苜草素對蛋雞膽固醇代謝的影響及其基因調(diào)控機制

李　寧　劉　鑫　曲正祥　劉　通　杜　宇　高玉鵬 　閔育娜

(西北農(nóng)林科技大學動物科技學院，楊凌712100)

苜草素對蛋雞膽固醇代謝的影響及其基因調(diào)控機制

李寧劉鑫曲正祥劉通杜宇高玉鵬*閔育娜*

(西北農(nóng)林科技大學動物科技學院，楊凌712100)

摘要：本試驗旨在研究飼糧中添加不同水平苜草素對蛋雞膽固醇代謝的影響，并探討其基因表達調(diào)控機制。選取體重和產(chǎn)蛋率相近的26周齡尼克蛋雞540只，隨機分為5組，每組6個重復，每個重復18只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加300、600、900、1 200 mg/kg的苜草素。預試期7 d，正試期70 d。結(jié)果表明：1)試驗第35天和第70天，900 mg/kg苜草素組的蛋黃膽固醇含量顯著低于對照組(P<0.05)。2)與對照組相比，900 mg/kg苜草素組顯著升高了蛋雞血清中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量和高密度脂蛋白/低密度脂蛋白(HDL/LDL)(P<0.05)，各組蛋雞血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量差異均不顯著(P>0.05)。3)與對照組相比，600、900、1 200 mg/kg苜草素組顯著降低了蛋雞肝臟中3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)mRNA表達量(P<0.05)，900和1 200 mg/kg苜草素組顯著升高了蛋雞肝臟組織中膽固醇7α-羥化酶(CYP7A1)mRNA表達量(P<0.05)。各組蛋雞肝臟中固醇結(jié)合蛋白元件-2(SERBP-2)和卵巢中卵黃蛋白原受體(OVR)mRNA表達量無顯著差異(P>0.05)。綜上，飼糧中添加苜草素降低了蛋黃膽固醇和全蛋膽固醇含量，其調(diào)控機制可能是通過抑制蛋雞膽固醇的內(nèi)源性合成和促進膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化排泄2種途徑來實現(xiàn)。本試驗推薦26～35周齡蛋雞苜草素添加水平為900 mg/kg。

關(guān)鍵詞：苜草素；飼養(yǎng)；蛋雞；膽固醇代謝；基因表達

雞蛋營養(yǎng)成分全面且均衡，是人們重要的動物性食品之一，但雞蛋的消費量因其較高的膽固醇含量而受到制約[1-3]。研究表明，通過調(diào)節(jié)膳食中的膽固醇含量可以降低血液中膽固醇含量[4-5]，且這一理念普遍深入人心。雖然美國膳食指南在2015年對膽固醇的攝入量已不加限制[6]，但并非全部專家給予認同和贊同[7-9]，膽固醇仍是心血管健康的潛在威脅之一[10]，尤其對于那些有動脈粥狀硬化、糖尿病、高膽固醇血癥的人[11-12]，更應(yīng)加以注意。隨著人們對健康的重視和對高膽固醇危害意識的增強，低膽固醇雞蛋越來越受到大眾的青睞[13]。因此，尋求新途徑研發(fā)低膽固醇雞蛋對生產(chǎn)保健蛋品及發(fā)展蛋雞產(chǎn)業(yè)具有重要的現(xiàn)實意義。選擇利用植物源性添加劑來降低雞蛋膽固醇可能是綠色、安全、理想的途徑之一。苜草素(polysavone)是從紫花苜蓿(MedicagosativaL.)中通過現(xiàn)代破壁萃取工藝技術(shù)提取的純植物飼料添加劑，具有用量少、功效明顯、穩(wěn)定性好的特點，其主要功能活性成分為多糖、黃酮、皂甙等[14]。研究表明，皂甙、黃酮和多糖具有促進畜禽生長、增強機體免疫力、降血脂、提高機體抗氧化等作用[15-17]，且能減少畜牧業(yè)對抗生素的依賴。Dong等[18]研究表明，飼糧中添加500～1 000 mg/kg苜草素能夠提高肉雞的抗氧化活性，改善肉品質(zhì)。王長康等[19]在蛋雞上的研究表明，苜草素能提高蛋雞生產(chǎn)性能與蛋品質(zhì)，對降低血清膽固醇含量也有作用。張麗娜等[20]表明，蛋雞飼糧中添加苜草素能夠顯著降低全蛋及肝臟中膽固醇含量，以500～1 000 mg/kg較優(yōu)。綜上所述，研究一般多限于對生產(chǎn)性能或直觀代謝指標的表述，缺乏相關(guān)更深層次的動物代謝較為明晰的機制佐證，本研究以蛋雞為例，探討苜草素對其膽固醇代謝及相關(guān)基因表達的影響，探討苜草素對蛋雞雞蛋膽固醇和血脂代謝影響的效用，并分析該效用與蛋雞肝臟組織中調(diào)控膽固醇代謝的關(guān)鍵基因3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMGCR)、固醇結(jié)合蛋白元件-2(SERBP-2)、膽固醇7α-羥化酶(CYP7A1)和卵巢組織中卵黃蛋白原受體(OVR)mRNA表達的關(guān)系，闡明苜草素對蛋雞膽固醇代謝的作用機制，進而為確定苜草素在蛋雞飼糧中的合理應(yīng)用提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗材料

