飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和鈣磷代謝的影響

張　璐　李　靜　麥康森　艾慶輝*　張春曉　李會(huì)濤　袁禹惠

(1.中國(guó)海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，教育部海水養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青島266003；2.通威股份有限公司技術(shù)中心，成都610041；3.中國(guó)石油大學(xué)(華東)化工學(xué)院，青島266580)

飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和鈣磷代謝的影響

張璐1,2李靜3麥康森1艾慶輝1*張春曉1李會(huì)濤1袁禹惠2

(1.中國(guó)海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，教育部海水養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青島266003；2.通威股份有限公司技術(shù)中心，成都610041；3.中國(guó)石油大學(xué)(華東)化工學(xué)院，青島266580)

摘要：本研究旨在探討飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和鈣磷代謝的影響。以初始體重為(2.26±0.03) g的鱸魚(yú)幼魚(yú)為試驗(yàn)對(duì)象，隨機(jī)分為6組(每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15尾魚(yú))，飼喂維生素D含量實(shí)測(cè)值分別為34.2、219.4、393.8、775.9、1 534.1和3 091.2 IU/kg的等氮等能飼料，進(jìn)行9周的養(yǎng)殖試驗(yàn)。結(jié)果表明：1)當(dāng)飼料中維生素D含量在34.2～393.8 IU/kg時(shí)，鱸魚(yú)的增重率隨著飼料中維生素D含量的升高顯著上升(P<0.05)，但是當(dāng)飼料中維生素D含量高于393.8 IU/kg時(shí)，鱸魚(yú)的增重率變化不顯著并且出現(xiàn)平臺(tái)期(P>0.05)。同樣，鱸魚(yú)的特定生長(zhǎng)率、飼料效率和蛋白質(zhì)效率均表現(xiàn)出與增重率相似的變化趨勢(shì)。2)飼料中維生素D含量顯著影響了魚(yú)體粗灰分、鈣和磷含量，脊椎骨、鰓蓋骨和鱗片粗灰分含量以及脊椎骨鈣和磷含量(P<0.05)，但對(duì)魚(yú)體粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和水分含量沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。3)飼料中維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)血清堿性磷酸酶活性及羥脯氨酸、鈣離子和無(wú)機(jī)磷含量均有顯著影響(P<0.05)。4)飼料中維生素D含量顯著影響了鱸魚(yú)肝體指數(shù)及肝臟脂肪和維生素D含量(P<0.05)。隨著飼料中維生素D含量的升高，肝臟維生素D含量呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，并在飼料中維生素D含量達(dá)到1 534.1 IU/kg時(shí)變化趨于平穩(wěn)。以增重率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用折線(xiàn)模型分析得出鱸魚(yú)幼魚(yú)獲得最大生長(zhǎng)時(shí)對(duì)飼料中維生素D的需求量為431.0 IU/kg飼料。以肝臟維生素D含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用二次曲線(xiàn)模型分析得出鱸魚(yú)幼魚(yú)獲得最大肝臟維生素D沉積量時(shí)對(duì)飼料中維生素D的需求量為2 444.4 IU/kg飼料。

