Myd88在狼瘡性腎炎患者血清組織中的表達(dá)及意義

趙彥叢

(邯鄲市涉縣醫(yī)院 輸血科,河北 邯鄲056400)

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Myd88在狼瘡性腎炎患者血清組織中的表達(dá)及意義

趙彥叢

(邯鄲市涉縣醫(yī)院 輸血科,河北 邯鄲056400)

狼瘡性腎炎對系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)的預(yù)后影響較大,導(dǎo)致的腎功能衰竭是該病主要死亡原因之一。已有報道[1]發(fā)現(xiàn)Toll受體在該病免疫應(yīng)答過程中起著重要作用，人髓樣分化因子88(Myd88)是該信號通路中接頭蛋白，調(diào)控著信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)，Myd88在免疫應(yīng)答中具有非常重要的作用。本研究通過檢測Myd88在狼瘡性腎炎患者血清組織中表達(dá)，對其臨床意義進行了分析，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料

2014年2月-2015年2月64例狼瘡性腎炎患者為觀察對象，根據(jù)SLEDAI評分分成2組，A組非活動期32例，男3例，女29例，年齡18-46歲，平均(30.8±6.4)歲，病程1個月-6年，平均(1.4±1.2)年，B組活動期32例，男2例，女30例，年齡19-48歲，平均(31.2±6.2)歲，病程3個月-8年，平均(1.6±1.3)年，排除合并感染、腫瘤和其他自身免疫性疾病。32名健康志愿者作對照組，男4例，女28例，年齡20-45歲，平均(29.8±5.8)歲，3組的性別、年齡等資料比較無顯著差異(P>0.05)，具可比性。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)

狼瘡性腎炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]：①尿蛋白定量>0、>5g/d或>4mg/(kg.h)；②尿紅細(xì)胞>5g/HPF(離心尿檢)；③腎功能出現(xiàn)異常；④腎活檢異常；4項中具備任1項即符合狼瘡性腎炎。

1.3免疫組化法檢測組織Myd88表達(dá)制作腎組織切片：經(jīng)皮腎穿刺活檢取得腎組織，福爾馬林緩沖劑固定，梯度酒精脫水，浸蠟包埋，切片，溫水展開，置于多聚賴氨酸防脫載玻片，溫箱烤干，待染色。免疫組化染色按試劑盒說明書操作。每張切片選3個高倍視野觀察。將檢測結(jié)果同腎臟病理活動指數(shù)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動度評分(SLEDAI)評分和24 h尿蛋白定量進行比對，Spearman相關(guān)檢驗分析相關(guān)性。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析

2結(jié)果

A組、B組Myd88陽性表達(dá)率25.0%、53.1%，對照組陽性表達(dá)率為0，組間比較差異具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1；B組的腎臟病理活動指數(shù)、SLEDAI評分和24h尿蛋白定量均明顯高于A組，Myd88同上述腎臟功能性指標(biāo)呈正相關(guān)性，見表2。

表1　3組的Myd88免疫組化分析結(jié)果

注：組間免疫組化評分比較：A、B組明顯高于對照組，t=8，24，P<0.01；B組明顯高于A組，t=16，P<0.01.組間陽性表達(dá)率比較：A、B組明顯高于對照組χ2=9.14，23.2，P=0.003，<0.01；B組明顯高于A組，χ2=5.3，P=0.02

表2　　　Myd88同腎臟病理活動指數(shù)、SLEDAI評分和

3討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡是常見自身免疫疾病，流行病學(xué)調(diào)查顯示我國該病患病率為0.007%，以育齡女性居多。多數(shù)學(xué)者[2,3]認(rèn)為狼瘡性腎炎是一種免疫復(fù)合物介導(dǎo)性腎炎，自身反應(yīng)性T、B淋巴細(xì)胞高度活化、多種細(xì)胞因子的相互作用、免疫復(fù)合物的形成與沉著等是腎損害發(fā)生的主要機制。系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)ㄟ^免疫復(fù)合物沉積等途徑造成多個系統(tǒng)和器官的損害，狼瘡性腎炎嚴(yán)重影響預(yù)后。