試驗用苜草素為棕黃色粉末，由中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所提供。苜草素提取方法為破壁萃取[14]，主要有效成分包括：多糖≥15%，總黃酮≥5%，總皂甙≥5%。

1.2試驗設(shè)計及飼糧

選取540只健康、產(chǎn)蛋性能基本一致的26周齡尼克蛋雞。采用單因子完全隨機設(shè)計，試驗雞隨機分成5個組，每組6個重復，每個重復18只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加300、600、900、1 200 mg/kg的苜草素，試驗期77 d，其中預試期7 d，正試期70 d。

試驗基礎(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型，參照我國《雞飼養(yǎng)標準》(NY /T 33—2004)產(chǎn)蛋雞營養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3飼養(yǎng)管理

試驗雞只采用3層階梯式籠養(yǎng)，密閉式雞舍，自控式濕簾降溫通風系統(tǒng)，各組均勻分布于雞舍不同空間，自由采食、飲水，每天光照16 h。每天飼喂2次(08:30、14:30)，15:00準時收集雞蛋。每天觀察雞群健康狀況，記錄死淘雞數(shù)，常規(guī)免疫、消毒和飼養(yǎng)管理。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎(chǔ))

1)預混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of the diet：VA 10 000 IU，VD31 800 IU，VE 10 IU，VK 10 mg，VB125 ug，硫胺素 thiamine l mg，核黃素 riboflavin 4.5 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 50 mg，煙酸 niacin 24.5 mg，吡哆醇 pyridoxine 5 mg，生物素 biotin 1 mg，葉酸 folic acid 1mg，膽堿 choline 500 mg，Mn 65 mg，I 0.4 mg，F(xiàn)e 60 mg，Cu 8 mg，Zn 80 mg，Se 0.3 mg。

2)粗蛋白質(zhì)、鈣和總磷為實測值，其余為計算值。CP, Ca and TP were measured values, while the others were calculated values.

1.4樣品采集與處理

正試期第35天和第70天，每個重復隨機取3枚雞蛋分離蛋黃，稱重后裝于10 mL離心管，于4 ℃冰箱保存。試驗結(jié)束時，雞稱重求得每重復平均體重，每個重復選取與重復內(nèi)平均體重差異不顯著(P>0.05)的蛋雞3只，空腹12 h后于左翅下采血5 mL于促凝管中，室溫靜置1 h后3 500 r/min離心15 min制成血清，分裝于EP管中，-20 ℃保存?zhèn)溆?。采血后雞只屠宰分別取同部位的肝臟組織和卵泡組織各2 g左右放入凍存管快速置于液氮中速凍，-80 ℃保存待測。

1.5測定指標與方法

1.5.1雞蛋膽固醇提取與檢測

蛋黃處理方法參照文獻[21]，膽固醇提取后用0.45 μm有機微孔濾膜過濾，色譜柱測定。雞蛋膽固醇含量用蛋黃膽固醇含量(mg/g)和全蛋膽固醇含量(mg/枚)2個指標表示[22]。