關(guān)鍵詞：鱸魚(yú)；維生素D；生長(zhǎng)；需求；鈣磷代謝

維生素D最重要的種類(lèi)為維生素D2[又名麥角鈣化醇(ergocalciferol)]和維生素D3(又名膽鈣化醇(cholecalciferol)]。麥角鈣化醇的先體是來(lái)自植物的麥角固醇，膽鈣化醇的先體是來(lái)自動(dòng)物的7-脫氫膽固醇，先體經(jīng)紫外線(xiàn)照射而轉(zhuǎn)變成維生素D2和維生素D3。維生素D3不僅是一種營(yíng)養(yǎng)成分，也是一種激素原，其本身并沒(méi)有任何內(nèi)在的生物學(xué)活性，只有首先在肝臟中代謝成25-羥維生素D3[25(OH)D3]，然后在腎臟中轉(zhuǎn)化為1α,25-二羥基維生素D3[1α,25(OH)2D3]及24R,25-二羥基維生素D3[24R,25(OH)2D3]后才具有生物活性。維生素D能夠調(diào)節(jié)體內(nèi)的鈣磷平衡，影響甲狀旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)對(duì)骨骼的作用[1]。新的研究發(fā)現(xiàn)，除調(diào)節(jié)鈣磷平衡外，維生素D可能還在如代謝、細(xì)胞增殖與分化、自身免疫、心血管生理功能、神經(jīng)與肌肉功能及防癌等方面發(fā)揮重要生理功能[2]。

鱸魚(yú)(Lateolabraxjaponicus)屬兇猛的肉食性魚(yú)類(lèi)，其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，深受人們的喜愛(ài)。鱸魚(yú)生長(zhǎng)速度快，對(duì)鹽度和溫度的適應(yīng)范圍較廣，無(wú)需室內(nèi)越冬，是我國(guó)南、北方海水養(yǎng)殖的主要種類(lèi)之一。目前有關(guān)鱸魚(yú)營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究已有一些報(bào)道，初步確定了鱸魚(yú)的蛋白質(zhì)以及脂肪的最適需要量[9-12]。杜震宇等[13]研究了不同脂肪源和降脂因子對(duì)鱸魚(yú)生長(zhǎng)、組織和血液生化指標(biāo)的影響。近年來(lái)，本實(shí)驗(yàn)室也在鱸魚(yú)的適宜氮能比[14]、礦物質(zhì)需求[15-16]、外源酶添加[17]等營(yíng)養(yǎng)生理方面做了大量的研究工作。在維生素方面，本實(shí)驗(yàn)室研究了維生素C對(duì)鱸魚(yú)生長(zhǎng)及免疫的影響[18]，但在鱸魚(yú)上關(guān)于維生素D需求的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)以鱸魚(yú)幼魚(yú)為研究對(duì)象，旨在探討鱸魚(yú)幼魚(yú)對(duì)精制飼料中維生素D的定量需求，同時(shí)在此基礎(chǔ)之上研究飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)魚(yú)體常規(guī)成分、肝臟維生素D含量、血清生理與生化指標(biāo)以及骨骼礦化和鈣、磷含量的影響，以期為鱸魚(yú)人工飼料的開(kāi)發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)飼料制作

以酪蛋白和明膠為蛋白質(zhì)源，豆油和鯡魚(yú)油為脂肪源，糊精為糖源，褐藻酸鈉為黏合劑，并添加混合氨基酸模擬鱸魚(yú)魚(yú)體氨基酸模式，配制出精制基礎(chǔ)飼料(表1)，在每千克基礎(chǔ)飼料中分別添加0、200、400、800、1 600和3 200 IU維生素D3，配制出6種等氮等能的試驗(yàn)飼料，試驗(yàn)飼料中維生素D含量實(shí)測(cè)值分別為34.2、19.4、393.8、775.9、1 534.1和3 091.2 IU/kg。

各種飼料原料分別粉碎后過(guò)80目篩網(wǎng)，然后將各種原料混合均勻，再與水和豆油及鯡魚(yú)油充分混勻，用F-26Ⅱ型雙螺桿擠條機(jī)(華南理工大學(xué)科技實(shí)業(yè)總廠(chǎng)研制)加工成型，制得的飼料在45 ℃烘箱中烘至水分含量達(dá)到9%～10%。烘干的飼料破碎過(guò)篩后得到2種顆粒大小不同的飼料(1.5 mm×3.0 mm和2.5 mm×4.0 mm)，將這2種顆粒飼料分別密封進(jìn)塑料袋儲(chǔ)存在-20 ℃?zhèn)溆谩?/p>

