益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)和糞便微生物菌群的影響

高　印　王國軍　來航線　楊雨鑫*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院，楊凌712100；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院，楊凌712100)

益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)和糞便微生物菌群的影響

高印1王國軍1來航線2楊雨鑫1*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院，楊凌712100；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院，楊凌712100)

摘要：本試驗(yàn)旨在研究益生菌發(fā)酵蘋果渣對早期斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)和糞便微生物菌群的影響。選擇平均體重(5.87±0.10) kg斷奶仔豬120頭，隨機(jī)分為5組(每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭豬)：負(fù)對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧(不含抗生素)，正對照組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.1%的混合型抗生素，試驗(yàn)組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加4%、6%、8%益生菌發(fā)酵蘋果渣的試驗(yàn)飼糧。試驗(yàn)期35 d。結(jié)果表明：與負(fù)對照組相比，飼糧添加抗生素和6%益生菌發(fā)酵蘋果渣均顯著提高斷奶仔豬平均日采食量和平均日增重(P<0.05)，顯著降低料重比、糞便中大腸桿菌數(shù)量和腹瀉率(P<0.05)；添加抗生素和6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可以顯著降低血清中尿素氮和總膽固醇的含量(P<0.05)，顯著提高生長激素、胰島素、三碘甲狀腺原氨酸和甲狀腺素含量(P<0.05)。隨著益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量的增加，生長性能、腹瀉率、糞便大腸桿菌數(shù)量以及血清中尿素氮、總膽固醇和激素指標(biāo)呈現(xiàn)二次變化趨勢(P<0.05)，當(dāng)添加量為6%時(shí)效果最好。與正對照組相比，添加益生菌發(fā)酵蘋果渣能極顯著增加糞便中菌群總數(shù)(P<0.01)，而對其他各項(xiàng)指標(biāo)均無顯著影響(P>0.05)。由此可見，添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣能提高斷奶仔豬的生長性能，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡，降低糞便中大腸桿菌數(shù)量和腹瀉率，提高血清中內(nèi)分泌激素含量，降低尿素氮和膽固醇含量。

關(guān)鍵詞：益生菌發(fā)酵蘋果渣；斷奶仔豬；生長性能；血清生化指標(biāo)；糞便菌群

2014年我國的蘋果種植面積和產(chǎn)量分別達(dá)到了235.53萬hm2和3 915萬t[1]，其中有25%用于生產(chǎn)濃縮蘋果汁、果醋等副產(chǎn)品，僅濃縮蘋果汁產(chǎn)渣量已達(dá)120萬t[2]。研究發(fā)現(xiàn)，蘋果渣中含有豐富的營養(yǎng)成分、維生素和蘋果酸，有利于微生物的直接吸收和利用，可作為家畜的飼料在畜禽中使用，但作為動物飼料，其蛋白質(zhì)含量偏低，影響了其他成分的利用[3-5]。因此需采用特定工藝，通過微生物發(fā)酵提高蘋果渣中蛋白質(zhì)含量，將蘋果渣轉(zhuǎn)化為營養(yǎng)豐富的微生物蛋白質(zhì)飼料，這是解決蘋果渣出路的重要途徑之一。另有研究指出，在蘋果渣發(fā)酵生產(chǎn)飼料蛋白質(zhì)過程中，不僅提高了果渣發(fā)酵產(chǎn)物的蛋白質(zhì)含量，還產(chǎn)生大量生物酶、活性肽、游離氨基酸等對動物營養(yǎng)具有重要作用的活性成分[6-8]。在一些研究中發(fā)現(xiàn)，通過發(fā)酵產(chǎn)品及其發(fā)酵過程中的代謝產(chǎn)物，可改善仔豬的生長性能、腸道健康，并可替代飼料中抗生素的使用[9-10]。因此，本試驗(yàn)擬用發(fā)酵蘋果渣飼喂家畜，觀察其對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)和糞便菌群的影響，以為其在家畜生產(chǎn)中應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)動物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)在陜西省興平市鑫亥畜牧養(yǎng)殖有限責(zé)任公司鑫亥生豬良種繁育場進(jìn)行，試驗(yàn)共進(jìn)行38 d(預(yù)試期3 d，正試期35 d)，預(yù)試期飼喂基礎(chǔ)飼糧，即不含抗生素和益生菌發(fā)酵蘋果渣，其組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)選取120頭初始體重為(5.87±0.10) kg的(21±1)日齡斷奶“杜×長×大”三元雜交仔豬，按單因子隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)隨機(jī)分成5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭仔豬。試驗(yàn)分組情況如下：負(fù)對照(NC)組，飼喂基礎(chǔ)飼糧；正對照(PC)組，在基礎(chǔ)飼糧中添加0.1%的硫酸黏桿菌素、桿菌肽鋅、金霉素混合型抗生素；試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加4%、6%、8%益生菌發(fā)酵蘋果渣。