1.5.2血清生化指標

血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量按照試劑盒說明書于采樣后48 h內(nèi)采用全波長酶標儀(美國Bio-Tek公司)進行測定，試劑盒購自北京北化康泰臨床試劑有限公司。

1.5.3膽固醇代謝相關(guān)基因的表達量的測定

取肝臟組織30 mg、卵巢組織50 mg，按照試劑盒(北京天恩澤有限公司)說明書提取總RNA，用紫外分光光度計(日本Hitachi公司)測定總RNA濃度及純度，所有樣品吸光度比值(OD260 nm/OD280 nm)在1.8～2.0，1%瓊脂糖凝膠電泳檢測總RNA的完整性。用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(大連寶生物工程有限公司)將所有RNA樣品進行反轉(zhuǎn)錄，反應(yīng)采用10 μL體系，轉(zhuǎn)錄方法參照試劑盒說明書。獲得的cDNA稀釋10倍，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

根據(jù)GenBank上原雞的cDNA序列，用Primer 5.0軟件設(shè)計引物，將β-肌動蛋白(β-actin)設(shè)為內(nèi)參基因。引物由上海英俊生物技術(shù)有限公司合成，引物詳細資料見表2。肝臟HMGCR、SREBP-2、CYP7A1和卵泡OVR的mRNA表達量，用熒光定量PCR儀(美國Bio-Rad公司)測定，配制每個樣品3個重復。20 μL反應(yīng)體系：0.1%焦碳酸二乙酯(DEPC)水6 μL、cDNA模板2 μL、上及下游引物各1 μL、SYBR Green-Ⅱ(大連寶生物工程有限公司) 10 μL；循環(huán)條件：95 ℃預變性30 s，95 ℃變性5 s，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，40個循環(huán)。目的基因表達量的計算采用2-ΔΔCT法[23]，以β-actin表達量為參比。

表2　目的基因引物序列

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進行單因素方差分析，組間平均值用Duncan氏法進行多重比較，數(shù)據(jù)均用“平均值±標準差”表示，以P<0.05作為差異顯著性判斷標準。

2結(jié)果

2.1苜草素對雞蛋膽固醇含量的影響

由表3可知，在試驗第35天，600和900 mg/kg苜草素組的蛋黃膽固醇含量顯著低于對照組和300 mg/kg苜草素組(P<0.05)，900 mg/kg苜草素組的全蛋膽固醇含量顯著低于對照組(P<0.05)，各組的蛋黃重無顯著差異(P>0.05)。試驗第70天，900 mg/kg苜草素組的蛋黃膽固醇含量顯著低于對照組(P<0.05)，各組蛋黃重和全蛋膽固醇含量均無顯著差異(P>0.05)，但試驗組的全蛋膽固醇有降低的趨勢，與第35天測定結(jié)果基本趨于一致。

表3　苜草素對雞蛋膽固醇含量的影響

同行數(shù)據(jù)肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2苜草素對蛋雞血清生化指標的影響

由表4可知，飼糧中添加苜草素對蛋雞血清中TC、TG、LDL-C含量無顯著影響(P>0.05)。飼糧中添加苜草素對蛋雞血清中HDL-C含量有顯著影響(P<0.05)，其中900 mg/kg苜草素組與對照組差異顯著(P<0.05)，升高了37.74%。試驗組的HDL/LDL均高于對照組，其中600和900 mg/kg苜草素組與對照組差異顯著(P<0.05)，分別升高了107.50%和102.50%。

表4　苜草素對蛋雞血清生化指標的影響

2.3苜草素對蛋雞膽固醇代謝相關(guān)基因mRNA表達量的影響

由表5可知，與對照組相比，600、900、1 200 mg/kg苜草素組肝臟HMGCRmRNA的表達量分別下降了64.42%、62.50%、48.08%(P<0.05)；與對照組相比，900和1 200 mg/kg苜草素組肝臟CYP7A1 mRNA的表達量分別升高了61.73%、69.14%(P<0.05)。各組肝臟中SREBP-2和卵巢中OVRmRNA表達量沒有顯著差異(P>0.05)。