表1　基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)混合氨基酸組成(干物質(zhì)基礎(chǔ))Composition of amino acid mixture (DM basis)：天冬氨酸 aspartic acid 1.25%，甘氨酸 glycine 0.02%，丙氨酸 alanine 0.67%，精氨酸 arginine 0.73%，半胱氨酸 cystine 0.04%，纈氨酸 valine 0.13%，蛋氨酸 methionine 0.29%。

2)每千克礦物質(zhì)預(yù)混料含有 Contained the following per kg of mineral premix：NaF 200 mg，KI 80 mg，CoCl2·6H2O(1%) 5 000 mg，CuSO4·5H2O 1 000 mg，F(xiàn)eSO4·H2O 8 000 mg， ZnSO4·H2O 5 000 mg，MnSO4·H2O 6 000 mg，MgSO4·7H2O 120 000 mg，Ca (H2PO4)2·H2O 750 000 mg，NaCl 1 000 mg，沸石粉 zoelite powder 94 270 mg。

3)維生素預(yù)混料為每千克飼料提供 Vitamin premix provided the following per kg of the diet：VB125 mg，VB245 mg，VB620 mg，VB120.1 mg，VK310 mg，肌醇 inositol 800 mg，泛酸 pantothenic acid 60 mg，煙酸 niacin acid 200 mg，葉酸 folic acid 20 mg，生物素 biotin 1.20 mg，VA 32 mg，VE 120 mg，VC 2 000 mg，氯化膽堿 choline chloride 2 500 mg，乙氧基喹啉 ethoxyquin 150 mg，小麥粉 wheat middling 14 017 mg。

1.2飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用鱸魚(yú)選用當(dāng)年同一批海捕魚(yú)苗，于水泥池(3.0 m×2.0 m×1.5 m)中暫養(yǎng)，以基礎(chǔ)飼料飽食投喂，使之逐漸適應(yīng)試驗(yàn)飼料和養(yǎng)殖環(huán)境。暫養(yǎng)結(jié)束后，試驗(yàn)魚(yú)饑餓24 h，然后稱(chēng)重，挑選出體格健壯、規(guī)格一致的鱸魚(yú)[初始體重為(2.26±0.03) g]隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)，以重復(fù)為單位放養(yǎng)于室內(nèi)流水系統(tǒng)300 L的玻璃纖維桶(水量250 L)內(nèi)，放養(yǎng)密度為15尾/桶。每天投喂試驗(yàn)飼料2次(07:00、17:00)，表觀飽食投喂。試驗(yàn)1～4周投喂顆粒大小為1.5 mm×3.0 mm的飼料，5～9周投喂顆粒大小為2.5 mm×4.0 mm的飼料。每次投喂前1 h吸污，投喂后1 h收集殘餌，烘干，稱(chēng)重，每天記錄投飼量。如有死魚(yú)，記錄數(shù)量并稱(chēng)重。試驗(yàn)用海水經(jīng)沉淀、1級(jí)砂濾，持續(xù)充氣，水流量為1 L/min,水溫為24.0～27.0 ℃，鹽度為28.0‰～29.5‰，pH在8.0～8.1之間，溶解氧含量在7 mg/L左右。飼養(yǎng)9周后，將試驗(yàn)魚(yú)饑餓24 h，計(jì)數(shù)，并用丁香酚(1∶10 000)(上海試劑廠(chǎng)產(chǎn)品)麻醉。從每桶中隨機(jī)選取3條鱸魚(yú)，用1 mL的無(wú)菌注射器從尾靜脈取血，待析出血清后保存?zhèn)溆茫溆嗟聂~(yú)全部稱(chēng)重并取樣。取樣后的魚(yú)體保存于-20 ℃冰箱中，血清保存于-80 ℃冰箱中。

