種公牛口蹄疫三價(jià)滅活疫苗免疫抗體水平消長測定

盧旺銀

甘肅省家畜繁育中心，甘肅 武威 733000

種公牛口蹄疫三價(jià)滅活疫苗免疫抗體水平消長測定

盧旺銀

甘肅省家畜繁育中心，甘肅 武威 733000

為降低口蹄疫病毒對種公牛健康造成威脅，影響正常生產(chǎn)，提高種公牛有效利用率，我站對國內(nèi)已檢測和局部發(fā)生過的三種口蹄疫疫病，用三價(jià)滅活疫苗免疫注射，并檢測種公牛免疫抗體效價(jià)的消長，測定該疫苗對種公牛的保護(hù)周期；對全群,60頭種公牛頸部深層肌肉注射口蹄疫三價(jià)滅活疫苗，分別在免疫后21 d、60 d、120 d、172 d隨機(jī)選取15頭種公牛采血分離血清，檢測免疫抗體水平，疫苗注射后檢測分析22頭種公牛精液理化指標(biāo)變化；結(jié)果注射疫苗后21 d后抗體水平開始升高，達(dá)到有效保護(hù)水平，60 d達(dá)到高峰，120 d高峰持續(xù)，到150 d后逐漸下降，172 d免疫抗體仍處在保護(hù)區(qū)間內(nèi)，注射該疫苗對種公牛未造成過敏反應(yīng)，對精液理化指標(biāo)和數(shù)量影響差異不顯著；注射疫苗后檢測對精液理化指標(biāo)和數(shù)量影響差異不顯著,免疫保護(hù)期的延長，為下一次免疫注射爭取了安全期，經(jīng)過臨界期檢測免疫抗體水平，能減少免疫注射次數(shù)，降低種公牛免疫應(yīng)激反應(yīng)。

種公牛；口蹄疫；滅活疫苗；抗體水平

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄動物為主的急性、熱性、高度傳染性疫病，世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為烈性動物傳染病，我國規(guī)定為一類動物疫病。近年流行的O/ME-SA/Pan Asia、O/SEA/Mya-98和A/ASIA/Sea-97病毒均是傳入的。從周邊流行的病毒、流行的頻率和循環(huán)的區(qū)域位置判斷,O/Pan Asia-2、A/Iran-05、Asia1/Sindh-08和O/Ind-2001病毒未來威脅依然較大?？谔阋咭咔闀r(shí)有發(fā)生，對畜牧業(yè)生產(chǎn)構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，對種公牛的安全生產(chǎn)影響更大，為了有效預(yù)防口蹄疫的發(fā)生和傳播，保證種公牛的安全生產(chǎn)，進(jìn)行全覆蓋強(qiáng)制免疫的口蹄疫免疫程序。但在具體操作過程中，存在免疫間隔期長，部分種公牛免疫后期抗體效價(jià)達(dá)不到抵御外界病毒侵襲的水平，不能使畜群得到有效的免疫保護(hù)。為使種公牛免疫抗體水平能始終保持在有效保護(hù)的狀態(tài)，同時(shí)又不影響種公牛的安全生產(chǎn)，選擇最佳的疫苗和免疫時(shí)間，是非常重要的。應(yīng)用口蹄疫O型、亞洲I型、A型三價(jià)滅活疫苗進(jìn)行免疫注射，檢測種公牛體內(nèi)免疫抗體水平消長規(guī)律，免疫后種公牛精液理化指標(biāo)的變化，觀察是否過敏等，為制定適合種公牛站實(shí)際的最佳免疫方案提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動物 將種公牛站全群60頭牛全部進(jìn)行免疫，任意選擇15頭作為試驗(yàn)對象。

1.1.2 試驗(yàn)用疫苗 試驗(yàn)全部采用金宇保靈生物藥品有限公司生產(chǎn)的口蹄疫O型、亞洲I型、A型三價(jià)滅活疫苗，2～8℃保存，有效期內(nèi)使用。

1.1.3 抗體檢測 儀器酶標(biāo)分析儀，全自動酶標(biāo)洗板機(jī)，臺式高速離心機(jī)，KH系列智能型電熱恒溫器；96孔ELISA板、U型96孔抗原抗體反應(yīng)板、封板膜、集精器、精子密度儀、相差顯微鏡、平衡柜、數(shù)控冷凍儀、細(xì)管分裝機(jī)等。

1.1.4 檢測用試劑中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)提供的O型、亞洲I型、A型口蹄疫抗體檢測液相阻斷(LB-ELISA)試劑盒，均在有效期內(nèi)使用。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 O型口蹄疫抗體檢測方法用LB-ELISA:GB/T18935-2003；亞洲I型口蹄疫抗體檢測方法用LB-ELISA:GB/T18935-2003； A型口蹄疫抗體檢測方法用LB-ELISA:GB/T18935-2003。

1.2.2 免疫注射 2015年1月20日對60頭種公牛全部注射口蹄疫O型、亞洲I型、A型三價(jià)滅活疫苗，每頭1.50 ml。

1.2.3 采精量的統(tǒng)計(jì)分析 對其中的22頭肉用種公牛分別于注射前一周和注射后一周統(tǒng)計(jì)采精量數(shù)據(jù)，分析免疫注射后對種公牛生產(chǎn)的影響。

1.2.4 采樣時(shí)間 分別在免疫注射后21 d、60 d、120 d、172 d(即2月12日、3月23日、5月23日、7月15日)隨機(jī)選擇15頭種公牛采血分離血清，檢測免疫抗體。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 口蹄疫O型、亞洲I型、A型三價(jià)滅活疫苗注射前后種公牛生產(chǎn)EXCEL統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表1、表2。