3討論

3.1苜草素對雞蛋膽固醇含量和蛋雞血清生化指標的影響

研究表明，過量攝入高膽固醇食物(如雞蛋)會危害患有心臟病、高血壓、糖尿病等人群的健康[24]，故降低雞蛋中膽固醇含量對改善蛋品的食用價值具有重要意義。蛋雞體內(nèi)膽固醇主要與LDL受體結(jié)合，以極低密度脂蛋白(VLDL)形式隨血液轉(zhuǎn)運至卵母細胞，VLDL進入卵母細胞的量決定了蛋黃中膽固醇含量[25]。大豆異黃酮中的金雀異黃素(genistein)通過抑制酪氨酸激酶降低LDL受體活性從而降低蛋黃中膽固醇的沉積[26]。尹靖東等[22]用40 mg/kg大豆黃酮飼喂28周齡蛋雞，極顯著降低了蛋黃和全蛋中膽固醇含量，并顯著抑制了氧化膽固醇的形成。Malinow等[27]發(fā)現(xiàn)，苜蓿皂苷通過抑制大鼠腸道對膽固醇的吸收進而降低血清中TC含量。有研究稱皂苷主要通過與腸道膽固醇結(jié)合來促進膽固醇的排泄并降低其吸收，以此調(diào)節(jié)膽固醇代謝[15]。侯永剛等[28]報道，對蛋雞飼喂60和90 mg/kg苜蓿皂苷，蛋黃、全蛋膽固醇含量顯著和極顯著降低。張麗娜等[20]

發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加苜草素對蛋黃膽固醇含量無顯著影響，但1 000 mg/kg苜草素組能夠顯著降低全蛋中膽固醇含量且有降低蛋黃膽固醇含量的趨勢。本研究結(jié)果表明，添加900 mg/kg苜草素顯著降低了蛋黃膽固醇含量，說明苜草素對雞蛋膽固醇含量有降低的作用，這可能與苜草素中的黃酮與皂甙等活性物質(zhì)能夠降低雞蛋膽固醇含量有關(guān)，而與張麗娜等[20]的結(jié)果有差異是由于本試驗選取產(chǎn)蛋高峰期蛋雞作為試驗對象，而前人研究選用產(chǎn)蛋后期蛋雞，蛋雞年齡與雞蛋中膽固醇含量存在顯著相關(guān)性。但是苜草素的添加水平與其降低雞蛋膽固醇的含量未呈線性關(guān)系，只有添加適當水平苜草素才能發(fā)揮其最大效果。

表5　苜草素對肝臟HMGR、SREBP-2、CYP7A1和卵泡OVR mRNA表達量的影響

王長康等[19]在肉雞上的研究結(jié)果顯示，苜草素試驗組顯著降低血清中TC和雌二醇(E2)含量，但不影響血清HDL-C含量。董曉芳等[29]也有相似報道，在給1日齡肉仔雞飼糧添加500 mg/kg苜草素，28和42 d后分別顯著降低血清中TG和TC含量。謝泰華等[30]在28周齡蛋雞中添加苜草素對血脂指標無顯著影響，但對血清TC、LDL-C含量有降低的趨勢。而本試驗添加苜草素使蛋雞血清中TC和LDL-C含量較對照組有所降低但不顯著，與前人研究的結(jié)果相似，但本試驗添加苜草素組均不同程度升高血清HDL-C含量和HDL/LDL，與前人研究的結(jié)果有異，其主要原因：一是苜草素對肉雞和蛋雞血脂指標的影響效果不同可能與雞種有關(guān)，肉雞膽固醇代謝與其生長發(fā)育的脂肪代謝有關(guān)，而產(chǎn)蛋雞膽固醇代謝主要是圍繞蛋黃膽固醇形成進行，這兩者不同的膽固醇代謝模式對雞來講，其代謝機制可能不同，且本試驗苜草素的添加水平與前人不同也可能是造成結(jié)果差異的原因；二是本試驗中各組蛋雞血清TC含量未出現(xiàn)顯著差異，說明苜草素對蛋雞循環(huán)著的血液總TC與蛋黃膽固醇的作用間沒有必然相關(guān)關(guān)系[31]，而苜草素提高HDL-C含量和HDL/LDL，其一說明其更有利于HDL將肝外組織中TC運回肝臟，在肝臟經(jīng)代謝轉(zhuǎn)化或以非酯化的形式形成膽汁酸從而排泄掉[32]，這種功效與膽固醇在機體內(nèi)的轉(zhuǎn)運有關(guān)；其二說明血清中HDL/LDL與雞蛋膽固醇含量存在顯著負相關(guān)的關(guān)系。