1.2益生菌發(fā)酵蘋果渣的制備

1.2.1發(fā)酵原料

固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基，由果渣∶油渣∶尿素=17∶2∶1組成，滅菌后基質(zhì)含水量為60%；菌劑主要包括黑曲霉、安琪酵母、乳酸桿菌和芽孢桿菌。

1.2.2發(fā)酵過程

將黑曲霉斜面菌種接入裝有麩皮培養(yǎng)基的組培瓶中，30 ℃培養(yǎng)5 d后，以2%接種量接入裝有麩皮培養(yǎng)基的塑料盤，30 ℃培養(yǎng)10 d，然后和安琪酵母一起接種到固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，烘干后按一定比例加入乳酸桿菌和芽孢桿菌摻混制成成品。

1.2.3發(fā)酵蘋果渣成分

風(fēng)干蘋果渣添加油渣輔料后，經(jīng)復(fù)菌發(fā)酵劑發(fā)酵，可明顯提高飼料中蛋白質(zhì)含量，同時(shí)添加了能改善動物腸道菌群的乳酸菌和芽孢菌，使果渣改良為具有提供飼料蛋白質(zhì)和益生作用的生物活性蛋白質(zhì)飼料。其營養(yǎng)成分如下：安琪酵母、乳酸桿菌和芽孢桿菌的含量分別為1.4×104、5.5×107和8.7×105CFU/g；飼料中粗蛋白質(zhì)、總能、多肽和游離氨基酸的含量分別為29.29%、17.47 MJ/kg、4.04%、0.07%；蛋白質(zhì)酶、纖維素酶和果膠酶活性分別為114.06、793.08和198.03 U/g。

1.3試驗(yàn)飼糧及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)飼糧參照NRC(2012)配制，各組飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)前對豬舍進(jìn)行徹底地消毒，并對試驗(yàn)仔豬進(jìn)行統(tǒng)一驅(qū)蟲及接種疫苗。飼養(yǎng)期間在每天的07：30、14：30、21：30進(jìn)行飼喂，自由采食和飲水。每天準(zhǔn)確記錄給料量和剩料量，以計(jì)算平均日采食量。

表1　試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items組別GroupsNCPCⅠⅡⅢL-賴氨酸鹽酸鹽L-Lys·HCl0.460.460.520.560.60DL-蛋氨酸DL-Met0.040.040.060.070.09L-蘇氨酸L-Thr0.100.100.130.160.18L-色氨酸L-Try0.020.020.030.040.04抗生素Antibiotic0.10植酸酶Phytase0.010.010.010.010.01香味劑Flavor0.040.040.040.040.04預(yù)混料Premix1)1.001.001.001.001.00合計(jì)Total100.00100.00100.00100.00100.00營養(yǎng)水平Nutrientlevels2)消化能DE/(MJ/kg)14.0014.0014.0014.0014.00粗蛋白質(zhì)CP18.0018.0018.0018.0018.00鈣Ca0.800.800.800.800.80總磷TP0.430.430.410.410.41總賴氨酸TotalLys1.141.141.161.161.16可消化賴氨酸DigestibleLys1.041.041.041.041.04蛋氨酸Met0.310.310.330.330.34蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys0.570.570.570.570.57蘇氨酸Thr0.640.640.640.640.64色氨酸Try0.180.180.180.180.18

