FQ-PCR法對丙肝病毒RNA載量、抗-HCV、ALT異常的相關性探討

宋予娟新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院檢驗科，河南新鄉(xiāng)　453000

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FQ-PCR法對丙肝病毒RNA載量、抗-HCV、ALT異常的相關性探討

宋予娟
新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院檢驗科，河南新鄉(xiāng)453000

[摘要]目的應用FQ-PCR法觀察丙肝病毒RNA載量、抗-HCV、ALT異常之間相關性。方法整群選擇該院2012年7月—2015年7月收治95例丙型肝炎病毒感染患者作為研究對象，分別進行抗-HCV抗體、丙氨酸轉氨酶（ALT）檢測，計算HCV-RNA陽性率、抗-HCV陽性率、ALT異常率。結果95例患者中HCV-RNA陽性率為64.2%（61/95），抗-HCV陽性率為69.5%（66/95）?？?HCV陽性率隨HCV-RNA載量的增加而升高，二者呈正相關。95例患者中ALT異常率為50.5%（48/95），且異常率隨HCV-RNA載量的增加而升高，二者呈正相關。結論FQ-PCR法在丙型肝炎檢測中的應用顯示HCV-RNA載量與抗-HCV及ALT濃度之間均有明顯相關，可作為重要檢測手段應用于該病臨床診斷及預后判斷。

[關鍵詞]丙肝病毒；FQ-PCR法；抗-HCV；ALT

我國丙型肝炎病毒（HCV）感染率約為2.5%～4.9%，極易發(fā)展為慢性丙型肝炎，嚴重者會進一步轉化為肝硬化或肝癌[1]，對患者生命安全造成嚴重威脅。免疫酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）為血清丙肝病毒抗體（Anti-HCV）最常見檢測方法，臨床應用廣泛，但該法存在一定假陽性與假陰性[2]。隨著近年熒光定量聚合酶鏈反應（FQPCR）檢測技術的出現(xiàn)及廣泛應用，臨床逐漸應用其進行丙肝病毒的診斷及療效觀察。該文以該院2012年7月—2015年7月間收治丙型肝炎病毒感染患者為例，應用FQ-PCR法觀察丙肝病毒RNA載量、抗-HCV、ALT異常之間相關性，現(xiàn)報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

整群選擇該院收治的95例丙型肝炎病毒感染患者作為研究對象，男63例、女32例，年齡19～71歲，平均（38.4±5.5）歲。

1.2方法

抽取2 mL的EDTA-K2抗凝外周靜脈血并分離，取100 μL血清用真空負壓膜提取法提取總RNA，逆轉錄步驟及PCR反應體系配比遵照說明書進行，每次實驗均設陰性、陽性對照品。HCV-RNA載量＜1000拷貝/mL血清為正常。①抗-HCV抗體檢測：ELISA法測定，根據(jù)說明書操作，陰性對照OD平均值×2.1為臨界值，樣本所測結果大于或等于臨界值為陽性。②丙氨酸轉氨酶（ALT）：全自動生化分析儀進行分析，低于40 U/L為正常。

2　結果

2.1HCV-RNA載量與抗-HCV陽性率之間關系分析

95例患者中HCV-RNA陽性率為64.2%（61/95），抗-HCV陽性率為69.5%（66/95）?？?HCV陽性率隨HCV-RNA載量的增加而升高，差異有統(tǒng)計學意義（r= 0.941，P＜0.05），呈正相關，見表1。

表1　HCV-RNA載量與抗-HCV陽性率關系[n（%）]

2.2HCV-RNA載量與ALT異常率的關系分析

95例患者中ALT異常率為50.5%（48/95），且異常率隨HCV-RNA載量的增加而升高，差異有統(tǒng)計學意義（r=0.823，P＜0.05），呈正相關，見表2。

表2　HCV-RNA載量與ALT異常率關系

3　討論

丙型肝炎發(fā)病呈全球性流行，其發(fā)病率雖低于乙型肝炎，但危害更大。早期發(fā)現(xiàn)并準確診斷HCV感染并實現(xiàn)丙型肝炎傳染源防控為阻斷病毒傳播最有效手段[3-4]。

人體感染HCV后一般血清在15個月內就會形成抗-HCV，而外周血中HCV-RNA的檢出為HCV復制活躍的可靠指標，感染2周內即可檢出[5]。該研究應用FQ-PCR法探析丙肝病毒RNA載量、抗-HCV及ALT異常之間相關性，結果顯示HCV-RNA陽性率為64.2%（61/95），抗-HCV陽性率為69.5%（66/95），ALT異常率為50.5%（48/95），且抗-HCV陽性率與ALT異常率之間均呈現(xiàn)正相關，因此該研究認為HCV-RNA載量偏高可作為丙型肝炎發(fā)病預測指標。