1.3樣品分析測(cè)定方法

飼料原料、飼料和魚(yú)體常規(guī)成分的分析全部采用AOAC(1995)[19]的方法。其中水分含量測(cè)定采用105 ℃烘干恒重法，粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定采用半微量凱氏定氮法(總氮×6.25)，粗脂肪含量測(cè)定采用索氏抽提法(乙醚為溶劑)，粗灰分含量測(cè)定采用馬福爐中600 ℃灼燒12 h稱(chēng)重法。肝臟脂肪含量采用Folch等[20]的方法測(cè)定。血清堿性磷酸酶(AKP)活性及羥脯氨酸(Hpro)、鈣離子(Ca2+)和無(wú)機(jī)磷(Pi)含量均采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒測(cè)定。飼料和肝臟維生素D含量采用高效液相色譜法[21]檢測(cè)。鱸魚(yú)全魚(yú)氨基酸組成樣品處理和測(cè)定采用Zhang等[22]方法。魚(yú)體和脊椎骨中鈣和磷含量用VISTA-MPX型電感耦合等離子發(fā)射光譜(ICP-OES)(瓦里安)測(cè)定。每份樣品均重復(fù)測(cè)定3次。

1.4計(jì)算公式

增重率(WGR)=100×(Wt-W0)/W0；

特定生長(zhǎng)率(SGR)=100×(lnWt-lnW0)/t；

飼料效率(FER)=100×(Wt×Nt-W0×N0)/Id[23]；

蛋白質(zhì)效率(PER)=100×(Wt×Nt-W0×N0)/Ip；

存活率(SR)=100×Nt/N0；

肝體指數(shù)(HSI)(%)=100×WL/WB。

式中：W0為初始體重；Wt為終末體重；t為試驗(yàn)天數(shù)；Nt為終末尾數(shù)；N0為初始尾數(shù)；Id飼料攝入量(以干重計(jì))；Ip粗蛋白質(zhì)攝入量(以干重計(jì))；WL為肝臟重；WB為體重。

1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行方差和相關(guān)性分析。先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，若差異達(dá)到顯著水平(P<0.05)，則采用Tukey’s檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2結(jié)果

2.1飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)指標(biāo)的影響

由表2可知，飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)的存活率沒(méi)有產(chǎn)生顯著影響(P>0.05)，但是顯著影響了鱸魚(yú)幼魚(yú)的增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料效率和蛋白質(zhì)效率(P<0.05)。飼料中不添加維生素D組(維生素D含量34.2 IU/kg組)鱸魚(yú)幼魚(yú)的存活率(73.3%)最低，但是與其他各組(82.2%～93.3%)差異不顯著(P>0.05)。當(dāng)飼料中維生素D含量在34.2～393.8 IU/kg時(shí)，鱸魚(yú)幼魚(yú)的增重率隨著飼料中維生素D含量的升高顯著上升(P<0.05)，但是當(dāng)飼料中維生素D含量高于393.8 IU/kg 時(shí)，鱸魚(yú)幼魚(yú)的增重率變化不顯著并且出現(xiàn)平臺(tái)期(P>0.05)。同樣，鱸魚(yú)幼魚(yú)的特定生長(zhǎng)率、飼料效率和蛋白質(zhì)效率均表現(xiàn)出與增重率相似的變化趨勢(shì)。飼料中維生素D含量(X)與鱸魚(yú)幼魚(yú)增重率(Y)的關(guān)系用折線(xiàn)模型表示為：Y=652.5-1.24(431.0-X)，此時(shí)鱸魚(yú)幼魚(yú)對(duì)維生素D的需求量為431.0 IU/kg飼料(圖1)。