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供Premix provided the following per kg of diets：VA 12 000 IU，VD32 400 IU，VE 30 IU，VK33.2 mg，VB12.4 mg，VB28 mg，VB64 mg，VB1232 μg，葉酸 folic acid 1.32 mg，生物素 biotin 124 μg，煙酰胺 nicotinamide 34 mg，泛酸 pantothenic acid 20 mg，Cu 180 mg，F(xiàn)e 100 mg，Zn 100 mg，Mn 5.2 mg，Se 0.48 mg，I 0.26 mg。

2)計(jì)算值 Calculated values。

1.4樣品的采集與處理

1.4.1糞樣的采集

在試驗(yàn)期第7、14、21、28和35天，于飼喂前分別從每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取3頭試驗(yàn)仔豬，采集新鮮糞樣混勻后取10 g放入10 mL滅菌好的離心管中，加入甘油置于-80 ℃冰箱保存，用于糞便微生物菌群的測定。

1.4.2血樣的采集及血清的制備

分別于試驗(yàn)的第21天和第35天從每組的每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1頭豬，前腔靜脈采血10 mL，傾斜放置30 min，3 000 r/min離心15 min，收集血清，-20 ℃低溫冷藏，用于血清生化指標(biāo)的測定。

1.5測定指標(biāo)與方法

1.5.1生長性能

分別于試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)空腹稱重，根據(jù)初重和末重計(jì)算平均日增重。每天記錄各組的采食量，計(jì)算平均日采食量和料重比。每天16：30觀察仔豬糞便情況，記錄腹瀉頭數(shù)，計(jì)算腹瀉率。

腹瀉率(%)=[總腹瀉次數(shù)/(總頭數(shù)×

試驗(yàn)天數(shù))]×100。

1.5.2血清生化指標(biāo)

血清生化指標(biāo)：葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)和總膽固醇(TC)含量采用試劑盒法測定；血清激素指標(biāo)：生長激素(GH)、胰島素(INS)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)含量采用酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試劑盒進(jìn)行測定。試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.5.3糞便微生物菌群

采用平板稀釋法和最大可能數(shù)(MPN)法對糞便樣品中的菌群總數(shù)和大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。

菌群總數(shù)：根據(jù)樣品批次不同，選擇10-4～10-6連續(xù)稀釋度的3個(gè)樣品勻液，分別吸取1 mL于無菌平皿內(nèi)，每個(gè)稀釋度做2個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取1 mL空白稀釋液加入2個(gè)無菌平皿內(nèi)作空白對照，并及時(shí)將15～20 mL冷卻至46 ℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基[放置于(46±1) ℃恒溫水浴箱中保溫]傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。待瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，(37±1) ℃培養(yǎng)(48±2) h。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位(CFU)表示。每個(gè)稀釋度的菌落數(shù)采用2個(gè)平板的平均值，平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為每克樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。

大腸桿菌：選擇10-4～10-6連續(xù)稀釋度的3個(gè)樣品勻液，每個(gè)稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯，每管接種1 mL，(37±1) ℃培養(yǎng)(24±2) h，觀察倒管內(nèi)是否有氣泡產(chǎn)生，(24±2) h產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，如未產(chǎn)氣則繼續(xù)培養(yǎng)至(48±2) h，產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。用接種環(huán)從產(chǎn)氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)管中，(36±1) ℃培養(yǎng)(48±2) h，觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者，計(jì)為大腸菌群陽性管。按確證的大腸菌群LST陽性管數(shù)，檢索MPN表，報(bào)告每克樣品中大腸菌群的MPN值。

1.6數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。利用t檢驗(yàn)，比較PC組與添加4%、6%、8%益生菌發(fā)酵蘋果渣組的差異。線性和二次檢驗(yàn)飼糧中隨著益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量的增加對仔豬各項(xiàng)測定指標(biāo)的影響。以P<0.05為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，以P<0.01為差異極顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2結(jié)果與分析