3.2苜草素對蛋雞膽固醇代謝影響的相關(guān)基因調(diào)控機制分析

本研究表明，苜草素影響雞蛋膽固醇含量，但與其飼糧添加水平不呈線性關(guān)系，這種效應(yīng)的代謝特征主要表現(xiàn)在提高蛋雞血液HDL-C含量和HDL/LDL。本試驗探討了這種代謝影響的相關(guān)基因調(diào)控機制。禽類的膽固醇主要在肝臟組織和卵巢組織中合成。研究表明，HMGCR和SREBP-2、CYP7A1、OVR分別在蛋雞膽固醇的合成、排泄、沉積過程中調(diào)控著關(guān)鍵作用[33-34]。

蛋雞從飼料中獲取的外源性膽固醇十分有限，主要是通過從頭合成途徑滿足機體膽固醇的需求。HMGCR是膽固醇合成的限速酶，通過調(diào)控HMGCRmRNA的表達可以控制血清和蛋黃中的膽固醇含量[33]。Elkin等[34]添加0.06%的阿托瓦他丁顯著降低肝臟細胞HMGCRmRNA的表達量，并使蛋黃中膽固醇含量下降35%。本試驗表明，添加600和900 mg/kg苜草素使蛋雞肝臟HMGCRmRNA的表達量分別下降了64.42%、62.50%，而添加1 200 mg/kg苜草素組雞肝臟HMGCRmRNA的表達量降低了48.08%，這種效果與其降低蛋黃膽固醇和全蛋膽固醇的試驗效果相一致，并能在一定程度上解釋苜草素影響雞蛋膽固醇含量與其飼糧添加水平不呈線性關(guān)系之故。說明苜草素可以通過降低HMGCRmRNA的表達來達到降低雞蛋膽固醇含量的目的，而對血清中TC含量影響不顯著是由于血清TC含量受到許多因素的影響，它不僅是由膽固醇合成的限速酶基因的表達水平?jīng)Q定的。SREBP-2是轉(zhuǎn)錄因子SREBPs的一種，通過在轉(zhuǎn)錄水平上促進HMGCR的表達來特異性調(diào)控膽固醇代謝，但SREBP-2通常在膽固醇含量較低時才發(fā)揮作用[35]。本試驗中飼糧添加苜草素未能改變雞肝臟SREBP-2 mRNA表達量，說明苜草素沒有通過SREBPs通路在轉(zhuǎn)錄水平來調(diào)控HMGCRmRNA表達。CYP7A1是動物肝臟中膽汁酸合成的限速酶，Shi等[36]研究表明：苜蓿皂苷能上調(diào)高脂大鼠CYP7A1的表達，增強CYP7A1活性，從而加強了糞便中膽汁酸的分泌。本試驗中添加900和1 200 mg/kg苜草素蛋雞CYP7A1 mRNA表達量顯著高于對照組，且飼糧添加900 mg/kg苜草素雞蛋膽固醇降低效果最明顯，這與苜草素中含有一定的苜蓿皂苷有關(guān)。推測CYP7A1 mRNA表達量的增加會提高CYP7A1的活性，加快蛋雞肝臟膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化，進而血清中HDL-C含量顯著增加，限制了膽固醇向雞蛋蛋黃中的沉積量。說明苜草素增強蛋雞肝臟膽固醇的排泄也可能是其調(diào)控膽固醇代謝的途徑之一。蛋黃幾乎包含了雞蛋中全部膽固醇，蛋黃膽固醇的沉積過程主要通過OVR介導的內(nèi)吞作用將VLDL攜帶的膽固醇轉(zhuǎn)運至發(fā)育中的卵母細胞，隨卵母細胞的生長最終形成蛋黃[37]，OVR的內(nèi)呑作用與蛋雞的繁殖性能至關(guān)重要。本試驗中飼糧添加苜草素并未影響蛋雞卵巢中OVRmRNA的表達量，說明苜草素影響雞蛋膽固醇含量的調(diào)控并未發(fā)生在蛋黃膽固醇的沉積環(huán)節(jié)。綜上，苜草素影響雞蛋膽固醇含量的主要調(diào)控途徑可能是通過抑制蛋雞膽固醇的內(nèi)源性合成和促進膽固醇的排泄來進行。