Toll樣受體信號通路在自身免疫應(yīng)答中起重要作用，該受體通過識別病原相關(guān)分子模式誘導(dǎo)免疫效應(yīng)分子表達(dá)，激活多種前炎性因子參與抗感染過程[4,5]。該受體同特異性配體結(jié)合后可刺激如IL-6、IL-12和TNF-a等細(xì)胞因子表達(dá)，從而對免疫細(xì)胞進行調(diào)控，其同自身免疫性疾病相關(guān)性受到廣泛關(guān)注。Myd88是該信號通路中的重要蛋白，參與傳遞多種不同受體的活化信號，實驗發(fā)現(xiàn)該蛋白參與促炎癥細(xì)胞因子IL-6的調(diào)節(jié)[6]。本研究通過免疫組化法檢測狼瘡性腎炎患者血清組織中Myd88的表達(dá)水平，并將檢測結(jié)果同疾病活動度進行了相關(guān)性分析。表明活動期和非活動期的狼瘡性腎炎患者的Myd88陽性檢出率明顯高于健康志愿者，Myd88免疫組化評分均高于健康志愿者，說明狼瘡性腎炎患者血清組織Myd88處于高表達(dá)水平。Myd88被譽為TLR 信號通路的“瓶頸”，TLR/Myd88 信號通路被證實和自身免疫性疾病存在密切關(guān)聯(lián)。TLR通路信號由 Myd88 傳導(dǎo)，最終激活下游轉(zhuǎn)錄因子，其中包括NF-κB、IRF 3、2中轉(zhuǎn)錄因子上調(diào)機體防御蛋白和促炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-12、INF-β的表達(dá)，該通路是多調(diào)節(jié)功能傳導(dǎo)通路，在免疫炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。一般來說，正常人炎癥因子處于平衡狀態(tài)，狼瘡性腎炎患者炎癥因子多，可能和Myd88表達(dá)增多有關(guān)。腎臟病理活動指數(shù)、SLEDAI評分和24 h尿蛋白定量均是腎臟損害程度的反映指標(biāo)，通過分析Myd88同上述指標(biāo)關(guān)聯(lián)性發(fā)現(xiàn)活動期狼瘡性腎炎腎臟病理活動指數(shù)、SLEDAI評分和24 h尿蛋白定量明顯高于非活動期，活動期患者Myd88表達(dá)量和陽性率明顯高于非活動期，Myd88表達(dá)量同腎臟病理活動指數(shù)、SLEDAI評分和24 h尿蛋白定量呈正相關(guān)。Myd88高水平表達(dá)可能促使炎癥因子表達(dá)，一定程度的反映腎功能損害程度，對該病臨床預(yù)后有重要指導(dǎo)意義。通過上述分析可以看出接頭蛋白 Myd88同自身免疫性疾病間存在關(guān)聯(lián)，筆者認(rèn)為該蛋白不僅可以用于指導(dǎo)疾病治療效果，還可以將其作為疾病干預(yù)治療靶點，用RNA 干擾、基因敲除、靶點化合物治療等方式來調(diào)節(jié)Myd88表達(dá)。增強 Myd88 信號可用來提高疫苗效能、提高病毒載體介導(dǎo)基因治療效果等[7]，而削弱 Myd88 信號有益于自身免疫性疾病和某些炎性疾病的的治療。

參考文獻：

[1]Wenzel J,Held C,Palmisano R,et al.Measurement of TLR-induced macrophage spreading by automated image analysis:Differential role of Myd88 and MAPK in early and late responses[J].Front Physiol，2011,2(18):71.

[2]Chaudhary A,Ganguly K,Cabantous S,et al.The brucella TIR-like protein TcpB ineracts with the death domain of Myd88[J].Biochem Biophys Res Commun,2012,417(1):299.

[3]吳燕燕，王易.Toll樣受體信號通路中Myd88的研究進展[J].免疫學(xué)雜志，2012,28(3):262.

[4] 章烈，李園，周總光.髓樣分化因子 88 的研究進展：把握 TLR 信號通路中的瓶頸[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2013,20(6):685.

[5]Li W,Liu HD,You WC,et al.Enhanced cortical expression of myeloid differentiation primary response protein 88(Myd88) in patients with traumatic brain injury[J].J Surg Res，2013,180(1):133.

[6]李佩宏，李文奇.IgA腎病患者尿蛋白和血管內(nèi)皮生長因子的相關(guān)性研究[J].重慶醫(yī)學(xué)，2014,12(8)：918.

[7]陶于洪,羅秋紅.Toll 樣受體與腎臟疾病研究進展[J].實用兒科雜志,2012,27(17):1362.

免疫組化結(jié)果判定：細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒提示陽性細(xì)胞，判讀時參考如下標(biāo)準(zhǔn)：①陽性細(xì)胞百分比<1%計0分，1%-10%計1分，10%-30%計2分，30%-60%計3分，60%以上計4分；②陽性細(xì)胞染色強度：無黃色顆粒計0分，淡黃色計1分。黃色計2分，棕黃色計3分。免疫組化評分為2項評分結(jié)果之和，0-2分為陰性3-7分為陽性。

文章編號：1007-4287(2016)05-0806-02

(收稿日期：2015-08-11)