2.1添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，各組之間初始重?zé)o顯著差異(P>0.05)；與NC組和Ⅲ組相比，其他組末重顯著提高(P<0.05)；Ⅱ組平均日增重較NC組、Ⅰ組和Ⅲ組分別極顯著提高了4.90%、2.44%和4.84%(P<0.01)，PC組顯著高于NC組和Ⅲ組(P<0.05)；與NC組相比，Ⅱ組平均日采食量極顯著提高了2.45%(P<0.01)，PC組和Ⅰ組平均日采食量也顯著提高(P<0.05)；PC組和Ⅱ組料重比極顯著低于NC組和Ⅲ組(P<0.01)。與PC組相比，飼糧中添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對試驗(yàn)全期的料重比有提高的趨勢(P=0.077)。隨著飼糧中添加益生菌發(fā)酵蘋果渣比例的增加，仔豬的平均日增重、平均日采食量和料重比呈現(xiàn)二次變化趨勢(P<0.05)，其中6%添加組效果最好。

表2　益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)相同小寫字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，肩標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.

*AP：益生菌發(fā)酵蘋果渣組，下表同。AP mean probiotic fermented apple pomace groups, the same as below.

2.2添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬腹瀉率的影響

由表3可知，試驗(yàn)1～21 d，PC組、Ⅰ組和Ⅱ組較Ⅲ組的腹瀉率分別顯著下降了17.98%、13.47%和15.73%(P<0.05)，PC組比NC組顯著下降了15.11%(P<0.05)，Ⅰ組和Ⅱ組與NC組相比分別下降了10.45%和14.29%(P>0.05)。試驗(yàn)22～35 d，NC組和Ⅲ組較PC組和Ⅱ組顯著升高(P<0.05)，同時(shí)，Ⅰ組較NC組顯著下降(P<0.05)?？梢?，無論前期還是后期，腹瀉率隨著益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量的增加都是先下降后升高，呈現(xiàn)二次變化趨勢(P<0.05)，且6%添加組腹瀉率最低。

表3　益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬腹瀉率的影響

2.3添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，各組血清TP、ALB、GLU和TG含量差異均不顯著(P>0.05)，但Ⅱ組和PC組血清TP和ALB含量較NC組均有明顯上升。在UN含量方面，與NC組相比，試驗(yàn)21 d PC組和Ⅱ組分別下降了34.67%和38.21%(P<0.05)，試驗(yàn)35 d PC組和Ⅱ組分別下降了15.94%和16.52%(P<0.05)；在TC含量方面，與NC組相比，PC組、Ⅰ組和Ⅱ組均呈下降趨勢，且差異顯著(P<0.05)。隨著益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量的增加，血清UN和TC含量呈現(xiàn)二次變化趨勢(P<0.05)，且試驗(yàn)21 d血清TC含量呈線性降低(P=0.011)。與PC組相比，益生菌發(fā)酵蘋果渣組各血清生化指標(biāo)均無顯著變化(P>0.05)。結(jié)果表明，在飼糧中添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可以明顯升高血清中TP和ALB含量，顯著降低UN和TC含量。

2.4添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清激素指標(biāo)的影響

由表5可知，與NC組和Ⅲ組相比，PC組和Ⅱ組血清GH、INS、T3和T4含量都顯著升高(P<0.05)，其中PC組和Ⅱ組血清GH含量升高達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。隨著益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量的增加，試驗(yàn)21 d血清INS、T3、T4含量均呈現(xiàn)先上升后降低的二次趨勢(P<0.05)，血清GH含量有二次變化趨勢(P=0.059)；試驗(yàn)35 d血清GH、INS、T3含量呈現(xiàn)先上升后降低的二次趨勢(P<0.05)。結(jié)果表明，飼糧添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清GH、INS、T3和T4含量的影響最為明顯。