2.2飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)體成分的影響

由表3可知，飼料中不同維生素D含量顯著影響了鱸魚(yú)幼魚(yú)魚(yú)體粗灰分、鈣和磷的含量(P<0.05)，但是對(duì)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和水分的含量沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。隨著飼料中維生素D含量的升高，鱸魚(yú)幼魚(yú)魚(yú)體粗灰分的含量呈增加趨勢(shì)，且維生素D含量最高組(維生素D含量3 091.2 IU/kg組)顯著高于維生素D含量34.2 IU/kg組(P<0.05)。同樣，鱸魚(yú)幼魚(yú)魚(yú)體鈣和磷的含量與粗灰分含量的變化趨勢(shì)基本一致，而鈣的含量雖然在維生素D含量最高組略低于次高組(維生素D含量1 534.1 IU/kg組)，但是并無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表2　飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)指標(biāo)的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

圖1　飼料中維生素D含量與鱸魚(yú)幼魚(yú)增重率的關(guān)系

2.3飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)血清堿性磷酸酶活性及羥脯氨酸、鈣離子和無(wú)機(jī)磷含量的影響

由表4可知，隨著飼料中維生素D含量的升高，鱸魚(yú)幼魚(yú)血清堿性磷酸酶的活性及鈣離子的含量均表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)，而血清無(wú)機(jī)磷的含量則表現(xiàn)出持續(xù)升高的趨勢(shì)。血清羥脯氨酸的含量在不添加維生素D組出現(xiàn)最高值，顯著高于維生素D含量為219.4和775.9 IU/kg組(P<0.05)，但是與其他各組相比無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.4飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)脊椎骨、鰓蓋骨和鱗片粗灰分以及脊椎骨鈣和磷含量的影響

由表5可知，飼料中維生素D含量由34.2 IU/kg升至1 534.1 IU/kg時(shí)，鱸魚(yú)幼魚(yú)脊椎骨、鰓蓋骨、鱗片粗灰分以及脊椎骨鈣含量均表現(xiàn)出顯著的升高(P<0.05)，在維生素D的含量由1 534.1 IU/kg升至3 091.2 IU/kg時(shí)雖略有下降，但是差異并不顯著(P>0.05)。脊椎骨磷含量與飼料中維生素D含量正相關(guān)，隨著飼料中維生素D含量的升高表現(xiàn)出上升的趨勢(shì)，且維生素D含量為1 534.1和3 091.2 IU/kg組顯著高于維生素D含量為34.2、219.4和393.8 IU/kg組(P<0.05)。

2.5飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)肝體指數(shù)及肝臟脂肪和維生素D含量的影響

由表6可知，飼料中不同維生素D含量顯著影響了鱸魚(yú)幼魚(yú)肝體指數(shù)及肝臟脂肪和維生素D含量(P<0.05)。隨著飼料中維生素D含量的升高，肝體指數(shù)和肝臟脂肪含量呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，而肝臟維生素D含量則呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，并均在飼料中維生素D含量達(dá)到1 534.1 IU/kg時(shí)變化趨于平穩(wěn)。飼料中維生素D含量(X)與鱸魚(yú)幼魚(yú)肝臟維生素D含量(Y)的關(guān)系用二次曲線(xiàn)模型表示為：Y=-9E-07X2+0.004 4X+0.881 6，此時(shí)鱸魚(yú)幼魚(yú)對(duì)維生素D的需求量為2 444.4 IU/kg飼料(圖2)。

表3　飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)體成分的影響(濕重基礎(chǔ))

表4　飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)血清堿性磷酸酶活性及羥脯氨酸、鈣離子和無(wú)機(jī)磷含量的影響

3討論

表5　飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)脊椎骨、鰓蓋骨和鱗片粗灰分以及脊椎骨鈣和磷含量的影響(干重基礎(chǔ))