表1 注射口蹄疫三價(jià)疫苗前后種公牛生產(chǎn)情況統(tǒng)計(jì)表

表2 疫苗注射對牛凍精生產(chǎn)量的影響

注：同列標(biāo)有相同小寫字母表示差異不顯著(\%p\%>0.05)

經(jīng)數(shù)據(jù)分析，注射前一周和注射后三周種公牛凍精生產(chǎn)量差異不顯著。

2.2 口蹄疫A型-O型-亞I三價(jià)苗免疫抗體跟蹤監(jiān)測結(jié)果檢測結(jié)果見表3。

免疫后21 d抗體水平開始升高，60 d達(dá)到高峰，高峰持續(xù)60～120 d，到172 d后逐漸下降，但仍處在有效保護(hù)區(qū)間。

表3 口蹄疫A型-O型-亞I三價(jià)苗免疫抗體跟蹤監(jiān)測結(jié)果表

3 結(jié)果分析與結(jié)論

3.1 結(jié)果分析

從種公牛免疫前后凍精生產(chǎn)情況統(tǒng)計(jì)結(jié)果看，口蹄疫A型、O型、亞I型三價(jià)苗免疫注射對生產(chǎn)影響不大，差異不顯著。從檢測結(jié)果來看，種公牛在2015年1月20日注射口蹄疫A型、O型、亞I三價(jià)疫苗后的21 d后，抗體水平開始升高，達(dá)到有效保護(hù)水平，60 d達(dá)到高峰，120 d高峰持續(xù)，到172d后逐漸下降，但仍處在保護(hù)區(qū)間內(nèi)。給種公牛注射口蹄疫O型、亞洲I型、A型三價(jià)滅活疫苗，同時(shí)能達(dá)到較高的保護(hù)率。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，注射疫苗后檢測對精液理化指標(biāo)和數(shù)量影響差異不顯著，本試驗(yàn)結(jié)果與張淑二,朱茹萌2011，試驗(yàn)顯示的青年種公牛(2歲以內(nèi))免疫注射后60日內(nèi)，精液理化指標(biāo)有一定影響的結(jié)果相反，出現(xiàn)不同結(jié)果可能與種公牛個(gè)體差異，疫苗批次使用的佐劑等有一定關(guān)系，還需要對該疫苗注射后的免疫效果，種公牛精液理化指標(biāo)方面的影響做進(jìn)一步探討和研究。

3.2 結(jié)論

根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果分析，種公牛1次免疫后，在6個(gè)月內(nèi)，免疫抗體效價(jià)保持在一個(gè)相對均衡的水平上，起到了預(yù)防疫病保護(hù)種公牛的目的?？贵w效價(jià)≥1∶128，保護(hù)率達(dá)99%以上；效價(jià)在1∶22～1∶90之間，保護(hù)率達(dá)50%；效價(jià)≤1∶16就失去對種公牛的保護(hù)。免疫抗體水平數(shù)據(jù)分析與種公牛年齡間沒有明顯差異，肉牛與奶牛之間免疫應(yīng)激反應(yīng)和精液理化肉牛比奶牛明顯。因此，我們提出種公牛用口蹄疫三價(jià)苗免疫后6個(gè)月再繼續(xù)免疫的免疫程序的免疫方案，這樣既科學(xué)又省時(shí)。也防止了兩次免疫接種期間野毒的侵?jǐn)_，一次注射同時(shí)完成三種型口蹄疫病毒的免疫，大大節(jié)省了勞動強(qiáng)度，降低了種公牛免疫應(yīng)激反應(yīng)，該疫苗注射后2h內(nèi)留舍觀察全群未出現(xiàn)過敏反應(yīng)，保障種公牛健康安全生產(chǎn)。

[1] 吳清民．獸醫(yī)傳染病學(xué) [M]．北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社， 2000：68-79.

[2] 劉在新.全球口蹄疫防控技術(shù)及病原特性研究概觀[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015(17):3547-3564.

[3] 張淑二,朱茹萌,等.注射口蹄疫疫苗對三個(gè)品種公牛精液品質(zhì)的影響[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2011(4):75-78.

[4] 孔偉，馬志遠(yuǎn).注射口蹄疫疫苗對種公牛精液品質(zhì)的影響[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013(5):43-46.

Fluctuation Determination of Immune Antibody Level in a Trivalent Inactivated Vaccine against Foot-and-Mouth Disease in Cattle

LU Wang-yin

(LivestockBreedingCenterofGansuProvince,WuweiGansu733000China)

In order to reduce the threat of foot-and-mouth disease virus to the health of bulls and normal production, and improve the effective utilization rate of the bull. The breeding center injected with trivalent inactivated vaccine immunization against three foot-and-mouth diseases, and to detect the fluctuation of bull immune antibody titer and protection cycle of the vaccine on bull. The whole group of 60 bulls were used neck deep intramuscular injection of FMD inactivated vaccine. In 21d, 60d, 120d and 172d after immunization, 15 bulls were randomly selected to isolate serum, detect immune antibody level. Changes in the physicochemical analysis index of semen of 22 bulls after vaccination. The results showed that antibody level of the vaccine after 21d began to increase and achieve effective protection level. Antibody level peaked at 60d, then continue to peak at 120d and gradually drop at 150d, and immune antibody was still in the protection interval at 172d. Injection of the vaccine didn't cause allergic reactions on bulls and have no significant effect in physical index and the number of semen. The extension of immune protection period provided safety period for a second immunization. The detection of immune antibody levels can reduce the number of immune injection and bull immune stress response after the critical period.

Bull; foot-and-mouth disease; inactivated vaccine; antibody level

2016-09-08

盧旺銀(1963-)，男，甘肅武山人，推廣研究員，主要從事動物疫病防治、科技管理和技術(shù)推廣等工作。

S 852.4+1

A

1004-6704(2016)06-0036-03