此外，61例HCV-RNA陽性患者中有4例抗-HCV陰性病例，推測原有以下幾點[6]：①患者處于抗HCVIgG窗口期，由于窗口期時間較長可達3個月左右，因此出現(xiàn)此時尚未形成抗體的情況；②機體免疫功能低下，無法產(chǎn)生免疫應答；③HCV基因異原性高。而HCV-RNA陽性率低于抗-HCV陽性率的原因則可能為[7]：①自然界存在大量RNA降解酶，以致假陰性的出現(xiàn)；②患者采取過抗病毒治療等因素有關，血清中HCV-RNA載量未達到最低檢測量；③機體HCV病毒己被清除，HCV-RNA即時顯示為陰性，而抗體會繼續(xù)持續(xù)存在一段時間。另外，研究還顯示HCV-RNA載量與ALT濃度之間也存在明顯正相關，提示丙型肝炎患者血清ALT濃度可作為體內HCV狀態(tài)的間接反映指標，而HCV-RNA水平則間接反映肝細胞炎性損傷程度。

綜上所述，F(xiàn)Q-PCR法在丙型肝炎檢測中的應用顯示HCV-RNA載量與抗-HCV及ALT濃度之間均有明顯相關，可作為重要檢測手段應用于該病臨床診斷及預后判斷。

[參考文獻]

[1]趙東巖,陳弟,劉春林,等.TRFIA、FQ-PCR方法聯(lián)合檢測乙肝標志物的應用探討[J].昆明醫(yī)科大學學報,2014,35（10）57-60.

[2]梁勇彪,莫定敢,覃海燕,等.FQ-PCR檢測HCV-RNA載量與ALT相關性探討[J].中外醫(yī)學研究,2012,10（8）:59.

[3]白旭華,潘品良,毛瑋,等.靜脈吸毒人群中血漿抗-HCV EIA法、WB法與HCV RNA熒光定量PCR法比較[J].中國輸血雜志,2009,22（4）:300-301.

[4]石瑩,楊雨,田綠波,等.入境外籍人員抗-HCV、HCV-RNA 與ALT相關性及監(jiān)測分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學,2015,42（1: 168-171.

[5]楊水賢.慢性乙型肝炎病毒DNA定量檢測與慢性乙肝、肝臟損傷程度、HBeAg關系的探究[J].浙江中醫(yī)藥大學學報, 2013,20（12）:1424-1425.

[6]張學英,李勵,柴曉文,等.乙型肝炎病毒標志物不同模式與HBV-DNA、PA、ADA及ALT濃度的相關性研究[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,2012,11（6）:447-448.

[7]李文楷,丁波,魏容,等.聯(lián)合檢測血清標志物、ALT和HBVDNA對乙型肝炎患者診療的臨床意義[J].四川醫(yī)學,2013, 34（1）:154-156.

Observation on the Correlation of Hepatitis C Virus RNA Load and Anti-HCV and ALT Abnormal by FQ-PCR Method

SONG Yu-juan
Clinical Laboratory,Xinxiang First People's Hospital,Xinxiang,Henan Province,453000 China

[Abstract]Objective To observe the correlation of hepatitis C virus RNA load and anti-HCV and ALT abnormal by FQPCR method.Methods 95 cases of patients with hepatitis C virus infection treated in our hospital from July 2012 to July 2015 were selected and their anti-HCV antibodies and alanine aminotransferase（ALT）were detected and the HCV-RNA positive rate and ALT abnormal rate were counted.Results The HCV-RNA positive rate was 64.2%（61/95）and the anti-HCV positive rate was 69.5%（66/95）of the 95 cases of patients,the Anti-HCV positive rate increased with the increase of HCV-RNA load,the two was positively related,the ALT abnormal rate was 50.5%（48/95）and it increased with the increase of HCV-RNA load,,the two was positively related.Conclusion FQ-PCR method in the detection of hepatitis C shows that HCV-RNA load is obviously related to anti-HCV and ALT concentration,which can be used as an important detection method for the clinical diagnosis and prognosis judgment.

[Key words]Hepatitis C virus;FQ-PCR method;Anti-HCV;ALT

[中圖分類號]R5

[文獻標識碼]A

[文章編號]1674-0742（2016）01（c）-0048-02

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.03.048

[作者簡介]宋予娟（1977.5-），女，河南新鄉(xiāng)人，碩士，主管檢驗師，研究方向：免疫學。

收稿日期：（2015-10-18）