2.5添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬糞便微生物菌群的影響

由表6可知，在整個(gè)飼養(yǎng)階段，PC組總菌數(shù)均顯著低于NC組和益生菌發(fā)酵蘋果渣組(P<0.05)，益生菌發(fā)酵蘋果渣組較NC組呈明顯上升趨勢，但差異不顯著(P>0.05)。在大腸桿菌方面，與NC組和Ⅲ組相比，第7天PC組和Ⅱ組極顯著降低(P<0.01)，第14和21天顯著降低(P<0.05)；第28和35天，與NC組相比，PC組、Ⅰ組和Ⅱ組均顯著降低(P<0.05)，Ⅲ組也明顯下降，但差異不顯著(P>0.05)。隨著益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量的增加，大腸桿菌呈現(xiàn)顯著的二次變化趨勢(P<0.05)。PC組與益生菌發(fā)酵蘋果渣組相比，菌群總數(shù)極顯著下降(P<0.01)。結(jié)果表明，在仔豬斷奶飼糧中添加益生菌發(fā)酵蘋果渣可以明顯地提高菌群總數(shù)，降低大腸桿菌數(shù)，其中以6%添加量效果最佳。

表4　益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

表5　益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清激素指標(biāo)的影響

3討論

3.1添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬生長性能的影響

仔豬斷奶后容易出現(xiàn)采食量下降、免疫力降低、生長停滯和腹瀉等一系列的“早期斷奶應(yīng)激綜合征”，嚴(yán)重影響早期斷奶仔豬的成活率和養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)中添加的益生菌發(fā)酵蘋果渣是由新鮮果渣通過由酵母菌、乳酸菌和芽孢桿菌組成的混合型微生態(tài)制劑固態(tài)發(fā)酵制得。益生菌發(fā)酵蘋果渣中除了含有大量活菌，還有益生菌代謝產(chǎn)生的蛋白質(zhì)酶、淀粉酶和纖維素酶以及活性肽和游離氨基酸，可以提高仔豬的消化能力和飼料利用率，進(jìn)而提高生長性能。此外，芽孢桿菌和酵母菌等好氧菌的代謝為腸道乳酸菌的繁殖提供良好的厭氧環(huán)境從而產(chǎn)生大量乳酸，抑制致病性大腸桿菌的大量繁殖：一方面使腸道pH降低，改善腸道微生態(tài)平衡，提高消化能力[11-12]，提高動物的免疫力，降低發(fā)病率和腹瀉率；另一方面，可以改善飼糧的適口性，提高動物采食量。

表6　益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬糞便微生物菌群的影響

從本試驗(yàn)結(jié)果來看，并非益生菌發(fā)酵蘋果渣的添加比例越高，斷奶仔豬的生長性能越好，存在一個(gè)最佳添加量的問題。在綜合平均日增重、平均日采食量、料重比和腹瀉率指標(biāo)基礎(chǔ)上，添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣和PC組效果最好，可以顯著提高仔豬平均日增重和平均日采食量，降低料重比和腹瀉率，提高生長性能。吳紅翔等[13]研究表明，用3%蘋果渣發(fā)酵飼料代替基礎(chǔ)飼糧飼喂鵪鶉，能夠改善鵪鶉蛋品質(zhì)，提高生產(chǎn)性能。García等[14]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加益生菌能明顯改善斷奶仔豬生長性能，提高飼料轉(zhuǎn)化率，減少腹瀉的發(fā)生，提高養(yǎng)殖效益。這都與本試驗(yàn)的結(jié)果基本一致。

3.2添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

仔豬血清生化指標(biāo)可綜合反映機(jī)體的新陳代謝狀況。比如血清中TP和UN含量能夠準(zhǔn)確反映動物機(jī)體對蛋白質(zhì)的代謝吸收情況和飼糧中氨基酸的平衡狀況[15-16]。本試驗(yàn)中各組血清TP和ALB含量均無顯著變化，但添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可以顯著降低血清UN含量，表明益生菌發(fā)酵蘋果渣可以增加機(jī)體氮沉積量，有利于蛋白質(zhì)合成，促進(jìn)生長發(fā)育，這可能與益生菌發(fā)酵蘋果渣中的活性肽和游離氨基酸含量密切相關(guān)。曾李等[17]研究表明，渣類飼料通過益生菌發(fā)酵后能夠顯著提高飼糧中小肽、寡肽和游離氨基酸的含量，從而提高飼糧中蛋白質(zhì)利用率，有利于提高動物生長性能。

