增完成后，取PCR產(chǎn)物經(jīng)1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測觀察。

1.2.2血清學(xué)檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測山東省各地血清樣品中的PRRSV、PRV、CSFV抗體。嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書操作。

2　結(jié)果

2.12014—2015年主要豬病的抗原抗體檢測結(jié)果

2.1.1PRRS檢測結(jié)果。2014年，檢測PRRS疑似病料765份，檢出陽性病料368份，陽性率為48.10%；檢測血清抗體2 416份，檢出抗體陽性1809份，陽性率為74.88%。2015年，檢測PRRS疑似病料1 149份，檢出陽性病料466份，陽性率為40.56%；檢測血清抗體2 889份，檢出陽性2 438份，陽性率為84.39%?？乖腥韭食氏陆第厔?，抗體陽性率呈上升趨勢。

2.1.2PR檢測結(jié)果。2014年，檢測PR野毒感染疑似病料418份，檢出陽性17份，陽性率為4.07%；檢測血清抗體2 420份，野毒（gE）抗體陽性率為32.88%（622/1892），免疫（gB）抗體陽性率為71.40%（383/528）。2015年，檢測PR野毒疑似病料709份，檢出陽性77份，陽性率為10.86%，顯著高于2014年；檢測血清抗體4 451份，野毒（gE）抗體陽性率為31.33%（1 101/3 514），免疫（gB）抗體陽性率為69.16%（648/937），與2014年的gE、gB抗體陽性率基本一致。

2.1.3CFS檢測結(jié)果。2014年，檢測CFS疑似病料624份，檢出陽性病料161份，陽性率為25.80%，明顯高于2013年（14.15% ）；檢測血清抗體1 323份，檢出抗體陽性747份，陽性率為56.46%，與2013年基本一致（56.24%）。2015年，檢測疑似CFS病料690份，檢出陽性87份，陽性率為12.61%，顯著低于2014年；檢測血清抗體2 899份，檢出抗體陽性2 074份，陽性率高達(dá)71.54%，達(dá)到免疫合格水平（70%以上），顯著高于2013年與2014年。

2.1.4PED、TGE檢測結(jié)果。2014年，檢測PED疑似病料197份，檢出陽性129份，陽性率為65.48% ；檢測TGE疑似病料86份，陽性率為5.81%。2015年檢測PED疑似病料220份，檢出陽性171份，陽性率為77.73%，高于2014年；檢測TGE疑似病料76份，檢出陽性2份，陽性率為2.63%，低于2014年。

2.1.5細(xì)菌性疾病檢測結(jié)果。2014年，從多個豬場送檢的162份疑似樣品中分離到15株SS，分離率為9.26%，以血清2型為主；從92份疑似樣品中分離到28株HPS，分離率為30.43%，以血清4型和5型為主，還檢測出血清1型、12型和13型。2015年，從157份疑似樣品分離到14株SS，分離率為8.92%，以血清2型為主；從89份疑似樣品中分離到18株HPS，分離率為20.22%，以血清4型和5型為主，還檢測出血清1型、13型和14型。藥敏試驗結(jié)果表明，2014—2015年的SS、HPS分離株均對頭孢類抗生素高度敏感，可作為防治該兩種疫病的首選藥物；多數(shù)分離株對鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、紅霉素、新霉素、林可霉素、復(fù)方新諾明等抗生素有一定的耐藥性。

圖1　2014年和2015年主要豬病抗原陽性率對比

圖2　2014年和2015年主要豬病抗體陽性率對比

2.2各季度抗原抗體陽性率變化情況

2.2.1PRRS。2014年，除第一季度外，PRRS抗原陽性率均較高，而第一、二季度的抗體陽性率明顯高于第三、四季度。2015年第一、四季度抗原陽性率明顯高于第二、三季度，而抗體陽性率除第三季度稍低外，其他季度均較高。由圖3可見，抗原陽性率與抗體陽性率大致呈負(fù)相關(guān)。