養(yǎng)殖9周后，飼喂不添加維生素D飼料的鱸魚(yú)的存活率雖然低于其余各組，但未表現(xiàn)出顯著差異，并且在養(yǎng)殖后期沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的維生素D缺乏癥，但是解剖時(shí)發(fā)現(xiàn)維生素D含量最低組的鱸魚(yú)鰓蓋骨脆弱、易碎。與Halver[27]報(bào)道的“過(guò)量的維生素D會(huì)導(dǎo)致養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)鰓蓋脆弱”有所出入，本試驗(yàn)在飼料中維生素D含量最高組并未觀察到類(lèi)似的癥狀，經(jīng)過(guò)對(duì)鰓蓋骨粗灰分含量進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)維生素D含量最低組鰓蓋骨粗灰分含量也最低，并顯著低于維生素D含量最高組。至于維生素D含量最高組脊椎骨、鰓蓋骨中粗灰分含量仍較高，可能與維生素D含量沒(méi)有達(dá)到鱸魚(yú)承受的極限或養(yǎng)殖周期不夠長(zhǎng)有關(guān)。

表6　飼料中不同維生素D含量對(duì)鱸魚(yú)幼魚(yú)肝體指數(shù)及肝臟脂肪和維生素D含量的影響(濕重基礎(chǔ))

圖2　飼料維生素D含量與鱸魚(yú)幼魚(yú)肝臟維生素D含量的關(guān)系

在對(duì)鱸魚(yú)脊椎骨、鰓蓋骨和鱗片粗灰分以及脊椎骨鈣含量分析中，我們發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)的最大值無(wú)一例外都出現(xiàn)在維生素D含量次高組(即飼料中維生素含量為1 534.1 IU/kg時(shí))，而不是出現(xiàn)在維生素D含量最高組(即飼料中維生素含量為3 091.2 IU/kg時(shí))，維生素D含量最高組的數(shù)值雖然在統(tǒng)計(jì)分析上與次高組沒(méi)有顯著差異，但都有不同程度的降低。人類(lèi)醫(yī)學(xué)研究表明，過(guò)量維生素D導(dǎo)致骨骼廣泛脫鈣，骨鹽含量顯著降低，從而容易導(dǎo)致骨折。在本試驗(yàn)雖未觀察到骨折現(xiàn)象，但是維生素D含量最高組的骨鹽含量已經(jīng)開(kāi)始有一定程度的下降，不過(guò)下降程度與維生素D含量最低組比起來(lái)相差甚遠(yuǎn)，結(jié)合維生素D含量最低組骨骼有機(jī)質(zhì)的流失情況最為嚴(yán)重這一點(diǎn)，也說(shuō)明了為什么鰓蓋骨脆弱、易碎的現(xiàn)象出現(xiàn)在維生素D含量最低組而不是維生素D含量最高組。

鱸魚(yú)幼魚(yú)肝體指數(shù)和肝臟脂肪含量的變化趨勢(shì)一致，維生素D含量最低組表現(xiàn)出最高的肝體指數(shù)(2.69%)和肝臟脂肪含量(15.67%)，然后隨著飼料中維生素D含量的上升而逐漸下降(表6)。George等[30]研究表明虹鱒攝食維生素D缺乏的飼料表現(xiàn)為生長(zhǎng)下降和肝臟脂肪含量增加，這與本試驗(yàn)得到的結(jié)論是一致的。但是，本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)鱸魚(yú)幼魚(yú)整個(gè)魚(yú)體的脂肪含量卻是隨著飼料中維生素D含量的上升而逐漸上升，在肝臟脂肪含量最高組卻表現(xiàn)出最低的魚(yú)體粗脂肪含量(5.3%)。據(jù)此推測(cè)：魚(yú)體較高的肝臟脂肪含量應(yīng)該并不是從外界攝入了更多的脂肪或脂肪合成能力升高的結(jié)果，而很可能是因?yàn)楦闻K中維生素D過(guò)量累積造成肝臟磷脂合成障礙或載脂蛋白合成障礙導(dǎo)致甘油三酯難以轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟，從而在肝臟中大量積累引起病變，與肝臟脂肪含量異常升高相對(duì)應(yīng)的是整個(gè)魚(yú)體脂肪含量的下降。