4結(jié)論

① 飼糧添加苜草素能降低蛋黃膽固醇和全蛋膽固醇含量，本試驗推薦26～35周齡蛋雞飼糧苜草素添加水平為900 mg/kg。

② 苜草素降低雞蛋膽固醇含量的代謝特征主要是提高蛋雞血清HDL-C含量和HDL/LDL，其調(diào)控機制主要是通過下調(diào)HMGCRmRNA的表達量來抑制蛋雞膽固醇的內(nèi)源性合成和上調(diào)CYP7A1 mRNA的表達量來促進膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化排泄2種途徑來實現(xiàn)。

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(責任編輯武海龍)

Effects and Gene Regulatory Mechanism of Polysavone on Cholesterol Metabolism of Laying Hens

LI NingLIU XinQU ZhengxiangLIU TongDU YuGAO Yupeng*MIN Yuna*

(College of Animal Science and Technology, Northwest A&F University, Yangling 712100, China)

Abstract:The experiment was carried out to evaluate the effects of dietary different polysavone supplemental level on cholesterol metabolism of laying hens, and discussed its regulation mechanism of gene expression. A total of 540 twenty-six-week-old Nick laying hens were randomly divided into 5 groups with 6 replicates per group and 18 birds per replicate. Laying hens in control group were fed with a basal diet, and other were fed with the basal diets supplemented with 300, 600, 900 and 1 200 mg/kg polysavone, respectively. The pre-test lasted for 7 days, and the experiment lasted for 70 days. The results showed as follows: 1) on day 35 and day 70, the yolk cholesterol content in 900 mg/kg polysavone group was significantly lower than that in control group (P<0.05). 2) Compared with the control group, the high density lipoprotein-cholesterol (HDL-C) content and high density lipoprotein to low density lipoprotein ratio (HDL/LDL) in 900 mg/kg polysavone group significantly increased (P<0.05). There were no significant differences in the contents of total cholesterol (TC), triglyceride (TG) and low density lipoprotein-cholesterol (LDL-C) in serum among all groups (P>0.05). 3) Compared with the control group, the mRNA expression of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase (HMGCR) in liver of laying hens in 600, 900 and 1 200 mg/kg polysavone groups significantly decreased (P<0.05), and the mRNA expression of cholesterol 7α-hydroxylase (CYP7A1) in liver of laying hens in 600 and 900 mg/kg polysavone groups significantly increased (P<0.05). There were no significant differences in the mRNA expression of sterol regulatory element-binding protein 2 (SREBP-2) in liver and occyte vitellogenesis receptor (OVR) in ovarian of laying hens among all groups (P>0.05). Our present study indicates that dietary supplemented with polysavone can reduce the whole egg and egg yolk cholesterol content. The possible mechanism of cholesterol lowering effects can result from reducing endogenous synthesis and more cholesterol excretion. The suitable dietary polysavone supplemented level of laying hens aged from 26 to 35 weeks is 900 mg/kg.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(5)：1558-1565]

Key words:polysavone; feeding; laying hens; cholesterol metabolism; gene expression

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.05.033

收稿日期：2015-11-19

基金項目：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-41-K13)；科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化項目(2013GB2G000468)；陜西省科技資源統(tǒng)籌項目(2016KTCL02～18)

作者簡介：李寧(1990—)，女，陜西漢中人，碩士研究生，研究方向為動物營養(yǎng)與飼料科學。E-mail： 810226606@qq.com *通信作者:高玉鵬，教授，博士生導師，E-mail： gaoyupeng112@sina.com; 閔育娜，副教授，碩士生導師，E-mail： 472956784@qq.com

中圖分類號：S831

文獻標識碼：A

文章編號：1006-267X(2016)05-1558-08

*Corresponding authors: GAO Yupeng, professor, E-mail: gaoyupeng112@sina.com； MIN Yuna, associate professor, E-mail： 472956784@qq.com