圖3　PRRS抗原抗體陽性率動態(tài)變化

2.2.2PR。由圖4可見，PRV野毒（gE）抗原陽性率在2014—2015年各季度一直維持在較低水平；PRV野毒（gE）抗體在2014年第一季度和2015年第一、二季度陽性率較高，而PRV免疫（gB）抗體，除2014年第四季度外，其他季度陽性率均較高。

圖4　PR抗原抗體陽性率動態(tài)變化

2.2.3CFS。由圖5可知，2014和2015年，CSF抗原陽性率在第二季度最高，推測第二季度是CFS的易發(fā)季節(jié)。2014年第一、三季度的CFS抗體陽性率高于第二、四季度，與抗原陽性率結(jié)果相反。2015年各季度抗體陽性率均較高，而抗原陽性率低于2014年。橫向?qū)Ρ劝l(fā)現(xiàn)，CFS抗原陽性率與抗體陽性率大致呈負(fù)相關(guān)。

圖5　CSF抗原抗體陽性率動態(tài)變化

2.2.4PED與TGE。由圖6可知，2014年，僅第三季度的PED陽性率較高，2015年全年陽性率普遍較高，表明在2015年P(guān)ED已成為危害仔豬的重要疫病。TGE僅在2014年第四季度檢測出5例，2015年第三季度檢測出2例，表明TGE已不是引起仔豬腹瀉的主要病因。

圖6　PED和TGE抗原陽性率動態(tài)變化

2.2.5細(xì)菌性疾病。由圖7可知，2014年第一季度及2015年第一、二季度的SS抗原陽性率較低，推測第一季度是SS的低發(fā)季節(jié)。而2014年第二、四季度及2015年第一季度的HPS抗原陽性率較高，表明HPS已成為豬群全年常見的細(xì)菌性疾病。

圖7　細(xì)菌性疾病抗原陽性率動態(tài)變化

3　討論

從目前情況看，2015年相對2014年，PRRS 和CFS等疫病的抗原感染率呈下降趨勢，抗體陽性率呈上升趨勢，說明山東省規(guī)?；i場根據(jù)疫病流行動態(tài)采取的部分防控措施有效，使得主要疫病得到一定程度地控制。

但是，目前山東省生豬養(yǎng)殖業(yè)還存在一些問題：豬群中混合感染和繼發(fā)感染現(xiàn)象十分普遍，主要是PRRSV、PCV-2的病毒性混合感染，以及HPS、SS、支原體、胸膜肺炎放線桿菌等引起的細(xì)菌性繼發(fā)感染[1]。寒冷季節(jié)豬群呼吸道疾病嚴(yán)重，主要表現(xiàn)為發(fā)熱、呼吸困難、咳嗽、腹式呼吸、食欲下降和消瘦等。除了病原性因素外，豬舍條件惡劣、氣溫急劇變化、飼養(yǎng)密度過大等因素也可誘發(fā)豬群呼吸道疾病的發(fā)生[2-3]。目前，豬免疫抑制性疾病危害加大?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)很多因素會引發(fā)豬的免疫抑制，其中臨床普遍認(rèn)可的兩大免疫抑制性疾病為PRRS、PCV-2。豬群產(chǎn)生免疫抑制后，自身非特異性免疫水平下降，并持續(xù)處于亞健康狀態(tài)，導(dǎo)致后續(xù)的免疫效果不理想或者免疫失敗，進(jìn)而不能對豬群產(chǎn)生有效的保護(hù)力[4]。

在生豬疫病形勢愈加復(fù)雜的現(xiàn)今，如何保障養(yǎng)豬業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展，最大限度地降低因疾病造成的經(jīng)濟損失，是豬病研究者的工作重點。而養(yǎng)豬場本身也應(yīng)當(dāng)實行健康養(yǎng)殖，增強豬的體質(zhì)和天然免疫力。