血脂和脂蛋白含量反映了機(jī)體在穩(wěn)態(tài)下的代謝調(diào)節(jié)，特別是脂肪酸在脂肪組織和肝臟之間循環(huán)的基本調(diào)節(jié)[18]。血清中TG和TC含量可反映脂肪在動物機(jī)體的代謝狀況。本試驗(yàn)各組間血清TG含量沒有顯著變化，但當(dāng)益生菌發(fā)酵蘋果渣添加量達(dá)到6%時(shí)，血清TC含量較NC組顯著降低，表明在飼糧中添加一定比例的益生菌發(fā)酵蘋果渣能提高機(jī)體對脂肪的利用能力，從而為蛋白質(zhì)的合成提供能量，促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育，進(jìn)而提高仔豬的生長性能。

3.3添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬血清激素水平的影響

“下丘腦-垂體-靶器官”軸上GH、INS和甲狀腺激素等激素對動物生長起重要的調(diào)節(jié)作用[19]。GH處于生長軸的中心環(huán)節(jié)，其主要生理作用是促進(jìn)蛋白質(zhì)沉積和骨骼生長，具體表現(xiàn)為通過胰島素樣生長因子(IGF)促進(jìn)氨基酸進(jìn)入細(xì)胞，加強(qiáng)DNA、RNA的合成進(jìn)而促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，促進(jìn)機(jī)體呈正氮平衡。對于仔豬來說，GH是提高蛋白質(zhì)沉積的主要生理因子。INS是調(diào)控機(jī)體糖代謝的主要激素，能夠促進(jìn)組織細(xì)胞對葡萄糖的攝取和利用，加速糖原合成，還能夠促進(jìn)細(xì)胞對氨基酸的攝取、抑制蛋白質(zhì)分解和糖原異生，利于細(xì)胞的生長[19]。同時(shí)，INS還可與GH協(xié)同促進(jìn)機(jī)體的生長發(fā)育。甲狀腺激素對蛋白質(zhì)的合成具有重要作用，并且可通過調(diào)節(jié)糖類和脂肪的代謝來促進(jìn)器官和組織的分化。T3是甲狀腺激素在動物體內(nèi)發(fā)揮生理作用的主要部分，主要通過調(diào)控垂體中GH基因的表達(dá)和GH的合成以及調(diào)節(jié)INS水平來促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，影響動物的生長發(fā)育。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在斷奶仔豬飼糧中添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可使體內(nèi)與生長有關(guān)的內(nèi)源激素(GH、INS和甲狀腺激素)含量有顯著性升高，從而促進(jìn)生長。王書鳳等[20]研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加組合抗生素可顯著提高內(nèi)源激素(GH、ISN和T3)含量；盧昱屹等[21]研究發(fā)現(xiàn)，在仔豬飼糧中添加10%和20%的發(fā)酵豆粕可以顯著提高血清中GH含量，促進(jìn)生長，降低料重比。以上研究結(jié)果都與本試驗(yàn)一致。

3.4添加益生菌發(fā)酵蘋果渣對斷奶仔豬糞便微生物菌群的影響

斷奶應(yīng)激的主要表現(xiàn)之一是仔豬腸道微生物菌群之間比例失調(diào)，使腸道優(yōu)勢菌群發(fā)生更替，致使大腸桿菌、沙門氏菌等一些致病菌或者條件致病菌大量繁殖，打破腸道微生態(tài)平衡，排放內(nèi)毒素或產(chǎn)生其他毒副作用，從而引起機(jī)體消化機(jī)能紊亂，導(dǎo)致動物生長性能下降。有研究發(fā)現(xiàn)，在仔豬斷奶階段應(yīng)用以乳酸菌為主的單一或者復(fù)合益生菌能夠干預(yù)并糾正腸道微生態(tài)體系失衡現(xiàn)象，從而保證其良好生長性能發(fā)揮[11,22]。Dong等[23]研究表明，為斷奶仔豬飼喂益生菌可以顯著降低糞便中大腸桿菌的數(shù)量，提高生長性能和免疫力。本試驗(yàn)研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣能夠顯著降低糞便中大腸桿菌數(shù)量，對病原菌具有較好的抑菌效果，說明在飼糧中添加適宜水平的益生菌發(fā)酵蘋果渣產(chǎn)生了與抗生素相似的結(jié)果，從而降低腹瀉率，提高生長性能。