4結(jié)論

當(dāng)以增重率為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，鱸魚(yú)幼魚(yú)對(duì)維生素D的需求量為431.0 IU/kg飼料，而當(dāng)以肝臟維生素D含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)時(shí)，鱸魚(yú)對(duì)維生素D的需求量為2 444.4 IU/kg飼料。

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(責(zé)任編輯菅景穎)

Effects of Different Dietary Vitamin D Contents on Growth Performance, Calcium and Phosphorus Metabolism of Juvenile Japanese Seabass (Lateolabraxjaponicas)

ZHANG Lu1,2LI Jing3MAI Kangsen1AI Qinghui1*ZHANG Chunxiao1LI Huitao1YUAN Yuhui2

(1. The Key Laboratory of Mariculture, Education Ministry of China, Fishery College, Ocean University of China, Qingdao 266003, China; 2. Technology Center of Tongwei Co., Ltd., Chengdu 610041, China;3. Center for Bioengineering and Biotechnology, China University of Petroleum (East China),Qingdao 266580, China)

Abstract:A 9-week feeding experiment was conducted to evaluate the effects of different dietary vitamin D contents on growth performance, calcium and phosphorus metabolism of juvenile Japanese seabass (Lateolabrax japonicas). Juvenile Japanese seabass with the initial body weight of (2.26±0.03) g as the experimental animal, and were randomly divided into 6 groups with 3 replicates each group and 15 fish per replicate. Fish in the 6 groups were fed six isonitrogenous and isoenergentic diets with the measured contents of vitamin D were 34.2, 219.4, 393.8, 775.9, 1 534.1 and 3 091.2 IU/kg, respectively. The results showed as follows: 1) weight gain rare (WGR) was significantly increased with increasing dietary vitamin D content from 34.2 to 393.8 IU/kg (P<0.05), and when the dietary vitamin D content more than 393.8 IU/kg, the WGR had no significant change and presented a trend of forgetting (P>0.05). Special growth rate (SGR), feed efficiency ratio (FER) and protein efficiency ratio (PER) showed a similar tendency to WGR. 2) Dietary vitamin D content significantly influenced the contents of ash, calcium and phosphorus in carcass, ash in vertebra, operculum and scale, and calcium and phosphorus in vertebra of juvenile Japanese seabass (P<0.05), but had no significant influences on the contents of crude protein, crude lipid and moisture in carcass (P>0.05). 3) Serum alkaline phosphatase (AKP) activity, and hydroxyproline (HPro), calcium ion (Ca2+) and inorganic phosphorus (Pi) contents were all significantly affected by dietary vitamin D content (P<0.05). 4) Dietary vitamin D content had significant influences on hepatosomatic index, liver lipid and vitamin D contents (P<0.05). Liver vitamin D content showed an increased trend with increasing dietary vitamin D content, and it changed to be steady when dietary vitamin D content up to 1 534.1 IU/kg. Broken-line model analysis with the WGR as the appraising index shows that juvenile Japanese seabass require 431.0 IU/kg diet vitamin D for maximal growth. Base on the quadratic curve model analysis with the liver vitamin D content as the appraising index, juvenile Japanese seabass require 2 444.4 IU/kg diet vitamin D for maximal liver vitamin D deposition.[Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28(5)：1402-1411]

Key words:Japanese seabass (Lateolabrax japonicas); vitamin D; growth; requirement; of calcium and phosphorus metabolism

doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.05.016

收稿日期：2015-11-13

基金項(xiàng)目：國(guó)家“十五”科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(2001BA505B-06，2004BA526B06)；國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30901108)；山東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(ZR2009EQ007)

作者簡(jiǎn)介：張璐(1979—)，男，河北唐山人，博士，從事水生動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)和免疫學(xué)研究。E-mail: zhanglu_ouc@163.com *通信作者：艾慶輝，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: qhai@ouc.edu.cn

中圖分類(lèi)號(hào)：S963

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-267X(2016)05-1402-10

*Corresponding author, professor, E-mail: qhai@ouc.edu.cn