提議山東省應(yīng)采取“養(yǎng)重于防，防重于治”的綜合措施。首先要精心飼養(yǎng)和科學(xué)管理，給豬群提供潔凈的飲水、均衡的營養(yǎng)飼料和適宜的環(huán)境，這是豬群健康養(yǎng)殖的基礎(chǔ)[9-10]。其次要建立健全生物安全體系，嚴(yán)格隔離、消毒和防疫。一要制定合理的消毒程序，將消毒工作程序化、規(guī)范化；二要嚴(yán)格實行自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出的生產(chǎn)制度，在必須引種時，應(yīng)執(zhí)行嚴(yán)格、科學(xué)的隔離和檢疫措施，堅決杜絕將新的病原進(jìn)入豬場；三要制訂科學(xué)的免疫程序，進(jìn)行合理地藥物保健，依據(jù)疫病的現(xiàn)狀，合理控制主要疫病，避免盲目性和重復(fù)性免疫[11]。

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（責(zé)任編輯：朱迪國）

Detection and Comparative Analysis of Main Epidemic Porcine Diseases in Shandong Province from 2014 to 2015

Xia Yanchun1，3， Zhang Yuyu2，3，Zeng Hao3，Zhang Meijie3，Jiao Anqi3，Yang Jie3，Guo Lihui2，3，Ren Sufang2，3，Chen Zhi2，3，Sun Wenbo2，3，Yu Jiang2，3，Chen Lei2，3，Du Yijun2，3，Li Jun2，3，Wu Jiaqiang1，2，3
（1.Academy of Life Sciences，Shandong University，Jinan，Shandondg 250100；2. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan，Shandong 250100；3. Shandong Key Laboratory of Animal Disease Control and Breeding，Jinan，Shandong 250100）

Abstract：In order to provide references for formulating the prevention and control measures，the antigens and antibodies of the main epidemic diseases of swine were detected in Shandong province from 2014 to 2015 and their infection status and epidemic trend were analyzed. The results showed that the antigen positive rate of porcine reproductive and respiratory syndrome （PRRS） decreased from 48.10% to 40.56%，while the antibody positive rate of PRRS increased from 74.88% to 84.39%. The antigen positive rate of pseudorabies （PR） increased from 4.07% to 10.86%， while the antibody positive rate of PR gE and gB in 2015 were basically same as that in 2014. The antigen positive rate of classical swine fever （CFS） decreased from 25.80% to 12.61%，while its antibody positive rate increased from 56.46% to 71.54%. The occurrences of PRRS and PR were not signifi cantly seasonal and the incidence of CFS was high in the second quarter of 2014. The antibody positive rates of PRRS，PR and CFS were negatively correlated with their antigen positive rates. The antigen positive rate of porcine epidemic diarrhea （PED） increased from 65.48% to 77.73%.The quarterly results showed that there was high incidence in the third quarter of 2014 and throughout the whole year of 2015. Transmissible gastroenteritis （TGE） was only sporadic. The antigen positive rates of streptococcus suis （SS） in 2014 and 2015 were about 9% invariably，while the antigen positive rate of haemophilus parasuis （HPS） decreased from 30.42% to 20.22%. In short，the main epidemic porcine diseases ，such as PRRS and CFS， presented a downtrend of antigen infection rates and an uptrend of antibody positive rates from 2014 to 2015 in Shandong province.It indicated that main epidemic porcine diseases were controlled in Shandong province.

Key words：epidemic porcine diseases；antigen；antibody；epidemic trend；comparative analysis

中圖分類號：S852.23

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1005-944X（2016）05-0001-05

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.05.001

基金項目：國家自然科學(xué)基金面上項目（31572550）；山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新課題；山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系；泰山學(xué)者特聘專家工程經(jīng)費；重大科技成果培育計劃（2014CGPY04）

通訊作者：吳家強