4結(jié)論

① 飼糧添加益生菌發(fā)酵蘋果渣可顯著提高斷奶仔豬平均日增重和平均日采食量，顯著降低料重比。

② 飼糧添加益生菌發(fā)酵蘋果渣可顯著降低斷奶仔豬糞便中大腸桿菌數(shù)量，降低腹瀉率。

③ 斷奶仔豬飼糧中益生菌發(fā)酵蘋果渣較為適宜的添加量為6%。

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(責(zé)任編輯田艷明)

Probiotic Fermented Apple Pomace Affects Growth Performance, Serum Biochemical Indicators and Fecal Microbial Flora of Weaned Piglets

GAO Yin1WANG Guojun1LAI Hangxian2YANG Yuxin1*

(1. College of Animal Science and Technology, Northwest A & F University, Yangling 712100, China; 2. College of Natural Resources and Environment, Northwest A & F University, Yangling 712100, China)

Abstract:This study was conducted to evaluate the effects of probiotic fermented apple pomace on growth performance, serum biochemical indicators and fecal microbial flora of weaned piglets. A total of 120 weaned piglets with an average initial body weight of (5.87±0.10) kg were randomly assigned to 5 groups with 3 replicates per group and 8 pigs per replicate. Pigs were allotted to 5 diets, including a basal diet (without antibiotic, negative control group), a basal diet+0.1% hybrid antibiotics (positive control group) and three experimental diets supplemented with probiotic fermented apple pomace at the levels of 4%, 6% and 8% in the basal diet, respectively. The experiment lasted for 35 d. Results showed that, compared with negative control group, antibiotic and 6% probiotic fermented apple pomace supplementation got higher average daily gain and average daily feed intake (P<0.05), but lower feed/gain, fecal E. coli population and diarrhea rate (P<0.05). Antibiotic and 6% probiotic fermented apple pomace supplementation also significantly decreased serum urea nitrogen and total cholesterol contents (P<0.05), while significantly increased growth hormone, insulin, triiodothyronine and thyroxine contents (P<0.05). With the increasing of probiotic fermented apple pomace supplemental level, growth performance, diarrhea rate, fecal E. coli population, serum urea nitrogen, total cholesterol and hormone indices showed quadratic effect changes (P<0.05), with 6% probiotic fermented apple pomace supplementation got the best effect. Compared with positive control group, probiotic fermented apple pomace supplementation extremely significantly increased the total number of fecal bacteria (P<0.01)， but did not significantly affect the other indices (P>0.05). It is concluded that dietary supplementation of 6% probiotic fermented apple pomace can improve growth performance and serum endocrine hormones, regulate intestinal flora balance, and reduce fecal E. coli population, diarrhea rate, serum urea nitrogen and cholesterol of weaned piglets.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(5)：1515-1524]

Key words:probiotic fermented apple pomace; weaned piglet; growth performance; serum biochemical indicators; fecal microbial flora

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.05.028

收稿日期：2015-12-30

基金項(xiàng)目：國家科技支撐計(jì)劃——黃土高原農(nóng)果牧復(fù)合循環(huán)技術(shù)集成與示范(2012BAD14B11)；特色產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新鏈——農(nóng)業(yè)領(lǐng)域(K3320215118)

作者簡介：高印(1988—)，男，河南方城人，碩士研究生，研究方向?yàn)閯游餇I養(yǎng)與飼料科學(xué)。E-mail: gy380671315@163.com *通信作者：楊雨鑫，副教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail: yxyang@nwsuaf.edu.cn

中圖分類號：S816.6

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1006-267X(2016)05-1515-10

*Corresponding author, associate professor, E-mail: yxyang@nwsuaf.edu.cn